Introdução à Microbiologia

Introdução ao
estudo da
Microbiologia
História, definições, importância e objetivos da
microbiologia.

Onde são encontrados os

microrganismos?
 Introdução ao estudo da Microbiologia

Deriva de três palavras gregas:

Mikros (“pequeno”)
Bios (“vida”)
Logos (“estudo”)
 Introdução ao estudo da Microbiologia

MICROBIOLOGIA - CONCEITO:

É o estudo dos microrganismos (micróbios está em desuso), que são

seres vivos muito pequenos para serem vistos a olho nu.
 Introdução ao estudo da Microbiologia

 Morfologia
 Estrutura
 Fisiologia
 Reprodução
 Genética
 Taxonomia
Estuda a distribuição natural, relações recíprocas e com
outros seres vivos; efeitos benéficos e prejudiciais sobre os
homens.
 Introdução ao estudo da Microbiologia
MICROBIOLOGIA - CONCEITO:
MICROBIOLOGIA - CONCEITO
 Introdução ao estudo da Microbiologia

MICRORGANISMOS – ONDE ESTÃO?

• No ar, podendo contaminar:

Introdução ao estudo da Microbiologia
MICRORGANISMOS – ONDE ESTÃO?

No corpo humano:

• pulmões saudáveis: 128 espécies de

bactérias  2.000 microrganismos por cm2;

• boca: 200 espécies de micro- organismos,

• mãos: das
microrganismos
83% espécies de na
estão na mão esquerda, e vice-
mão versa.
direita
não
• Flora: bactérias no corpo
comuns
humano necessárias para a
manutenção do equilíbrio de vários
sistemas
MICRORGANISMOS – ONDE ESTÃO?

• No solo:

Profundidade Bactérias
(cm)
aeróbias
(106 por
grama)
0-8 24
8-20 3,1
20-40 1,9
40-60 0,9
60-80 0,7
80-100 0,15
A importância dos micro-organismos

Ciclagem de nutrientes – decompositores, ciclo do C/N/O

Produção de metano – gás natural

• Biotecnologia: - Fermentações - Síntese de produtos
farmacêuticos - Biorremediação
• Componentes da microbiota • Patógenos vegetais e animais.
 “ Em todas as questões humanas há um único
fator dominante – o tempo. Para compreender o
estado atual da ciência, precisamos saber como
ela chegou a ser assim: nós não podemos evitar
os acontecimentos históricos... Para avançar
rumo ao futuro devemos olhar para trás, no
passado.”

J. M. Ziman
The Force of knowledge
Cambridge, Inglaterra, 1976
Aspectos Históricos da Microbiologia

Era uma vez...

... a vontade do Homem em conhecer a vida que o rodeia,

sobretudo aquilo que não é visível.

• Até o século XVII, o avanço da microbiologia foi prejudicado pela

falta de equipamentos apropriados para observar os micróbios.
 Introdução ao estudo da Microbiologia

• Dentre os principais fatos

microrganismos, destacam-se: que marcam a história dos

Ano Fatos históricos

1665 Robert Hooke foi o primeiro a observar as células

Observou finou cortes de cortiça em um

microscópio primitivo, visualizando pequenos
poros semelhantes a favo de mel, o que chamou de
células.
 Introdução ao estudo da Microbiologia

Ano Fatos históricos

1674 Antony van Leeuwenhoek observou pela primeira vez os microrganismos

“Criador do microscópio ótico”

“No ano de 1675 descobri seres
vivos na água da chuva que tinha
ficado alguns dias num pote de
barro, vitrificado por dentro. Isto
me levou a olhar esta água com
grande atenção, especialmente
aqueles animaizinhos que me
pareciam dez mil vezes menores
do que os que podem ser
percebidos na água a olho nu”.
• 1673 -1723: Anton van Leeuwenhoek - foi o primeiro a observar micro-
organismos vivos através de lentes de aumento com resolução de 300 a 500
vezes.
• Observou e descreveu os microrganismos ("animálculos“)

• Fez desenhos detalhados de “animálculos” de água da chuva, de

suas próprias fezes e de material raspado de seus dentes –
Sociedade Real de Londres

• “eu posso julgar por mim mesmo

(apesar de limpar a minha boca, como
já disse), que todas as pessoas que
vivem nesse país não são tantas
quanto os animais vivos que eu
carrego em minha própria boca hoje”

• Leeuwenhoek é considerado o
fundador da microbiologia
O progresso da Microbiologia ficou vinculado ao
desenvolvimento de instrumentos e técnicas
pertinentes ao seu estudo, tais como
microscópios com maior poder de resolução e
técnicas de cultivo e coloração de estruturas
celulares.

A Microbiologia como Ciência começa a ter um

verdadeiro avanço a partir de meados do século XIX, com
o desenvolvimento de microscópios de alta qualidade
juntamente com o aperfeiçoamento de técnicas de
esterilização e cultivo de microrganismos.
 Introdução ao estudo da Microbiologia

• Sécs. XVII-XIX: Abiogênese X Biogênese – Redi,

Spallanzani, Schulze, Schwan e Pasteur
 Introdução ao estudo da Microbiologia

Ano Fatos históricos

1857 Pasteur contesta a geração espontânea dos microrganismos

A ausência de microrganismos no frascos mantido intacto e a

presença no frasco quebrado mostram que o ar contém
microrganismos e que estes, ao entrarem em contato com o líquido
nutritivo e estéril do balão, desenvolvem-se.
 FERMENTAÇÃO E PASTEURIZAÇÃO

• Naquele muitos cientistas acreditavam que o ar

tempo, os açúcares desses fluidos em álcool.
convertia

• Microrganismos chamados de leveduras convertiam os

açúcares em álcool na ausência de ar → fermentação

• Grupo mercadores franceses pediu a Pasteur que

de
descobrisse porque o vinho e a cerveja azedavam.

• Desenvolvimento de um método que impedisse

a deterioração dessas bebidas.
• O azedamento e a deterioração eram causados por
microrganismos diferentes. Na presença de ar, as
bactérias transformam o álcool da bebida em vinagre (ácido acético).

• A solução de Pasteur para o problema da deterioração foi o aquecimento

da cerveja e do vinho o suficiente para matar a maioria das bactérias que
causavam o estrago.

PASTEURIZAÇÃO

Demonstração da relação entre a deterioração de

alimentos e os micro-organismos foi a etapa mais
importante para o estabelecimento da relação entre
doenças e micro-organismos
 Introdução ao estudo da Microbiologia

OUTROS FATOS IMPORTANTES:

Ano Fatos históricos

1796 Jenner cria uma vacina para varíola
1847 Semmelweiss estabelece a causa da febre puerperal
1865 Lister introduz técnicas antissépticas
1876 Koch prova que microrganismos específicos causam doenças específicas
1881 Koch usa ágar para obter uma cultura pura
1892 Iwanowski descobre o vírus
1929 Fleming descobre a penicilina
1983 Luc Montaigner e Robert Gallo anunciam a descoberta do HIV
1995 Anúncio da primeira sequência completa de um genoma bacteriano
Haemophilus influenzae
No final da década de 1870, Koch interessou-se pelo carbúnculo. Analisando
sangue de vítimas do carbúnculo ao microscópio, observou a presença de uma
bactéria de grandes dimensões. Desenvolvendo técnicas microbiológicas,
Koch conseguiu isolar a bactéria.
Animais sadios inoculados com a bactéria purificada apresentavam os
sintomas clássicos do carbúnculo. A partir do sangue destes animais,
Koch re-isolou mesma bactéria. Ele repetiu o experimento, sempre re-
isolando a bactéria dos animais experimentalmente infectados até que
tivesse certeza que tinha encontrado o agente da doença.

Koch também descobriu os agentes

etiológicos da cólera e da tuberculose, as
bactérias Vibrio cholerae e Mycobacterium
tuberculosis, respectivamente. A bactéria
M. tuberculosis é ainda hoje denominada
bacilo de Koch. Seus estudos, combinados
com os de Pasteur, estabeleceram a Teoria
do Germe da Doença.
Em 1877, Koch formulou um conjunto de postulados os quais afirmava
deveriam ser adotados para que se aceitasse uma relação entre um micro-
organismo em particular e uma doença.
 Ignaz Philipp Semmelweis - médico húngaro eternizado
como "salvador das mães“ – Hospital Geral de Viena

1847: redução na incidência de febre puerperal pela prática da

anti-sepsia das mãos. Os médicos matavam 3x mais que as
parteiras naquela região.
 A idade de ouro da microbiologia

• 1857 a 1914 - Avanços rápidos - Pasteur e Robert Koch

 Séc. XIX: Estabelecimento da Microbiologia
como uma Ciência

• Descoberta de agentes de muitas doenças; papel

da imunidade na prevenção e na cura das doenças;

• Atividades químicas de microrganismos;

•Aperfeiçoamento das técnicas de microscopia e

cultivo de microrganismos;
.

• Desenvolvimento de vacinas e técnicas cirúrgicas

 Introdução ao estudo da Microbiologia

MICRORGANISMOS NA HISTÓRIA:

• PESTE BUBÔNICA ou MORTE NEGRA – varreu a Europa durante a

Idade Média, matando 25 milhões de pessoas (1/3 da população);

• Transmitida por ratos e pulgas infectadas pela bactéria Yersinia pestis.

 Introdução ao estudo da Microbiologia

MICRORGANISMOS NA HISTÓRIA:

• GRANDE FOME NA IRLANDA – a requeima da batata

por fungofoi responsável pela grande fome na Irlanda no
século
XIX. Em 1846 cerca de 1,24 milhões de pessoas morreram e
1,2 milhões emigraram;

• Transmitida por batatas infectadas por Phytophthora infestans.

 Introdução ao estudo da Microbiologia

MICRORGANISMOS HOJE:

O desenvolvimento da MICROBIOLOGIA permitiu:

• CONTROLE E TRATAMENTO DE DOENÇAS

• VACINAS

• MEDICAMENTOS

• TRATAMENTO DE ÁGUAS E ESGOTOS

 Introdução ao estudo da Microbiologia

MICRORGANISMOS HOJE:

Importância ambiental:

• Estuda como microrganismos afetam o planeta e a

os
atmosfera
 Introdução ao estudo da Microbiologia

MICRORGANISMOS HOJE:

Importância industrial:

• Primeira utilização de microrganismos no preparo e

foi
conservação de alimentos: pão, vinho, queijos;
• Produção de medicamentos: antibióticos, vitaminas.

• Controle de qualidade: análises microbiológicas desde a obtenção da

matéria-prima até a entrega para consumo do produto acabado.
 Introdução ao estudo da Microbiologia

MICRORGANISMOS HOJE:

Importância industrial:
PRODUTO Contribuição dos Microrganismos
Queijo Crescimento contribui para maturação, sabor e aparência.
Bebidas Levedura é utilizada para converter açúcar, suco de uva ou grão
Alcoólicas de malte tratado em álcool.
Vinagre Determinadas bactérias convertem álcool em ácido acético.
Insulina Hormônio sintético feito a partir de bactérias criadas por
engenharia genética.
Ácido Cítrico Alguns fungos são utilizados na produção.
 Introdução ao estudo da Microbiologia

MICRORGANISMOS HOJE:

Importância agrícola:

• Proteção de e plantas contra proliferação de

animais
microrganismos.
• Microrganismos que matam insetos são utilizados
como
pesticidas naturais.

• São também utilizados para manter a fertilidade de um solo.

• Mais recente: criação de suplementos alimentares.

Controle da população
microbiana
Dessecação, Fogo, Salga, Frio
Egípcios: Embalsamento
Joseph Lister: Técnicas anti-séptica em operações cirúrgicas
Controle da população microbiana

O controle microbiológico pode ser realizado :

INIBIÇÃO: Bloqueio da multiplicação –

ação microbiostática
(MO vivo não multiplica)

MORTE: Perda irreversível da capacidade de

reprodução – ação microbiocida (morte
rápida do microrganismo)
 Ação dos agentes de controle
microbiano

Estrutura da célula bacteriana. A- Pili. B- Ribossomas (danos às proteínas: produtos químicos, calor); C- Cápsula; D-
Parede celular; E- Flagelo; F- Citoplasma; G- Vacúolo; H- Plasmídeo; I- DNA (danos aos ácidos nucléicos: radiação,
calor, produtos químicos); J-Membrana plasmática (alteração na permeabilidade: hipoclorito, iodóforos, quaternário
de amônio)
 Como escolher o melhor método/agente de
controle microbiano?

1. Objetivo que se deseja alcançar:

• Destruir ou remover todos os micro-organismos presentes

• Destruir somente certos tipos de microrganismos
• Prevenir a multiplicação de microrganismos já presentes

2. Tipo de material que será alvo do tratamento:

• Meio de cultura; produtos farmacêuticos, superfície de

instrumentos cirúrgicos,
• Alimentos de consumo humano e animal
• Tecidos vivos
 CONCEITOS

ESTERILIZAÇÃO

Destruição de todas as formas de

vida microbiana, incluindo os
esporos.

Vapor sob pressão (autoclave) Gás

esterilizante (óxido de etileno)

 DESINFECÇÃO

Destruição da maioria dos

patógenos vegetativos em
matéria inanimada.

Pode utilizar métodos físicos

(UV, água fervente ou vapor)
ou químicos (desinfetantes).

Não inativa formas esporuladas.

 ANTISSEPSIA

Destruição da maioria dos patógenos

vegetativos em tecidos vivos pela
inibição do seu crescimento ou
atividade.

Antimicrobianos químicos
(antissépticos).
 DEGERMAÇÃO

Remoção mecânica dos microrganismos de

uma área limitada, como o local em torno de
uma injeção na pele (ex.: algodão
embebido em álcool)

SANITIZAÇÃO

Redução de microrganismos em utensílios

para fins alimentares, equipamentos
industriais e ambientes hospitalares até
níveis seguros de saúde pública (lavagem
com alta temperatura, uso de
sanitizantes).
 ASSEPSIA

Conjunto de medidas utilizadas para prevenir a contaminação

microbiana num material (vivo ou não) ou reduzir o números de
microrganismos já presentes.

A assepsia deve ser mantida após a utilização de métodos,

técnicas e rotinas de controle de população microbiana.
Controle da
população

microbiana

Destruir, inibir ou remover

microrganismos

Agentes físicos Agentes químicos

Microrganismos em nos aceitáveis ou ausência

 Agentes físicos usados no controle
microbiano

FILTRAÇÃO
Liquídos com constituintes que seriam inativados pelo calor

• Filtros de membrana: compostos de substâncias como ésteres

de celulose ou polímeros plásticos, tornaram-se populares para
uso industrial e laboratorial.
 Agentes físicos usados no controle
microbiano

FILTRAÇÃO de AR
• Filtros HEPA (high efficiency particulate air): removem
quase todos os microrganismos maiores que cerca de 0,3
micrometros de diâmetro. (sistemas de ar)
 Agentes físicos usados no controle microbiano

BAIXAS TEMPERATURAS

Bacteriostático

Refrigeração: 1 a 10°C

Congelamento rápido profundo:

Conservação de culturas (- 80 °C)

Liofilização: Água removida por

alto vácuo em baixa temperatura (-
50 °C)
 Agentes físicos usados no controle
microbiano
ALTAS TEMPERATURAS
Calor úmido
Fervura (100 °C) – desnaturação protéica

Autoclave ( 121ºC) - aumento da temperatura em alta pressão.

Usada para esterelizar meios de cultura, soluções, utensílios, etc.
Autoclave: temperaturas acima da água
fervente (121ºC/15min) em um sistema
fechado de volume constante, um aumento
da pressão permitirá um aumento da
temperatura.

Usada para esterilizar: meios de cultura,

soluções, utensílios, etc.
 Agentes físicos usados no controle
microbiano
ALTAS TEMPERATURAS

Pasteurização rápida (HTST - High Temperature and Short Time)

UHT (ultra high temperature)

 PASTEURIZAÇÃO X UHT

São processos de esterilização diferentes.

Na pasteurização a alimento é aquecido a mais de 70 °C por até 20

segundos, e então resfriado muito rapidamente a -4 °C. Esse método,
chamado pasteurização, mata apenas as bactérias que causam doenças – e
conserva o alimento por um período aproximado de sete à dez dias (leite
de saquinho)

Já o processo UHT (ultra high temperature, em inglês) é um processo

de esterilização mais radical: o alimento é aquecido a 140°C por 3
segundos, seguido por resfriamento em uma câmara à vácuo.Como
praticamente nenhuma bactéria sobrevive, ele dura até quatro meses em
temperatura ambiente (leite de caixinha)
 Agentes físicos usados no controle microbiano

CALOR SECO

Chama direta: queima de contaminantes

até tornarem cinzas (ex.: alças).

Incineração: copos de papel, curativos

contaminados, carcaças de animais,
sacos e panos de limpeza.

Esterilização com ar quente: vidros

vazios, agulhas, instrumentos, seringas de
vidro – Forno de Pasteur (180º C por
2 horas)
 Agentes físicos usados no controle microbiano

Ressecamento
Remoção de água dos microrganismos .
Efeito bacteriostático.

Pressão osmótica ambiente hipertônico

ocasiona saída de água da célula

Radiação
 Não Ionizantes (Ultra-Violeta) => baixo poder de penetração
 Ionizantes (Beta, Gama, Raio X) => Grande poder de penetração
 Agentes químicos usados no controle microbiano

Fenol e agentes fenólicos:

– Antisséptico ou desinfetante
– Promovem ruptura de membrana
plasmática, desnaturação de enzimas.
Fenol é raramente usado (padrão de
comparação).
– Hexaclorofeno: derivado do fenol.
Ativo em presença de matéria
orgânica

Biguanidas:
– Ruptura de membrana plasmática;
– Antissepsia da pele e mucosas
(clorexidina);
– Bactericida, fungicida,
não esporocida, atóxico.
Iodo: Antisséptico efetivo –
iodóforos (bactericida e tintura
mucosas). e
irritante das
Cloro: desinfetantes de cloro na forma de
hipoclorito de sódio (NaClO) e cloraminas
(cloro e amônia). Desinfecção de água e
utensílios.

Álcoois: antisséptico ou desinfetante

Ruptura da membrana, desnaturação de
proteínas e dissolução de lipídeos. Mais
efetivo em 70%. Ação depende da retirada
da sujidade.
 AGENTES DE SUPERFÍCIE

Sabões e detergentes não iônicos:

Remoção mecânica dos microrganismos
Alguns podem ter antimicrobianos (Triclosan)

Detergentes aniônicos:
Lauril sulfato de sódio, inativação ou ruptura
de enzimas

Detergentes catiônicos:
Quaternário de amônio, inibição enzimática,
desnaturação protéica e ruptura da membran a
plasmática. Cepacol- cloreto de
cetilpiridínio/cloreto de benzalcônio
Aldeídos (Gluteraldeído e
formaldeído)
Desnaturação protéica;
Desinfecção de
equipamentos
médicos (2 % por 30 min).

Peroxigênios
O3 usado para auxiliar na
cloração
H2O2 – antisséptico fraco, bom
desinfetante.
 METAIS E SEUS COMPOSTOS

Desnaturação protéica, bactericidas,

antissépticos ou desinfetantes;

AgNO3: pode ser usado para

prevenir infecções gonocócicas
oculares.

Cloreto de mercúrio: ação lenta.

Antissepsia de pele e mucosa.
Tóxico (uso não recomendado).

CuSO4: algicida; ativo mesmo em

baixa concentração de matéria
orgânica.
Quimioterápicos

Para o controle de doenças infecciosas. Uso interno.

Principal propriedade: Toxicidade seletiva – mata o agente

infeccioso sem causar dano ao hospedeiro.

Podem ser antibióticos ou agentes sintéticos

Características de um agente químico ideal

• Amplo espectro;
• Toxicidade seletiva;
• Solubilidade, estabilidade, odor relativo;
• Não corrosivo, não deve corar;
• Poder de penetração e poder residual;
• Não combinar com substâncias orgânicas;
• Disponibilidade e preço razoável;
• Não poluir o meio ambiente.
Fatores que influenciam a efetividade dos tratamentos

Tamanho da população microbiana: quanto maior a carga microbiana,

maior o período de tempo para eliminar todos os micro- organismos.

Intensidade ou concentração do método/agente microbicida:

quanto menor a intensidade ou concentração do agente microbicida, maior o
período de tempo para eliminar toda a população microbiana

Tempo de exposição ao agente microbicida: quanto maior o tempo de

exposição ao agente, maior será o número de células microbianas mortas;