M1 – Chimie

Année Universitaire 2023-2024

Techniques d’Analyse Séparatives
Carbonnier

EXERCICE 13 :
L’analyse par chromatographie d’un mélange contenant 4 composés a conduit au chromatogramme présenté page 2.
Le premier signal (non numéroté) correspond aux solutés non retenus contenus dans le mélange (t m=1,2 min). Le temps
de rétention du soluté 4 est indiqué sur le chromatogramme (t 4=22,9 min).
1-Déterminer le temps de rétention (min) puis le volume de rétention (mL) de chaque soluté.
2-Déterminer le volume mort (mL) de la colonne.
3-Déterminer le facteur de rétention du soluté 4.
4-Déterminer (en utilisant 2 formules différentes) le nombre de plateaux théoriques de la colonne en considérant
le pic du soluté 1, puis en considérant le pic du soluté 4.
5-Déterminer la hauteur équivalente à un plateau théorique (pic 1 et pic 4).
6-Déterminer le facteur de résolution entre les solutés 2 et 3. Conclure sur la qualité de la séparation.
7-Déterminer la vitesse linéaire de la phase mobile.
8-Déterminer la vitesse linéaire du soluté 4. La valeur obtenue vous parait-elle logique ?
On donne : débit D=0,5 mL/min ; longueur de la colonne : L= 25 cm
On rappelle la formule : N=5,54 tR2/t2 avec t largeur du pic à mi-hauteur (unité de temps)

EXERCICE 14 :
1-On injecte un mélange de 2 solutés A et B sur une colonne de chromatographie (colonne 1) de longueur L1=10 cm et
de diamètre dc1=0,5cm. La vitesse linéaire de la phase mobile est égale à 0,15 cm/sec. Les facteurs de rétention des 2
solutés sont respectivement égaux à 0,8 et 1,27. Le nombre de plateaux théoriques de la colonne 1 est égal à 340. On
donne : D=1mL/min
1-a. Déterminez le volume mort de la colonne.
1-b. Déterminez le volume de rétention de chaque soluté. L’exprimer en mL.
1-c. Déterminez la valeur du facteur de résolution R1 entre les deux pics. La séparation est-elle correcte ?
2-On injecte le même mélange sur une autre colonne (colonne 2) de longueur L2=2L1=20 cm. Toutes les autres conditions
chromatographiques sont maintenues constantes.
2-a. Donnez l’expression littérale du volume de rétention V2 d’un soluté sur la colonne 2 en fonction de son
volume de rétention V1 sur la colonne 1, de L2 et de L1. Justifiez votre réponse.
2-b. Donnez l’expression littérale de la largeur du pic à la base ω2 d’un soluté sur la colonne 2 en fonction de sa
largeur de pic à la base ω1 sur la colonne 1, de L2 et de L1. Justifiez votre réponse.
2-c. Donnez l’expression littérale du facteur de résolution R2 entre les 2 pics en fonction de R1, de L2 et de L1.
Faites l’application numérique. Que peut-on conclure sur la qualité de la séparation ?

EXERCICE 15 :
1-On injecte un mélange de 2 solutés A et B sur une colonne de CLHP de longueur
L1=10 cm et de volume mort égal à 1 mL (colonne 1). Les résultats obtenus sont reportés dans le tableau 1:
Tableau 1
Soluté VR (mL) (mL)*
A 8 0,77
B 9,55 0,92
* est la largeur du pic à mi-hauteur
1-a. Déterminer le facteur de rétention de chaque soluté.
1-b. Déterminer le nombre de plateaux théoriques de la colonne 1.
1-c. Déterminer le facteur de résolution entre les 2 pics. Que peut-on conclure quant à la qualité de la séparation ?

2-On injecte le mélange A+B sur une colonne de longueur L2=2L1=20 cm (colonne 2), toutes les autres conditions
chromatographiques étant identiques à celles de la question 1.
2-a. Comparer le volume mort de la colonne 2 à celui de la colonne 1.
2-b. Comparer les volumes de rétention des solutés A et B sur la colonne 2 et sur la colonne 1. Justifier la réponse.
2-c. Déterminer la valeur du facteur de rétention pour le soluté A puis pour le soluté B sur la colonne 2. Comparer
aux valeurs obtenues sur la colonne 1. Que constatez-vous ? Démontrer que ce résultat est général.
2-d. Comparer le nombre de plateaux théoriques de la colonne 2 à celui de la colonne 1.
2-e. Comparer les largeurs des pics à la base ( ) que l’on obtiendra pour les solutés A et B sur la colonne 2, aux
valeurs de mesurées sur la colonne 1. Calculer les valeurs numériques
2-f. La séparation du mélange A+B sera-t-elle possible sur la colonne 2 ?
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EXERCICE 16:
On se propose de séparer du décan-1,4-ol et du décane par chromatographie à polarité de phase inversée (colonne
remplie de silice octadécyle; L=15 cm; dc=0,5 cm; volume mort Vm=1,4 ml).
Les phases mobiles utilisées sont constituées de mélanges eau-acétonitrile. L'évolution des facteurs de rétention k'1 et
k'2 en fonction du pourcentage d'eau de la phase mobile est reportée dans le tableau ci-dessous (l’indice 1 correspond
au premier pic, l’indice 2 au pic 2).

% eau 10 20 30 40
k'1 1,35 2 2,75 3,8
k'2 1,86 3,86 7,94 17,4

1- Quel est le soluté élué en première position, le décan-1,4-ol ou le décane? Pourquoi?

2-Tracez pour chaque soluté les courbes logk' = f(%eau).
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3- a) Expliquez la position relative des deux courbes.

b) Dans le cas du décane, justifiez la valeur positive de la pente.
c) Le décan-1,4-ol possède deux fonctions alcool. D'après les résultats chromatographiques obtenus, le décan-
1,4-ol a-t-il un caractère polaire ou apolaire?
d) Pourquoi les pentes ont-elles des valeurs différentes?
4- Sachant que le nombre de plateaux théoriques de la colonne est égal à 400 (supposé identique pour les deux solutés),
quelle phase mobile devra-t-on utiliser pour obtenir une séparation correcte (facteur de résolution supérieur ou égal à
1,5)?

EXERCICE 17:
On cherche à séparer du méthylcyclohexane (A) et du cyclohexanol (B) par chromatographie à polarité de phase
inversée (CPI). Les conditions de l’analyse chromatographique sont les suivantes : colonne de silice modifiée C18 ; L=15
cm ; dp=10 µm ; D=1,5 mL/min ; Vm=1,4 mL.
1-La CPI vous paraît-elle adaptée à la séparation de ce mélange ? Pourquoi ?
2-La première phase mobile testée est un mélange d’acétonitrile et d’eau 90-10 (v/v). On injecte chaque soluté
séparément. L’un d’eux sort à 3,8 mL, l’autre à 4,2mL.
a/Quel est le soluté le plus retenu ? Pourquoi ?
b/Sachant que le nombre de plateaux théoriques annoncé par le fournisseur (et supposé égal pour les deux
solutés) est de 900 plateaux par mètre, la séparation vous paraît-elle possible dans ces conditions ?
3-Afin d’améliorer la résolution, on teste une phase mobile contenant 70% d’acétonitrile et 30% d’eau. Les volumes
d’élution sont alors égaux à 6,1 et 7,8 mL.
a/Expliquer l’augmentation de rétention constatée.
b/Comparer l’augmentation de rétention observée pour le soluté A à celle observée pour le soluté B. Expliquer
la différence observée.
c/ Calculer la nouvelle valeur du facteur de résolution (on suppose que la valeur de N est identique à celle de
la question 2b).
d/ Déterminer la durée approximative de l’analyse.
4-Proposer une autre méthode qui aurait permis d’améliorer la qualité de la séparation.

EXERCICE 18 :

On cherche à analyser un mélange contenant des ions Ca2+, Na+ et K+ sur une colonne de chromatographie d’échange
d’ions (L=25 cm). On rappelle les numéros atomiques de ces éléments : Ca : Z=20 ; Na : Z=11 ; K : Z=19.
La phase mobile est à base d’acide nitrique (H+NO3-) dilué.
1- Préciser le type de support chromatographique qu’il convient d’utiliser : un support portant des groupements
sulfonate (- SO3-) ou un support portant des groupements ammonium quaternaire (-NR3+) ? Justifier ce choix
2- Dans le cas des ions Na+, écrire l’équilibre d’échange d’ions entre le soluté (Na +), la phase stationnaire et la phase
mobile.
3- Dans quel ordre les ions Ca2+, Na+ et K+ seront ils élués ? Justifier la réponse.
4- Lorsque la concentration de l’acide nitrique contenu dans la phase mobile est égale à 10-3M, les pics sont très bien
séparés (R>>1,5) mais la durée de l’analyse est élevée (>30 minutes). Pour réduire le volume de rétention des
solutés (et donc la durée de l’analyse), faut-il augmenter ou diminuer la concentration de l’acide nitrique
contenu dans la phase mobile ? Justifier clairement la réponse. (On pourra, par exemple, raisonner sur le cas des
ions Na+).