Sexagem Espermática

CENTRO UNIVERSITÁRIO CESMAC
Medicina Veterinária
SEXAGEM ESPERMÁTICA
Alice Carolina, Beatriz Torres, Luiz Guilherme, José Peixoto,
Nathalia Monyk e Milton Rocha.

2022/01
SUMÁRIO
Introdução
Histórico
Utilização
Vantagens e Desvantagens
Características Estruturais
Requisitos da Técnica de Sexagem Espermática
Técnica 1: Centrifugação em Gradiente de Densidade
Técnica 2: Citometria de Fluxo
Técnica 3: Imunossexagem
Considerações Finais
Referências
c
2
INTRODUÇÃO
SÊMEN SEXADO
Espermatozoides
Técnicas
Melhoramento
portadores do
descritas para a
genético
cromossomo X ou Y separação
3
HISTÓRICO
ORIGEM DA UTILIZAÇÃO DE ESPERMATOZOIDES SEXADOS
460 A.C. 1920 1950 1980
DEMÓCRITO JOHNSON E MORUZZI ANDREW

WELCH MOLDAVAN
Sugeriu que o
O DNA foi determinado
testículo direito
Primeiras tentativas como um componente
Surgimento da
de isolar as duas importante dos

Citometria de Fluxo,
produzia machos e o
populações de cromossomos, propôs

considerada a melhor
esquerdo fêmeas.
que o DNA poderia ser
técnica de sexagem
espermatozoides.
usado como um fator de
espermática.
diferenciação.
4
VANTAGENS
Interesse zootécnico
Aptidão produtiva
Reduzir a incidência de
problemas em partos, com o uso
de sêmen sexado de fêmea, pois
normalmente nascem mais leves
DESVANTAGENS
Alto custo
Tem uma taxa de concepção
mais baixa (10% a 20% menor)
quando comparada à taxa de
concepção do sêmen
convencional
5
CARACTERÍSTICAS ESTRUTURAIS DO
SÊMEN SEXADO CRIOPRESERVADO
É NECESSÁRIO QUE POSSUA:
MORFOLOGIA, ATIVIDADE METABÓLICA E MEMBRANAS PLASMÁTICAS

NORMAIS, ADEMAIS DE DNA INTACTOS.
6
7
REQUISITOS DA SEXAGEM ESPERMÁTICA
• REQUISITOS PARA UMA TÉCNICA EFICIENTE NA
SEPARAÇÃO ESPERMÁTICA:
- A maioria das células devem ser sexadas e com reduzido descarte de
espermatozoides;
- Tenha acuidade próxima de 100%;
- Seja reproduzível;
- Seja simples e rápida;
- Seja barata o suficiente para se difundir no mercado.
A EVOLUÇÃO DE ALGUMAS TÉCNICAS PERMITIU AVANÇOS
DESSAS CONDIÇÕES, MAS NENHUMA CONSEGUIU REUNIR
TODAS AS CONDIÇÕES.
8
CENTRIFUGAÇÃO EM
GRADIENTE DE DENSIDADE
SEPARAÇÃO COM FORÇA CENTRÍFUGA
Separação dos espermatozoides pela
diferença das suas respectivas
densidades;
Através da força centrífuga;
Quando uma amostra é colocada em
uma centrífuga e a força é aplicada,
elementos de maior densidade se
movem em direção ao fundo do
recipiente, enquanto os de menor
densidade ficam próximos a superfície.
9
CITOMETRIA DE FLUXO
MENSURAÇÃO DO CONTEÚDO DE DNA
Células X e Y possuem conteúdo de DNA

total diferentes;
Média de 3 a 4% entre as espécies;
Utilização do Citômetro de fluxo;
Fluoróforo HOECHST 33342
10
Cristal pizoelétrico vibra e quebra
a corrente em microgotas
A informação é transmitida do
computador até as gotas para
Raio laser emite luz UV sobre
que estas sejam eletricamente
os espermatozoides
carregadas
COMPUTADOR
Aplica-se uma carga negativa, positiva
Os espermatozoides X emitem mais

ou nenhuma às microgotas
fluorescência que os Y
As microgotas são desviadas quando passam
DETECTOR
frente ao campo elétrico gerado por placas
11
IMUNOSSEXAGEM
RECONHECIMENTO POR ANTÍGENOS DO GÊNERO
- MÉTODO IMUNOLÓGICO DE SEXAGEM DE ESPERMATOZOIDES:

1. BAIXO CUSTO NO PROCESSAMENTO,
2.TÉCNICA MENOS INVASIVA AO ESPERMATOZOIDE,
3. NÃO OFERECE LIMITAÇÕES NA PRODUÇÃO ESPERMÁTICA
Ressalta-se que ainda que os estudos sejam iniciais os resultados
já obtidos foram conclusivos.

Essas proteínas afetam energia, metabolismo, estresse,
resistência, composição do citoesqueleto, entre outros fatores nos
espermatozoides.
12
CONSIDERAÇÕES FINAIS
Diante do exposto, evidencia-se que diversos aspectos

relacionados à técnica de sexagem de células espermáticas
viáveis ainda necessitam ser elucidados, como REDUÇÃO DOS
CUSTOS associada ao AUMENTO DA PRODUÇÃO destas células
com alto PODER FECUNDANTE, a variação individual na
fertilidade dos reprodutores doadores de sêmen para a
sexagem e ASPECTOS TÉCNICOS como exposição à
centrifugação, corantes e raios laser, de forma a diminuir esse
avanço na capacitação e reação acrossômica do
espermatozoide sexado.
13
REFERÊNCIAS
ARAUJO, MICHELLE SILVA; VOLPATO, RODRIGO; LOPES, MARIA DENISE. PRODUÇÃO DE
EMBRIÕES BOVINOS IN VITRO COM SÊMEN SEXADO. REVISTA DE EDUCAÇÃO
CONTINUADA EM MEDICINA VETERINÁRIA E ZOOTECNIA DO CRMV-SP, V. 11, N. 3, P. 8-
15, 2013.
BARUSELLI, O.S, GIMENES, L. U., SALES JN, AYRES H, ET AL. SÊMEN SEXADO:
INSEMINAÇÃO ARTIFICIAL E TRANSFERÊNCIA DE EMBRIÕES. REV BRAS REPROD ANIM.
2007;31(3):374-81
DA SILVA, E.C.; GUERRA, M.M. POTENCIAL BIOTECNOLÓGICO DA SEXAGEM
ESPERMÁTICA NA PRODUÇÃO ANIMAL.
GARNER DL, GE SEIDEL JR. 2008. HISTORY OF COMMERCIALIZING SEXED SEMEN FOR
CATTLE. THERIOGENOLOGY 69, 886-895.
JOHNSON LA, WELCH GR. 1999. SEX PRESELECTION: HIGH-SPEED FLOW CYTOMETRY
SORTING OF X AND Y SPERM FOR MAXIMUM EFFICIENCY. THERIOGENOLOGY. 52, 1323-
41.
14
REFERÊNCIAS
KIDDY CA. 1971. SEX RATIO AT BIRTH – PROSPECTS FOR CONTROL. EN: HAFS HD (ED).
AMERICAN SOCIETY OF ANIMAL SCIENCE, SAVOY, IL.
MEDALHA, A.G. SÊMEN SEXADO [TESE DE MESTRADO]. CAMPO GRANDE: UNIVERSIDADE
FEDERAL DE MATO GROSSO DO SUL; 2008. 2.
MORUZZI JF. 1979. SELECTING A MAMMALIAN SPECIES FOR THE DETERMINATION OF X
AND Y CHROMOSOME BEARING SPERM. J REPROD FERTIL 57, 319-323.
VILLADIEGO, F. A. C. ET AL. SÊMEN SEXADO ATRAVÉS DE CITOMETRIA DE FLUXO E
CENTRIFUGAÇÃO POR GRADIENTE DE CONCENTRAÇÃO. REVISTA DE MEDICINA
VETERINARIA, N. 36, P. 121-133, 2018.
OLIVEIRA KM. EFEITO DO PROCESSO DE SEXAGEM DE SÊMEN POR CITOMETRIA DE
FLUXO E CRIOPRESERVAÇÃO SOBRE MORFOMETRIA DA CABEÇA DE ESPERMATOZÓIDES
E ESTABILIDADE DE CROMATINA [TESE DE MESTRADO]. UBERLÂNDIA: UNIVERSIDADE
FEDERAL DE UBERLÂNDIA; 2007.
14
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460 A.C. 1920 1950 1980

DEMÓCRITO JOHNSON E MORUZZI ANDREW

de isolar as duas importante dos

populações de cromossomos, propôs

problemas em partos, com o uso

de sêmen sexado de fêmea, pois

normalmente nascem mais leves

mais baixa (10% a 20% menor)

quando comparada à taxa de

É NECESSÁRIO QUE POSSUA:

MORFOLOGIA, ATIVIDADE METABÓLICA E MEMBRANAS PLASMÁTICAS

A EVOLUÇÃO DE ALGUMAS TÉCNICAS PERMITIU AVANÇOS

DESSAS CONDIÇÕES, MAS NENHUMA CONSEGUIU REUNIR

diferença das suas respectivas

uma centrífuga e a força é aplicada,

elementos de maior densidade se

movem em direção ao fundo do

recipiente, enquanto os de menor

densidade ficam próximos a superfície.

Células X e Y possuem conteúdo de DNA

computador até as gotas para

Raio laser emite luz UV sobre

que estas sejam eletricamente

Aplica-se uma carga negativa, positiva

Os espermatozoides X emitem mais

- MÉTODO IMUNOLÓGICO DE SEXAGEM DE ESPERMATOZOIDES:

Ressalta-se que ainda que os estudos sejam iniciais os resultados

já obtidos foram conclusivos.

resistência, composição do citoesqueleto, entre outros fatores nos

Diante do exposto, evidencia-se que diversos aspectos

EMBRIÕES BOVINOS IN VITRO COM SÊMEN SEXADO. REVISTA DE EDUCAÇÃO

CONTINUADA EM MEDICINA VETERINÁRIA E ZOOTECNIA DO CRMV-SP, V. 11, N. 3, P. 8-

INSEMINAÇÃO ARTIFICIAL E TRANSFERÊNCIA DE EMBRIÕES. REV BRAS REPROD ANIM.

DA SILVA, E.C.; GUERRA, M.M. POTENCIAL BIOTECNOLÓGICO DA SEXAGEM

ESPERMÁTICA NA PRODUÇÃO ANIMAL.

CATTLE. THERIOGENOLOGY 69, 886-895.

SORTING OF X AND Y SPERM FOR MAXIMUM EFFICIENCY. THERIOGENOLOGY. 52, 1323-

AMERICAN SOCIETY OF ANIMAL SCIENCE, SAVOY, IL.

MEDALHA, A.G. SÊMEN SEXADO [TESE DE MESTRADO]. CAMPO GRANDE: UNIVERSIDADE

FEDERAL DE MATO GROSSO DO SUL; 2008. 2.

MORUZZI JF. 1979. SELECTING A MAMMALIAN SPECIES FOR THE DETERMINATION OF X

AND Y CHROMOSOME BEARING SPERM. J REPROD FERTIL 57, 319-323.

VILLADIEGO, F. A. C. ET AL. SÊMEN SEXADO ATRAVÉS DE CITOMETRIA DE FLUXO E

CENTRIFUGAÇÃO POR GRADIENTE DE CONCENTRAÇÃO. REVISTA DE MEDICINA

VETERINARIA, N. 36, P. 121-133, 2018.

OLIVEIRA KM. EFEITO DO PROCESSO DE SEXAGEM DE SÊMEN POR CITOMETRIA DE

FLUXO E CRIOPRESERVAÇÃO SOBRE MORFOMETRIA DA CABEÇA DE ESPERMATOZÓIDES

E ESTABILIDADE DE CROMATINA [TESE DE MESTRADO]. UBERLÂNDIA: UNIVERSIDADE

FEDERAL DE UBERLÂNDIA; 2007.

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