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Pratica 3 - Postulado de Koch 2018

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POSTULADO DE KOCH

2018 2011
Cap. 3 Cap. 3

O material da aula está disponível no STOA e no Canal USP do youtube


POSTULADO DE KOCH (1881)
Sequência de procedimentos utilizada para estabelecer
a relação causal entre um microrganismo e uma doença

ADAPTADO ÀS DOENÇAS DE PLANTAS

O microrganismo deve estar associado com a doença em todas as plantas


sintomáticas e não deve estar presente em plantas sadias
1 – Associação constante patógeno-hospedeiro

O microrganismo deve ser isolado da planta doente e cultivado em cultura pura


2 – Isolamento / cultivo

O microrganismo em cultura pura deve ser inoculado sobre plantas sadias (mesma
espécie ou variedade) e produzir a mesma doença nas plantas inoculadas
3 – Inoculação do organismo em plantas sadias

O microrganismo deve ser isolado em cultura pura novamente e suas


características devem ser as mesmas das observadas em 2
4 – Reisolamento do patógeno
POSTULADO DE KOCH – 1881

1 – Associação constante patógeno-hospedeiro


2 – Isolamento / cultivo

3 – Inoculação do organismo em plantas sadias

O microrganismo em cultura pura deve ser inoculado


sobre plantas sadias (mesma espécie ou variedade
na qual a doença apareceu) e reproduzir os sintomas

Considerar o período de Colocar um patógeno


incubação de cada doença em contato com - ou no
interior de - tecido de
planta hospedeira e
4 – Reisolamento fornecer condições para
seu desenvolvimento
VIAS DE PENETRAÇÃO DE PATÓGENOS

Fungos a - Direta – através da cutícula


- estômatos
b - Aberturas naturais - lenticelas
- hidatódios
c - Ferimentos

Bactérias a - Ferimentos
b - Aberturas naturais

Vírus a - Microferimentos
b - Vetores (insetos, nematoides, etc.)
Exercício 1
Inoculação do fungo Phakopsora euvitis – ferrugem da uva

- Coletar os Filtrado com


esporos
urediniósporos (inóculo)
com pincel
- Suspender em
H2O
- Filtrar com gaze
Patógeno biotrófico, não cultivável Aspergir o inóculo sobre as folhas
(inoculação por aspersão)

Colocar as plantas em
condições adequadas
(câmara úmida) e
esperar pelos sintomas
(período de incubação)
Exercício 2
Inoculação de bactérias Xanthomonas em couve

- Adicionar água esterilizada à cultura


- Raspar a cultura
- Filtrar (gaze)

Filtrado
(inóculo)

Meio de cultura com o


agente causal

Fazer uma incisão no limbo


foliar com tesoura previamente
Colocar em condições imersa na suspensão bacteriana
adequadas (câmara (penetração por ferimentos)
úmida) e esperar pelos
sintomas (período de
incubação)
Exercício 3

Inoculação de vírus (Zucchini yellow mosaic virus - ZYMV) em abobrinha

Folhas de abobrinha Macerar o tecido foliar + tampão


Infectadas com ZYMV

Suspensão com partículas


virais (inóculo)

Polvilhar carborundo
nas folhas das plantas
sadias de abobrinha

Colocar a Molhar algodão na suspensão e


planta em Lavar a folha passar sobre a folhas
condições com água (inoculação por
adequadas microferimentos)
Exercício 4

Inoculação do fungo Penicillium em laranjas

Com ferimento Sem ferimento

3 a 5 furos na região do Deslizar a agulha sobre o


pedúnculo pedúnculo sem ferir o fruto
(2 frutos) (2 frutos)
barbante
Manga plástica
5°C T1 B1
s/f Identificação
Algodão úmido

25°C

Armazenar em câmaras com temperatura controlada por 7 dias


POSTULADO DE KOCH EM FITOPATOLOGIA

Transferência para o meio de


cultura
Desinfestação
superficial

I
Microrganismo presente em plantas sintomáticas
Associação constante patógeno-
hospedeiro

Isolamento do microrganismo
II

Reprodução dos
sintomas
III Inoculação de
planta sadia

IV Reisolamento do
microrganismo

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