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    Eritrograma

    Enviado por

    Ronin Santos
    1) O documento descreve os procedimentos para realizar um hemograma completo, incluindo hematócrito, hemoglobina, contagem de eritrócitos e cálculo de índices hematimétricos. 2) Para o hematócrito, o sangue é centrifugado em tubo capilar e medido o volume de eritrócitos. A hemoglobina é dosada por espectrofotometria. 3) A contagem de eritrócitos é feita após diluição do sangue em câmara de Neubauer, contando as cé

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    Eritrograma

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    Ronin Santos
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    1) O documento descreve os procedimentos para realizar um hemograma completo, incluindo hematócrito, hemoglobina, contagem de eritrócitos e cálculo de índices hematimétricos. 2) Para o hematócrito, o sangue é centrifugado em tubo capilar e medido o volume de eritrócitos. A hemoglobina é dosada por espectrofotometria. 3) A contagem de eritrócitos é feita após diluição do sangue em câmara de Neubauer, contando as cé

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    1) O documento descreve os procedimentos para realizar um hemograma completo, incluindo hematócrito, hemoglobina, contagem de eritrócitos e cálculo de índices hematimétricos. 2) Para o hematócrito, o sangue é centrifugado em tubo capilar e medido o volume de eritrócitos. A hemoglobina é dosada por espectrofotometria. 3) A contagem de eritrócitos é feita após diluição do sangue em câmara de Neubauer, contando as cé

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    Eritrograma

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    Ronin Santos
    1) O documento descreve os procedimentos para realizar um hemograma completo, incluindo hematócrito, hemoglobina, contagem de eritrócitos e cálculo de índices hematimétricos. 2) Para o hematócrito, o sangue é centrifugado em tubo capilar e medido o volume de eritrócitos. A hemoglobina é dosada por espectrofotometria. 3) A contagem de eritrócitos é feita após diluição do sangue em câmara de Neubauer, contando as cé

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    UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO- FACULDADE DE MEDICINA

    VETERINÁRIA E ZOOTECNIA
    DEPARTAMENTO DE CLÍNICA MÉDICA

    VCM 311 - Patologia Clínica Veterinária


    Roteiro de aula prática
    HEMATOLOGIA CLÍNICA
    HEMOGRAMA
    ERITROGRAMA

    1. Hematócrito (Volume Globular) - %

     Homogeneizar a amostra de sangue


     Preencher aproximadamente 3/4 do tubo capilar com sangue
     Obstruir uma das extremidades (com massa ou fogo)
     Centrifugar no microcentrifugador (13000 g) por 5 minutos (caprinos: 15 minutos).
     Usar tabela para relacionar o volume de eritrócitos com o volume total da amostra
    de sangue contida no tubo capilar = Ht %.

    OBS: Sempre avaliar o aspecto do plasma (ictérico, lipêmico, hemolisado).

    2. Dosagem de Hemoglobina - g/dL

    Em três tubos de ensaio de 10 mL devidamente identificados serão aferidos o “Branco”


    de reagentes, o “Padrão” com concentração conhecida de hemoglobina e a “Amostra” a
    ser analisada:

    Tubos Branco Padrão Amostra


    Reativo de Drabkin ou água 5,0 mL 5,0 mL 5,0 mL
    destilada
    Padrão (ex:10 g/dL)
    KCn - VENENO! --- 20 µL ---

    Sangue --- --- 20 µL

     Homogeneizar e aguardar pelo menos 10 minutos (temperatura ambiente)


     Leitura em espectrofotômetro ou fotocolorímetro ( = 540 nm)

    Resultado: AbsP --- ConcP ConcA = AbsA . ConcP g/dL


    AbsA --- ConcA AbsP

    3. Contagem de Eritrócitos (hemácias)


    3
    A contagem do número total de eritrócitos por mm pode ser feita manualmente
    em hemocitômetro (câmara de Neubauer) ou por contadores automáticos.
    3.1. Diluição da amostra

    Amostra: sangue com EDTA


    Diluidores: Líquido de Gower ou Solução Fisiológica.

    3.1.1. Microdiluição

    Diluição 1:200 em pipeta hematimétrica para glóbulos vermelhos

    Técnica:
    - Homogeneizar o sangue;
    - Aspirar o sangue até a marca 0,5 da pipeta de Thoma para glóbulos
    vermelhos;
    - Limpar o sangue da parte externa da pipeta;
    - Aspirar a solução diluidora até a marca 101;
    - Agitar
    - Desprezar as primeiras gotas e preencher a câmara de Neubauer

    3.1.2. Macrodiluição
    Diluição 1:201 utilizando pipeta automática

    Técnica:
    - Em um tubo, colocar 4 mL de diluidor
    - Homogeneizar o sangue;
    - Pipetar 20 µL de sangue
    - Homogeneizar
    - Preencher a câmara de Neubauer

    4.2. Contagem:

    Aguardar a sedimentação das hemácias e ao colocar a câmara no microscópio,


    não inclinar muito para que as células, por gravidade, não se desloquem para um lado
    só. Focar o retículo de contagem em menor aumento (4x) e passar para as objetivas de
    10x e, depois, 40x.
    Contar as hemácias de cinco quadrados (4 cantos e 1 central) da área central da
    câmara, delimitados pelas linhas triplas (do total de 25 quadrados=1 mm2). São incluídas
    hemácias que estejam sobre dois lados da linha tripla (regra do “L”) e que encostem até
    a segunda linha. Quanto aos outros dois lados, ignorar as hemácias que encostarem na
    primeira linha interna. Multiplicar o resultado pelo respectivo fator de correção, calculado
    a partir do método utilizado (micro ou macrodiluição).

    3
    Nº de hemácias por mm (µL)= nº de hemácias contadas X Fator de Correção

    Fator de Correção
    O fator de correção é calculado com base na :
     diluição (200 ou 201)
     área da câmara onde as células foram contadas
    (fazer o cálculo para completar 1 mm2 – multiplicar por 5)
     altura da câmara (0,1 mm – para corrigir para 1 mm, multiplicar por 10).
    (observar ilustração no fim do roteiro)
    Portanto:
    Microdiluição:
    200 x 5 x 10 x he contadas = he contadas x 10000 = he x 106/mm3

    Macrodiluição:
    6 3
    201 x 5 x 10 x he contadas = he contadas x 10050 = he x 10 /mm

    4. Índices Hematimétricos Absolutos

    VCM (volume corpuscular médio) em fl = Ht x 10


    He

    HCM (hemoglobina corpuscular média) em pg = Hb x 10


    He

    CHCM (concentração hemoglobínica corpuscular média) em % = Hb x 100


    Ht
    5. Esquema da Câmara Hematimétrica de Neubauer Modificada

    1 mm

    1 mm

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