Neoplasias

Definicin. Nomenclatura. Clasificacin Histogenetica y Clinica.

Prof. Abelardo Morales Briceo

INTRODUCCIN
Existen una serie de mecanismos en los cuales el organismo multiplica sus elementos celulares con fines tiles Ejemplo. La Hiperplasia de un rgano, en caso de prdida de un rin.

El fenmeno de la regeneracin y cicatrizacin implica multiplicacin celular y formacin de tejido nuevo, este tipo de neoformacin es ordenada y tiene una funcin especifica.

Neoplasias
Proliferacin anormal de uno o varios tejidos

No tiene Pto. final

Incontrolado

Agresivo para el Husped

Oncologa
Clasificacin

Estudio de las neoplasas Benignas Malignas

Neoplasia
El termino neoplasia es sinnimo de tumoracin.
Neoplasia: literalmente significa nuevo crecimiento.

Oncologa: Ciencia encargada del estudio de los tumores. Cncer: Forma comn de denominar a los tumores malignos

Nomenclatura
Trminos que son necesarios conocer: Hiperplasia
Metaplasia
Displasia

Anaplasia
Bien Diferenciado

Mal Diferenciado

METAPLASIA
Inhalacin

Aparato Mucociliar
TraqueoBronquial Macrfago Alveolar

Cadena linftica Espacios subpleurales

Adenocarcinoma broncogenico

Nomenclatura
Los tumores tienen dos componentes bsicos al igual que un rgano. Parnquima Componentes Estroma Sufijo oma al tej. de origen Ejplo.Tej. Fibroso Fibroma. Excepciones Granulomas Epiteliales Carcinomas. Mesenquimaticos Sarcomas. Mixtos Carcinosarcomas

Benignos Clasificacin Malignos

CLASIFICACION HISTOGENETICA
TEJIDO EPITELIAL EPITELIO REVESTIMIENTO EPITELIO GLANDULAR TROFOBLASTO RGANO DE ESMALTE TEJIDO CONECTIVO FIBROSO ADIPOSO TEJIDO MUSCULAR LISO ESTRIADO TEJIDO CARTILAGINOSO TEJIDO SEO LEIOMIOMA Leiomiosarcoma DE BENIGNO PAPILOMA MALIGNO CARCINOMA

PLIPO
MOLA HIDATIFORME

ADENOCARCINOMA
CORIOCARCINOMA ADAMANTIOMA

FIBROMA
LIPOMA

FIBROSARCOMA
LIPOSARCOMA

RABDOMIOMA
CONDROMA OSTEOMA

Rabdomiosarcoma
CONDROSARCOMA OSTEOSARCOMA

EPITELIO REVESTIMIENTO

EPITELIO GLANDULAR

TEJIDO CONECTIVO

TEJIDO CONECTIVO

TEJIDO CONECTIVO

TEJIDO CONECTIVO

TEJIDO CONECTIVO

CLASIFICACION HISTOGENETICA
NOTOCORDA TEJ. VASCULAR SANGUINEO TEJ. LINFATICO VASCULAR HEMANGIOMA LINFAGIOMA CORDOMA HEMANGIOSARCOMA LINFANGIOSARCOMA LEUCOSIS O LEUCEMIA SINOVIONA SINOVIOSARCOMA

T. DE MEDULA OSEA MEMBRANA SINOVIALES T. NERVIOSO PERIFERICO

NEURONA SCHAWANOMA BENIGNO SCHAWANOMA MALIGNO

NERVIO
VAINA DE SCHAWAN NERVIOSO CENTRAL ASTROCITO

ASTROCITOMA I GLIOMA GANGLIO NEUROMA

2,3 2,3 GANGLIOBLASTOMA

GLIA
GANGLIOS SIMPATICOS

DIFERENCIAS ENTRE NEOPLASIAS BENIGNOS Y MALIGNOS

TUMORES BENIGNOS
ENCAPSULADOS SE CONSERVAN BIEN NO INVASIVAS TUMORES MALIGNOS NO ENCAPSULADOS FRECUENTES NECROSIS

INVASIVAS
POCO DIFERENCIADAS MITOSIS ATPICAS Y ANORMALES

BIEN DIFERENCIADAS
MITOSIS NORMALES E INFRECUENTES CRECIMIENTO LENTO

CRECIMIENTO RPIDO E INCESANTE

PRODUCEN METSTASIS

NO METSTASIS

Nomenclatura
Tumores con nombre de Clulas
Mesotelioma Plasmocitoma Histiocitoma Mastocitoma Osteoclastoma

Nomenclatura
Tumores con nombre del Investigador (Eponimos) HODGKIN EWING STICKER

MAREK Tumores Mixtos

GRAWITZ

WILMS

Fibroadenoma Carcinosarcoma

Neoplasias originada de varias hojas Blastodermicas Teratomas o Quistes Dermoides (OVARIOS).

Benignos y Malignos

Clasificacin Clnica
Tumor, Ndulo, Metstasis. T.N.M. To, T1, T2, T3 No, N1, N2 ,N3 Mo, M1 M2 M3. T- Presencia de tumor. T1, T2, T3. S e refiere a la extensin o tamao del tumor. N. Se refiere a la presencia de Ndulos Ganglionares de drenaje

N1. Ganglio prximal afectado.

N2. Ganglio medial afectado N3. Ganglio distales afectados

Clasificacin Clnica
M. Se refiere a la diseminacin Metastsica. M1. Metstasis a rgano. M2. Metstasis a rganos M3.Metstasis a rganos.

Ejemplo T1, N2, M1: Tumor de 5cms, con 2 ganglios mediales comprometidos, M1. metstasis a hgado,

ANATOMA DE LAS NEOPLASIAS

MORFOLOGA

A SIMPLE VISTA AL MICROSCPIO OPTICO (M.O) AL MICROSCPIO ELECTRONICO (M.E)

PATOLOGIA MACROSCOPICA
FORMA MASA O BULTO ULCERA O PRDIDA DE TEJIDO COMBINACION: masa ulcerada ESFRICO/INFILTRANTE Ejemplos: Ca. Epidermoide de piel, leiomioma uterino, leiomioma gstrico.

Por lo general:
Benignos Malignos Masa Necrosis Ulceracin

Tamao NO es ndices de comportamiento ni pronostico

Tumores muy pequeos mamas, tiroides, pulmn, prstata Alta malignidad

Tumores Grandes Superficie: LEIOMIOMAS Benignos

Lisa, uniforme, nodular

Granular Umbilicados Vegetantes

Benignos (fibromas, lipomas)

Tumores papilares ovario, tiroides, carcinomas. Metstasis infectados/ necrticos Ca. Esfago, tero.

Superficies y Tamaos

Color

PUEDE SUGERIR DIAGNSTICO CARCINOMAS LINFOMAS SARCOMAS VERDES Blanquecinos, Granulares Carne de pescado crudo Rojas, Carnosas Hepatocarcinomas secretores de bilis

NEGROS
AMARILLOS

Melanomas, Ca. Basocelular pig.

Ca. Rin (LIPIDOS)

Color

EN TRMINOS GENERALES

SE DEBE ANALIZAR EN CONJUNTO CON: HEMORRGIAS NECROSIS FIBROSIS QUISTES EN LA SUPERFICIE CALCIFICACIN E INFECCIN.

EL MACROSCPICO, ORIENTA PERO NO ES CONCLUYENTE PARA EL DIAGNSTICO

Aspecto macroscpico de las neoplasias

Aspecto macroscpico de las neoplasias

PATOLOGA MICROSCPICA
ES MUY VARIABLE

LAS NEOPLASIAS SON TEJIDOS

- PARNQUIMA - ESTROMA Parnquima Estroma Componente celular Vasos sanguneos, linfticos, nervios, tejido conectivo.

Ejemplo: Carcinoma de Hgado. Parnquima: hepatocitos con signos de malignidad.

Liposarcoma

Lipoblastos

ESTROMA

Es caso en carcinoma de rin

Tejido conectivo

Abundante: Carcinoma escirroso de mama, estomago.

La clula neoplsica puede ser:

Muy similares a las normales

Bien diferenciado

Benignos

No se parecen a las normales

poco dif. (anaplsica) Maligna

Tener Cambios de Aspecto histolgico

Metaplasia

Cambios de maduracin celular

Displasia

Cambios en una Clula Neoplsica Aislada

Forma Irregular: Renacuajo (Rabdomiosarcoma)

Tamao Anormal:

Hepatocarcinoma (muy grandes), a veces muy pequeas como en tiroides, algunos Carcinoma de pulmn.

Ncleos Hipercromticos Escaso Citoplasma Prdida Relacin Ncleo Citoplasma

CONTENIDO CITOPLASMATICO

LPIDOS GLUCGENO

LIPOMA, LIPOSARCOMA HEPATOCARCINOMA, CARCINOMA DE RIN

I.G. INSULINA MELANINA

LINFOMAS B. CARCINOMA DE PNCREAS MELANOMAS

ESTRUCTURAS INTRACELULARES
Estriaciones Transversales Cristaloides Productos Intracelulares Osteoides Rabdomiosarcoma Tumor de Leydig (Test.) Colgenos: Fibromas, Fibs. Osteosarcoma Osteognico

Alteraciones ms sugestivas de malignidad se aprecian en: El Ncleo

Las alteraciones de tamao, densidad, hipercromatismo, figuras mitticas numerosas, nucleolos prominentes.

No obstante no son absolutamente concluyentes, sin relacionar con el aspecto biolgico de la neoplasia.

MICROSCOPIA ELECTRNICA Se usa para diagnstico de Neoplasias muy diferenciadas

Melanomas

Carcinoma

Indiferenciados

Desmosomas

tumores muy indiferenciados de origen Ept.

NEOPLASIA

VAS DE DISEMINACIN DE LAS NEOPLASIAS

NEOPLASIA
INVASIN
METASTASIS

PROPIO DE MALIGNOS AGRESIVOS

INVASIN: Presencia de clulas neoplsicas FUERA de su SITIO DE ORIGEN, SIN PERDER CONTINUIDAD entre la masa PRIMARIA Y LA MASA DE TEJIDO SECUNDARIA. EJEMPLO: Ca. De Bronquio Ca. De Estmago Infiltrado parilla costal Infiltrado paredes y se adhiere al hgado.

METASTASIS: Entre la masa primaria y secundaria NO EXISTE CONTINUIDAD, diseminacin a sitios distantes de la masa original.

EJEMPLO: Ca. Bronquio Ca. Estmago Metstasis a Cerebro. Metstasis a ganglios, hgado, peritoneo

INVASIVIDAD Capacidad de las clulas neoplsicas de LESIONAR y PENETRAR en los tejidos circundantes. Las clulas normales pueden penetrar en los tejidos. POLIMORFONUCLEARES

MONOCITOS
HISTIOCITOS.

PERO NO PROVOCAN DAO CELULAR, SOLO SE DESLIZAN POR LOS ESPACIOS INTERSTICIALES.

VAS DE INVASIN DE LAS NEOPLASIAS

Menor resistencia a la penetracin de clulas neoplsicas

Espacios Intersticiales.
Conductos Preformados. Una vez alcanzada la luz del vaso: TRES DESTINOS O SU COMBINACIN Obliteran el vaso TROMBO LINFTICO Proliferan dentro de la luz SIN PERDER CONTINUIDAD

METSTASIS

 Se desplazan por la circulacin y se implantan a distancia.

Invaden tejidos circundantes SIN PREFERENCIA por los espacios intersticial, ni cavidades, ni conductos, afortunadamente son las menos. EJEMPLO: CARCINOMA PAPILAR DEL TIROIDES. Infiltra tejidos vecinos, traquea, esfago, subcutneo, msculo

METSTASIS
Los pacientes con tumores malignos usualmente NO sucumben por causa del tumor primitivo sino por las METSTASIS. VAS DE DISEMINACIN METASTASICA. 1. LINFTICA Carcinoma.

2. HEMATGENA

Sarcoma

3. LINFOHEMATOGENA 4. TRANSCELOMICA (Implantacin) Ca. Pulmn pleura.

Ca. Ovarico

peritoneo

5. CONDUCTOS PREFORMADOR REVESTIDOSPOR EPITELIOS. Tracto digestivo, urinario, pulmonar.

NEOPLASIA

DIAGNSTICO DE NEOPLASIAS

DIAGNSTICO DE NEOPLASIAS
HISTORIA. DIAGNSTICO CLNICO. MUESTRA REPRESENTATIVAS DEL TUMOR BIEN CONSERVADA, Fijadores, congelacin. 1.- ESTUDIO MICROSCOPICO O ANATOMO PATOLGICO. BIOPSIAS: INTRAPERITONEAL, PREOPERATORIA O EXTEMPORNEA. 48 HORAS INCLUSIN EN PARAFINA.

1. INCISIONAL. 2. EXCISIONAL.

 ASPIRACIONES CON AGUJA FINA Tiroides, Prstata, Hgado, Ganglio Linftico. EXTENSIONES CITOLGICAS. PAPA NICOLAU/ PAP MART. Para Estudiar:

RGANOS.
Cuello Uterino. Pulmn. Prstata. Vejga. Estmago.

LQUIDOS:
Orina, Peritoneal, Pleural, Cefalorraqudeo.

Las clulas neoplsicas son MENOS COHERENTES , se diferencian de las clulas normales, Displasias, Cncer.

2.INMUNOCITOQUIMICA: UTILIZADO EN EL DIAG. O

TRAT. Anticuerpo Monoclonales Identificacin de Productos Celulares Marcadores de Superficie 2.1.- Clasificacin de T. Malignos MUY INDIFERENCIADOS, de distintos orgenes (similares entre s), de dificultoso diagnstico solo con H-E.

2.2.- Clasificacin de Leucosis y Linfomas.

Identifica y clasifica Linfomas de Clulas T y B.

2.3.- Determinacin del lugar de origen de Tumores Metastsicos. En muchos Ca. 1ra manifestacin METASTASIS. Origen??. Ej. Ag. Prosttico marcadores de tiroides y prstata. y tiroglobulinas son

2.4.- Deteccin de Molculas con significado teraputico o pronstico.

Deteccin de RECEPTORES HORMONALES (estrgeno, progesterona) valor pronstico y teraputico. En general las N. DE MAMA con receptores H. tienen MEJOR PRONSTICO y se trata con ANTIESTROGENOS.

DIAGNSTICO MOLECULAR

No son fundamentales en el diagnstico de cncer. tiles para diferenciar proliferaciones BENIGNAS

(policlonales).
Proliferaciones MALIGNAS (Monoclonales). Estudios Genticos.

Diagnstico de la predisposicin al cncer.

MARCADORES TUMORALES Son ndices bioqumicos de la PRESENCIA DE TUMOR.

ENTRE ELLOS: 1.- Antgenos de superficie celular. 2.- Protenas citoplasmticas. 3.- Enzimas.

4.- Hormonas.
EN LA PRACTICA SON MOLCULAS QUE PUEDEN DETECTARSE EN PLASMA U OTRO LQUIDOS.

NO SON UN MTODO FUNDAMENTAL PARA DE CNCER. Su utilidad APOYA el tratamientos, recidivas... diagnstico

DIAGNSTICO y respuesta a

ALGUNOS MARCADORES TUMORALES: A.C.E. Antgeno producido por tejido embrionario INTESTINO, PNCREAS, HGADO, MAMA. de

ALFA FETO PROTENA Glucoprotenas sintetizada en el feto en saco vitelino. Hgado, Intestino, Cell Germinales del Testculo. Sus niveles bajan rpidamente despus de la intervencin quirrgica de Ca. de hgado o testculo. PROTENAS ESPECFICAS Inmunoglobulinas (I.G) ................. Mieloma Mltiple. Fosfatasa Alcalina ......................... Ca. De Prstata. Antgeno Prosttico ...................... Ca. De Prstata.

HORMONAS

Gonadotrofina Corinica ....... Tumor del Trofoblasto y T.

Calcitonina ............................. Ca. Medular de Tiroides. Catecolaminas ........................ Feocromocitoma. MUCINAS Carcinoma de Ovario ................. C.A- 125 Ca. de Colon, Pncreas ............. C.A. 19-9 Ca. de Mama ............................... C.A- 15-3

Carcinogenesis
Factores Geogrficos Incidencia Versus Mortalidad Ejemplo: Carcinoma estomago Japn EEUU Carcinoma de pulmn EEUU Japn Factores ambientales y culturales tienen mayor peso que la predisposicin gentica.

Factores Geogrficos Ambientales y Culturales

Herencia
Los tumores son mas frecuentes en razas puras que en mestizos. La consanguinidad esta altamente relacionada con mamarios tumores en perros. Los bxer son la raza de mayor riesgo de presentar una variedad de tumores especialmente mesenquimaticos. Humanos..retinoblastoma, poliposis,Ca Estomago Gl.mamaria, ovario, encfalo

Raza
Bxer: Alto Riesgo

Bulldog-Bxer-Alto riesgo Tumores Sistema hemopoyetico-Linfoma Boston terrier- tumores vasculares

Bxer-spaniel-labrador- Alto riesgo Tumores glndula mamaria

Raza

Edad
La edad ejerce una influencia importante, sobre la probabilidad de sufrir cncer. Los carcinomas ocurren en los ltimos aos de vida 55 aos. Cada grupo de edad tiene propensin a ciertas formas de cncer. En la actualidad ha incrementado la mortalidad en nios con cncer. Adultos 55 aos Carcinomas Nios 15 aos Leucemias-Cncer S.N.C.

Edad

Obesidad-Alcoholismo-Tabaquismo

Oncogenes y Cncer
Los oncogenes o genes causantes de cncer derivan de los proto-oncogenes, genes celulares que promueven el crecimiento y la diferenciacin normales.

Factores Ambientales Adquiridos: Prod. Qumicos. Radiacin, virus.

Mutaciones en el genoma de las clulas somticas

Mutaciones Heredadas

Act. de oncogenesPromotores del crecimiento.

Alteracin de los genes que regulan la apoptosis

Inactivacin de genes supresores de cncer

Expresin de productos alterados de los genes y prdida de prod gnicos reguladores

Neoplasia maligna

Genes Supresores de Cncer

Los proto-oncogenes codifican protenas que promueven el crecimiento celular, los productos de los genes supresores de tumores aplican frenos a la proliferacin celular. La perdida de estos genes es un hecho clave en muchos tumores.

Agentes Carcinognicos y sus interacciones celulares

Una gran cantidad de agentes causan daos genticos e inducen la transformacin neoplsica de clulas. Carcingenos Qumicos Energa Radiante Virus Oncognicos

Carcinogenesis Qumica
Hidrocarburos aromticos policclicos. Son los agentes carcingenos mas potentes que se conocen. Si se presentan en la piel, cncer de piel, combustin del tabaco, cncer de pulmn, grasas animales al asar carnes a la parrilla, tambin se encuentra en carnes y pescados ahumados.

Aminas Aromticas y Colorantes Azoicos

Ejercen su efecto carcinognico en el hgado donde forma el carcingeno final, por la activacin de los sistemas oxigenasa del citocromo P 450. Colorantes como el rojo escarlata (cerezas) y el amarillo Nro 5 (mantequilla).

Carcingenos presentes en la Naturaleza

Existen aproximadamente 30 carcingenos qumicos, producidos por plantas y microbios. El mas importante es el carcingeno heptico, la aflatoxina B1, producido por Aspergillus flavus, que crece en cereales mal almacenados.

Agentes Diversos
Asbesto- Carcinoma Broncognico. Cloruro de vinilo- hemangiosarcoma heptico. Cromo y Niquel- Cncer de Pulmn. Aldrin, dieldrin y clordano- carcinomas en animales.

Carcinogenesis por Radiaciones

Luz ultravioleta Cancer de Piel. Radiacin Ionizante: Origen medico Origen ocupacional
Neoplasias malignas

Bombas atmicas

Carcinogenesis por Virus

Se ha demostrado que un elevado numero de virus ARN y ADN son oncognicos en una amplia variedad de animales.

Virus ADN Oncgenos.

Adenovirus.
Virus del papiloma bovina Virus de Epstein- Barr [VEB] Virus del papiloma. humano [VPH]

Virus de Marek [herpes virus] Virus de hepatitis B

Virus ARN Oncgenos.

Retrovirus [RNA] grupo leucosis linfoide mieloblastosis reticuloendoteliosis.

La nica forma segura de evitar el cncer, es no nacer, vivir es correr el riesgo

Antgenos Tumorales
En muchos tumores reducidos experimentalmente y en algunos canceres humanos se han demostrado antgenos que desencadenan respuesta inmunitaria.

Antgeno especifico del tumor [AET] Clasificacin

Antgeno asociado a tumor [AAT]

Antgeno especifico de tumor [AET]

Factores pronsticos y predictivos en el cncer de mama

Dr.Eduardo Caleiras Dr.Aldo Reigosa Yniz

Conceptos
Factor pronstico
Evolucin

Factor predictivo
Respuesta a tratamiento especfico

Factores pronsticos
Embolos neoplsicos Necrosis

Estadio clnico Tamao del tumor Ganglios axilares Tipo histolgico Edad Grado histolgico Grado nuclear Invasin a piel

Angiognesis
Bordes y mrgenes Estrato social Componente intraductal extenso Infiltrado inflamatorio

Estadio clnico

Estadio I II III IV

Sobrevida 5 aos 85 % 66 % 43 % 10 %

Tamao del tumor

- 2 cm 1 10mm 10 13 mm 14 20 mm (medida histolgica) + 2 cm

S5a 88 % 73 % 65 %

59 %

Tamao del tumor

Ganglios linfticos axilares

N ganglios + 0 Micrometstasis (- 2 mm) 1a3 4a9 10 +

Sobrevida 5 aos 88 % ? (83) % 80 % 68 % 45 %

Importante sealar si existe o no extensin extranodal

Predictores de mt axilares:

Tamao del tumor Grado nuclear mbolos vasculares

Tipo histolgico

Buen pronstico Mucinoso, tubular, papilar, adenoideo-qustico Pronstico intermedio Medular, lobular

Mal pronstico Metaplsico, clulas en anillo de sello, carcinosarcoma, rico en lpido

Grado histolgico
(Scarff-Bloom-Richardson-Elston)
Parmetros:
Formacin tbulos Pleomorfismo Mitosis

III
II

Grados:

Grado nuclear
(Black)
Parmetros:
Nuclolos Pleomorfismo Tamao nuclear (n/c)

III

Grados:

II

mbolos vasculares

Linfticos Sanguneos Importancia Recurrencia Metstasis ganglionares Metstasis a distancia

S5a IL
No Si

N0
70 40

N1
45 40

Factores pronsticos y predictivos inmunohistoqumicos

Receptores de estrgeno Receptores de Progesterona C-erbB-2 p53

Bcl2 Ki67 Catepsina D Factor de crecimiento epidrmico MDR - 1

Receptores hormonales

+++

Receptores hormonales y carcinognesis

Insulto carcingeno Clula normal

RE+

RE+ Alteraciones genmicas promovidas por estrgeno Clula tumoral REClula tumoral

J Clin Oncol 19:1, 18-27, 2001.

Receptores hormonales y pronstico

RE+ RP+ Mayor edad al diagnstico Menor tamao tumoral Mejor grado histolgico Mayor supervivencia

RE- RP-

Anderson. J Clin Oncol 19: 18-27, 2001.

Receptores hormonales y pronstico - Edad al diagnstico

RE+RP+ (58%) RE+RP- (23%)

30

40

50

60

70

30

40

50

60

70

RE-RP+ (4%)

RE-RP- (15%)

30

40

50

60

70

30

40

50

60

70

Receptores hormonales y pronstico

RE+RP+ RE+RPRE-RP+

RE-RP-

Sobrevida en meses

Receptores hormonales y valor predictivo

Respuesta a manipulacin hormonal RE+ RP+ RE+ RPRE- RP+ RE- RP77 % 27 % 46 % 11 %

Weidner: Surg Oncol Clin 6: 415-462, 1997.

Receptores hormonales y valor predictivo

Receptores de estrgeno Alfa = susceptibilidad al tamoxifeno (crom. 6) Beta = resistencia al tamoxifeno (crom. 14)

C-erbB-2 (Her-2/neu)

Proto-oncogen Familia de receptores del factor de crecimiento epidrmico Cromosoma 17 Codifica receptor transmembrana tirosina quinasa de 185 kd

C-erbB-2 (Her-2/neu)

Amplificacin y/o sobre-expresin lleva a fosforilacin de regin intracelular Seal que desencadena cascada --------------------> crecimiento celular 20 a 30 % de casos de cncer de mama Factor pronstico Factor predictivo

C-erbB-2 (Her-2/neu)

Factor pronstico: Peor pronstico Sobrevida global menor Sobrevida libre de enfermedad menor Grupo con ganglios negativos, c-erbB-2 -, receptores hormonales +, bcl2 + = mejor pronstico = no quimioterapia adyuvante ?.

C-erbB-2 (Her-2/neu)

Factor predictivo: Menor respuesta a terapia endocrina Menor respuesta a Qt con CMF Mejor respuesta a antraciclinas - doxorrubicina Respuesta a trastuzumab Mejor respuesta a taxanos + trastuzumab

Trastuzumab Anticuerpo monoclonal humanizado dirigido contra protena Her2/neu Se acopla al dominio extracelular de la protena

Bloquea proliferacin celular

Induce toxicidad celular dependiente de anticuerpos Hasta ahora aprobado su uso en enfermedad metastsica

Lebeau: J Clin Oncol 19: 354-363, 2001

C-erbB-2 (Her-2/neu) Inmunohistoqumica

IHQ -

IHQ 2+

IHQ + IHQ 3+

C-erbB-2 (Her-2/neu) Inmunohistoqumica

C-erbB-2 (Her-2/neu)
Inmunohistoqumica (IHQ) 0 = negativo + = negativo ++ = positivo dbil +++ = positivo fuerte Hibridacin in situ fluorescente (FISH) normal

baja amplificacin alta amplificacin

C-erbB-2 (Her-2/neu)
IHQ

0 FISH

1+ 2+ 67 21

3+ 21 176

207 28 2

+ 7

3% 7% 24% 89%
Concordancia general = 82 %
Mass R y col. Proc ASCO 2000; 19.

C-erbB-2 (Her-2/neu)

FISH -

IHQ 2+

C-erbB-2 (Her-2/neu)

FISH +

IHQ 3+

C-erbB-2 (Her-2/neu)

IHQ 1+

FISH -

IHQ 3+

FISH ++

IHQ -

FISH -

IHQ 2+

FISH +

C-erbB-2 (Her-2/neu) Toma de decisin para tratamiento con trastuzumab Muestra IHQ 2+ FISH 3+ Tto. especfico FISH + Tto. especfico

+
Tto. especfico

Lebeau: J Clin Oncol 19: 354-363, 2001

p53 mutante

p53 salvaje --> clula alterada --> apoptosis Mutacin --> clula alterada --> no apoptosis 30 - 50 % casos de cncer de mama Mal pronstico - supervivencia reducida Sensibilidad a taxanos Resistencia a antraciclinas Futuro ---> Remplazo de p53 funcional

p53 mutante

Bcl2

Sobre-expresin relacionada con bloqueo de apoptosis Proto-oncogen Localizado en mitocondrias Relacionado con estrgeno Predice respuesta a tratamiento hormonal

Bcl2

Ki67

Mide actividad proliferativa Reconoce eptope en ncleos de clulas proliferativas Positivo en clulas no G0 (G1, S, G2, M) Mayor % clulas + = mayor agresividad 1 a 9 % = ndice bajo 10 a 13 % = ndice intermedio 14 % o mas = ndice alto

Ki67

Catepsina D Proteasa lisosomal Facilita invasin tumoral y metstasis Peor supervivencia Correlacionada con amplificacin del gen c-myc

Tavassoli. Pathology of the Breast,1999.

Catepsina D

MDR-1

Glicoprotena de transmembrana - 170 kD Gen de resistencia multidrogas Producto proteico acta como bomba transmembrana Bombea drogas citotxicas fuera de la clula Sobre-expresin relacionada con resistencia a drogas de quimioterapia (antraciclinas, vincristina, etoposide, taxanos)

Hahn: Int J Oncol 14: 273-279, 1999

Conclusin

Factores clsicos Terapia individualizada

Nuevas drogas Inmunoterapia

Factores inmunohistoqumicos

Nuevos avances Manipulacin gentica

Universidad Central De Venezuela Facultad de Ciencias Veterinarias Departamento de Patologa Veterinaria Ctedra de Patologa

NUEVOS AVANCES DIAGNSTICOS EN PATOLOGIA VETERINARIA

M.V. Julissa Ramrez Medina M.Sc
Maracay Abril, 2004

Introduccin

Tcnicas Diagnsticas
INMUNOHISTOQUMICA (IHQ)
Inmunofluorescencia (Coons et al.,1940) Marcaje Enzimas (Nakane, 1966; Avrameas, 1969; Brown, 1974)

REACCIN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR)

Kary Mullis (1983) Premio Nobel

HIBRIDIZACIN IN SITU (HIS)

Pardue y Gall (1969) Jones et al. (1969)

Introduccin a las Tcnicas De IHQ y Aplicaciones en Patologa Veterinaria

Combina tcnicas (anatmicas, inmunolgicas y bioqumicas) Localiza componentes tisulares (in situ) Utiliza enzima (marcador)
Peroxidasa Fosfatasa alcalina Glucosa oxidasa
Se basa en la visualizacin de un anticuerpo, lo ms especfico posible, que reconozca a un antgeno concreto, fijado y presente en los cortes del tejido en estudio.

INMUNOHISTOQUMICA Conceptos Bsicos

Antgeno: sustancia o partcula animada o inanimada induce respuesta H C
Ac primario: reacciona con el Ag Afinidad de un Ac: formar IC insolubles Ac monoclonales: mismo clon de clulas plasmticas (sntesis ratn)

Ac policlonales: diferentes (sntesis

producido conejo)

por

clulas

Eptopo: porcin de un Ag que reacciona con un Ac

INMUNOHISTOQUMICA Conceptos Bsicos

Peroxidasa: forma complejo E-S Diaminobencidina (DAB): intensifica la reaccin

colorimtrica
Antisuero: suero que contiene Acs.
Background: tincin no especfica (fondo) Reaccin

cruzada: Acs. reaccionan contra

otros Ags.
Control positivo: resultado tincin especfica Control negativo: muestras procesadas usando

suero no inmune

Tcnicas de Inmunoperoxidasa
Tcnicas de Inmunoperoxidasa

Anticuerpos marcados

Anticuerpos sin marcar peroxidasa antiperoxidasa

directa

indirecta

Tcnicas con Ac`s Marcados

P
Representacin enzimtica de la Tcnica de inmunoperoxidas mediante el uso de Acs. marcados (mtodo directo)

Ag

Ag

Ag

Ag

Tcnicas con Ac`s Marcados

Representacin enzimtica de la Tcnica de inmunoperoxidasa mediante el uso de Acs. marcados (mtodo indirecto)

Ag

Ag

Ag

Ag

Tcnicas con Ac`s no Marcados

PP

MTODO DE LA PEROXIDASA ANTIPEROXIDASA (PAP) Sternberger et al., 1970-1986

Ag

Ag

Ag

Ag

Aplicaciones de la IHQ en Patologa Veterinaria

CONSIDERACIONES GENERALES
Antgenos a detectar: Microorganismos: agentes infecciosos y Ags. detectables en tejidos Depsitos: (Igs) enf. autoinmunes Filamentos intermedios: queratina; vimentina; desmina

Aplicaciones de la IHQ en Patologa Veterinaria

Antgenos a detectar:
Hormonas:

tumores endocrinos

Marcadores

neurolgicos: elonasa especfica neuronal

Protenas

superficiales leucocitarias: CD4-CD8

oncognicos: Acs. contra oncogenes y Dx. de tumores

Productos

Aplicaciones de la IHQ en el Dx. de diferentes especies animales

Caninos
Felinos Aves
Toxoplasmosis;Tumores pobremente diferenciados; Neospora caninum
Toxoplasmosis; Tumores pobremente diferenciados Vs Laringotraqueitis; Vs infeccin de bronquitis; Vs enfermedad infecciosa de la bursa; Vs de la encefalomielitis aviar adenovirus, influenza virus; Vs enf. de Newcastle Msculo gluteus medius; Sarcocystis neurona Encefalopata Espongiforme Rinotraquetis infecciosa

Equinos Bovinos Cerdos

Influenza , SRRP, Lawsonia intracellularis, coronavirus (GET); Escherichia coli

Circovirus Porcino Tipo 2

Conclusiones
Herramienta en Anatoma Patolgica avances en el Dx. histopatolgico. Constituye en la actualidad una tcnica de gran importancia en biologa y es utilizada para realizar Dxs. rpidos. Se inici con fines de Investigacin y actualmente se emplea cada vez ms en el Dx. rutinario.

Reaccin en Cadena de la Polimerasa (PCR)

Biologa molecular (cdigo gentico)
Pruebas diagnsticas Identificacin de patgenos (ADN o ARN) Especies, tipo, subtipo y patotipo Muestras
Es una tcnica in vitro que imita la habilidad natural de la clula de duplicar el ADN

Fundamento de la Tcnica (PCR)

1.- Desnaturalizacin 95C

Pasos

2.- Alineacin 37-56C 3.- Amplificacin 72C

TAQ POLIMERASA

ADN POLIMERASA

AMPLIFICA ADN AGENTE CAUSAL

SINTETIZA NUEVAS CADENAS DE ADN

PCR AUTOMATIZADO

PCR

Gel de electroforesis

PCR como herramienta diagnstica en patologa Veterinaria

Aves
Haemophilus paragallinarum; Mycoplasma gallisepticum; M. synoviae; Birnavirus; Coronavirus; Alphaherpesvirus; Circovirus; Oncornavirus; Herpesvirus Babesia spp.; Fasciola heptica; Trichomona foetus Strongylus vulgaris Ascaris suum, VSRRP; VGET; Salmonella spp. Lawsonia intracellularis; VPR (pseudorabia) Haemonchus contortus; Paratuberculosis; paternidad Parvovirus, Ehrlichia spp; Echinococcus granuloso; coronavirus, Leishmania spp; Def. de fosfofructoquinasa; H. heilmannii; H. felis Toxoplasma gondii; Helicobacter felis y H. pylori

Bovinos Equinos Porcinos OvinosCaprinos Caninos

Felinos

Conclusiones
Las aplicaciones en la gentica molecular estn contribuyendo a enriquecer y descifrar los conocimientos que hasta ahora solo pertenecan al misterio que encierran los genes. El anlisis de los cidos Nucleicos abre nuevos campos en las ciencias agropecuarias en general y en la veterinaria en particular: identificacin de agentes patgenos en el Dx. clnico, de genotipos, patotipos, deteccin de enfermedades hereditarias, pruebas de paternidad, entre otros. El PCR posee altos niveles de especificidad para el Dx. e identificacin de agentes patgenos ya que se fundamenta en la secuencia nica de bases del genoma de un organismo.

HIBRIDIZACIN in situ (HIS)

Mapear un gen por hibridacin molecular de una secuencia clonada de ADN marcado con radioactividad o fluorescencia, en un cromosoma extendido sobre una laminilla. Combinada con IHQ- informacin microscpica de genes (ADN, ARN) Material genmico: (estructura)
Cadenas Azcar-fosfato Bases nucletidas (pricas y prirmidnicas)

topolgica

Tcnica de IHS
Se requieren 3 componentes esenciales:
cido nucleico blanco (ADN o ARN) Sonda de Ac. Nucleico marcado Sistema de deteccin
Marcadores: radioactivos, fluorescentes, quimioluminiscentes y bioreactivos

Duracin: 30-90 minutos. Recoleccin de muestras

Congeladas Fijadas en formalina

Hibridizacin in situ

Canino s

Aplicaciones de la HIS como Herramienta Diagnstica en Patologa Veterinaria

Parvovirus

Cerdos Virus Aftosa; Pestivirus, PRRSV Bovinos Virus Aftosa, Pestivirus; Virus de Maedi-Visna Porcino Herpesvirus 1; Circovirus porcino s Aves Anemia infecciosa aviar

IHQ o IHS o PCR? cual seleccionar?

Presencia de Material Especifico de un Organismo Infeccioso en Tejidos
DISPONIBILIDAD ALTA SENSIBILIDAD

Infecciones activas

Infecciones latentes PC R

IHQ

HIS

CONCLUSIONES
Detecta secuencias complementarias de cidos nucleicos presentes en tejidos usando sondas especficas para el organismo infeccioso. Combina la morfologa y la biologa molecular, considerando que cada organismo infeccioso tienen un segmento nico de ADN o ARN que no se encuentra en otros organismos, clulas la tejidos. molecular ha causado El desarrollo cientfico de o biologa un fuerte impacto en las ciencias en general, as como en el campo diagnstico de la patologa veterinaria.

GRACIAS POR SU ATENCIN