122 M.BVP PDF
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SCIENTIFIQUE
DEPARTEMENT DE BIOTECHNOLOGIE
MEMOIRE
THEME
En premier, Je dédie ce travail à la prunelle de mes yeux : mon père qui m’a veillé jours et
nuit.
A ma sœur : Djazia et son mari Salim
A mes Grands-parents
A mes amis : Zina, Imane, Basma, Bochra, Fatima, Meriem, Nour Elhouda et Nadjia et a
toutes mes amies.
A Mes Neveux et Nièces
A ma Binôme : Hanane et sa famille.
A mes tantes et mes oncles : Nourdine, Mohamed, Nasredine, Yamina, Zoulikha et Nawal.
A toute la famille : Amari et Azouz.
A mon Fiancé : Mohamed qui était présent tous jour dans tous moment de ma vie.
A Cette occasion je rond hommage à mes defuntes mère (Fatiha) et sœur (Omelkhir)
SOUMYA
Dédicace
A l’aide de DIEU tout puissant, qui m’a tracé le chemin de ma vie, j’ai pu
réaliser ce travail que je dédie :
Aux personnes les plus chères au monde mes chers parents;
A la lumière de mes yeux, l’ombre de mes pats et le bonheur de ma vie ma mère qui m’a
apporté son appui durant toutes mes années d’études, pour son sacrifice et son soutien qui
m’ont donné confiance, courage et sécurité.
A mon cher père qui m’a appris le sens de la persévérance tout au long de mes
études, pour ses efforts fournis jour et nuit pour mon éducation et mon bien être. Ce travail
est le fruit de ses sacrifices, ses conseils et ses encouragements.
A mes chères sœurs Nassima et son mari Mahfoud ; Safia et son mari Hocine ;
Hayat et son mari Morad et Fatma et A mes chers frères Salim et Mohamed.
A mon binôme « Soumia » qui a partagé avec moi les moments difficiles de ce travail et sa
famille
A tous mes professeurs qui m’ont enseigné tout le long de mon parcours scolaire et
universitaire, Sans oublier mes amis de la promotion de biotechnologie des plantes
aromatiques et médicinales et des produits naturels 2016/2017
Hanane
: ﻣﻠﺨﺺ
اﻟﺘﻲ ﺗﺴﺒﺒﮭﺎC.illinoinensis وJ. Phoenicea ﯾﺴﺎھﻢ ھﺬا اﻟﻌﻤﻞ ﻓﻲ ﺗﻘﯿﯿﻢ اﻟﻨﺸﺎط اﻟﻤﻀﺎد ﻟﻠﻘﺸﺮة ﻟﻤﺴﺘﺨﻠﺼﺎت
وﺻﯿﺎﻏﺔ ﻣﻨﺘﺞ ﻋﻀﻮي، ﻓﻲ ﻓﺮوة اﻟﺮأس وﻣﺪى ﻓﻌﺎﻟﯿﺘﮭﺎMalassezia furfur
ھﺬه اﻟﻤﻘﺘﻄﻔﺎت ھﻲ ﻣﺎدة اﻟﺒﻮﻟﯿﻔﯿﻨﻮل.ﺗﺠﻤﯿﻠﻲ ﯾﻌﺎﻟﺞ ھﺬه اﻟﻤﺸﻜﻠﺔ ﺻﺤﯿﺔ
.Carya illinoinensis وأوراق وﻟﺤﺎءJuniperus phoenicea.L ﻣﻦ أوراق وﺛﻤﺎر ﻧﺒﺎت
إﺿﺎﻓﺔ إﻟﻰ دراﺳﺔ ﻣﻘﺎرﻧﺔ ﺑﯿﻦ ﻣﺴﺘﻮى اﻟﺒﻮﻟﯿﻔﯿﻨﻮل ﻓﻲ أوراق وﺛﻤﺎر
ﻋﻨﺪ ﻣﺴﺘﻮى ﻟﺤﺎء٪49 أﻇﮭﺮت اﻟﻨﺘﺎﺋﺞ أن ﻧﺴﺒﺔ اﻟﻤﺎء ﻛﺎﻧﺖ.اﻟﻨﺒﺎﺗﯿﻦ
ﻋﻠﻰ،68% أﻋﻠﻰ ﻣﻘﺎرﻧﺔ ﺑﺄوراق اﻷﺧﯿﺮة اﻟﺘﻲ ﺗﺒﻠﻎ، Carya illinoinensis ﻧﺒﺎت
.٪Juniperus phoenicea 37 ﻣﻦ وﻓﻲ ﺑﻠﻐﺖ ﻧﺴﺒﺔ ﺛﻤﺎر٪43 ﻣﺴﺘﻮى اﻷوراق ﻛﺎﻧﺖ
ﻛﻤﺎ ﺗﻢ إﺟﺮاء دراﺳﺔ ﻛﯿﻤﯿﺎﺋﯿﺔ ﻧﺒﺎﺗﯿﺔ ﻟﻠﻜﺸﻒ ﻋﻦ ﺑﻌﺾ اﻟﻌﻨﺎﺻﺮ
اﻟﻔﻼﻓﻮﻧﻮﯾﺪ واﻟﻌﻔﺺ اﻟﺘﻲ ﺗﺘﻮاﺟﺪ ﺑﻜﺜﺮة: ﻋﻠﻰ وﺟﮫ اﻟﺨﺼﻮص، اﻟﻜﯿﻤﯿﺎﺋﯿﺔ
ًﺎ وﺟﻮد
ﻧﻈﮭﺮ أﯾﻀ.واﻟﻐﯿﺎب اﻟﺘﺎم ﻟﻸن ﺛﻮﺳﯿﺎﻧﯿﻦ ﻓﻲ ﻛﻼ اﻟﻨﻮﻋﯿﻦ
Résumé :
Figure 16 : Lotion à base de poudre des feuilles de J. phoenicea et d’écorce de C. illinoinensis ; d’écorce
de C . illinoinensis et de la poudre des feuilles de J. phoenicea ……………………………..………33
Figure 20 : Les effets secondaires apparus suite à l’application de lotion et savons artisanal…………..36
Tableau 1 : Les produits utilisés pour la fabrication d’une lotion et leur rôle………………………24
Tableau 2 : Les résultats de test phytochimique de C. illinoinensis et J. phoenicea …………….29
Tableau 3 : Aspect physique des extraits phénolique de C.illinoinensis et J. phoenicea……………31
Tableau 4: Diamètres d’inhibition de Malassezia furfur par les polyphénols……………………….32
Introduction
Introduction
Introduction
Depuis la nuit des temps , l’homme a toujours cherché à se servir des plantes pour
s’alimenter d’abord, mais aussi pour se soigner ( Benhamza , 2008 ). Les pellicules sont un
problème capillaire et concernent une personne sur deux, principalement des hommes assez
jeunes. Elles peuvent toutefois avoir un impact sur l’estime de soi et la qualité de vie. Les
pellicules sont des petites squames ou cellules mortes blanchâtres ou grisâtres à la surface du cuir
chevelu, elle se détachent facilement du cuir chevelu, surtout quand elles sont sèches et
deviennent bien visibles sur des vêtements sombres.
Pour cela, nous nous sommes attachés à valoriser les substances des fruits, des feuilles et
de l’écorce par la mise en évidence de leur activité antipelliculaire et qui sont couramment
utilisées dans des cosmétiques capillaires tels que les polyphénols et l’extrait aqueux, et
d’identifier la concentration optimale et enfin de formuler un shampooing et une lotion et
1
Introduction
déterminer la tolérance cutanée des formes cosmétiques évaluée par étude du profil métrique
« contre empreintes » obtenues à partir d'empreintes de peau.
Ce travail comprend en premier lieu une recherche bibliographique approfondie sur les
deux plantes, suivi d’une partie qui renferme l’extraction des substances (biologiques
polyphénols et extrait aqueux) et l’étude de leur l’activité antifongique in vitro sur Malassezia
furfur qui est la source d’un problème sanitaire au niveau du cuir chevelu et, en fin, une
formulation de produits bio et leur application thérapeutique externe pour évaluer leur efficacité
in vivo.
En fin, nous terminons par une conclusion et des perspectives.
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Chapitre I
Etude bibliographique
Chapitre I : Synthèse bibliographique
1-Généralité
La famille des Cupressaceae comprend deux sous – familles, se divisent chacune en
trois tribus, les Cupressoideae et Les Callitroideae qui sont essentiellement respectivement
des hémisphères nord et sud (Haluk & Roussel, 2000). Elle comporte environ trente
genres (Farjon, 2001) ; les plus importants sont Cupressus L., Juniperus L. et Callitris
Vent. (Schulz et al., 2005).
1-3-Juniperus phoenicea L
C'est un arbrisseau, de I à 8 mètres de hauteur, ramifié dès la base et à houppier
dense, allongé. L'écorce est brun- rouge, fibreuse, assez épaisse. Les feuilles persistantes
opposées (rarement verticillées par trois), sont de deux sortes: - Des feuilles en aiguilles
(lOxlmm), piquantes, avec deux lignes blanches dessus et dessous, qui se trouvent
uniquement sur les individus très jeunes ; - Des feuilles en écailles, petites (1mm), ovales
et bombées sur le dos, étroitement appliquées sur les rameaux, bordées d'une marge
d'aspect cartilagineux. Les fruits (automne de la deuxième année) sont globuleux, assez
gros (8 à 10mm), noirâtres quand ils sont jeunes, puis verts et enfin rouges sombres et
luisants à maturité; ils renferment 7 à 9 graines (Becker et aL, 1982). (Figure 1)
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Chapitre I : Synthèse bibliographique
1-4-Taxonomie
Embranchement: Spermaphytes
Sous- Embranchement: Gymnospermes
Classe: Conifères
Ordre: Coniférales
Famille : Cupressacées
Genre Juniperus
Espèce: Juniperus phoenicea L
En Arabe : Arar (Quezel et Santa, 1962).
En Français: Genévrier rouge, Genévrier de Phénicie
En Anglais : Phoenician Cedar, Berry Bearing cedar
En kabyle: taqa (tawrirt plus rarement) (Quezel et Gast ,1998))
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Chapitre I : Synthèse bibliographique
1-6-Usages thérapeutiques
Cette espèce est très utilisée en médecine traditionnelle. Les feuilles sont utilisées sous
forme de décoction pour soigner le diabète, la diarrhée et le rhumatisme alors que les fruits
séchés et réduits en poudre peuvent guérir les ulcérations de la peau et les abcès (Le Floc'h,
1983). Les feuilles sont utilisées contre les maladies broncho-pulmonaires et comme un
diurétique (Bellakhder, 1997 ; Boullard, 2001). Le mélange des feuilles et cônes a été utilisés
comme un hypoglycémiant oral (Bellakhder, 1997).
Il a été démontré que les huiles essentielles des feuilles et des cônes possèdent une activité
antimicrobienne (Stassi et aL, 1996). L'a-pinène, qui est le composé majoritaire de l'huile de fun
Juniperus phoenicea, présente plusieurs activités biologiques : il est antibactérien, anti-
inflammatoire, antiviral, expectorant, sédatif, herbicide, insectifuge, et aromatisant (DukeJ.A.;
1998).
1-7-Composition chimique
Akrout (1999) a déterminé la composition chimique de l'huile essentielle des feuilles de
Juniperus phoenicea, récolté en Tunisie. L'a-pinène est le composé majoritaire avec une teneur
de 67,71%. D'autres composés sont présents dans cette huile en quantités appréciables: le p-
cymène (5,86%), le 3-phellandrène (2,21%) et l'acétate d'a-terpényle (2,71%). L'étude de la
variabilité chimique de l'huile essentielle des feuilles de Juniperus phoenicea subsp. turbinata
récolté dans différentes régions en Corse, a permis Rezzi S de définir deux groupes d'huiles
essentielles:
Les huiles essentielles du groupe I sont caractérisées par une forte teneur en a-pinène
(58,7%). La composition chimique des échantillons du groupe II, est caractérisée par une faible
teneur en a-pinène (33,0%) et une teneur significative en 3-phellandrène (21,1%) et en acétate
d'a-terpényle (8,2%). Par ailleurs, l'étude réalisée (Cavaleiro et al., 2001) sur la même sous-
espèce récoltée en Portugal, leur a permis de distinguer trois groupes d'huiles essentielles:
• Le premier groupe est caractérisé par une prédominance en a-pinène (teneur moyenne:
44,3%), suivi de 3-phellandrène (teneur moyenne: 22,7%) et de l'acétate d'a-terpényle (teneur
moyenne: 6,9%). Le rapport a-pinène/ 3-phellandrène est proche de 2/1.
• Les huiles essentielles du groupe II sont aussi caractérisées par l'a-pinène (teneur
moyenne: 27,8%), le -phellandrène (teneur moyenne: 28,8%) et l'acétate d'a-terpényle (teneur
moyenne: 10,5%), mais le rapport a-pinène/ 3-phellandrène est proche de 1.
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Chapitre I : Synthèse bibliographique
• Les échantillons appartenant au groupe III, sont dominés par l'a-pinène (teneur moyenne:
81,5%).
Barrero et al. (2006) ont étudié la composition chimique de l'huile essentielle des
feuilles de .Juniperus phoenicea L., récolté en Maroc. Les constituants majoritaires sont des
hydrocarbures mono terpéniques : l'a-pinène (45,5%) et le 8-carène (13,0%).
Hayouni et al. (2007) ont démontré que les solvants et la méthode d'extraction, influent
significativement sur la teneur des polyphénols et les activités biologiques (antioxydante et
antibactérienne) des extraits des fruits de Juniperus phoenicea L., récolté en Tunisie.
L’écorce est de couleur gris clair qui noircit et se fissure au fil des années. Le
système radiculaire est pivotant , avec un chevelu abondant et ramifié , recouvert de
mycorhizes ( Bretaudeau , 1981), ses racines sont traçantes et ont toujours tendance à
remonter à la surface vers la couche fertile et aérée du sol ( Garavel , 1971 ).
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Chapitre I : Synthèse bibliographique
2-2-Origine
L’aire d’origine de cette espèce s’étend des moyennes montagnes d’Asie centrale (
du Caucase au Turkestan ) , de l’Asie mineure , des Balkans et de l’Himalaya jusqu’à
l’Est de la Chine ( Germain, 1992).
Dès l’antiquité grecque, le noyer commun a été cultivé et introduit en Europe puis ,
pendant la période romaine , en Afrique du Nord ( Sabatier , 1999 ). Il a été introduit au
Chili et cultivé en Californie au 20 éme siècle ( Germain , 1992 ).
Il est également cultivé en Australie , en Nouvelle-Zélande et en Afrique du Sud (
Garavel , 1959 ).
2-3 -Systématique
Selon Crete (1965), le pacanier appartient à :
Règne : plantae
Division :magnoliopsida
Classe : magnoliopsida
Ordre : Juglandales
Famille : Juglandaceas
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Chapitre I : Synthèse bibliographique
Genre : Carya
Espèce : Carya illinoinensis.
Noms communs : En français : noyer royal ; ganquier ; callotier et eclonnier (Arnal et al. ,2009)
arbre au sommeil, gland de jupiter , gland divin.
En arabe : el jouza ,djouz, souik ou souak.
En anglais: common walnut, persian walnut, walnut.
2-4 -Biotope
Le noyer est un arbre peu exigeant mais son enracinement profond lui fait préférer
des sols riches , perméables , sablo-argileux et sans eaux stagnantes ( Nedelec , 1993 ). Du
point de vue des besoins en lumière , le noyer est considéré comme essence de lumière.
A une certaine tolérance à l’ombrage dans le jeune âge répond une forte exigence en
lumière à l’âge adulte ( Ben baaziz Ben maad , 2011 ) .
2-5-Composition chimique
Les feuilles aromatiques renferment du tanin , une huile volatile , une substance
amère : le juglon. La noix contient 40- 50 % d’huile grasse et la coque verte « le brou »
est riche en vitamine C ( Schauenberg et Ferdinan , 2005 ).
Les noix
Les noix vertes cueilles vers la mi-juin, permettent de préparer une liqueur qui est
souveraine pour nettoyer l’estomac, le foie, purifier le sang et qui «écarte les dérangements d’
estomac et la paresse intestinales .de plus c’est un excellent fluidifiant du sang (Vanier , 1999 ).
Cette plante a également sa place dans la pharmacopée sa peau vertes possèdent des
propriétés antiseptique, digestives, et anti-inflammatoire. Elles sont également censées faire
baisser la pression artérielle et la glycémie. En usage externe on utilise le Noyer pour soigner les
pertes blanches, les angines, les plaies atones, les abcès froids, les scrofules, les eczémas
suintants la blennorragie et le charbon (Schauenberg et Ferdinan , 2005).les affections
invétérés de la peau , etc. (Nedelec ,1993).
Les feuilles
Les feuilles du noyer étaient astringentes et aromatiques , tandis que l’écorce était
réputée pour être astringente amère. Légèrement laxatifs , ses fruits verts confits étaient
employés pour combattre la constipation ( Nedelec ,1993 ) .
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Chapitre I : Synthèse bibliographique
Les principaux emplois internes de l’espèce ont porté sur la scrofule , maladie
d’origine tuberculeuse qui s’accompagnait de fistules. On l’a employé pour soigner toutes
sortes d’affections cutanées eczéma, impétigo, plaies atones de même que la transpiration
excessive des mains et des pieds (Vanier , 1999).
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Chapitre I : Synthèse bibliographique
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Chapitre I : Synthèse bibliographique
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Chapitre I : Synthèse bibliographique
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Chapitre I : Synthèse bibliographique
traitement d’attaque (deux à trois shampooings traitants par semaine) et de poursuivre par un
traitement d’entretien (un shampoing par semaine).
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Chapitre I : Synthèse bibliographique
4-2-Définitions
4-2-1 produits cosmétiques :
En droit français, les produits cosmétiques sont définis par l’article L.5131-1 du Code de la
Santé Publique :
« On entend par produit cosmétique toute substance ou préparation destinés à être mise en
contact avec les diverses parties superficielles du corps humain, notamment l’épiderme, les
systèmes pileux et capillaire, les ongles, les lèvres et les organes génitaux externes ou avec les
dents et les muqueuses buccales en vue, exclusivement ou principalement, de les nettoyer, de les
parfumer, d’en modifier l’aspect, de les protéger, de les maintenir en bon état ou de corriger les
odeurs corporelles» ( Martini, 2011).
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Chapitre I : Synthèse bibliographique
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Chapitre I : Synthèse bibliographique
vitamines, des filtres solaires, des antiseptiques, des sels d’Aluminium, des anti-inflammatoires,
des anti-séborrhéiques et des anti-cellulitiques. Les formulations sont généralement bâties autour
du principe actif en fonction de ses caractéristiques physicochimiques.
- Excipients : le terme excipient, veut dire « porter hors » ou « transporter », ce sont des
substances qui véhiculent les principes actifs dans l’épiderme, ils vont moduler la pénétration de
l’actif à travers la peau et peuvent avoir une activité par eux-mêmes.
- Adjuvants : constituent la majeure partie du produit final, assurant une certaine stabilité aux
formulations. Ils améliorent le rôle de l’excipient en modifiant l’aspect, la consistance, le toucher
et la viscosité du produit cosmétique. Ils sont généralement des gélifiants ou épaississants, des
humectant ou émollients.
- Additifs : présents en petite quantité, ils améliorent la présentation et la conservation du
produit, ce sont :
-Des agents conservateurs, qui évitent la contamination bactérienne et des antioxydants qui
protègent les produits de l’oxydation.
- Des parfums, destinés à rendre agréable l’utilisation du produit de beauté ou à masquer
l’odeur de certains ingrédients
-Des colorants.
- Tensioactifs : des molécules amphiphiles (à la fois hydrophiles et lipophiles), ce qui leur
confère la propriété de s’orienter aux interfaces et, par conséquence de faire chuter la tension
inter faciales. Ils sont en outre capables de former des micelles en solution aqueuse au-dessus
d’une certaine concentration. Ils peuvent être mouillants, moussants, détergents, dispersants,
solubilisant, émulsionnants mais ces propriétés n’apparaissent pas toutes au même degré pour
toutes les molécules.
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Chapitre I : Synthèse bibliographique
- avoir une bonne acceptabilité cosmétique, tant du point de vue de sa texture que de sa facilité
d’emploi.
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Chapitre II
Matériels et méthodes
Chapitre II : Matériels et méthodes
1-1-Objectifs du travail
Notre étude porte sur l’extraction et la mise en évidence de l’effet antipelliculaire
d’extraits polyphénoliques et aqueux des feuilles et des fruits de genévrier J.Phoenicea et des
feuilles et d’écorce de pacanier « Carya illinoinensis » par l’étude in vitro antifongique sur
Malassezia furfur et in vivo sur des volontaires.
Ce travail a été réalisé au niveau du laboratoire de recherche de biotechnologie des
plantes médicinales et aromatiques département d’agronomie ( université Saad Dahleb de
Blida ) et au niveau du laboratoire de microbiologie de venus de la wilaya de Blida.
2-Matériel
2-1-Matériel végétal
Les feuilles et les fruits de J.Phoenicea sont récolte dans la région de Meselmoun située
dans la wilaya de Tipaza , tandis que, les feuilles et l’écorce de C. illinoinensis sont
récolté dans la région de Oued el Alleug ( wilaya de Blida), durant la même période du
mois de décembre 2019.
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Chapitre II : Matériels et méthodes
Des colorants
Moule en silicone.
Papier filme.
Spatule en bois.
Moulinex.
Bol en inox ou en verre.
Récipient
3-Méthodes
3-1- Détermination du teneur en eau
Le contenu en humidité de la plante a été déterminé par le procédé de séchage à l’étuve.
Une quantité de feuilles fraîches d’une masse de 5g± 0.01 a été exposée à une température de
105°C± 5 dans une étuve jusqu’à l’obtention d’un poids constant (Twidwell et al., 2002 ;
Bourkhiss et al., 2009).
Le taux d’humidité est calculé par la formule suivante :
( α β)
H%= × 100
α
Considérons :
α : Poids de l’échantillon (plante fraîche) en gramme ;
β : Poids de l’échantillon (plante sèche) en gramme;
H% : Taux d’humidité exprimé en pourcentage.
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Chapitre II : Matériels et méthodes
minutes puis filtrer sur papier filtre. Rincer le résidu avec un peu d’eau distillée chaude, de
manière à obtenir 100 ml de l’infusé.
Les Tanins
Introduire dans un tube à essai 5 ml de l’infusé, ajouter goutte à goutte environ 1 ml de
solution aqueuse diluée de FeCl3 à 1 %. En présence de tanins il se développe une coloration
verdâtre (tanins catéchiques) ou bleu noirâtre (tanins gallique).
Les Flavonoïdes
A 5ml de l’infusé ajouter 5ml de HCL et quelques petits fragments de tournure de MG,
puis 1ml d’éthanol. L’apparition d’une coloration rouge orangé indique la présence des
flavonoïdes.
Les glucosides
Mettre 2gouttes d’Acide sulfurique concentré sur une masse de poudre végétale. En
présence de l’acide sulfurique la masse se colore en rouge brique, puis en violet.
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Chapitre II : Matériels et méthodes
les filtrats sont évaporés à sec à l’aide d’un évaporateur rotatif à 45 °C . Les
résidus obtenus sont repris dans 20 ml de méthanol et conservés à 4 °C jusqu’à
utilisation.
Le même protocole a été suivi pour l’extraction des polyphénols de «Juniperus
phoenicea L» .
Cette extraction a permis d’obtenir quatre extraits polyphénoliques :
Extrait n°1 : l’extrait des feuilles de pacanier « Carya illinoinensis ».
Extrait n°2 : l’extrait l’écorce de pacanier « Carya illinoinensis ».
Extrait n°3 : l’extrait des feuilles de genévrier cade« Juniperus phoenicea L»
Extrait n°4 : l’extrait des fruits de «Juniperus phoenicea L».
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Chapitre II : Matériels et méthodes
R = Pc – Pv / Q x 100
R : Rendement en %
Pc : Poids du ballon avec le contenu ( en g )
Pv : Poids du ballon vide ( en g )
Q : Poids de la matière végétale de départ ( en g )
Ces tests ont été réalisés au laboratoire de microbiologie des laboratoires venus.
1. Matériel utilisé : disques de cellulose stériles, bain-marie, boites de pétri, pince stérile,
micropipettes, pipettes.
2. Réactifs : gélose Sabouraud.
3. Préparation des milieux de culture : de la gélose Sabouraud, déjà liquéfiée dans un bain
marie à95 +-3°C, est versée aseptiquement dans des boites de pétri à raison de 15ml par boite.
Les milieux sont refroidis et solidifiés sur une paillasse. puis, on prépare un inoculum estimé à
10^6 unités formant colonie par millilitre (UFC/ml) à partir de la souche testés. Cet inoculum
est ensemencé par inondation sur des boites de pétri contenant la gélose sabouraud.
4. Dépôt des disques : l’aide d’une pince stérile, un disque de cellulose, de 6mm de diamètre
pour être ensuite imbibé avec les polyphénols à tester et enfin déposé sur la surface de la gélose.
Le tout est laissé diffuser sur la paillasse pendant 30minutes, puis est laissé en incubation à 25°C
pendant 72h.
5. Lecture : l’activité antifongique des polyphénols est évaluée en fonction du diamètre des zones
claires autour des disques (zone d’inhibition) (Richard et al. 1995)
22
Chapitre II : Matériels et méthodes
23
Chapitre II : Matériels et méthodes
Tableau 1 : Les produits utilisés pour la fabrication d’une lotion et leur rôle :
Mode opératoire :
3- Mélange
Lorsque les deux solutions sont à la même température, nous versons doucement la
solution (l’eau + la soude) dans le bol qui contient l’huile de maïs et nous mixons à l’aide d’un
Mixeur d’une manière discontinue jusqu’à l’obtention d’une pate (stade purée de pomme de
terre). On ajoute une quantité de poudre de feuilles ou de fruits ou d’écorce de plante à étudier
est nous mélangeons jusqu’à homogénéisation.
4- Moulage
À l’aide d’une spatule en bois nous remplissons le moule, le couvrir par un papier film et
le laisser solidifier pendant 24h à l’abri de la lumière.
5- Démoulage
Après 24h, le savon est démoulé et laissé sécher pendant 1mois pour assurer que le pH du
savon devient neutre et sera près à l’utilisation après test.
Les différentes étapes de préparation du Savon sont montrées dans les figures :
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Chapitre II : Matériels et méthodes
3-6 Enquête
Dans le but de tester la présence ou non d’effets antipelliculaire de lotion et savon élaborés ,
nous avons choisis une population composée de 40 femmes dont la tranche d’âge varie entre 20
et 65 ans. L’application des lotions et des savons a duré dix jours, après lesquels, nous avons
interrogé ces personnes selon le questionnaire établi. Ce dernier est composé de 04 questions
fermées :
2. Pensez-vous que les produits cosmétiques naturels sont plus efficace que les synthétiques ?
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Chapitre II : Matériels et méthodes
L’apparition de pellicules
La diminution des démangésants
Souplesse et peignabilite
Douceurs des cheveux
Aucun
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Chapitre III
Les feuilles de Juniperus phoenicea ont présenté une teneur en eau de 43% et les fruits de
37 %, la teneur en matière sèche a été de 57% et 63%. Les feuilles renferment plus d’eau que le
fruit.
L’écorce de C. illinoinensis ont présenté un taux d’humidité nettement supérieur que celui
des autres parties organiques des deux plantes. Suivi des feuilles de J.Phoenicea et le fruit
28
Chapitre III : Résultat est discutions
(49%). La matière sèche des feuilles de C. illinoinensis est plus élevée que celles des autres
parties organiques des deux plantes (68%).
2- Screening phytochimique
Les tests phytochimiques consistent à détecter les différentes familles de composés
chimiques existant dans les parties aériennes traitées des deux espèces sélectionnées, par des
réactions qualitatives de caractérisation. Ceci a permis de mettre en évidence la présence de
différents groupes chimiques. Les résultats obtenus sont résumés dans le tableau n°1 :
C. illinoinensis J. phoenicea
Composes phytochimiques recherché
Feuilles Ecorces Feuille Fruits
Tanins +++ +++ +++ +++
Flavonoïdes +++ +++ +++ +++
Glucosides _ _ +++ +++
Anthocyanes. _ _ _ _
(+) : Présents ; (++) : abondants ; (+++) : très abondants ; (-) : absent
29
Chapitre III : Résultat est discutions
espèce .Cependant les travaux de (qureshi et al., 2014 ; Hao et al., 2015) soulignent la présence
des coumarines a des fortes teneures dans les échantillons de feuilles de la même espèce .
Concernant J.Phoenicea, nos résultats sont en accord avec ceux obtenus par les travaux
d’Alzand et al. (2014), Latif et al. (2014) et Fadel et al. (2016). En effet, ces derniers ont signalé
la présence des tanins, des flavonoïdes dans les extraits de J. phoenicea tandis que, Makhloufi et
al. (2014) et Amalich et al. (2016) ont rapporté respectivement, l’absence des tanins. Une autre
étude faite par El-Sawi et al. (2014) confirme la présence des flavonoïdes.
3- Rendement en polyphénols
Rendement%
Feuille de pacanier Ecorce de pacanier
Feuille de juniperus .P Fruits de juniperus .P
0.00858
0,00596
0,0056
0,0038
Feuille de
Ecorce de
pacanier Feuille de
pacanier Fruits de
juniperus .P
juniperus .P
La figure ci-dessous présente les déferrent taux de rendement des polyphénols extraite a
partir de quatre organes laquelle : Les feuilles de Carya illinoinensis et les feuilles et les fruits de
Juniperus phoenicea L.
Nous trouvons que les feuilles de pacanier « Carya illinoinensis » contiennent une grande
quantité des polyphénols au taux de 0.00858%. Alors que la quantité est proche de celle de
l’écorce de pacanier (0,00596%) et les feuilles de la plante J.phoenicea (0,0056%), Tandis que
les fruits de la plante J.Phoenicea contiennent la quantité la plus faible en polyphénols.
Ces rendements sont en relation directe avec les méthodes utilisés comme le signalent
beaucoup d'auteurs qui ont étudié l'influence des différentes conditions d’extraction sur les
rendements en composés phénoliques de source végétale (Bonnaillie et al, 2012 ; Jokić et al,
30
Chapitre III : Résultat est discutions
2010). Garcia-Salas et al. (2010), indiquent que la solubilité des composés phénoliques dépend
de leur nature chimique dans la plante, qui varie de composés simples à fortement polymérisés.
Les matières végétales peuvent contenir des quantités variables d'acides phénoliques,
phénylpropanoïdes, anthocyanines, et tanins. Cette diversité structurale est responsable de la
grande variabilité des propriétés physico-chimiques influençant l'extraction des polyphénols
(Koffi et al, 2010). Les mêmes auteurs, notent que la solubilité des composés phénoliques est
affectée par la polarité du solvant utilisé. En effet, Mahboub et al. (2010), ont montré que les
teneurs en polyphénols totaux varient en fonction du solvant utilisé et en fonction du rapport
solvant/eau ainsi que le temps d’extraction. Les teneurs les plus élevées en polyphénols totaux
sont obtenues quand le rapport solvant/eau est de 80/20 (v/v) et quand le temps est prolongé.
4-Aspect macroscopique
Tableau 3 : Aspect physique des extraits phénolique de C.illinoinensis et J. phoenicea
Carya illinoinensis Juniperus phoenicea
Aspect Feuille Ecorce Feuilles Fruits
macroscopique
Odeur forte Cade + forte Cade+++
Couleur Verte marron Vert foncé marron
Aspect Semi fluide Semi fluide Semi fluide Semi fluide
Consistance solvant (poudre + solvant (poudre + solvant (poudre + solvant (poudre +
un liquide un liquide un liquide un liquide
méthanoïque) méthanoïque) méthanoïque) méthanoïque)
(+) faible odeur de cade ;(+++) forte odeur de cade
31
Chapitre III : Résultat est discutions
32
Chapitre III : Résultat est discutions
D’après les résultats obtenus, on remarque que les polyphénol de feuilles « Carya
illinoinensis» ont exercé une meilleur activité inhibitrice vis-à-vis de Malassezla furfur avec la
concentration C1 (Ø =24mm) et C2 (Ø =15mm) et C3 (Ø=12mm). Suivi de la concentration C1
de fruits de «Juniperus phoenicea » (Ø =17mm) et C2 de l’écorce de « Carya illinoinensis» (Ø
=16mm). Ces espèces donc, exercent une forte activité fongicide contre cette souche responsable
de l’apparition des pellicules capillaires. Ceci est dû à leur profil chimique riche en tanin et
flavonoïde.
La C2 provoque une inhibition moyen allant de (13 à 15)mm par rapport par les extraits
d’écorce de Carya , de Feuilles de Carya et de Fruit de Juniperus.
La C3 de feuilles et l’écorce de « Carya illinoinensis» et des feuilles et fruits de
«Juniperus phoenicea » présente une faibles activité antifongique (Ø: de 12mm à 7mm)
Ces polyphénols renferment des agents anti- inflammatoires en grande quantité , qui
pourraient exercer un effet apaisant sur le cuir chevelu.
33
Chapitre III : Résultat est discutions
Nous avons réalisé une enquête pour évaluer l’efficacité des produits formulés Lotion à
base de poudre des feuilles de J. phoenicea et d’écorce de C. illinoinensis ; d’écorce de
C . illinoinensis et de la poudre des feuilles de J. phoenicea et des Savons artisanal à base
de poudre des feuilles de J. phoenicea et d’écorce de C. illinoinensis.
1. L’enquête
34
Chapitre III : Résultat est discutions
15%
NON
OUI
85%
0%
40%
OUI
NON
60%
35
Chapitre III : Résultat est discutions
artisanal?
0%
5%
OUI
NON
95%
Les effets indésirables rencontrés chez les femmes enquêtées sont très rares, seulement 5 %
des femmes ont signalés des réactions cutanées anormales (irritations) après l’application
des savons et des lotions.
4. Quels effets donnent ces lotions et ces savons?
AUCUN
20
SOUPLESSE ET PEIGNABILITE
10
L'APPARITION DE PELLICULES
20
36
Chapitre III : Résultat est discutions
L’effet le plus rencontré chez les utilisatrices de ces produits la diminution démangeant
35% et l’apparition de pellicules avec 20%, alors que 10% estime que ces produits ont un
effet de souplesse et peignabilite . L’effet douceur des cheveux a été mentionné par 15%
des femmes, les 20 % restantes n’ont constaté aucun effet.
D’après les résultats de l’enquête, nous constatons que les femmes ont plus
confiance en produits cosmétiques naturels.
D’autre part ces résultats nous permettent de dire que notre produit naturel n’a pas
donner d’effet indésirable chez les utilisatrices.
De nombreuses études in vivo démontrent un large éventail des propriétés positives des
extraits phénoliques concernant la prévention des maladies de la peau et l’amélioration de
son état (Zillich, 2015).
37
Conclusion
Conclusion
Conclusion
Selon le travail effectué sur les plante suivantes : Jeniperus phoenicea .L et Carya
illinoinensis, dont le but est d’évaluer :
. La composition phytochimique à travers le screening chimique suivi du calcule du taux
d’humidité
- L’effet antipelliculaires de l’extrait fluides de feuilles de Juniperus phoenicea L. et l’écorce
de Carya illinoinensis sur le cuir chevelu.
Les résultats ont montré la présence des groupements chimique chez Juniperus phoenicea
et Carya illinoinensis suivants :
-Les tanins et les flavonoïdes qui marquent la richesse des feuilles et d’écorce et de fruit
- Les anthocyanes qui marquent une absence parmi les parties aérienne de C. illinoinensis
ainsi que J. phoenicea.
D’après les résultats du taux d’humidité, on constate que l’écorce de Carya illinoinensis
contient une teneur d’eau de 68% plus élevé par apport aux autres organes.
L’extraction des polyphénols réalisés sur les feuilles et les fruits de Jeniperus phoenicea
L., l’écorce et les feuilles de pacanier ont montré que le rendement en poly phénols des feuilles
de pacanier est le plus grande qui est de 0,00858% comparée à d'autres organes.
L’étude de l’activité antifongique des extraits phénolique sur la souche Malassezla furfur
a démontré que les polyphénols de feuilles « Carya illinoinensis» ont exercé une meilleur
activité inhibitrice vis-à-vis de Malassezla furfur avec la concentration C1 (Ø =24mm) et C2 (Ø
=15mm) et C3 (Ø=12mm). Ceci est dû à leur profil chimique riche en tanin et en flavonoïdes.
De ces résultats obtenus on conclut que les extraits de Carya illinoinensis peut être inclus
dans la formulation de remèdes phytothérapeutiques contre la pellicule tels que les lotions et les
savons.
La lotion à base des poudres d’écorce de Carya illinoinensis et de feuilles de Juniperus
phoenicea formulé et appliquées avant le lavage du cuire chevelu ont montré un effet
antipelliculaire intéressant.
En perspectives, vue que l'Algérie est l'un des pays qui se caractérise par un couvert végétal très
diversifié, cela nécessite son étude et connaissance en vue de sa valorisation, notamment dans le
domaine de la cosmétologie. Nous proposons d’accentuer les études suivantes sur l’extrait
éthanoïques des feuilles et fruits J. phoenicea, des feuilles et d’écorce de C.illinoinensis :
- L’activité antifongique, antibactérienne et antivirale
-le dosage du polyphénol.
38
Conclusion
39
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45
Annex I
Annex
Annex I
Tableau : Matériel et produits utilisés
Réactifs,additifs et
verreries Appariels
solution
Eau distillée Flacon en verre de 250ml
methanol stérile Thermomètre
HCL Béchers stérile Bain marine
Fecl3 Ballon de 500ml Agitateur
NaOH Tube à essai stérile Etuve à températures
H2SO4 Spatule en bois réglable (37° et 44°)
MG Entonnoir Balance
Papier filtre Wattman Rota vaporisateur
papier aluminium Bec benzine
boite Pétri
Tableau 3 : Les produits cosmétiques naturels sont plus efficace que les synthétiques