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    Obtención de Muestras Biológicas para El Diagnóstico de Influenza y Otros Virus Respiratorios

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    Jasonrisa Dent
    Este documento proporciona información sobre la obtención de muestras biológicas para el diagnóstico de virus respiratorios como la influenza y el virus sincitial respiratorio. Explica los procedimientos para la recolección de muestras nasofaríngeas y orofaríngeas, los materiales necesarios, y las consideraciones para el envío y almacenamiento de las muestras para su análisis en el laboratorio.

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    Obtención de Muestras Biológicas para El Diagnóstico de Influenza y Otros Virus Respiratorios

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    Título original

    OBTENCIÓN DE MUESTRAS BIOLÓGICAS PARA EL DIAGNÓSTICO DE INFLUENZA Y OTROS VIRUS RESPIRATORIOS

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    LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL

    OBTENCIÓN DE MUESTRAS
    BIOLÓGICAS PARA EL DIAGNÓSTICO
    DE INFLUENZA Y OTROS VIRUS
    RESPIRATORIOS
    PONENTES:

    Blga. Paola Adely Luyo Fonttis

    Blga. Delsy Espinal Quiñonez


    VIRUS RESPIRATORIOS
    LOS VIRUS RESPIRATORIOS SE ALOJAN EN EL TRACTO RESPIRATORIO
    CAUSANDO SÍNTOMAS LEVES, MODERADOS O GRAVES
    DEPENDIENDO DEL TIPO DE VIRUS. POR EJEMPLO:

    La influenza es una infección vírica que afecta principalmente a la nariz,


    la garganta, los bronquios y, ocasionalmente, los pulmones.

    El VRS puede extenderse al aparato respiratorio inferior, causando


    neumonía o bronquiolitis
    INFLUENZA Y
    OVRs
    ● INFLUENZA A
    ● INFLUENZA B
    ● PARAINFLUENZA 1,2 Y 3
    ● ADENOVIRUS
    ● VIRUS SINCITIAL RESPIRATORIO
    ● METAPNEUMOVIRUS
    INFLUENZA Y OVRs

    Virus de la influenza
    estacional en seres
    humanos
    VIRUS RESPIRATORIOS

    - LAS INFECCIONES RESPIRATORIAS AGUDAS (IRAs)


    REPRESENTAN UN PROBLEMA PRIORITARIO DE SALUD A
    NIVEL MUNDIAL.

    - SU ALTA MORBIMORTALIDAD AUMENTA EN LOS MESES


    DE TEMPERATURAS BAJAS.
    VIRUS RESPIRATORIOS

    Influenza Ha causado pandemias


    tales como:
    ● LA INFLUENZA ES UNA
    ENFERMEDAD RESPIRATORIA
    AGUDA, ● 1918 La gripe ESPAÑOLA H1N1
    EXTRAORDINARIAMENTE ● 1957 La gripe ASIÁTICA H2N2
    CONTAGIOSA. ● 1968 La gripe de HONG KONG H3N3
    ● CAUSANTE DE MUERTE DE ● 1997 HONG KONG registra casos de
    MILES DE PERSONAS. gripe aviar H5N1
    ● 2009 México es atacada por H1N1 de
    origen porcino
    OBTENCIÓN DE MUESTRAS BIOLÓGICAS PARA EL DIAGNÓSTICO
    DE ENFERMEDADES: VIRUS RESPIRATORIOS

    VIRUS RESPIRATORIOS
    VÍA DE TRANSMISIÓN:
    Medidas de prevención de las infecciones respiratorias

    agudas
    Tenemos:

    ● Lavado de manos
    ● Ventilar correctamente las áreas de trabajo.
    ● Evitar el contacto directo con personas que presenten síntomas.
    ● Usar mascarilla.
    ● Vacunas completas de acuerdo al calendario de vacunación.
    ● Al toser o estornudar, cubrirse la boca y la nariz con un pañuelo
    desechable.
    ● Alimentación saludable rico en vitamina A y C
    DIRECTIVA SANITARIA PARA LA VIGILANCIA EPIDEMIOLÓGICA DE
    INFLUENZA, DE OTROS VIRUS RESPIRATORIOS (OVR) E INFECCIONES
    RESPIRATORIAS AGUDAS GRAVES (IRAG) EN EL PERÚ N° 045 - MINSA-DGE
    - V.01

    l. FINALIDAD

    Contribuir a la formulación e implementación de


    medidas sanitarias orientadas a la reducción del impacto de
    las infecciones respiratorias agudas graves (IRAG), influenza y
    de otros virus respiratorios con potencial epidémico o
    pandémico en el Perú.
    DEFINICIONES OPERATIVAS
    Caso de síndrome gripal (SG) o Caso de infección respiratoria aguda grave
    enfermedad tipo influenza (ETI) (IRAG).

    Persona que presenta: Fiebre Síndrome que se presenta en un paciente


    (mayor o igual a 38°C) de inicio de cualquier edad, con aparición súbita
    brusco acompañado de tos o dolor de fiebre superior a 38°C o historia de
    de garganta. Puede acompañarse fiebre y que presenta: Tos, Dificultad para
    de síntomas sistémicos como respirar
    mialgias, postración, cefalea o
    malestar general
    FLUJOGRAMA DE LA VIGILANCIA CENTINELA DEL
    SÍNDROME GRIPAL (SG)
    DISPOSICIONES GENERALES

    Para cumplir los objetivos descritos en la directiva sanitaria, se fortalecerá:


    • La vigilancia centinela de síndrome gripal, en los establecimientos
    designados (Anexo N° 1).
    • La vigilancia intensificada de IRAG y muerte por IRAG en los hospitales
    centinelas designados (Anexo N° 2).
    • La vigilancia nacional de IRAG inusitada.
    DISPOSICIONES ESPECÍFICAS
    VIGILANCIA CENTINELA DEL SÍNDROME GRIPAL (SG)

    EN CADA ESTABLECIMIENTO DE SALUD SELECCIONADO PARA LA VIGILANCIA CENTINELA DEL


    SINDROME GRIPAL SE CUMPLIRAN LOS SIGUIENTES PROCEDIMIENTOS

    DOS DÍAS A LA
    SEMANA(COORDINADOS
    PREVIAMENTE CON LRR) SE
    SELECCIONAR UN REALIZARÁ LA CAPTACIÓN DE CASOS OBTENER MUESTRAS DE
    CONSULTORIO EXTERNO DE DE SG QUE SE ENCUENTREN DENTRO HISOPADO NASAL Y FARÍNGEO
    MEDICINA GENERAL Y SEGUIR DE LOS PRIMEROS 3 DÍAS DE EN LOS PACIENTES CAPTADOS,
    EL FLUJOGRAMA DE LA ENFERMEDAD (MAXIMO 3 CASOS POR LAS CUALES SERÁN REMITIDAS
    VIGILANCIA DEL SG. DÍA). Y EL MÉDICO TRATANTE DENTRO DE LAS 24 HRS AL LRR
    REGISTRARÁ LA FICHA DE
    INVESTIGACION CLINICO
    EPIDEMIOLOGICA PARA LA
    VIGILANCIA SG O ETI
    DISPOSICIONES ESPECÍFICAS

    LOS LABORATORIOS DE REFERENCIA LOS ESTABLECIMIENTOS CENTINELAS


    REGIONAL DEBEN CUMPLIR LO SIGUIENTE: DEBEN CUMPLIR CON LO SIGUIENTE:

    ● DISTRIBUIR LOS INSUMOS PARA LA


    OBTENCIÓN DE MUESTRAS A LOS
    ESTABLECIMIENTOS CENTINELAS DE ● IDENTIFICAR LOS CASOS DE
    ACUERDO A SU CONSUMO. ACUERDO A LAS DEFINICIONES
    ● PROCESAR LAS MUESTRAS POR Y CRITERIOS ESTABLECIDOS.
    TÉCNICA DE ● OBTENCIÓN,
    INMUNOFLUORESCENCIA, ALMACENAMIENTO Y ENVÍO DE
    ALMACENAR Y REMITIR LAS MUESTRAS, ASÍ COMO DE LA
    MUESTRAS O ALÍCUOTAS AL INS BIOSEGURIDAD EN SU
    PARA DIAGNOSTICO ESPECIALIZADO. MANIPULACIÓN.
    ● EMITIR OPORTUNAMENTE LOS
    RESULTADOS DEL DIAGNÓSTICO DE
    LAS MUESTRAS OBTENIDAS POR
    INMUNOFLUORESCENCIA EN EL
    SISTEMA NETLAB.
    OBTENCIÓN DE LA MUESTRA PARA
    INFLUENZA Y OTROS VIRUS RESPIRATORIOS
    CRITERIOS PARA LA
    DETECCIÓN DEL VIRUS
    CRITERIOS PARA LA OBTENCIÓN DE LA MUESTRA

    ● SG: Preferentemente dentro de las primeras 72 hrs desde el inicio de los síntomas.
    ● IRAG: Dentro de los 7 primeros días de enfermedad.
    ● Antes de iniciar tratamiento antiviral.
    MATERIALES PARA OBTENCIÓN DE LA MUESTRA
    MATERIALES PARA OBTENCIÓN DE LA MUESTRA

    tipear esto
    Consideraciones generales para obtención de muestras

    ➢ Tener la orden y/o ficha clínica


    epidemiológica con la información
    completa y legible.
    ➢ Fecha de inicio de síntomas.
    ➢ El personal de laboratorio debe colocar la
    fecha de obtención de la muestra.
    ➢ Rotular el tubo, medio de transporte viral y
    verificar que coincidan en nombre o código
    del paciente.
    Consideraciones generales para obtención de muestras

    El personal que obtiene la muestra debe:

    ● Verificar que cuenta con todos los materiales.


    ● Revisar la fecha de vencimiento del tubo
    ● Rotular el tubo:
    - Nombre completo
    - Fecha de obtención de muestra
    - Tipo y N° de documento de identidad
    ● Revisar que los datos del tubo coincidan con los datos
    de la ficha epidemiológica.
    TIPOS DE MUESTRA PARA INFLUENZA Y
    OVRs
    ● Hisopado nasofaríngeo (HNF)
    ● Hisopado orofaríngeo
    ● Hisopado nasal y faríngeo
    ● Aspirado nasofaríngeo (ANF)
    ● Otros: aspirado endotraqueal, BAL, lavado
    bronquial, tejido pulmonar, biopsia,
    derrame pleural, esputo.
    HISOPADO NASOFARÍNGEO

    1. Explicar el procedimiento al paciente y


    solicitar que incline la cabeza hacia atrás
    (con un ángulo de entre 45° a 70°)
    2. Introducir el hisopo a través de la nariz
    suavemente, hasta llegar a la nasofaringe.
    3. Girar el hisopo dentro de la nasofaringe.
    ➔ Profundidad: Aprox 5-7 cm
    ➔ Tiempo: Aprox. 5 a 10 seg
    ➔ Rotaciones: Aprox 5
    1. Retire el hisopo, colóquelo en el tubo de
    MTV.

    Nota: Lo importante es obtener células, no


    secreciones. (si es necesario solicitar al paciente
    limpiarse antes de realizar el procedimiento)
    HISOPADO OROFARÍNGEO

    1. Colocar el bajalenguas sobre la lengua de forma


    que permita ver la orofaringe.
    2. Ingresa el hisopo hacia la orofaringe, la muestra
    debe ser colectada de la orofaringe posterior y de
    los pilares tonsilares.
    3. Girar el hisopo dentro de la orofaringe por aprox
    10 segundos.
    4. Retirar el hisopo.

    Nota: No tocar la lengua, dientes, encías, úvula, paladar y mejillas con el hisopo. Se puede utilizar
    un bajalengua para acceder a la orofaringe.
    HISOPADO NASOFARINGEO/OROFARINGEO
    ● Introducir ambos hisopos en el tubo que contiene el medio de transporte
    ● Romper el mango excedente de los hisopos un poco menos de la altura de la boca
    del tubo para que pueda cerrarse herméticamente.
    TRASLADO DE MUESTRAS DESDE EL PUNTO DE OBTENCIÓN
    DE HASTA EL LABORATORIO

    RECOMENDACIONES:

    ● Uso de ropa adecuada para el trabajo. NO


    transportarse con los mandiles fuera del
    laboratorio.
    ● Minimizar el tránsito por áreas comunes, esto
    incluye el uso de ascensores.
    ● Uso de carritos de laboratorio de ser necesario.
    ● Si el recipiente es un tubo, debe tener cierre
    hermético con tapa a rosca o a presión y se debe
    colocar en gradillas de manera que conserve su
    posición vertical.
    CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE
    MUESTRAS
    Conservación y transporte de muestras

    ● Las muestras deben ser conservadas en cadena de frío (2 - 8°C), hasta 72 horas.
    ● En caso la muestra no puede ser procesada dentro de las 72 horas se congela a - 70°C
    ● Evitar que la muestra se congele y descongele en ciclos repetidos.
    CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE
    MUESTRAS
    El traslado de muestras deben usar un triple empaque
    ElEltraslado
    trasladode
    demuestras
    muestrasdeben
    debenusar
    usarun
    untriple
    tripleempaque
    empaque

    ● Contenedor primario: depósito donde se coloca la muestra (medio de transporte viral).


    ● Contenedor secundario: recipiente para proteger la muestra.
    ● Contenedor terciario: recipiente cooler o caja de tecknopor donde se colocan cojines
    de hielo para conservar la muestra en cadena de frío (2 - 8°C).
    EMBALAJE DE MUESTRAS PARA ENVÍO AL LABORATORIO
    DE REFERENCIA
    Contenedor externo: etiquetado para el envío

    ➔ Compruebe que el contenedor


    externo esté etiquetado.
    ➔ Para derivar las muestras al
    laboratorio de referencia se debe
    adjuntar la documentación
    necesaria (listado de muestras,
    ficha epidemiológica
    correctamente llenado)
    Verificación de muestras en el área de ROM

    ➔ El personal verifica
    ➔ Revisa la integridad del la concordancia de
    ➔ El personal tubo primario, revisa las los datos con la
    encargado, tapas del contenedor muestra y fichas
    verifica y mide primario, que no estén epidemiológicas
    la temperatura derramadas, la cantidad correctamente
    del medio, esté rotulada llenados.
    Flujograma de diagnóstico de Influenza y
    OVRs
    Vigilancia centinela de Síndrome Gripal y vigilancia centinela
    de la infección respiratoria aguda grave (IRAG) y por muerte
    IRAG

    DISA/DIRESA/GERESA INSTITUTO NACIONAL


    ESTABLECIMIENTOS
    LABORATORIO DE DE SALUD
    CENTINELAS
    REFERENCIA REGIONAL

    1. Identificación de 1. procesamiento de
    1. Investigación y
    caso: muestra mediante
    seguimiento de caso
    - síndrome gripal técnica:
    2. procesamiento de
    - IRAG - rt- PCR en tiempo real
    muestra IFD
    - muerte por IRAG - cultivo
    3. información de
    1. notificación y llenado 1. información de
    resultados NETLAB
    de ficha de resultados a través de
    4. Envío de muestra o
    investigación NETLAB
    alícuota al INS
    2. obtención de muestra
    Métodos de diagnóstico de virus respiratorios
    CRITERIOS DE RECHAZO

    × Ficha epidemiológica con solicitud de análisis diferente o con datos incompletos

    × Los datos del tubo primario no coinciden con los datos de la ficha epidemiológica

    × No presentan la documentación necesaria.

    × Muestras colocadas en solución salina o que tengan más de 24 hrs de tomada la muestra.

    × Medio de transporte viral con volumen insuficiente. (<2 mL)

    × Muestras derramadas o contaminadas.

    × Muestras tomadas con hisopos de algodón y mango de madera o hisopos de alginato.

    × Muestras fuera del rango de temperatura (2 a 8°).

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