Lab Inf 32
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PREAMBULE
Ce document d’information, complémentaire du LAB GTA 23, recense de manière non exhaustive, les analyses
en microbiologie des eaux. Le but de cette nomenclature est d’harmoniser l’expression des portées
d’accréditation des laboratoires accrédités ou candidats à l’accréditation dans ce domaine. Il est également utile
aux évaluateurs dans le cadre des missions qui leurs sont confiées.
Ces portées types sont définies en application des règles du Cofrac sur l'expression des portées d’accréditation
(cf. documents LAB REF 08 et LAB INF 28 disponibles sur www.cofrac.fr).
I
FO
ENVIRONNEMENT / QUALITE DE L’EAU / Analyses microbiologiques
(Analyses microbiologiques des eaux - LAB GTA 23)
OBJET
CARACTERISTIQUE MESUREE
PRINCIPE DE LA METHODE
I T
REFERENCE DE LA
Eaux douces
OU RECHERCHEE
Eaux résiduaires
Eaux salines et
Coliformes
Incubation à 30°C
U E
Confirmation des tubes positifs
NF T 90-413
I Q
Filtration sur membrane
Eaux douces
Eaux des Escherichia coli et bactéries Incubation à 36°C N
RO
NF EN ISO 9308-1
établissements de coliformes Dénombrement des colonies
santé confirmées
I O Détermination du NPP
Eaux douces
Eaux résiduaires R S Ensemencement en microplaques
Incubation à 44°C
Eaux salines et
saumâtres
V E
Escherichia coli Confirmation des puits positifs par NF EN ISO 9308-3
fluorescence
Détermination du NPP
Eaux douces
LA
Eaux résiduaires
Entérocoques intestinaux
Ensemencement en microplaques
Incubation à 44°C
Confirmation des puits positifs par NF EN ISO 7899-1
Eaux salines et fluorescence
saumâtres
Détermination du NPP
Portée flexible FLEX1 : Le laboratoire est reconnu compétent pour pratiquer les essais en suivant les méthodes référencées et
leurs révisions ultérieures.
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Nomenclature et expression des lignes de portée Référence : LAB INF 32
d'accréditation pour les analyses microbiologiques Indice de révision : 01
des eaux
Date d’application : 15/09/2017
Ensemencement en direct
Et après concentration par filtration
Eaux de réseaux
puis décontamination par traitement
acide I
FO
sanitaires froides et Ou. après concentration par filtration
chaudes ou centrifugation puis traitement et
Legionella et Legionella
Eaux de tours
pneumophila
ensemencement d’une partie du NF T 90-431
concentrât.
I T
aéroréfrigérantes
(IRDEFA)
Incubation à 36°C.
Dénombrement des Legionella et
F A
Legionella pneumophila
immunofluorescence
agglutination au latex
ou
U E en
par
Ensemencement en direct
I Q
N
Et après concentration par filtration
puis décontamination par traitement
Eaux de réseaux
sanitaires froides et
chaudes (1)
Legionella et Legionella
acide
R O
Ou après concentration par filtration
Eaux de tours
pneumophila
(1)
A l’exception des eaux
T
puis traitement et ensemencement
C
non d’une partie du concentrât.
NF T 90-431
aéroréfrigérantes
(IRDEFA) (1)
filtrables
centrifugation.
nécessitant
L E
une Incubation à 36°C.
Dénombrement des Legionella et
E Legionella pneumophila
immunofluorescence ou
en
par
N agglutination au latex
I O Ensemencement en direct
R S
Legionella et Legionella
Et après concentration par filtration
puis décontamination par traitement
acide
Eaux de réseaux
sanitaires froides et V E
pneumophila
(1)
A l’exception des eaux
Ou après concentration par filtration
non puis traitement et ensemencement NF T 90-431
LA
filtrables nécessitant une d’une partie du concentrât.
chaudes (1) centrifugation. Incubation à 36°C.
Dénombrement des Legionella et
Legionella pneumophila en
immunofluorescence ou par
agglutination au latex
Ensemencement en direct
Legionella et Legionella Et après concentration par filtration
pneumophila puis décontamination par traitement
A l’exception des eaux colorées acide.
Eaux de réseaux (1)
sanitaires froides et et/ou non filtrables devant suivre le Incubation à 36°C. NF T 90-431
chaudes (1) processus analytique des eaux
Dénombrement des Legionella et
« sales ».
Legionella pneumophila en
immunofluorescence ou par
agglutination au latex.
Portée flexible FLEX1 : Le laboratoire est reconnu compétent pour pratiquer les essais en suivant les méthodes référencées et
leurs révisions ultérieures.
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Méthode qualitative
I Q
Eaux douces Pré-enrichissement
N
RO
Eaux résiduaires Enrichissements en milieu sélectif
Salmonella NF EN ISO 19250
Eaux salines et liquide
saumâtres
T
Isolement sur milieu gélosé
C
Confirmation
LE
Destruction des formes végétatives
Ensemencement en tube par
Eaux douces sulfito-réductrices et de E
Spores de bactéries anaérobies incorporation
Incubation à 37°C en anaérobiose
NF T 90-415
N
Clostridium sulfito-réducteurs
Dénombrement des colonies
I O caractéristiques
Eaux douces
S Destruction des formes végétatives
ER
Eaux résiduaires Spores de micro-organismes Enrichissement en milieu liquide
NF EN 26461-1
Eaux salines et anaérobies sulfito-réducteurs Incubation à 37°C en anaérobiose
saumâtres
V Détermination du NPP
LA
Destruction des formes végétatives
Filtration sur membrane
Spores de micro-organismes
Eaux douces Incubation à 37°C en anaérobiose NF EN 26461-2
anaérobies sulfito-réducteurs
Dénombrement des colonies
caractéristiques
Filtration sur membrane
Incubation à 36°C sur milieu sélectif
Eaux douces Staphylocoques pathogènes NF T 90-412
Dénombrement des colonies
confirmées
Portée flexible FLEX1 : Le laboratoire est reconnu compétent pour pratiquer les essais en suivant les méthodes référencées et
leurs révisions ultérieures.
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des eaux
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NF EN ISO 6341
I
FO
Eaux douces Détermination de l’inhibition de la
Calcul Equitox / m3 selon arrêté
Test "Daphnies" mobilité de Daphnia magna Straus –
Eaux résiduaires ministériel de l’Environnement du
essai de toxicité aiguë
21/12/2007 modifié par l’arrêté du
I T
20/03/2015 (facultatif)
Concentration sur laine de verre
Inoculation du concentrât
F A
Eaux douces
Eaux résiduaires
Eaux salines et
Entérovirus
Dénombrement des puits positifs U E
Repiquage sur culture cellulaire en
microplaque
XP T 90-451
saumâtres confirmés
I Q
N
Caractérisation des virus
Détermination du NPP
R O
Concentration sur laine de verre
Eaux douces
Eaux résiduaires
Entérovirus
C T
Détection des entérovirus humains
par culture cellulaire par la méthode
des plages
NF EN 14486
Et
Eaux salines et
saumâtres
L E Caractérisation des virus XP T 90-451
E
Détermination des UFP
Eaux salines et
saumâtres
R S Identification par
immunofluorescence
Dénombrement
LA
Test "Photobacterium" luminescence de Vibrio Fischeri – NF EN ISO 11348-1
Eaux résiduaires
Méthode utilisant des bactéries
fraîchement préparées
Détermination de l’effet inhibiteur
d’échantillon d’eau sur la
Eaux douces
Test "Photobacterium" luminescence de Vibrio Fischeri – NF EN ISO 11348-2
Eaux résiduaires
Méthode utilisant des bactéries
déshydratées
Détermination de l’effet inhibiteur
d’échantillon d’eau sur la
Eaux douces
Test "Photobacterium" luminescence de Vibrio Fischeri – NF EN ISO 11348-3
Eaux résiduaires
Mméthode utilisant des bactéries
lyophilisées
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leurs révisions ultérieures.
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Date d’application : 15/09/2017
CARACTERISTIQUE REFERENCE DE LA
OBJET PRINCIPE DE LA METHODE
MESUREE OU RECHERCHEE METHODE
N
Filtration sur membrane.
RO
Escherichia coli et bactéries
Eaux douces Méthode milieu chromogène sélectif BKR 23/08-06/12
coliformes
(COMPASS cc AGAR)
C T
Ensemencement en milieu liquide
LE
Escherichia coli et bactéries Méthode colorimétrique et
Eaux douces IDX 33/01–11/09
coliformes fluorimétrique Colilert®18
E Détermination du NPP
Ensemencement en milieu liquide
Eaux douces
Eaux salines et Escherichia coli N Méthode colorimétrique Colilert®18 IDX 33/02–06/12
saumâtres
I O Détermination du NPP
ER
Eaux embouteillées Pseudomonas aeruginosa Méthode milieu chromogénique BRD 07/21-04/12
(RAPID’PsA)
V
Portée flexible FLEX1 : Le laboratoire est reconnu compétent pour pratiquer les essais en suivant les méthodes référencées et
LA
leurs révisions ultérieures.
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des eaux
Date d’application : 15/09/2017
CARACTERISTIQUE REFERENCE DE LA
OBJET PRINCIPE DE LA METHODE
MESUREE OU RECHERCHEE METHODE
IQ
Eaux des Isolement PE 2.6.13 ou USP<61>
l’exclusion des clostridies
établissements de Confirmation Monographies
santé
N
Eaux décrites selon la
pharmacopée
Eaux des Germes aérobies viables totaux
membrane O
Ensemencement par filtration sur
R Pharmacopée en vigueur :
établissements de
santé
C T
Incubation
Dénombrement
Monographies
E
N
ENVIRONNEMENT / QUALITE DE L’EAU / Analyses microbiologiques
O
(Analyses microbiologiques des eaux - LAB GTA 23)
I
OBJET
R S
CARACTERISTIQUE
MESUREE OU RECHERCHEE
PRINCIPE DE LA METHODE
REFERENCE DE LA
METHODE
V E Détermination de la concentration en
endotoxines bactériennes par l’essai
Pharmacopée en vigueur PE
2.6.14 ou USP <85> et <161>
LA
Eaux décrites selon la au lysat d’amébocytes de limule
Endotoxines bactériennes (LAL) Méthodes A et/ou B
pharmacopée
Méthodes par gélification
(A préciser par le laboratoire)
Essai limite et/ou semi quantitatif
Détermination de la concentration en
endotoxines bactériennes par l’essai Pharmacopées en vigueur PE
au lysat d’amébocytes de limule 2.6.14 ou USP <85> et <161>
Eaux décrites selon la (LAL)
Endotoxines bactériennes Méthodes C et/ou D
pharmacopée Méthodes photométriques avec
recherche d’interférences :
Turbidimétrie et/ou colorimétrie (A préciser par le laboratoire)
cinétiques
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CARACTERISTIQUE REFERENCE DE LA
OBJET PRINCIPE DE LA METHODE
MESUREE OU RECHERCHEE METHODE
Détermination de la concentration en
endotoxines bactériennes par l’essai
au lysat d’amébocytes de limule
I
Pharmacopée en vigueur PE
2.6.14 ou USP <85> et <161>
FO
Eaux décrites selon la (LAL)
Endotoxines bactériennes Méthodes E et/ou F
pharmacopée Méthodes photométriques avec
recherche d’interférences :
Turbidimétrie et/ou colorimétrie en
point final I T
(A préciser par le laboratoire)
F A
Portée flexible FLEX1 : Le laboratoire est reconnu compétent pour pratiquer les essais en suivant les méthodes référencées et
leurs révisions ultérieures.
U E
(Analyses microbiologiques des eaux - LAB GTA 23)I Q
ENVIRONNEMENT / QUALITE DE L’EAU / Analyses microbiologiques
N
RO
CARACTERISTIQUE
OBJET PRINCIPE DE LA METHODE REFERENCE DE LA METHODE
MESUREE OU RECHERCHEE
Eaux douces
Micro-organismes revivifiables C T
Filtration sur membrane Méthode interne :*
Eaux des
établissements de
santé
22°C
L E Incubation à 22°C
Dénombrement des colonies
(référence et version du mode
opératoire à préciser)
E
Eaux douces
N
Micro-organismes revivifiables
Filtration sur membrane Méthode interne :*
Eaux des
établissements de 36°C
I O Incubation à 36°C
Dénombrement des colonies
(référence et version du mode
opératoire à préciser)
santé
Eaux douces
R S
Eaux des
établissements de
santé V EMicro-organismes revivifiables
30°C
Filtration sur membrane
Incubation à 30°C
Méthode interne :*
(référence et version du mode
LA
Dénombrement des colonies opératoire à préciser)
Solution de contrôle
des endoscopes
Pseudomonas aeruginosa
Pseudomonas spp Méthode qualitative :
Entérobactéries Culture sur milieu non sélectif
Entérocoques Typage morphologique des Méthode interne :*
Solution de contrôle colonies
Stenotrophomonas maltophilia (référence et version du mode
des endoscopes Coloration GRAM ou état frais
Acinetobacter sp, opératoire à préciser)
Ré-isolement
Staphylococcus aureus,
Confirmation par une galerie
Candida sp d’identification
Champignons filamenteux
* Portée FIXE : Le laboratoire est reconnu compétent pour pratiquer les essais en respectant strictement les méthodes
mentionnées dans la portée d’accréditation. Les modifications techniques de la méthode ne sont pas autorisées.
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Date d’application : 15/09/2017
CARACTÉRISTIQUE REFERENCE DE LA
OBJET PRINCIPE DE LA MÉTHODE
MESURÉE OU RECHERCHÉE METHODE
Méthode qualitative
Filtration I
Virus entériques : Elution du packaging (pour les eaux
embouteillées) FO
Méthode interne :*
Eaux douces Virus de l’hépatite A Concentration
I T
(référence et version du mode
Norovirus GI et GII
Rotavirus de groupe A
Extraction de l’ARN viral (Automate
à préciser)
F A
opératoire à préciser)
Eaux de réseaux
I Q
Concentration par filtration
sanitaires froides et
N
Extraction de l’ADN (Automate à
NF T 90-471
RO
chaudes Legionella et Legionella préciser) Méthode interne *:
Eaux de tours pneumophila Amplification et quantification par (référence et version du mode
aéroréfrigérantes
(IRDEFA) T
PCR en temps réel avec sonde
d’hybridation
C
opératoire à préciser)
L E
* Portée FIXE : Le laboratoire est reconnu compétent pour pratiquer les essais en respectant strictement les méthodes
E
mentionnées dans la portée d’accréditation. Les modifications techniques de la méthode ne sont pas autorisées.
N
I O
R S
V E
LA
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