INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAÇÃO, CIÊNCIA E TECNOLOGIA DA PARAÍBA

CAMPUS SOUSA/UNIDADE SÃO GONÇALO

BACHARELADO EM MEDICINA VETERINÁRIA

AVALIAÇÃO UTERINA E CERVICAL DE RECEPTORAS DE EMBRIÃO

EQUINO NO AGRESTE MERIDIONAL DE PERNAMBUCO

ALINE FRANCELINA DE QUEIROS

SOUSA – PB
2016
 ALINE FRANCELINA DE QUEIROS

AVALIAÇÃO UTERINA E CERVICAL DE RECEPTORAS DE EMBRIÃO

EQUINO NO AGRESTE MERIDIONAL DE PERNAMBUCO

Orientador: Prof. MSc. Luis Eduardo Pereira

de Andrade Ferreira

Coorientador: Prof. DSc. Daniel Cézar da

Silva

Trabalho de conclusão de curso apresentado ao

Instituto Federal de Educação, Ciência e
Tecnologia da Paraíba, Campus Sousa, como
parte das exigências para a obtenção do título de
Bacharel em Medicina Veterinária.
.

SOUSA – PB
2016
Q3a Queiros, Aline Francelina.
Avaliação uterina e cervical de receptoras de embrião
equino no agreste meridional de Pernambuco. / Aline
Francelina Queiros - Sousa, 2016.
41f.
Orientador: MSc. Luis Eduardo Pereira de Andrade Ferreira.
Coorientador: DSc. Daniel Cézar Silva.

Monografia (Bacharelado em Medicina Veterinária)

– Instituto Federal da Paraíba – IFPB.

1. Medicina Veterinária. 2. Ultrassonografia

3. Embrião. I. Título.
IFPB / BC CDU – 619
 INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAÇÃO, CIÊNCIA E TECNOLOGIA DA PARAÍBA
CURSO DE BACHARELADO EM MEDICINA VETERINÁRIA
CAMPUS SOUSA

CERTIFICADO DE APROVAÇÃO

Título: AVALIAÇÃO UTERINA E CERVICAL DE RECEPTORAS DE EMBRIÃO

EQUINO NO AGRESTE MERIDIONAL DE PERNAMBUCO

Autor: Aline Francelina de Queiros

Trabalho de conclusão de curso apresentado ao Instituto

Federal de Educação, Ciência e Tecnologia da Paraíba,
Campus Sousa, como parte das exigências para a
obtenção do título de Bacharel em Medicina Veterinária.

Aprovado pela Comissão Examinadora em: / /

Prof. MSc. Luis Eduardo Pereira de Andrade Ferreira

Orientador

________________________________________________
Profa. DSc. Ana Valéria Mello de Souza Marques
Examinadora Interna

________________________________________________
Profa. MSc. Lisanka Ângelo Maia
Examinadora Interna
Aos meus pais Francisco e Lucinei, minha irmã
Alana, e toda a minha família, pelo apoio,
compreensão, carinho e amor.
Amo vocês!

DEDICO.
 AGRADECIMENTOS

Agradeço primeiramente a Deus pelo dom da vida, por ouvir todas as minhas orações
em momentos difíceis e estar sempre ao meu lado me protegendo.
Aos meus pais Francisco Francelino dos Santos e Lucinei Queiros dos Santos (Painho
e Mainha) meus melhores amigos e incentivadores, por tamanha dedicação, exemplo e amor;
pelo sacrifício para que eu concluisse mais uma etapa de minha vida, apoiando todas as
minhas decisões. Que por muitas vezes abriram mão de seus próprios sonhos para que os
meus se tornassem realidade. Verdadeiros exempos de luta, honestidade, perseverança e fé! A
vocês minha eterna gratidão.
Aos amigos que fiz ao longo dos anos... Érica Oliveira e Élida Ramalho por terem
compartilhado comigo não só a casa, mas a amizade, paciência e longas risadas. Aos meus
amigos de graduação: Edla Íris, Jocélio, Ricardo, Segundo, Aldcejam, Morgana, Bismark,
Luis Fernando e Paulo que sempre estiveram presentes na alegria e no aperreio.
Por terem se tornado um grupo de amigos inseparáveis que me proporcionou
momentos de muita ciência, ajuda nos projetos de pesquisa, gargalhadas infinitas, e
principalmente pelas noites de muito forró e “despesas” de tantos almoços não pagos.
Aos meus avós, tios e primos, que em muitos momentos assumiram a forma de pais,
confiando todas as suas fichas em mim, o meu muito obrigado.
Ao meu orientador e amigo Luis Eduardo Andrade, pela orientação, disponibilidade e
contribuição dada para o desenvolvimento do experimento e concretização deste trabalho de
monografia. Pelo carinho, incentivo e apoio em meus primeiros passos na reprodução de
equideos.
Ao professor Daniel Cézar da Silva pela coorientação, disponibilidade e atenção com
que sempre me atendeu. Por ajudar pacientemente com as minhas dúvidas e questionamentos
intermináveis, colaborando da melhor maneira para o desenvolvimento deste trabalho.
Ao meu primo Everton Quirino pelo apoio, incentivos constantes e principalmente
pelo carinho. A minha prima Grasiete Queiroz, pelo companheirismo nos momentos em que a
tarefa parecia grande, pesada demais, quase impossível, pude compartilhar com você minhas
angustias e inquietações. E principalmente, por me mostrar que temos sempre que olhar para
o outro e oferecer não o que esperamos receber, mas sim o que o outro realmente precisa.
 Aos professores da graduação, em especial Francisco Nogueira por me permitir iniciar
na pesquisa científica. E a todos cujos nomes não foram citados, mas que contribuíram de
forma direta ou indiretamente para a realização desse trabalho e conclusão de mais essa etapa.
E finalmente, aos animais, aqueles que foram confiados em nossas mãos, para os
cuidados clínicos e cirúrgicos. A todos estes, o meu muito obrigado.
“Crê em ti mesmo, age e verá os resultados.
Quando te esforças, a vida também se esforça
para te ajudar.”

Francisco Cândido Xavier

AVALIAÇÃO UTERINA E CERVICAL DE RECEPTORAS DE EMBRIÃO EQUINO
NO AGRESTE MERIDIONAL DE PERNAMBUCO

RESUMO – Objetivou-se nessa pesquisa avaliar a implantação embrionária em éguas

receptoras de embriões diante das modificações da tonicidade (T1 = Mais tenso; T2 = Tenso,
porém um pouco menos do que T1; T3 = Mais flácido que T1 e T2, porém ainda diferente do
tônus no estro; T4 = Flácido, característico do estro), edema uterino (ED0 = Útero na fase de
diestro - sem edema; ED1 = Leve edema; ED2 = Moderado; ED3 = Marcante em todo o
útero; ED4 = Máximo, com pequena quantidade de líquido; ED5 = Anormal, ecotextura
padrão descaracterizada) e cérvix (C1 = Fechada; C2 = Intermediário; C3 = Aberta), visando
caracterizar o melhor estágio uterino da receptora para a inovulação. Foram utilizadas 12
éguas Quarto de Milha como doadoras e 98 éguas mestiças como receptoras e destas, 39
foram selecionadas para receber embriões, sendo preparadas três para cada doadora. As
mesmas foram submetidas a exame do trato reprodutivo via palpação retal e ultrassonografia
para determinação das características de tônus, edema uterino e cérvix. Na avaliação das
características de tonicidade uterina, as éguas prenhes apresentaram taxas de 25,64% para T1;
e 23,07% para T2. Dos animais com T1, apenas 54,16% (13) apresentaram as demais
características do sistema genital desejáveis, sendo classificadas como aceitáveis. Para as
éguas vazias com escore T1, houve percentual de 35,89% seguido de T2 com 15,38%. A
classificação de edema com relação às éguas prenhes apresentaram taxas de 28,20; 17,95; e
2,56%, para ED0; ED1; e ED2, respectivamente. Para éguas vazias, observou-se elevação em
ED0, com valor de 35,87%, seguido do ED1, com 15,38%. Com relação às características
cervicais houve percentual de 35,89% para C0 e 12,82% para C1 referente às fêmeas prenhes,
e para éguas vazias constatou-se valor de 51,28% para C0. Houve maior percentual de fêmeas
vazias em relação às prenhas, embora, ambas as classificações encontram-se dentro das
características ideais para a transferência de embriões. Contudo, possíveis variações podem
ser explicadas provavelmente por défice alimentar e mineral.

Palavras-Chave: Implantação embrionária. Transferência de embrião. Ultrassonografia

 EVALUATION AND UTERINE EQUINE EMBRYO RECIPIENTS OF CERVICAL
IN AGRESTE PERNAMBUCO SOUTHERN

ABSTRACT - This research aimed to evaluate the embryo implantation in embryo recipient
mares on the changes of tone (T1 = More tense, T2 = Tense, but slightly less than T1, T3 =
More flaccid T1 and T2, but still different from the tone in estrus, T4 = Baggy, characteristic
of estrus ), uterine edema (ED0 = Uterus in the diestrus phase - no edema; ED1 = Mild
edema; ED2 = Moderate; ED3 = Marked around the uterus, ED4 = Max with a small amount
of liquid , ED5 = abnormal echotexture un characterized standard) and cervix (C1 = Closed;
C2 = Intermediate; C3 = Open), to characterize the best of the receiving stage for uterine
embryo transfer. They used 12 Quarter Horse mares as donors and 98 mares as recipients and
of these, 39 were selected to receive embryos, and prepared three for each donor. They were
submitted to examination of the reproductive tract via rectal palpation and ultrasound to
determine the tone characteristics, uterine edema and cervix. In assessing the characteristics
of uterine tone, the pregnant mares showed 25.64% rates for T1; and 23.07% for T2. Animals
with T1, only 54.16% (13) were the other characteristics of the genital system desirable, being
classified as acceptable. To empty mares with T1 score, there was a percentage of 35.89%
followed by T2 with 15.38%. The edema classification with respect to pregnant mares had
rates of 28.20; 17,95; and 2.56% to ED0; DI1 ; and ED2 respectively. To empty mares, it was
observed increase in ED0, with a value of 35.87%, followed by ED1, with 15.38%. Regarding
cervical characteristics were percentage of 35.89% to 12.82% and C0 to C1 referring to
pregnant females, and empty mares found out value of 51.28 % for C0. There was a higher
percentage of females compared to empty pregnant, although both are within ratings of ideal
characteristics for the transfer of embryos. However, some variations can probably be
explained by food and mineral deficit.

Keywords: Embryo implantation. Embryo transfer. Ultrasonography

 LISTA DE ILUSTRAÇÕES

Página
Figura 1 - Ovários de égua (A); Desenho esquemático da anatomia ovariana (B)........ 14
Figura 2 - Lote de receptoras......................................................................................... 23
Figura 3 - Avaliação ultrassonográfica do ovário e mensuração folicular.................... 23
Figura 4 - Classificação ultrassonográfica de edema uterino em éguas........................ 25
Figura 5 - Lavagem uterina – Infusão ringer com lactato (A); Filtração do lavado 26
(B).
Figura 6 - Manutenção do embrião (esquerda), Placa de petri para lavagem (direita) 27
Figura 7 - Inovulação de embrião em receptora (A); Material utilizado (B)................. 28
Quadro 1 - Classificação do tônus uterino segundo a metodologia de Andrade Moura
(2012)............................................................................................................ 24
Quadro 2 - Classificação do edema uterino segundo a metodologia de Andrade
Moura (2012)................................................................................................ 24
Quadro 3 - Classificação das características cervicais segundo HUGHES et al. (1977)
adaptado........................................................................................................ 25
Gráfico 1 - Taxa de prenhez com relação às características de tonicidade uterina......... 29
Gráfico 2 - Taxa de prenhez com relação às características de edema uterino............... 31
Gráfico 3 - Taxa de prenhez com relação às características cervicais............................. 33
 LISTA DE ABREVIAÇÕES

BSA – Albumina do Soro Bovino

eCG – Gonadotrofina Coriônica Equina
FSH – Hormônio Folículo Estimulante
GnRH – Hormônio Liberador de Gonadotrofinas
IA – Inseminação Artificial
IM - Intramuscular
LH – Hormônio Luteinizante
MHz – Megahertz
PB – Proteína Bruta
PGE2 – Prostaglandina E2
P4 - Progesterona
TE – Transferência de Embriões
USG - Ultrassonografia
 SUMÁRIO

Página
1 INTRODUÇÃO............................................................................................................... 12
2 REVISÃO DE LITERATURA...................................................................................... 14
2.1 ANATOMIA DO SISTEMA GENITAL DA ÉGUA................................................. 14
2.2 FISIOLOGIA REPRODUTIVA DA ÉGUA.............................................................. 15
2.3 RECONHECIMENTO MATERNO E GESTAÇÃO................................................. 17
2.4 EXAME GINECOLÓGICO....................................................................................... 18
2.4.1 Genitália externa................................................................................................. 18
2.5 EXAME TRANSRETAL............................................................................................ 18
2.6 USO DA ULTRASSONOGRAFIA NA AVALIAÇÃO DA ECOTEXTURA
UTERINA.......................................................................................................................... 20
2.7 TRANSFERÊNCIA DE EMBRIÃO.......................................................................... 21
3 MATERIAL E MÉTODOS............................................................................................ 22
3.1 LOCALIZAÇÃO........................................................................................................ 22
3.2 GRUPOS EXPERIMENTAIS.................................................................................... 22
3.3 AVALIAÇÃO ULTRASSONOGRÁFICA DO APARELHO REPRODUTIVO...... 23
3.4 PROTOCOLO DE SINCRONIZAÇÃO E SELEÇÃO DAS ÉGUAS
RECEPTORAS.................................................................................................................. 24
3.5 COLETA DE MBRIÃO............................................................................................ 25
3.6 INOVULAÇÃO DO EMBRIÃO................................................................................ 27
4 RESULTADOS .............................................................................................................. 29
4.1 TÔNUS UTERINO..................................................................................................... 29
4.2 EDEMA UTERINO.................................................................................................... 30
4.3 CÉRVIX...................................................................................................................... 31
5 DISCUSSÃO.................................................................................................................... 32
5.1 TÔNUS UTERINO..................................................................................................... 32
5.2 EDEMA UTERINO.................................................................................................... 33
5.3 CÉRVIX...................................................................................................................... 34
6 CONCLUSÃO................................................................................................................. 37
7 REFERÊNCIAS.............................................................................................................. 38
 12

1 INTRODUÇÃO

Com o crescimento e desenvolvimento do mercado equestre no país, que reune

diferentes segmentos da economia e movimentam anualmente bilhões de reais, a busca por
maior produtividade e lucratividade tem imposto medidas para incrementar os resultados de
fertilidade, principalmente no que diz respeito à melhoria genotípica e fenotípica em equinos,
o que orienta para necessidade de aprimoramento das biotecnologias da reprodução.
A inseminação artificial (IA) e a transferência de embrião (TE) na espécie equina são
biotécnicas de grande importância para a referida exploração zootécnica. A versatilidade desta
espécie caracteriza-se como o principal agente responsável pelo crescimento mundial da
equideocultura. Estas biotecnologias permitem o maior desenvolvimento do setor através do
avanço na eficiência reprodutiva, promovendo melhor aproveitamento desses animais,
acelerando a evolução das raças e seus cruzamentos.
A expansão da transferência de embrião veio pela necessidade de maximizar a
utilização de fêmeas com conhecido mérito genético (doadoras), aproveitando maior
quantidade de folículos, que normalmente se tornariam atrésicos, levando vários
pesquisadores a desenvolver alternativas de potencialização como protocolos
superovulatórios, sendo possível superovular a fêmea, inseminá-la e posteriormente transferir
seus embriões para animais de menor valor genético e comercial (GONÇALVES et al., 2008).
Em conseguinte, a transferência de embriões de animais de elevado valor zootécnico
para receptora, tem sido técnica largamente empregada, com o intuito de ultrapassar os
problemas relacionados à reprodução de equinos, técnica esta consolidada em bovinos e que
apesar das dificuldades de superovulação na espécie equina tem possibilitado a utilização de
ciclos subsequentes e a produção de maior número de descendentes/ano em curto espaço de
tempo.
A eficiência reprodutiva em programas de TE equino é deliberada pelos índices de
recuperação embrionária e taxa de prenhez, que por sua vez são manipulados por variadas
condições. O percentual de éguas prenhes após TE é comprometido primariamente pelos
seguintes fatores: a receptora, o embrião e a doadora pela qual o embrião foi gerado. Cada um
destes fatores relacionados à taxa de prenhez tem sido largamente estudado, havendo
concordância em relação ao papel primordial exercido pela receptora na TE (ALONSO,
2007).
As éguas receptoras foram classificadas durante muito tempo como animais inferiores,
com restrições relativas à sanidade e nutrição. Contudo, no momento, ocupam posição
 13

importante dentro das deliberações do plantel comercial de TE. Necessitando considerar

alguns fatores como: o escore corporal, idade (3 a 10 anos), o tipo e o tamanho ideal da
receptora (o mais próximo da doadora), características vulvar e uterina, e alimentação
adequada (ALVARENGA et al., 2008).
A utilização da ultrassonografia (USG) na avaliação reprodutiva possibilita um
acompanhamento de maneira mais concisa, favorecendo de forma significativa as técnicas de
IA e TE, devido o seu aperfeiçoamento na avaliação da dinâmica folicular, determinação do
momento da ovulação, caracterização do tônus uterino precisando o momento da inovulação e
diagnóstico da gestação, tornando os dados mais confiáveis, quando comparado à palpação
retal, transformando-se em instrumento imprescindível para o médico veterinário
especializado em reprodução equina (PENA-ALFARO; BARROS, 2011).
A determinação de metodologia concreta e confiável, visando à escolha da receptora
de embrião mais adequada e com maiores probabilidades de diagnóstico positivo de prenhez,
consiste no ponto decisivo do programa de TE; sua adequada seleção e manejo deliberarão em
grande parte o sucesso da técnica.
O objetivo desse trabalho foi avaliar a implantação embrionária em éguas receptoras
de embriões diante das modificações da cérvix, tonicidade e edema uterino, visando
caracterizar o melhor estágio uterino da receptora para a inovulação.
 14

2 REVISÃO DE LITERATURA

2.1 ANATOMIA DO SISTEMA GENITAL DA ÉGUA

O aparelho reprodutor da égua é análogo ao das demais fêmeas de outras espécies

domésticas, embora apresentem peculiaridades quanto a posição, tamanho, entre outras
estruturas micro e macro anatômicas. Os principais órgãos reprodutores femininos incluem os
ovários, genitália tubular interna (ovidutos, útero, cérvix e vagina) e externa (vulva) (LEY,
2006). Estes órgãos são, em parte, funcionalmente dependentes de interações entre hormônios
e receptores hormonais, especialmente dos neuroendócrinos, produzidos e secretados pelo
hipotálamo e hipófise (SAMPER, 2009).
Na caracterização realizada por LEY (2006) os ovários encontram-se pendentes de
cada lado da coluna vertebral, pelo bordo anterior do ligamento largo, estando fixados a este
por meio de uma porção diferenciada do mesmo ligamento, o mesovário. A medula ou zona
vascular tem localização superficial, enquanto que o córtex ou zona cortical que contém os
folículos encontra-se no interior do ovário, local onde ocorre a liberação dos óvulos
denominada fossa ovulatória (Figura 1), diferente dos outros mamíferos onde a ovulação se dá
por toda a superfície do ovário (SILVA, 2005).

Figura 1 - Ovários de égua (A). Desenho esquemático da anatomia ovariana (B)

A B

FOSSA OVULATÓRIA

Fonte: bloganatomiaveterinaria.files.wordpress.com

O oviduto é o canal que faz a ligação entre os ovários e útero e pode ser dividido em
três zonas: o infundíbulo, a ampola e o istmo. A fossa ovulatória encontra-se intimamente
 15

associada ao infundíbulo, que conduz os óvulos até à porção mais larga do canal, a ampola,
onde se dá a fertilização. O istmo liga a ampola ao útero. Somente os óvulos que sofrem
fertilização passam pela junção utero-tubular até ao útero para implantação e posterior
desenvolvimento (LEY, 2006).
De acordo com GINTHER et al. (2007) e SISSON (2008), a égua apresenta útero
bipartido, em forma de Y ou T, com dois cornos e saliente corpo uterino. Órgão muscular ôco
adjacente aos ovidutos e a cérvix, está situado na cavidade abdominal, mas estende-se por
uma curta distância dentro da cavidade pélvica. As laterais do útero são conectadas às paredes
pélvicas e abdominais pelo ligamento largo, sendo este o principal responsável pelo
suprimento sanguíneo, linfático e nervoso do útero. Os cornos estão dentro da cavidade
abdominal, e no estado não gestante apresentam cerca de 20-25 cm.
A cérvix ou colo do útero é uma estrutura semelhante a um esfíncter, com
aproximadamente seis centímetros que se projeta caudalmente na vagina, onde esta é
composta por proeminências, dobras da mucosa as quais a mantém normalmente fechada
com auxílio de tampão mucoso (SILVA, 2005).
A vagina se estende através da cavidade pélvica desde o colo do útero até a vulva, e
possui mucosa aglandular e tecidos fibroelásticos que facilitam a passagem do feto no
momento do parto. A vulva, parte do trato genital comum aos sistemas urinário e reprodutivo,
compreendem dois lábios, o clitóris e seus seios, a fossa e a glande. Sua principal função é a
proteção da entrada da vagina. O clitóris apresenta-se como glândula arredondada que ocupa a
comissura ventral da vulva. Sua glande mede aproximadamente dois e meio centímentros de
diâmetro e é revestida por uma prega de pele, ficando cercada pela fossa do clitóris (LEY,
2006).

2.2 FISIOLOGIA REPRODUTIVA DA ÉGUA

Os equinos são animais poliéstricos estacionais e apresentam ciclos reprodutivos

ininterruptos numa determinada época do ano, geralmente na primavera e verão que coincide
com o aumento da luminosidade, ou seja, pelo aumento do fotoperíodo (CHEMINEAU et al.,
2008). Apesar de alguns animais, em certas latitudes, manifestarem ciclos estrais durante todo
o ano, eles não necessariamente procriam em todos os períodos estrais (HAFEZ; HAFEZ,
2004).
Conforme CUERVO-ARANGO e CLARK, (2010) a continuidade do fotoperíodo
controla a dinâmica reprodutiva através da neuromodulação da secreção do hormônio
 16

liberador de gonadotrofinas (GnRH). Período entre 15 a 16 horas de estímulo luminoso seja

em ambiente natural ou iluminação artificial agem sobre o eixo pineal-hipotalâmico-
hipofisário-gonadal para reduzir a produção de melatonina. Quando este hormônio é liberado
pela glândula pineal, impede a sintetização de GnRH pelo hipotálamo.
A frequência e amplitude dos pulsos da secreção de GnRH pelo hipotálamo possui
relação direta com a produção hipofisária e permite a liberação dos hormônios folículo-
estimulante (FSH) e luteinizante (LH). Os ovários através dos seus receptores tornam-se
responsivos ao FSH e ao LH estimulando o recrutamento, seleção e dominância folicular
(LEY, 2006).
O ciclo estral fisiológico da égua persiste cerca de 21 dias, sendo que o estro dura de
quatro a sete dias, podendo sofrer uma variação entre 2-12 dias no início da estação, e o
diestro de 14-15 dias (COSTA, 2014). Essa regularidade fundamenta-se no minuncioso
equilíbrio entre os hormônios sintetizados pela glândula pineal, hipotálamo, hipófise e os
ovários, associados ao manejo a que esses animais são submetidos (MARTINS, 2011).
De acordo com PYCOCK (2008a), o ciclo na égua pode ser dividido em duas fases:
folicular e lútea. A folicular ou estro é a fase que há predominância dos folículos produtores
de estrógenos, é o momento em que a égua encontra-se sexualmente receptiva ao macho, seu
trato genital está pronto para receber e transportar o sêmen até o local da fertilização.
Essa fase em éguas é caracterizada pela presença de folículo com mais de 25 mm de
diâmetro no ovário. A quantidade crescente de estradiol produzida pelos folículos ovarianos
induzem o comportamento de cio e o aumento dos níveis de LH pela ativação dos seus
receptores na célula da granulosa, por conseguinte a ovulação dos folículos maduros com
aproximadamente 40 a 45 mm e a formação do corpo lúteo (CL) (GINTHER et al., 2008b).
A fase lútea é também chamada diestro, onde há prevalência do corpo lúteo, aumento
da produção de progesterona (P4) e indifereça da égua ao cortejo do garanhão, onde seu
aparelho genital está organizado para desenvolver um embrião. O período de diestro finaliza
com a luteólise e o início da próxima fase folicular (HAFEZ; HAFEZ, 2004).
Na maioria das espécies domésticas, a ovulação ocorre 24 a 40 horas após pico
ovulatório de LH. Exceto na égua, a ovulação acontece antes desse pico, uma vez que os
níveis de LH sanguíneo estão aumentando lentamente, ocorrendo o pico aproximadamente 48
horas após a ovulação (GINTHER et al., 2008a).
A ovulação ocorre pela ruptura da parede folicular na região da fossa ovulatória,
admitindo que o fluído folicular, células da granulosa e o oócito sejam liberados. Desse modo,
ocorrerá colapso da parede folicular, possível de ser sentido à palpação retal, caracterizado
 17

como cratera ou depressão no local anteriormente ocupado pelo folículo, ou visualizado em

ultrasonografia como zona hiperecogênica, denominando-se de corpo lúteo (CL) (SAMPER,
2009).
Geralmente, o corpo lúteo em desenvolvimento tem vida útil de até 85 dias, caso o
endométrio não libere prostaglandina para a luteólise permanecerá a produção de
progesterona e não sofrerá regressão. Entretanto, nos ciclos estrais normais a luteólise corre
em torno de 15 dias. Acredita-se que o reconhecimento materno da gestação na égua que
ovula e é adequadamente coberta ou inseminada, com movimentação embrionária livre e que
consiga produzir estrógeno para suprimir a liberação endometrial de prostaglandina, deva
ocorrer entre os dias 12 e 14 após a ovulação produtiva (LEY, 2006).

2.3 RECONHECIMENTO MATERNO E GESTAÇÃO

O desenvolvimento embrionário inicial depende de sua perfeita interação com o

ambiente uterino. O endométrio necessita estar em ótimas condições para receber o concepto,
e sem qualquer estrutura que impeça a sua migração no interior do lúmen, visto que é nessa
fase que o reconhecimento materno da gestação acontece (CAIXETA et al., 2008).
No quinto dia pós-ovulação o embrião entra no útero, favorecido pela produção de
prostraglandina E2 (PGE2), que induz a contratilidade miometrial e consequentemente o
rolamento da vesicula embrionária pelo lúmen dos cornos uterinos (GAIVÃO; STOUT,
2007). Essa movimentação é substancial entre os dias 8 e 16 de gestação, para que o embrião
sinalize a sua presença e evite a lise do corpo lúteo (ARAR et al., 2007).
A manutenção da prenhez exige a produção de hormônios sintetizados pela placenta e
pelo concepto. A progesterona possui ação direta no endométrio uterino a fim de controloar a
diferenciação celular e sua funcionalidade. O estrógeno produzido pelo feto estimula a
elevação do tônus uterino, o diâmetro da vesícula embrionária e o espessamento da parede do
útero, além de ancorar o embrião no lúmen uterino por volta do 16º dia de gestação. Mesmo
após a fixação da vesícula embrionária no corno uterino, o miométrio continua a contrair-se
promovendo sua rotação, guiando o embrioblasto para a região ventral do útero (GAIVÃO;
STOUT, 2012).
No caso da não ocorrência da luteólise entre 14 e 16 dias após inseminação o corpo
lúteo continuará funcional, contudo a síntese de progesterona entra em declínio progressivo
por aproximadamente 20 dias seguintes, sendo necessário que corpos lúteos acessórios
 18

formados através da estimulação da gonadotrofina coriônica equina (eCG) entrem em ação

para suprir sua demanda (BERGFELT; ADAMS, 2007).
O eCG é produzido pelos cálices endometriais, que segundo DE MESTRE et al.
(2008), são formados por células trofoblásticas que após se multiplicarem, por volta de 36 a
38 dias migram profundamente no endométrio materno, constituindo essas estruturas que são
exclusivas aos equídeos.
O FSH hipofisário e o eCG auxiliam na produção de progesterona pelos corpos lúteos
acessórios até o momento em que a unidade feto-placenta torne-se autosuficiente e consiga
secretar progesterona em quantidade satisfatória, o que sobrevém por volta de 70 dias de
gestação, quando os cálices endometriais passam a desnaturar-se (ANTCZAK et al., 2013).
Após cerca de 120 dias com a gestação de fato estabelecida, constitui-se o
microcotilédone, a principal unidade de troca hemotrófica da placenta alantocoriônica,
continuando a gestação até seus 11 meses (DE MESTRE et al., 2008)

2.4 EXAME GINECOLÓGICO

2.4.1 Genitália externa

A avaliação visual da conformação pélvica pode apresentar alterações expressivas de

que o animal pode vir a desenvolver pneumovagina, urovagina ou indicativos para cirurgia de
reparação vulvar, além de outros fatores que interfiram na fertilidade da égua (RICKETTS,
2008a).
Desse modo, vagina e ânus precisam estar posicionados no mesmo plano, visto que
uma vulva mais protuberante e/ou um ânus mais profundo predispõe a infecções ascendentes,
resultantes de pneumovagina e de contaminação fecal (RIET CORREA, 2007; SAMPER,
2009).

2.5 EXAME TRANSRETAL

O exame transretal faz parte do protocolo de avaliação do trato reprodutivo (cérvix,

útero e ovários) de grandes animais e tem como finalidade avaliar tônus e formato de várias
estruturas, além de diagnosticar uma possível gestação. Deve ser realizado por profissional
capacitado, com o animal devidamente contido, sendo feito uso de luva específica além de
mão e braço bem lubrificados, a fim de evitar traumatismos como a ruptura da mucosa retal
em animais ariscos (SAMPER, 2009).
 19

A palpação dos ovários provê informações fundamentais quanto à ciclicidade e

desordens ovarianas. Durante o anestro a maioria das éguas apresentam ovários pequenos,
com aproximadamente três centímetros de diâmetro. Quando na primavera, com o aumento
do foto período e início do ciclo, os ovários podem alcançar o dobro do seu tamanho normal,
chegando a medir até dez centímetros durante o estro, sendo possível senti-los na
manipulação (RICKETTS, 2008a).
Na palpação transretal, a cérvix e o corpo do útero estarão situados na cavidade
pélvica. O útero será reconhecido como tecido delicado e pouco friável, as características da
cérvix apresenta-se-ão de forma semelhante ao útero conforme as diferentes fases do ciclo e
os ovários e os cornos uterinos estarão localizados no abdómen caudal (SAMPER, 2009).
Com a palma da mão na região dorsal e os dedos “em concha” sobre a margem cranial
do útero, desloca-se a lateralmente de um corno uterino ao outro, sendo possível dessa forma
avaliar tamanho e tônus uterino, bem como constatar se existe gestação ou indicativo de
alguma patologia, caudalmente a região da bifurcação uterina é possivel localizar a cérvix,
como uma estrutura um pouco mais consistênte que o útero (MCKINNON et al., 2011).
Durante a fase folicular ou cio, o útero apresenta-se relaxado e com tônus diminuído
se comparado ao diestro onde este permanecerá com formato tubular e tonicidade aumentada,
a cérvix exibirá encurtamento e edema, contudo quando a ovulação se aproxima torna-se
flácida com acentuado achatamento (PINEDA; DOOLEY, 2003).
No diestro, com a produção de progestágenos pelo corpo lúteo (CL) as células
endometriais aumentam de sobremodo seu volume e a camada superficial infiltra-se de
células de defesa, concomitante ocorre à redução do edema, tornando o útero mais firme a
manipulação. Sob estímulo do estrógeno e progesterona, o útero passa a produzir secreções
glandulares, líquido rico em proteínas e carboidratos para o lúmen uterino, que será
responsável pela nutrição primária do óvulo fertilizado (ANDRADE MOURA, 2012).
Na ausência de estro, as células endometriais vão retomar seu volume inicial, o útero
torna-se flácido e com parede delgada, tornando-o difícil de palpar e de forma semelhante na
fase lútea. A cérvix torna-se alongada, tubular e facilmente localizada à palpação (SAMPER,
2009).

2.6 USO DA ULTRASSONOGRAFIA NA AVALIAÇÃO DA ECOTEXTURA UTERINA E

SELEÇÃO DA ÉGUA RECEPTORA.
 20

A ultrassonografia transretal é imprescindível na transferência do embrião e no

momento da seleção das éguas receptoras, tornando-se procedimento de eleição por tratar-se
de método não invasivo e que possibilita avaliar as características uterinas e ovarianas.
Permitindo o descarte dos animais que apresentarem anormalidades, visto que, é função da
receptora o reconhecimento do embrião e fornecer condições ótimas para o seu
desenvolvimento (MEIRA, 2007).
A dinâmica da ecotextura uterina observada por meio de exame ultrassonográfico é
influenciada pelas distintas fases do ciclo estral aos níveis de esteróides ovarianos
preeminentes. De acordo com SAMPER et al. (2007) e FLEURY et al. (2006) o edema, o
tônus uterino e características da cérvix influenciam nas taxas de prenhez.
Durante a fase estrogênica o corno uterino apresenta-se claramente em forma de “roda
de automóvel”, que correspondem às pregas endometriais edematizadas. Estas são
hipoecogênicas, ou seja, refletem pouco as ondas sonoras, com áreas alternadamente
anecóicas – ecotextura heterogênea. Essas particularidades do endométrio na fase estral
caracterizam o edema estrual ou estral, que entre o 17º e 20º dia do ciclo apresenta uma maior
atividade, contudo, se desfaz logo após a ovulação (SAMPER et al., 2007).
E durante o diestro, sob ação da progesterona, o útero apresenta-se mais denso,
apresentendo ecotextura homogênea (hiperecóico), com pregas endometriais não
identificáveis, características ideais para TE (ANDRADE MOURA, 2012).
Quando em estro, as receptoras devem ser submetidas à avaliação ultrassonográfica
diariamente para observação do desenvolvimento folicular e ovulação. Espera-se que no
plantel haja disponibilidade de doadoras, admitindo escolher aquela que proporcione melhores
condições reprodutivas para receber o embrião (CARNEVALE et al., 2000).
Baseado nas classificações de tônus e morfoecogenicidade uterina, ALONSO (2007)
classificou as éguas receptoras como aceitáveis, marginais ou reprovadas. Aceitáveis, quando
apresentam útero com formato tubular, homogêneo, ecogênico e apresentando diferença
mínima entre miométrio e endométrio; marginais às receptoras que apresentaram ausência de
dobras endometriais, mais heterogêneo, com maior diferença entre miométrio e endométrio
que o anterior; e reprovadas, útero com formato pouco tubular, presença de dobras
endometriais, heterogêneo, com acentuada diferença entre miométrio e endométrio.
Considerando que, o botão para o sucesso da técnica de transferência de embriões seja
a qualidade da receptora, tais artifícios projetam alcançar elevados índices de prenhez pós TE
(MEIRA, 2007).
 21

2.7 TRANSFERÊNCIA DE EMBRIÃO

Após aproximadamente 40 anos de estudos e aperfeiçoamentos depois da primeira

descrição da TE em éguas, a técnica vem ganhando cada vez mais espaço no mercado. A TE
em equino pode ser realizada pela técnica cirúrgica, por incisão ao flanco, ou pela técnica não
cirúrgica por via cervical.
É uma tecnologia que consiste basicamente na coleta de embrião de uma fêmea
doadora de alta qualidade genética acasalada com garanhão de genética reconhecida e a
transferência para uma fêmea inferior, incumbida de levar a gestação a termo. O fato de que
nos primeiros 15 a 17 dias de gestação, o embrião equino tem vida livre no útero, sem formar
qualquer anexo embrionário, torna-se agente facilitador no processo de coleta (MCKINNON;
SQUIRES, 2007).
A TE permite à produção de múltiplos potros de éguas com alto potencial genético,
envolvidas em alguma atividade como exposições e competições; possibilita produzir
descendentes de potras ainda muito jovens para conceber; realizar teste de progênie em
fêmeas; resgatar a genética de um rebanho após grandes perdas, mais rapidamente; servir
como ferramenta para a formação de banco de germoplasma, criando um banco de embriões
criopreservados; permitir a utilização de fêmeas com problemas em manter a gestação, caso
não seja um problema genético (WRATHALL et al., 2005).
Todavia, apesar do cenário positivo da TE, sua aplicação no mercado equestre está
muito atrasado em relação ao seu uso em ruminantes e suinos (RIERA, 2009). Um dos
principais fatores para a baixa eficiência consiste na dificuldade em estimular a superovulação
em éguas, além do uso demasiado de fêmeas velhas como doadoras, fazendo decair as taxas
de recuperação embrionária (ALVARENGA, 2010).
Vários são os fatores que influenciam a baixa eficácia na TE, como idade, status e
manejo reprodutivo da doadora de embriões, da qualidade e forma de processamento pelo
qual o sêmen foi submetido, o dia da coleta do embrião e, sobretudo da receptora, sendo a
correta seleção desta imprescindível para o êxito da técnica (ALONSO, 2007).
Logo, o sucesso da técnica depende não somente da receptora como caso isolado, mas
do ambiente uterino para o qual o embrião será inovulado, este deverá estar sincronizado e
semelhante ao qual foi coletado, ou seja, em diestro, que pode ser determinado pelo
acompanhamento do ciclo ou utilização de hormônios exógenos. Entretanto, é comum ocorrer
falhas na sincronização, portanto é recomendável que se tenha no mínimo, duas receptoras
 22

para cada doadora, garantindo um melhor ambiente uterino para o embrião (MCKINNON;
SQUIRES, 2007).

3 MATERIAL E MÉTODOS

3.1 LOCALIZAÇÃO

O experimento foi desenvolvido no Agreste Meridional do Estado de Pernambuco, no

Haras Brejo das Flores, localizado na cidade de Garanhuns (Latitude: 08º 53’ 25” s e
Longitude: 36º 29' 34" w), no período entre agosto de 2014 a fevereiro de 2015, durante a
estação de monta. A precipitação média anual registrada gira em torno de 874 milímetros,
concentrados entre abril e julho. A umidade relativa do ar é elevada durante todo o ano, com
médias mensais entre 75% e 95%, e o tempo médio de insolação de aproximadamente 2.350
horas/ano.
A propriedade ocupa área de 390 hectares, sendo 190 utilizados para a equinocultura
de cavalos Quarto de Milha, e as demais áreas para o cultivo de pastagens, além de outras
atividades voltadas para o mesmo ramo.

3.2 GRUPOS EXPERIMENTAIS

Como doadoras de embriões, foram utilizadas 12 éguas Quarto de Milha com três a 18
anos de idade e condição corporal compatível com a atividade reprodutiva. Estas foram
inseminadas e induzidas a partir do dia que se identificou a presença de folículo com diâmetro
igual ou superior a 35 mm até a ovulação como relatado por CAIADO et al. (2005).
Para receptoras, utilizou-se 98 éguas mestiças, com idade de três a 12 anos,
apresentando escore corporal entre 3 e 4, contudo, apenas 39 destas foram selecionadas para
receber embriões, sendo preparadas três para cada doadora (Figura 2).
As éguas foram mantidas em pastagem de Cynodon spp., com água a vontade. O sal
mineral ad libitum e suplementação diária de concentrado (Durancho 15% de PB) foi
fornecido duas vezes ao dia somente para às fêmeas inovuladas.

Figura 2 - Lote de receptoras

 23

Fonte: Arquivo pessoal (2015)

3.3 AVALIAÇÃO ULTRASSONOGRÁFICA DO APARELHO REPRODUTIVO

As éguas foram submetidas a exame do trato reprodutivo semanalmente, por meio de

palpação retal auxiliado por aparelho de ultrassonografia - Ultrasom modo B, com transdutor
linear transretal multifrequêncial de 5-10 MHz (Mindray DP 10), (Figura 3), a fim de que
fossem avaliadas às características ovarianas, uterinas e cervicais.
As receptoras foram avaliadas no momento da indução até a identificação da ovulação;
no dia da transferência do embrião; e para confirmação da prenhez. As éguas selecionadas
para receber embriões foram aquelas que apresentaram ciclo estral semelhante ao das
doadoras.
Figura 3 – Avaliação ultrassonográfica do ovário (A) e mensuração folicular (B)
A B

Fonte: Arquivo pessoal (2015)

3.4 PROTOCOLO DE SINCRONIZAÇÃO E SELEÇÃO DAS ÉGUAS RECEPTORAS
 24

Dois dias após ovulação da égua doadora (D8) eram escolhidas três receptoras (D6)
que apresentassem folículos superiores a 35 mm, sendo estas medicadas com 750 µg de
Acetato de Deslorelina por via intramuscular (IM) para indução da ovulação, com mecanismo
de ação em até 48 horas. No dia da inovulação a égua selecionada recebia uma aplicação de
1800 mg de Progesterona, caso alcançado o sucesso da transferência do embrião e
confirmação da prenhez, mantinha-se as aplicações com doses semanais, durante os primeiros
120 dias de gestação.
A avaliação do tônus uterino realizada por palpação retal e classificação subjetiva para
edema uterino seguem recomendações de ANDRADE MOURA (2012) descritos abaixo:

Quadro 1 – Classificação – Escore do tônus uterino segundo metodologia de Andrade Moura

(2012)
Classificação Descrição
Tônus 1 (T1) Mais tenso
Tônus 2 (T2) Tenso, porém um pouco menos do que T1
Tônus 3 (T3) Mais flácido que T1 e T2, porém ainda diferente do tônus no estro
Tônus 4 (T4) Flácido - característico do estro

Quadro 2 – Classificação – Escore do edema uterino segundo metodologia de Andrade

Moura (2012)
Classificação Descrição
0 Útero na fase de diestro (sem edema)
1 Leve edema
2 Moderado
3 Marcante em todo o útero
4 Máximo, com pequena quantidade de líquido
5 Anormal, ecotextura padrão descaracterizada (irregular e desorganizada)

Figura 4 – Classificação ultrassonográfica de edema uterino em éguas

 25

Fonte: Arquivo pessoal (2015)

Para cérvix a classificação adotada foi de acordo com a abertura do seu ósteo, avaliada
através de pressão digital via palpação transretal, segundo metodologia relatada por HUGHES
et al. (1977), Quadro 3.

Quadro 3 – Classificação - Escore das características cervicais segundo HUGHES et al.

(1977) adaptado
Classificação Descrição
0 Fechada (na realização de pressão digital o dedo desliza lateralmente)
1 Intermediário (na realização de pressão digital nota-se formação de leve
depressão)
2 Aberta (na realização de pressão digital o dedo afunda na cérvix)

3.5 COLETA DE EMBRIÕES

Após higienização da região perianal e vulvar com solução degermante e água e

secagem com papel toalha, os embriões foram coletados de forma não cirúrgica, via lavagem
uterina entre os dias sete (D7) e oito (D8) após a ovulação (considerando-se D0 como o dia da
ovulação da doadora), conforme procedimentos recomendados por SQUIRES e MCCUE,
(2007).
 26

Nos procedimentos de lavagem uterina foram utilizados catéteres de via dupla em

sistema de coleta fechado e bilateral simultânea, o qual foi posicionado no corpo do útero na
região cranial da cérvix, onde posteriormente foi inflado o balonete com 60 cm³ de ar. A
solução utilizada na infusão uterina para o procedimento de colheita de embrião foi de ringer
com lactato de sódio (0.3G/100mL + cloreto de sódio (0.6G/100mL) + cloreto de potássio
(0.03G/100mL) + cloreto de cálcio diidratado (0.02G/100mL)) como descrito por CAIADO et
al. (2005) aquecida a 37 – 40 °C (Figura 5).
Para cada colheita foram realizados três lavados, utilizando o volume médio de 1000
mL por lavado. A solução infundida através de pressão manual do frasco de ringer foi retirada
por gravidade. Para facilitar este procedimento, foi executada a palpação retal, de modo a ser
possível massagear e erguer os cornos uterinos favorecendo a saída do fluido, passando pelo
copo coletor com filtro estéril, obtendo a filtração do lavado (Figura 5), permanecendo
pequena quantidade dentro do copo coletor o qual posteriormente foi transferido para uma
placa de Petri riscada, para facilitar a localização do embrião e análise através de lupa.

Figura 5 – Lavagem uterina – Infusão de ringer com lactato (A); Filtração do lavado (B)
A A BB

Fonte: Arquivo pessoal (2015)

Os embriões foram manipulados com o auxílio de palheta acoplada a seringa de 3 mL

sendo retirados da placa e depositados em outra contendo meio para manutenção Holding
(Embriolife Base, 4 mg BSA, Gentamicina 0,02 mg, anfotericina B 0,25 mg), onde foram
promovidos de cinco a sete banhos em gotas do mesmo meio para remoção das sujidades
aderidas ao embrião e posteriormente colocado em placa de petri (20x30) preenchido com a
mesma solução, onde permaneceu até o momento da inovulação (Figura 6).
 27

Figura 6 – Manutenção do embrião (esquerda); Placa de petri para lavagem (direita)

Fonte: Arquivo pessoal (2015)

3.6 INOVULAÇÃO DO EMBRIÃO

O embrião foi envasado em palheta plástica de 0,25 mL em porções alternadas de

solução de manutenção e ar, formando três colunas de meio de manutenção como o embrião
presente na coluna central, reduzindo a mobilidade, riscos de lesões e perda embrionária. Para
a inovulação foi utilizado aplicador de 0,25 modelo WTA de transferência, empregando
bainha plástica estéril sobre o inovulaor e coberta com camisinha sanitária, com objetivo de
minimizar a contaminação uterina.
Dentre as três éguas receptoras previamente selecionadas através da palpação retal e
exame ultrassonográfico para cada doadora, foram escolhidas aquelas que apresentaram
cérvix mais firme e fechada, maior tônus uterino e menor edema conforme indicado por
CARNEVALE et al. (2000). Em seguida realizou-se a limpeza da região perianal e vulvar da
égua com solução degermante, água, e álcool a 70%, sendo feito a secagem da região com
papel toalha. A inovulação do embrião foi executada no corpo do útero na região da
bifurcação cornoal (Figura 7). Após cinco dias da inovulação realizou-se o diagnóstico de
gestação através de USG.
.

Figura 7 – Inovulação de embrião em receptora (A); Material utilizado (B)

A B
 28

Fonte: Arquivo pessoal (2015)

 29

4 RESULTADOS

4.1 TONUS UTERINO

Para a avaliação das características de tonicidade uterina determinadas por meio de

palpação retal, foram qualificadas fêmeas apenas para os escores 1 e 2. Por conseguinte as
éguas prenhes denotaram classificação de (10) 25,64 e (9) 23,07% para os escores 1 e 2,
respectivamente (Gráfico 1).

Gráfico 1- Taxa de prenhez com relação às características de tonicidade uterina

No tocante as éguas vazias constatou-se tendência numérica para o escore 1, com

percentual de (14) 35,89% seguido do escore 2 com (6) 15,38%. Segundo CARNEVALE et
al. (2000) e SQUIRES (2005), éguas com tônus cervical e uterino mais tenso são as que
devem ser selecionadas prioritariamente para receberem embrião, pois apresentam melhores
índices de prenhez. Para a categoria de escore 3 não foi verificado constância para fêmeas
vazias ou prenhes conforme observado no Gráfico 1.
Dos animais com tonicidade uterina de pontuação 1, apenas (13) 54,16% das
receptoras apresentavam as demais características do sistema genital desejáveis, sendo
classificadas como aceitáveis por exibirem útero com formato tubular, homogêneo, ecogênico
e apresentando diferença mínima entre miométrio e endométrio, além da ausência de edema e
cérvix firmemente fechada. As fêmeas com escore 2, foram classificadas como marginais por
 30

apresentaram ausência de dobras endometriais, útero mais heterogêneo, com maior diferença
entre miométrio e endométrio que o anterior.

4.2 EDEMA UTERINO

Verificou-se para o edema uterino classificação de fêmeas apenas para os escores 0; 1;

e 2. Sendo que destes as éguas prenhes apresentaram distribuição de (11) 28,20; (7) 17,95; e
(1) 2,56%, para os escores 0; 1; e 2, respectivamente (Gráfico 2).

Gráfico 2 - Taxa de prenhez com relação às características de edema uterino

Em relação às éguas vazias, verificou-se elevação no escore 0, com valor de (14)

35,87%, seguido do escore 1, com (6) 15,38%. Paras as condições de escores 2; 3; 4; e 5, não
foi registrado frequência para fêmeas vazias (Gráfico 2).
Vale reassaltar que na metodologia utilizada nesta pesquisa, a escala de escore para
edema uterino variou de 0 a 5, em que, a partir da avaliação dos dados do Gráfico 2, pode-se
verificar que a maioria das fêmeas estavam concentradas nas classificações 0 e 1, que apesar
de qualificados como aceitáveis e marginais respectivamente, apenas 57,14% das fêmeas com
pontuação 0 apresentaram útero homogêneo e ecogênico, demonstrando ausência de edema
conforme descritos por ALONSO (2007).
 31

4.3 CÉRVIX

Com relação às características cervicais foram determinadas fêmeas somente para os

escores 0 e 1. Apresentando percentual de (14) 35,89% para o escore 0 e (5) 12,82% para o
escore 1, referente às fêmeas prenhes (Gráfico 3).

Gráfico 3 - Taxa de prenhez com relação às características cervicais

No que concerne às éguas vazias constatou-se valor de (20) 51,28% para a condição
de escore 0. Não havendo registros para as pontuações 1 e 2 conforme evidenciados no
Gráfico 3.
Segundo BRADECAMP (2007), éguas com baixo tônus cervical não são desejáveis
para receber embrião, apresentando piores taxas de prenhez. Apesar de buscar por cérvix mais
tensas nesse trabalho, de um total de 34 fêmeas avaliadas com escore cervical 0 (cérvix
fechada, firme, alongada e proeminente) consideradas características ideais para o momento
da inovulação, apenas 41,17% ficaram prenhas.
 32

5 DISCUSSÃO

5.1 TÔNUS UTERINO

O tônus uterino da receptora de embrião no dia da TE, influenciam significativamente

as taxas de prenhez. Resultados descritos por ALONSO (2007) sugerem que a qualidade
uterina pode indicar se o ambiente é adequado ou não para o desenvolvimento do embrião,
confirmando que, ao utilizar éguas com endométrio homogênio, com útero tubular e bom
tônus (mais tenso), obtém-se melhores índices de prenhez.
Tais mudanças na tonicidade uterina podem ser justificadas pela formação de corpos
lúteos viáveis, responsáveis pela produção de progesterona, hormônio indutor das
características do sistema genital na fase de diestro que vão promover hipertrofia das células
endometriais, reduzindo o edema, consequentemente tornando-o mais denso (ANDRADE
MOURA, 2012).
ALONSO (2007) estudou o efeito do tônus uterino sobre as taxas de prenhez de
receptoras de embrião inovuladas entre os dias três e oito (D3 a D8) pós-ovulação. A
avaliação do tônus foi realizada pela palpação retal, utilizando os escores T1: mais tenso; T2:
tenso, porém um pouco menos do que T1; T3: mais flácido do que T1 e T2, porém ainda
diferente do tônus no estro e T4: flácido, característico do estro, como avaliados nesse
trabalho.
O tônus uterino influenciou as taxas de prenhez, sendo que as éguas com T1 tiveram
taxas superiores às T2 e T3. As éguas com T2 apresentaram taxas menores do que as T1,
porém maiores do que T3. Os dados deparados por este autor divergem dos encontrados neste
trabalho, visto que os resultados para T1 e T2 apresentaram valores semelhantes para éguas
prenhes e vazias, sendo atribuídos à deficiência nutricional.
Da mesma forma FLEURY et al. (2006) selecionaram receptoras no dia da inovulação
(D3 a D8 pós-ovulação) tendo como base as características de tônus uterino. As taxas de
prenhez nas éguas com tônus uterino 1 (T1) (92%) e tônus uterino 2 (T2) (88%) foram
maiores que nas fêmeas com tônus uterino 3 (T3) (42%), demonstrando alta correlação
positiva entre tônus uterino e prenhez, sugerindo que o tônus uterino deve ser considerado na
escolha da receptora de embrião.
ALONSO (2007) concluiu em consonância com FLEURY et al. (2006), que edema e
tônus uterino afetaram a taxa de prenhez, sendo ambos importantes parâmetros para seleção
 33

de receptoras. Fatores estes que devem ser levados em consideração uma vez que condições
não avaliadas neste trabalho podem ter influenciado de forma negativa os resultados.

5.2 EDEMA UTERINO

Segundo CAIADO et al. (2007), as características do sistema genital é fator decisório

para a classificação de receptoras. Apresentando, o fator edema endometrial como um dos
principais parâmetros na classificação de éguas receptoras.
Dentro da reprodução equina a avaliação da condição de edema é o indício mais fiável
da competência estrogênica do folículo dominante, em conseguinte, para a detecção do cio na
égua saudável, mesmo quando esta não responde a rufiação pelo garanhão (ANDRADE
MOURA, 2011). Quando a fêmea encontra-se em fase luteínica com condições hormonais de
baixos níveis de estrógenos e elevados de progesterona devido à presença do corpo lúteo, o
edema é reduzido, tornando o ambiente uterino adequado para receber o embrião, semelhante
ao estado prenhe.
O edema uterino surge inicialmente na fase final do diestro e aumenta à medida que o
estro avança, esse evento acontece devido à produção crescente do hormônio estrogênico
pelos folículos dominantes, que atua no endométrio promovendo hipertrofia e exacerbada
divisão celular, além de aumentar a irrigação sanguínea local promovendo edema e impressão
de crescimento dos órgãos ao toque (CUERVO-ARANGO; NEWCOMBE, 2008).
SAMPER (1997) conduziu avaliação que relacionou a predição da ovulação em éguas
sadias e cíclicas, com sistema de escore para o edema endometrial com pontuação de 0 a 5
como os descritos nesse trabalho. Neste estudo, o autor observou modelo peculiar da
edematização uterina: o início dos sinais do comportamento estral foi relacionado ao edema
com o escore médio de dois. Aumentando gradativamente até alcançar pontuação máxima
(que variou individualmente entre três e cinco) com presença de folículo, geralmente, maior
que 35 mm (33 a 52 mm).
Desse modo, segundo o referido autor a relação grau de edema uterino e tamanho do
folículo é importante indicador para orientar o momento da cobertura em éguas cíclicas; a
melhor resposta ao tratamento indutor da ovulação (98% de ovulações até 48 horas após
aplicação) acontece quando o edema possui escore entre três e cinco; e que a redução do
edema está agregada à estabilidade do escore máximo adquirido e que esse fato é sugestivo da
aproximação da ovulação.
 34

Estas conclusões são corroboradas por SAMPER et al. (2007), afirmando que o grau
de edema uterino combinado com a determinação do tamanho folicular, consta de indicador
importante para definir quando a égua deverá ser beneficiada, fato que favorece os programas
de Inseminação Artificial (IA) e Transferência de Embriões (TE).
Em pesquisa realizada por ANDRADE MOURA (2012) foi observado significativa
influência da taxa de gestação sobre a quantidade de edema uterino, onde houve redução das
taxas de prenhez em receptoras quando o edema uterino apresentou escore 3 e 4 pós ovulação,
sendo os escores 0 e 1 considerados ideais. Reiterarando sobre a importância do edema
uterino para caracterizar as várias fases do ciclo estral, favorecendo o uso das biotecnologias
da reprodução de forma mais eficiente.
Desta forma o edema 0 e 1 podem ser caracterizados como ideais para o momento da
inovulação por apresentar baixos nives de estrógeno e predomínio da progesterona,
representando o perfil hormonal e condições ovarianas de diestro. Por conseguinte, a presença
de edema evidente (3-5) torna-se indesejável por demonstrar características de fase folicular e
não luteinica, que corresponde à presença de embrião no útero, logo, momento ideal para a
inovulação.

5.3 CÉRVIX

Alterações do tônus cervical são consideradas confiáveis como parâmetro das

mudanças morfológicas do trato reprodutivo da égua, sendo útil para determinar o momento
do ciclo estral no qual a égua se encontra (CAIADO et al., 2007).
Em fase mais tardia do estro, antes da ovulação, a cérvix vai estar extremamente
flácida, achatando-se prontamente contra a pélvis devido elevada concentração de estrógenos
circulantes. A cérvix em diestro é longa, tubular e facilmente palpável, devido à ação da
progesterona que são sintetizados pelos corpos lúteos remanescentes a ovulação (SAMPER,
2009).
De acordo com as avaliações realizadas neste trabalho, foi possível observar que o
tônus cervical se comportou de forma semelhante à tonicidade uterina, corroborando com
PINEDA e DOOLEY (2003), quando afirmam que efeitos do estrógeno e da progesterona na
cérvix são similares aos encontrados no útero.
As receptoras com corpo lúteo visível e grande, útero firme e cérvix fechada são
consideradas aprovadas e podem estar disponíveis como receptoras pelos próximos dias.
Geralmente, 10% das receptoras não passam nesse exame, em primeiro lugar por ter tônus
 35

uterino pobre, presença de edema marcante ou uma cérvix frouxa e aberta (SQUIRES, 2006).
Conforme (ALONSO, 2007), concentrações de progesterona circulantes mais baixas, podem
afetar negativamente o tônus uterino e cervical.
Em estudo realizado por RODRIGUES et al. (2012) com objetivo de avaliar as
características do sistema genital no dia da inovulação, classificaram 33 éguas receptoras
como inaptas para receber embrião, sendo observado que 82% e 70% desses animais não
apresentavam características de edema e tônus uterino desejáveis respectivamente, e apenas
15% apresentavam cérvix aberta.
Pode-se constatar porcentagem maior e significativa de problemas relacionados a
edema endometrial e tônus uterino, em comparação aos problemas de tônus e fechamento
cervical. No presente trabalho 87,17% das fêmeas utilizadas expunham cérvix firmemente
fechadas, evidenciando, que o parâmetro tônus cervical versa como opção interessante na
seleção das receptoras por melhor caracterizar condições de diestro.
As avaliações dos parâmetros supracitados são importantes no desenvolvimento e
sucesso da TE, embora fatores intrínsecos, extrísecos e embrionários também possam
contribuir para morte embrionária, visto que esta é responsável por perdas econômicas
significativas, principalmente em gestações estabelecidas após transferência de embriões
(GRECO et al., 2008).
Como fatores intrínsecos incluem-se: sub-função lútea, idade da égua, local de fixação
da vesícula embrionária e as anomalias cromossómicas maternas. Como fatores extrínsecos: o
stress, a nutrição, o clima, a palpação e ecografia transretal, o garanhão utilizado, o
processamento do sémen. Como fatores embrionários temos as alterações cromossômicas do
embrião ou de outras características, tais como a morfologia. Além de fatores intrínsecos e
extrínsecos associados (VANDERWALL, 2008).
Os resultados deste trabalho podem estar relacionados às condições de manejo
nutricional a que as éguas receptoras foram submetidas, visto que, a nutrição é de
fundamental importância nos programas de transferência de embriões e tem impacto direto
sobre o número e a viabilidade de embriões coletados.
A taxa de concepção insatisfatória em éguas com condição corporal ruim durante a
estação reprodutiva ou que apresentam baixo escore corporal no momento do parto,
aparentemente não é influenciada pela nutrição inadequada durante a estação, e sim pela
condição nutricional desta no início da estação (DAVOLLI, 2010). Representado a situação
apresentada neste trabalho, já que às éguas receptoras eram mantidas em pastagens deficientes
 36

e sem oferecimento de concentrados durante quase todo o período, sendo transferidas para um
pasto de melhor qualidade e ofertado concentrado somente posterior a inovulação.
RIERA (2000), afirma que éguas receptoras devem estar em balanço energético
positivo durante a temporada de transferência. As éguas que recebem embrião devem ser
transferidas para piquetes com melhor disponibilidade e qualidade de pastagem. As taxas de
prenhez são drasticamente inferiores em éguas que estão em balanço energético negativo,
mesmo quando estas estão em boa condição corporal.
Deve ficar claro ao veterinário que algumas mortes embrionárias são inevitáveis e para
sua ocorrência nas menores taxas possíveis, deve ser dado o suporte apropriado em nível de
manejo e nutrição (DAVOLLI, 2010).
A partir da conclusão dos resultados pode-se aferir que a quantidade de fêmeas vazias
pode ser atribuido possivelmente a falhas no manejo nutricional, uma vez que, estas foram
mantidas em balanço energético negativo por longo período. E que a observação de apenas
um parâmetro não é suficiente para determinar a eficiência da implantação embrionária em
receptoras de embriões, posto que, vários são os fatores que podem interferir culminando em
mortalidade embrionárica precoce.
 37

6 CONCLUSÃO

Houve maior percentual de fêmeas vazias em relação às prenhes, embora, de acordo

com os parâmetros citados na literatura, ambas as classificações encontram-se dentro das
características ideais para a transferência de embriões.
Mesmo as fêmeas vazias se enquadraram no papel de boas receptoras, contudo,
possíveis variações podem ser explicadas provavelmente por défice alimentar e mineral,
fundamentando o baixo rendimento das receptoras por consequência à negligências quanto ao
manejo nutricional.
Sugerindo o desenvolvimento de novos trabalhos afim que, seja determinado
metodologias que associados aos parâmetros estudados neste trabalho definam às
características da receptora ideal para transferência de embriões.
 38

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