Resumos do VII Congresso Brasileiro de Agroecologia – Fortaleza/CE – 12 a 16/12/2011 10886 - Atividade antagonista de oito isolado de Trichoderma spp. a dois isolados de Fusarium sp., in vitro. Antagonist activity of eight isolates of Trichoderma spp. two isolates of Fusarium sp. in vitro. SOARES, Eriksen Patric Silva¹; AZEVEDO, Daiana Maria Queiroz²; RODRIGUES, Gabriel Rebelo²; FROIS, Mauricio Rodrigues2; SILVA, Gleiciane Carla Gomes da2; SALES, Nilza de Lima Pereira2. 1 Mestrando em produção vegetal semiárido, Universidade estadual de Montes Claros - UNIMONTES, campus Janaúba – MG. eriksenpatric@yahoo.com.br; 2Universidade Federal de Minas Gerais–UFMG, campus Montes Claros - MG. daianamaria3@yahoo.com.br; gabriel.rebelorodrigues@gmail.com; mauriciofrois20@yahoo.com.br; gleicinhacarla@yahoo.com.br; nsales_ufmg@hotmail.com. Resumo: A definição de controle biológico, é a diminuição da soma de inoculo ou das atividades determinantes da doença, provocada por um patógeno, realizada por um ou mais organismos que não seja o homem. Objetivou-se com esse estudo avaliar o a porcentagem de inibição do agente de controle biológico (Trichoderma sp.), sobre o patógeno (Fusarium spp.). O experimento foi desenvolvido seguindo o delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial 8x2 sendo oito isolados de Trichoderma sp. (T1, T2, T3, T4, T5, T6, T7 e T8) versus dois isolados de Fusarium sp. (F1 e F2). Avaliou-se a porcentagem de inibição dos tratamentos sobre o patógeno. Observou-se que o Trichoderma spp. possui grande potencial de inibição de Fusarium sp., sendo observada diferença entre os isolados. Para os dois isolado de Fusarium sp. o tratamento que obteve melhor media de porcentagem de inibição foi o T8, sendo seguido pelo tratamento 2 para o F1 e sendo seguido pelo tratamento 6 para o F2. Palavras -Chave: Inibição, controle biológico, pareamento. Abstract: The definition of biological control is to decrease the amount of inoculum or activities determinants of disease caused by a pathogen, carried out by one or more entities other than the man. The objective of this study to evaluate him to percentage of inhibition of biological control agent (Trichoderma sp.) On the pathogen (Fusarium spp.). The experiment was conducted following a completely randomized design in factorial 8x2 with eight isolates of Trichoderma sp. (T1, T2, T3, T4, T5, T6, T7 and T8) versus two isolates of Fusarium sp. (F1 and F2). We evaluated the percentage of inhibition of the treatments on the pathogen. It was observed that Trichoderma spp. has great potential for inhibition of Fusarium sp. difference was observed among isolates. For both isolated from Fusarium sp. treatment who had the best average of the percentage of inhibition was T8, followed by treatment 2 for F1 and being followed by treatment for 6 F2. Keywords: Inhibition, biological control, pairing. Introdução Segundo Henning (2005), a importância da patologia de sementes reside no fato de que aproximadamente 90% das culturas utilizadas para alimentação são propagadas por sementes. Dessas, o milho (Zea mays L.) é uma das principais propagadas por sementes. Os principais fungos patogênicos transmitidos pelas sementes de milho são Fusarium moniliforme, Diplodia maydis e F. graminearum Schwabe (GOMES et al., 1981; LUZ, Cadernos de Agroecologia – ISSN 2236-7934 – Vol 6, No. 2, Dez 2011 1 Resumos do VII Congresso Brasileiro de Agroecologia – Fortaleza/CE – 12 a 16/12/2011 1997; TANAKA; BALMER, 1980). A seleção de microrganismos antagonista constitui a base essencial de todo o programa de controle biológico de doenças de plantas, determinando as chances de sucesso do controle biológico. Todos os métodos de seleção de antagonistas são baseados em evidências de que o organismo pretendente intervém, de algum modo, no desenvolvimento do patógeno ou reduz a doença, sendo que interferência implica em algumas formas de destruição ou inibição, podendo ser analisada tanto “in vitro” como “in vivo” (MELO, 1998). Um protocolo de seleção de antagonistas para controle biológico progride logicamente através de vários estágios, sendo em teoria de “in vitro” (testes em placas de Petri e/ou lâminas) para “in vivo” sob condições controladas (MACHADO, 1999; MELO, 1998). O método de pareamento de culturas fungicas é o mais largamente utilizado em estudos de antagonismo in vitro, existindo numerosos relatos de sucesso na seleção de microrganismos, visando ao controle biológico de fitopatógenos. E ainda o teste in vitro tem a possibilidade de avalias um grade número de isolados antagonistas (MARIANO, 1993). É um método que permite mensurar o crescimento micelial, bem como os tipos de interação, como hiperparasitismo, formação de clamidosporos, dentre outros (FARIA et al., 2002). O Trichoderma spp. é um importantes fungos saprófitas de solo, e várias espécies são antagônicas a outros microrganismos (MELO, 1996). Os mecanismos de ação pelos quais o Trichoderma spp. pode atuar são: antibiose, hiperparasitismo, competição e também pode atuar em alguns casos através de promoção de crescimento (MELO, 1996). Tendo em vista a propriedade inibitória de Trichoderma spp. sobre o desenvolvimento de fungos patogênicos e a importância de Fusarium sp., para o sementes de milho, o presente trabalho teve por objetivo investigar o a atividade antagonista, “in vitro”, do Trichoderma spp. ao Fusarium sp. Material e métodos O presente trabalho foi conduzido no Laboratório de Fitopatologia no Instituto de Ciências Agrárias da UFMG, em Montes Claros, Minas Gerais. Foram testados 8 isolados de Trichoderma spp. em atividade antagônica a 2 isolados de Fusarium sp. Os isolados de Trichoderma spp., foram obtidos de rizosrefa de sorgo ICA (T1), em rizoplano sorgo ICA (T2), rizosfera milho ICA (T3), rizoplano milho ICA (T4), isolado da micoteca 13 (T5), isolado micoteca 19 (T6), rizoplano milho comunidade de Jacaré Distrito de Montes Claros – MG (T7), e um isolado obtido de Lavra – MG (T8). Os isolados de Fusarium sp. foram obtidos de dois cultivares de sementes de milho sendo o isolado 1 de milho Argentino (F1), e o segundo de Hibrido Duplo (F2). Os discos de micélio obtidos das margens de colônias de Trichoderma spp. e Fusarium sp., foram cultivadas, por 7 dias, em meio BDA, a 25ºC em fotoperíodo de 12 horas (ALFENAS; MAFIA, 2007). Para o ensaio in vitro foi empregado o método de pareamento de disco de culturas fungicas. Cada placa de Petri de 9 cm de diâmetro, contendo o meio de cultura (BDA), recebeu dois discos de micélio de 5 mm de diâmetro, em lados opostos da placa, sendo 2 Cadernos de Agroecologia – ISSN 2236-7934 – Vol 6, No. 2, Dez 2011 Resumos do VII Congresso Brasileiro de Agroecologia – Fortaleza/CE – 12 a 16/12/2011 um do patógeno fusarium sp. (F1 e F2) e outro do isolado de Trichoderma spp. (T1, T2, T3, T4, T5, T6, T7 e T8) a ser avaliado. Como testemunha, usou-se o patógeno cultivado isoladamente, colocando-se um disco de micélio no centro de cada placa. As placas foram mantidas em BOD 25 + ou – 2°C e fotoperíodo de 12 horas. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, em esquema fatorial 8x2, onde foram utilizados oito diferentes isolados de Trichoderma (T1, T2, T3, T4, T5, T6, T7 e T8) para 2 diferentes isolado de Fusarium (F1 e F2) , com 4 repetições, cada placa constituindo uma repetição. As avaliações foram ao sétimo dias de incubação. Decorrido esse período determinou-se a colônias dos patógenos, por meio de uma régua milimetrada medindo-se o comprimento das culturas, e para a testemunha foi feita a medição nos dois sentidos da placa (horizontal e vertical) . Para o cálculo da porcentagem de inibição do crescimento micelial, foi aplicada a fórmula: % inibição = [(crtest – crtrat) /crtest] x 100, onde: crtest = crescimento radial da testemunha; crtrat = crescimento radial tratamento ( MENTEN et al., 1976). Resultados e discussão Os resultados foram significativos e mostram que a maioria dos tratamentos não diferiram estatisticamente entre si, apenas o tratamento T8 foi estatisticamente diferente do tratamento T3, T4 e T6 para o F1. O tratamento que obteve maior média de porcentagem de inibição foi o isolado T8, aproximadamente 85 % de inibição contra o F1, e sendo seguindo pelo T2, que impetrou em torno de 79% de inibição. E para o F2, somente o T4 diferiu estatisticamente dos tratamento T6, T7 e T8, novamente o T8 obteve melhor media sendo, aproximadamente 80% de inibição contra o F2, sendo seguido pelo T6 e T7, que alcançou em torno de 78 e 77% de inibição respectivamente (Tabela 1). Cadernos de Agroecologia – ISSN 2236-7934 – Vol 6, No. 2, Dez 2011 3 Resumos do VII Congresso Brasileiro de Agroecologia – Fortaleza/CE – 12 a 16/12/2011 Tabela 1: Médias da porcentagem de inibição do Fusarium sp.obtido de milho argentino (F1), e médias da porcentagem de inibição do Fusarium sp. obtido de milho hibrido duplo (F2) em cultivo pareado com oito isolados de Trichoderma spp., Montes Claros, 2010. Fusarim sp. F1 Tratamentos Porcentagem de inibição (médias) e comparações T1 77.6667 AB T2 78.6667 AB T3 74.0000 B T4 72.0000 B T5 77.6667 AB T6 76.6667 B T7 77.3333 AB T8 84.6667 A CV 4.346 Fusarim sp. F2 Tratamentos Porcentagem de inibição (médias) e comparações T1 76.7898 AB T2 74.3649 AB T3 74.7113 AB T4 69.8614 B T5 76.7898 AB T6 77.8291 A T7 77.1363 A T8 80.6005 A CV 3.921 *Médias seguidas por mesma letra maiúsculas na coluna e minúscula nas linhas não diferem entre si pelo teste Tukey a 5% de probabilidade. Este trabalho corrobora com Silva et al. (2008), onde foi realizado experimento testando Trichoderma sp. contra Phytophthora citrophthora, sendo confirmado também por Bomfim et al. (2009), que realizou experimento com Trichoderma sp., para inibir o crescimento Rhyzopus. Figura 1 : Porcentagem de inibição do Fusarium sp. obtido de milho hibrido duplo (F2) em cultivo pareado com oito isolados de Trichoderma spp., Montes Claros, 2010. 4 Cadernos de Agroecologia – ISSN 2236-7934 – Vol 6, No. 2, Dez 2011 Resumos do VII Congresso Brasileiro de Agroecologia – Fortaleza/CE – 12 a 16/12/2011 E ainda alcançou resultados parecidos com os obtidos por Louzada et al. (2009), que trabalhando com controle biológico usando diferentes isolados de Trichoderma spp., contra Sclerotinia sclerotiorum e Fusarium solani in vitro, observou que o diferentes isolados tinha efeito diferente sobre o mesmo patógeno, o mesmo observado neste trabalho. Em relação ao diferentes isolados de Fusarium sp., essas influenciaram no crescimento micelial. Para todos os oito isolados de Trichoderma spp. verificou que um mesmo isolado de Trichoderma spp. teve efeito inibitório diferente para os isolados de Fusarium sp. (figura 1). Isso pode ser explicado por ser diferentes isolados de Fusarium sp., o F2 é mais agressivo que o F1, por isso teve uma menos percentagem de inibição pelo Trichoderma spp. Conclusão Com o presente trabalho, foram obtidos dados que indicam o potencial antagonista de oito isolados de Trichoderma spp. provenientes de diferentes áreas, contra dois isolados de Fusarium sp. E o isolado de Trichoderma spp. que obteve maiores medias de porcentagem de inibição foi o isolado 8. Sendo que o T4 foi o tratamento que obteve piores porcentagem de inibição e diferiu estatisticamente dos demais nos dois experimentos. Agradecimentos A FAPEMIG pelo apoio financeiro. Referências ALFENAS, A.C.; MAFIA, R.G. Métodos em fitopatologia. Viçosa: UFV. 382p. 2007. BETTIOL, W. (Ed.). Controle Biológico de Doenças de Plantas. Jaguariúna. 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