Location via proxy:   [ UP ]  
[Report a bug]   [Manage cookies]                
Scribd Logo
Unggah

Selamat datang di Scribd!

  • 34 tayangan

    Presentasi PKL

    Diunggah oleh

    Khadijah
    Studi ini menguji perbedaan kualitas dan kuantitas DNA darah sapi yang disimpan pada berbagai waktu dan suhu. Hasilnya menunjukkan bahwa penyimpanan sampel darah selama 6 hari pada suhu 4°C atau 25°C masih ideal untuk analisis DNA karena memiliki kualitas dan kuantitas yang baik. Semakin lama penyimpanan, konsentrasi DNA akan menurun. Waktu penyimpanan tidak mempengaruhi kualitas DNA.

    Hak Cipta:

    © All Rights Reserved
    Unduh sebagai PPTX, PDF, TXT atau baca online dari Scribd

    Presentasi PKL

    Diunggah oleh

    Khadijah
    34 tayangan19 halaman
    Studi ini menguji perbedaan kualitas dan kuantitas DNA darah sapi yang disimpan pada berbagai waktu dan suhu. Hasilnya menunjukkan bahwa penyimpanan sampel darah selama 6 hari pada suhu 4°C atau 25°C masih ideal untuk analisis DNA karena memiliki kualitas dan kuantitas yang baik. Semakin lama penyimpanan, konsentrasi DNA akan menurun. Waktu penyimpanan tidak mempengaruhi kualitas DNA.

    Judul Asli

    PRESENTASI PKL.pptx

    Hak Cipta

    © © All Rights Reserved

    Format Tersedia

    PPTX, PDF, TXT atau baca online dari Scribd

    Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

    Apakah konten ini tidak pantas?

    Studi ini menguji perbedaan kualitas dan kuantitas DNA darah sapi yang disimpan pada berbagai waktu dan suhu. Hasilnya menunjukkan bahwa penyimpanan sampel darah selama 6 hari pada suhu 4°C atau 25°C masih ideal untuk analisis DNA karena memiliki kualitas dan kuantitas yang baik. Semakin lama penyimpanan, konsentrasi DNA akan menurun. Waktu penyimpanan tidak mempengaruhi kualitas DNA.

    Hak Cipta:

    © All Rights Reserved
    Unduh sebagai PPTX, PDF, TXT atau baca online dari Scribd
    Unduh sebagai pptx, pdf, atau txt
    34 tayangan19 halaman

    Presentasi PKL

    Diunggah oleh

    Khadijah
    Studi ini menguji perbedaan kualitas dan kuantitas DNA darah sapi yang disimpan pada berbagai waktu dan suhu. Hasilnya menunjukkan bahwa penyimpanan sampel darah selama 6 hari pada suhu 4°C atau 25°C masih ideal untuk analisis DNA karena memiliki kualitas dan kuantitas yang baik. Semakin lama penyimpanan, konsentrasi DNA akan menurun. Waktu penyimpanan tidak mempengaruhi kualitas DNA.

    Hak Cipta:

    © All Rights Reserved
    Unduh sebagai PPTX, PDF, TXT atau baca online dari Scribd
    Unduh sebagai pptx, pdf, atau txt
    Anda di halaman 1dari 19

    PERBEDAAN KUALITAS DAN

    KUANTITAS DNA DARAH SAPI YANG


    DISIMPAN PADA WAKTU DAN SUHU
    YANG BERVARIASI

    PRAKTEK KERJA LAPANGAN


    Salsabilla Audy
    3425162851
    Pembimbing I: Dr. Yulia Irnidayanti, M.Si
    Pembimbing II: Saiful Anwar M.Si
    PENDAHULUAN
    LATAR BELAKANG

    DNA Darah Waktu dan suhu Kualitas dan


    penyimpanan Kuantitas DNA
    sampel darah
    RUMUSAN MASALAH

    “Bagaimana perbedaan kualitas dan kuantitas


    DNA darah sapi yang disimpan pada waktu dan
    temperatur yang bervariasi?”
    TUJUAN PENELITIAN
    1. Menguji perbedaan kualitas DNA dengan teknik
    elektroforesis berdasarkan waktu dan suhu penyimpanan
    sampel darah.
    2. Menguji perbedaan kuantitas DNA dengan teknik
    nanophotometer berdasarkan waktu dan suhu
    penyimpanan sampel darah.
    MANFAAT PENELITIAN
    1. Mendapatkan informasi tentang kualitas dan kuantitas
    DNA berdasarkan waktu dan suhu penyimpanan yang
    berbeda.
    2. Melatih keterampilan di penelitian bidang bioteknologi
    molekuler selama Praktek Kerja Lapangan.
    TINJAUAN PUSTAKA

    DARAH KUALITAS SAMPEL KUALITAS DAN


     Target pemeriksaan DARAH KUANTITAS DNA
    umum untuk studi  Golden rule: sampel di  Kemurnian DNA
    fisik dan studi ekstraksi langsung  Konsentrasi DNA
    biomedis. setelah diperoleh.  Nanophotometer
    (Huang, 2017)  PCR
     Kualitas sampel  Uji elektroforesis
    rendah  hasil tidak
    konsisten.
    METODE PENELITIAN

    • Tempat dan waktu penelitian


    Waktu : Selasa, 27 Agustus 2019 – Rabu, 4
    September 2019
    Tempat: Laboratorium Reproduksi, Pemuliaan,
    dan Kultur Sel Hewan LIPI

    • Metode : Deskriptif
    ALAT DAN BAHAN
    • Tabung vaccutainer • Primer F & R • Elution Buffer
    • Jarum flashback • Master mix • Vortex
    • Waterbath
    • Holder • DW • Microsentrifuge
    • Alcohol swap
    • Sampel yang telah diekstraksi • Tube 1,5 ml
    • Ice box
    • Gene Aid Kit
    • Mesin PCR
    • Ice gel • PCR tube
    • Glove
    • Disposable syringe • Alat nanofotometer
    • Foam • Micropipet dan tips
    • Alkohol 70%
    • Mikropipet & Tips
    • Micropipet dan tips
    PROSEDUR PENELITIAN

    PENGAMBILAN DARAH SAPI

    EKSTRAKSI DNA

    NANOPHOTOMETER

    PCR

    ELEKTROFORESIS
    PROSEDUR PENELITIAN
    PENGAMBILAN SAMPEL DARAH

    Darah sapi simmental


    diambil sebanyak ± 3 ml dari
    vena jugularis dan vena
    ekor.

    Sampel darah disimpan di


    tabung vaccutainer berisi
    K3EDTA.
    PROSEDUR PENELITIAN
    DISTRIBUSI SAMPEL DARAH
    Darah dikelompokkan sebagai berikut:
    Suhu Penyimpanan Waktu Kode
    Penyimpanan Sampel
    Cold Temperature 1 hari 1 CT
    (4°C) 3 hari 3 CT
    6 hari 6 CT
    Room Temperature 1 hari 1 RT
    (±25°C) 3 hari 3 RT
    6 hari 6 RT

    CT = Cold Temperature
    RT = Room Temperature

    1 CT 1 RT 3 CT 3 RT 6 CT 6 RT
    PROSEDUR PENELITIAN
    EKSTRAKSI DNA
    Ekstraksi DNA darah dilakukan
    sesuai dengan protokol kit
    GeneAid yang terdiri atas 4
    tahap:
    Cell lysis

    DNA binding

    DNA washing

    DNA elution
    PROSEDUR PENELITIAN
    NANOPHOTOMETER

    Dinyalakan alat
    nanophotometer

    Diatur nanophotometer
    dengan lid faktor 10

    Kuvet dielusi menggunakan


    elution buffer

    Dimasukkan sampel DNA


    sebanyak 3 µl kedalam kuvet
    PROSEDUR PENELITIAN
    PCR (POLYMERASE CHAIN REACTION)
    Gen: FASN ex 34
    Kode Program: F34F
    Master mix : 3,5
    Primer F :1 Tahap Suhu Waktu Siklus
    (C)
    R :1 Pra 94 5’ 1x
    DW : 2,5 Denaturasi
    Denaturasi 94 25’’ 35 x
    DNA :2 Annealing 58 25’’ 35 x
    Total : 10 Ekstensi 72 25’’ 35 x
    Awal
    Ekstensi 72 5’
    Akhir
    Hold 20 ∞
    PROSEDUR PENELITIAN
    ELEKTROFORESIS

    Dibuat gel Dimasukkan Elektroforesi Visualisasi


    agarose 1% sampel DNA 3 s selama 27 dengan Gel
    µl + loading menit ; 70 V Documentation
    dye 1µl Box
    HASIL DAN PEMBAHASAN
    NANOPHOTOMETER
    Sampel Konsentrasi A260/A280
    (ng/𝝁𝒍)
    1 CT 5,250 1,830
    1 RT 5,550 1,870
    3 CT 4,500 1,700
    3 RT 4,500 1,655
    6 CT < 4,500 Too low
    6 RT < 4,500 Too low

    Keterangan Indikator DNA murni


    CT = Cold Temperature (4°C) A260/A280 = 1,8 – 2,0
    RT = Room Temperature (25°C)0
    HASIL DAN PEMBAHASAN
    VISUALISASI DNA

    M 1 CT 1 RT 3 CT 3 RT 6 CT 6 RT

    5oo bp

    Keterangan
    M = Marker (DNA ladder 100 bp)
    CT = Cold Temperature
    RT = Room Temperature
    KESIMPULAN

    1. Tidak terdapat perbedaan nyata antara kualitas dan


    kuantitas DNA pada sampel darah yang disimpan selama
    6 hari pada variasi waktu dan suhu penyimpanan
    berbeda.
    2. Penyimpanan sampel darah selama 6 hari masih ideal
    untuk analisis DNA di kedua suhu penyimpanan karena
    mempunyai kualitas dan kuantitas yang baik.
    3. Semakin lama waktu penyimpanan, konsentrasi DNA
    menurun.
    4. Waktu penyimpanan sampel darah tidak mempengaruhi
    kualitas DNA.
    SARAN

    Ekstraksi sampel darah dilakukan dengan teknik manual


    sehingga mendapatkan konsentrasi DNA yang jauh lebih
    tinggi dibandingkan menggunakan kit.
    TERIMAKASIH

    Anda mungkin juga menyukai