Marcadores para el diagnstico genrico en la investigacin criminalstica de semen.

Resea analtica

R. Sarmiento G., H. J. Morris Q. ISSN 0258-5 5 !ol. "!# N$ %# 200&

Marcadores para el diagnstico genrico en la investigacin criminalstica de semen. Resea analtica

R. Sarmiento G.*, H. J. Morris Q.** * Laboratorio Provincial de Criminalstica Santiago de Cuba, **Centro de Estudios de Biotecnologa Industrial (CEBI), Universidad de Oriente

Resumen
En esta revisin, se ofrece una valoracin de la importancia que tiene el diagnstico genrico en la investigacin criminalstica de semen para el esclarecimiento y probanza de los delitos contra el normal desarrollo de las relaciones sexuales. Se dan a conocer los diferentes mtodos empleados por la medicina forense, desde los ms rudimentarios para el diagnstico de semen, hasta las tcnicas avanzadas de inmunodiagnstico que constituyen lo ms relevante que se conoce hoy a nivel mundial. Se realiza un anlisis de los trabajos que han sido publicados por los autores ms conocidos en esta temtica, haciendo nfasis en los del doctor Sensabaugh, que desde el ao 1978 logr el aislamiento y purificacin de una protena altamente inmunognica, designada como P30, la que es, hasta ahora, considerada el marcador por excelencia para la determinacin genrica en el semen. Se brindan recomendaciones acerca de la estrategia para seguir en nuestro pas, haciendo previamente un anlisis de la situacin actual y de las implicaciones del desarrollo de nuevas tecnologas en la ciencia criminalstica. Palabras claves: medicina forense, diagnstico genrico de semen, P30, inmunodiagnstico.

Abstract
A valorization of the importance of generic diagnostic on semen criminalistic investigation for the enlightening and evidence of transgression against normal patterns of sexual relationships is given in the present review. The different methods used in forensic medicine for semen diagnostic, since the rudimentary ones until the most recent and relevant world-wide immunodiagnostic techniques were discussed. An analysis of the most widespread papers on this topic was made with emphasis in Sensabaugh research from 1978 concerning the isolation and purification of a highly immunogenic protein, named P30, which is considered the marker par excellence for semen generic determination. Recommendations on Cuban strategies taking into account the present situation and the implications for the development of new technologies in the criminalistic science were outlined. Key words: forensic medicine, semen generic diagnostic, P30, immunodiagnostic.

Introduccin
En los ltimos aos, se ha apreciado un incremento en la radicacin de causas vinculadas a los delitos sexuales, fundamentalmente la violacin. Se destaca, adems, la insuficiente presencia de pruebas periciales, hasta el punto de ser esta tipicidad delictiva a la que menos aporta la tcnica criminalstica. Sin embargo, por ser conocido el delito de violacin doctrinalmente

como un hecho de soledad, donde slo se cuenta con las declaraciones de los encartados (vctima y victimario), adquiere mayor importancia el aporte que puedan brindar dichas pruebas en su investigacin /1/. En los casos de consumacin de delitos sin testigos, las pruebas materiales adquieren un significado excepcionalmente importante. Algunas veces

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constituyen el nico medio para solucionar los difciles problemas que se presentan ante el investigador, al aportar elementos probatorios cientficamente demostrados. Es por ello, que el peritaje de las pruebas materiales posibilita determinar la forma en que fue consumado el delito, obtener pruebas que permitan establecer la veracidad del hecho y que se demuestre la culpabilidad o inocencia de los acusados. En la investigacin de delitos, el hallazgo de objetos o sustancias, gracias a su carcter y lugar de descubrimiento, tiene por s solo el significado de prueba material. Especficamente en la violacin, la presencia de semen en la vagina, el vestuario u otra parte del cuerpo de la vctima suele darnos informacin valiosa que puede emplearse en la investigacin, ayudando tanto a la propia calificacin del delito como al establecimiento del grado de participacin de los autores /2/. Sin embargo, el diagnstico genrico en la investigacin criminalstica de semen, ha dejado de desempear su papel, segn Sarmiento /1/, a partir de la revisin de 175 expedientes de fase preparatoria, radicados en el perodo 1996-2000. Se pudo constatar, que a pesar de la solicitud de peritaje de semen en un 42 % de los hechos, cifra insuficiente, en slo uno de los casos, el peritaje aport criterios de imputacin, debido, fundamentalmente, a la falta de medios y tcnicas adecuadas que brinden mayor credibilidad al diagnstico criminalstico /1/. Tomando en consideracin dichos antecedentes, en esta resea analtica se abordan algunas reflexiones tericas sobre el estado actual de la temtica a nivel mundial, y la conveniencia de buscar nuevos marcadores y nuevas tcnicas para el diagnstico genrico en la investigacin de semen.

C a ra cterstica s del esperma

El esperma total, recin emitido, es un lquido filante, cremoso, de color opalino, que tiende a amarillo verdoso cuando pasa el tiempo y de olor tpico. Consta de dos elementos diferentes: las clulas o espermatozoides procedentes de los tubos seminferos del testculo, y el plasma seminal, que procede del epiddimo, prstata, vesculas seminales y glndulas de Cowper. El lquido espermtico puede ser caracterizado desde el punto de vista morfolgico a travs del espermatozoide, pero no podra decirse lo mismo en cuanto a la composicin del plasma seminal, el que presenta las siguientes caractersticas bioqumicas: - glcidos: fructosa, ribosa, inositol, sorbitol, - compuestos nitrogenados: gran concentracin de aminocidos libres, aminas, ergotiomna, - componentes antignicos: albmina, dos o tres alfaglobulinas (una es la fosfatasa cida y la otra una glicoprotena), dos beta-globulinas (una de ellas es una siderofilina) y una gamma-globulina, - enzimticas: fibrinolisna, amino-oxidasa, fosfatasas cida y alcalina, - minerales: zinc y calcio /2/. Los procedimientos ms comunes usados para la identificacin del semen se centran en la deteccin de los espermatozoides o de la actividad de la fosfatasa cida prosttica. Los mtodos que incluyen la deteccin de espermina, colina o antgenos del semen son los menos utilizados; desafortunadamente, ninguno de estos procedimientos est exento de uno o ms problemas. Se conocen tambin otras tcnicas y mtodos que han sido empleados en el diagnstico genrico, que van desde las pruebas cristalogrficas, orientadas a la formacin de microcristales, las tcnicas cromatogrficas y electroforticas, que hoy da han perdido el favor de los investigadores, hasta los mtodos inmunolgicos a travs de tcnicas inmunoenzimticas que demuestran la especificidad proteica del rgano que las produce /1-3/.

Desarrollo
La identificacin del semen es de vital importancia en la investigacin de la violacin y otros delitos que tienen implcita la agresin sexual. El lquido espermtico se puede presentar al investigador en cuatro formas distintas: como mancha; impregnado en un tejido; como fluido, mezclado con otros fluidos corporales, como la secrecin vaginal, y por ltimo, como semen o lquido espermtico.

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Todos los procedimientos relacionados, con mayor o menor efectividad, logran establecer de forma cualitativa la presencia de semen; no obstante, unas tcnicas superan a otras en este objetivo. En nuestro pas, desde hace muchos aos, se ha estandarizado en los laboratorios la tcnica de la fosfatasa cida como una reaccin orientadora y la microscopa como prueba de certeza, o sea, la observacin al microscopio de una clula espermtica nos permite afirmar que en una determinada muestra investigada existe presencia de semen /4/. El hecho de no descubrir un espermatozoide completo, no debe conducir a la conclusin de que la mancha no es esperma. En efecto, la no deteccin de clulas espermticas en ellas puede atribuirse a varias razones: 1. La deshidratacin de los espermatozoides en la mancha los hace frgiles y se rompen en cabezas y colas. 2. Los espermatozoides se adhieren tenazmente al tejido, resultando a menudo muy difcil su elucin. 3. La difusin de los espermatozoides no es uniforme en la mancha, y cuando se emplean tcnicas de extraccin y tincin directas del tejido, manchado, se corre el riesgo de investigar una parte donde no existan espermatozoides. Por otro lado, el lquido espermtico puede no contener espermatozoides; es decir puede proceder de un sujeto asosprmico o sometido a vasectoma. De este modo, la imposibilidad de detectar espermatozoides en un material sospechoso, de ningn modo contraindica el semen. En el caso de la prueba de la fosfatasa cida, los problemas son diferentes, pues esta enzima no es exclusiva del semen o tejido prosttico, sino que su actividad es de naturaleza ubicua. Existen evidencias, de que la fosfatasa cida prosttica y la fosfatasa cida encontradas en secreciones vaginales normales son genticamente idnticas y de que ambas guardan tambin identidad con la fosfatasa cida lisosomal encontrada en la mayor parte de los tejidos, por lo tanto, es cuestionable la base gentica de la especificidad de

este ensayo. La prueba cuantitativa slo puede basarse sobre el nivel extraordinariamente alto de la actividad de la fosfatasa cida en el semen; los bajos niveles de actividad encontrados con frecuencia en los lavados vaginales post-coitales resultan, de esta manera, equvocos con respecto al problema de la deteccin del semen /5/. En la prctica forense comn, la deteccin de la fosfatasa cida prosttica es considerada presuntivamente antes de un diagnstico por muchos patlogos y especialistas forenses. La actividad de la fosfatasa cida en fuentes endgenas vaginales o de muchos materiales que contienen la enzima, puede arrojar resultados positivos falsos. La enzima, adems, declina en actividad bajo almacenamiento a temperatura ambiente. Por esas razones, cuando pequeas cantidades de semen pueden estar presentes, tanto en eluidos como en manchas en ropa interior y en exudados vaginales, la actividad de la fosfatasa cida no puede ser atribuida exclusivamente al semen. Otras pruebas para la identificacin del semen son tambin sospechosas con relacin a su especificidad; experimentos, empleando como marcadores la colina, gamma glutamil-transpeptidasa (GGT), espermina y lactato deshidrogenasa, han presentado significativas desventajas /2, 3/. De lo expuesto con anterioridad es evidente que resultara conveniente disponer de pruebas alternativas para la deteccin del semen. Una buena prueba alternativa debe satisfacer diversos criterios. En primer lugar, debe basarse sobre la deteccin de un marcador del semen para el cual pudiera demostrarse la base biolgica de la especificidad. Esta condicin virtualmente obliga a que el marcador sea una protena, ya que la sntesis de la protena, est bajo un control gentico directo. Para evitar el problema que se presenta en sujetos asosprmicos o que han sufrido una vasectoma, el marcador debe ser un componente del plasma seminal, que es donde se encuentra la mayor concentracin de componentes proteicos. Un buen marcador debe ser estable en manchas y en el medio vaginal. Por ltimo, ya que la dilucin eficaz de semen en la mezcla vaginal postcoital podra ser hasta de 1:2000, el marcador debe ser detectable en concentraciones mnimas /6, 7/.

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En la presente revisin, se ofrece una caracterizacin de una protena del plasma seminal que al parecer satisface las exigencias anteriores para un buen marcador del semen. El nombre PSA Prostate Specific Antigen, fue tomado de una glicoprotena de origen prosttico aislada por Wang et al. /8/. Con posterioridad, otros autores revelaron que esta molcula era idntica a dos protenas conocidas como seminoprotena del tipo gamma y la protena designada como P30, aisladas y purificadas por Hara et al. /9/ y Sensabaugh /10/, respectivamente. Este ltimo investigador la introdujo en el diagnstico genrico en las investigaciones forenses, sentando las pautas para su establecimiento como el marcador ms completo para el diagnstico genrico de semen.

La distribucin de protenas en el plasma seminal y el plasma sanguneo humano en electroforesis en gel con SDS es completamente diferente. Las diferencias cualitativas entre los patrones de estos dos lquidos y de otras secreciones como la leche o secreciones vaginales, son igualmente notables /10/. El plasma seminal humano contiene diversas especies de protenas importantes. Las dos bandas mayoritarias en la superficie del gel son la lactoferrna (LF) y la albmina (ALB), con pesos moleculares de 80 000 y 68 000 Dalton, respectivamente. Estas dos protenas se encuentran en muchas secreciones. La banda con el peso molecular de cerca de 50 000 Dalton es la subunidad de la fosfatasa cida (FA). La enzima natural es un dmero con peso molecular de alrededor de 100 000 Dalton. Se observa una banda de intensidad secundaria en una posicin correspondiente a los 41 000 Dalton, y por debajo de ella, una banda intensa que indica una protena de cerca de 30 000 Dalton. Estas protenas, que al parecer no estn presentes en otros lquidos o secreciones, se designaron como p41 y p30, respectivamente; tambin se evidenci la especificidad del plasma seminal para algunos de los pptidos que se encuentran en lmite de los 10 y 20 000 Dalton. Con excepcin de estos pptidos de bajo peso molecular, las protenas descritas anteriormente muestran una pequea variacin individual, y todas estn presentes en hombres con vasectoma. La especificidad manifiesta en el semen de la p30, sugiri la posibilidad de que esta protena se sometiera a futuras pruebas como marcador del semen. En apoyo a esto, en una caracterizacin inicial de los antgenos del plasma seminal, se haba identificado una protena con peso molecular de cerca de 31 000 Dalton como especfica del semen. Esta protena se design como E-1, de acuerdo con su movilidad en la electroforesis convencional /11, 12/. Con un antisuero obtenido por Li y Beling /13/, se confirm la identidad de la p30 y la E-1: el antisuero anti-E-1 reaccionaba con un preparado bastante puro de p30. Como en este estudio originalmente se us la designacin de p30, sta ha sido la que con ms frecuencia ha seguido emplendose para su identificacin. En la actualidad se le denomina, adems, como gamma seminoprotena y como PSA (antgeno especfico de la prstata).

Identifica cin de la s protena s especfica s del semen

La identificacin de las posibles protenas especficas del semen se realiz comparando las protenas del plasma seminal humano con las protenas de otros lquidos fisiolgicos mediante electroforesis en geles de poliacrilamida con dodecilsulfato de sodio (SDS-PAGE). Esta tcnica electrofortica separa las cadenas de polipptidos desnaturalizados en funcin del peso molecular, en lugar de la carga, y permite la deteccin de hasta cuarenta polipptidos en el plasma seminal. Este mtodo tiene dos ventajas sobre los procedimientos electroforticos e inmunoelectroforticos convencionales, usados con anterioridad en la caracterizacin del plasma seminal y otros lquidos fisiolgicos. En primer lugar, la deteccin de protenas no depende de su antigenicidad, como en el caso de la inmunoelectroforesis; de este modo pueden detectarse protenas que no son antgenos. En segundo lugar, el mtodo evita los inconvenientes asociados con la migracin de las glicoprotenas en la electroforesis; convencional, en la que muchas protenas estn polidispersas con respecto a la carga a causa del carbohidrato enlazado covalentemente. La fosfatasa cida prosttica, por ejemplo, migra en forma de mltiples bandas en la electroforesis convencional, pero migra como una banda simple en la electroforesis en gel con SDS.

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An lisis de la p30 en el semen, tejidos del a pa ra to reproductor ma sculino y otros lquidos corpora les
En el trabajo original de Sensabaugh /10/, la concentracin de p30 en el semen humano normal se determin a travs de la tcnica de inmunodifusin radial cuantitativa /14/. La concentracin media encontrada fue de 1,92 mg/mL, con un lmite de 0,24 a 5,5 mg/mL (n= 17); incluso, en el lmite ms bajo, la p30 se presenta a niveles fcilmente detectables. El ensayo de inmunodifusin doble /15/ se us para evaluar los tejidos del aparato reproductor masculino e identificar el origen histolgico de la protena p30. No se observ reaccin con los extractos del tejido testicular, vas deferentes o vescula seminal. La presencia de la protena en el plasma seminal de hombres con vasectoma ya exclua el origen testicular. Se obtuvo una reaccin positiva del antisuero con extractos de tejido prosttico, lo que indic la alta probabilidad de que la glndula prosttica fuera el tejido de origen. Li y Shulman /11, 12/ sugirieron la posibilidad de que el origen de la p30 no fuera prosttico; sin embargo, en sus experimentos no evaluaron directamente el tejido prosttico como se hizo en el trabajo de Sensabaugh /10/, y el mtodo utilizado tal vez no result lo suficientemente sensible para detectar el antgeno en dicho tejido. El anlisis de inmunodifusiondifusin doble, mostr que la concentracin de p30 en el extracto prosttico era de 1 al 2 % de la encontrada en el semen. Por otra parte, el anlisis de varios lquidos fisiolgicos humanos con el antisuero ms sensible indic que la p30 no est presente a niveles detectables en el suero sanguneo, el hemolizado de eritrocitos, las lgrimas, el sudor, la saliva, la leche, la sangre menstrual, la orina o los lquidos vaginales. Estos hallazgos no indicaban, an de manera inequvoca, la especificidad de esta protena en la glndula prosttica y el semen, porque exista la posibilidad de que un anlisis ms sensible, inmunolgico u otro, detectara la protena en otros tejidos o secreciones. No obstante, si p30 estuviese presente en alguno de los lquidos evaluados, su concentracin sera menor de 1/100 con relacin a la hallada en el plasma seminal.

Con posterioridad se realizaron pruebas de reactividad de la p30 con fluidos y soluciones no ensayados con anterioridad. Ninguno de los materiales evaluados, con excepcin del semen humano, daba una reaccin positiva. Entre los materiales no reactivos figuraban los contenidos estomacales, la bilis, la leche de vaca, el semen de gato, el semen de chimpanc, la yema y la clara de huevo, el caf, la cola, el sirope, el detergente, lociones bronceadoras, vaselina, locin rizadora y otros productos de marcas registradas y con aspecto semejante al lquido espermtico/10/.

C onocimientos recientes a cerca de la biologa y ca ra cterstica s bioqumica s del a ntgeno especfico de la prsta ta
Desde su identificacin en el fluido seminal por Seregni et al. /16/, se ha obtenido variada informacin sobre la biologa y la expresin del antgeno especfico de la prstata (PSA). Se conoce que es una glicoprotena de 30 000 Dalton, compuesta por 237 aminocidos, con un 7 % de carbohidratos. Estructural y funcionalmente, la PSA se asemeja a la calicrena, y su papel fisiolgico, de reciente conocimiento, est relacionado, principalmente, con la degradacin de las protenas fundamentales del cogulo seminal (seminogelinas I y II y fibronectina), siendo importante en la liquefaccin del semen. Los genes del PSA se localizan en la regin 13q del cromosoma 19, y tienen un alto grado de homologa (ms del 80 %) con los genes de la calicrena glandular humana. La sntesis y expresin de la PSA estn, aunque no exclusivamente, relacionadas con la hiperplasia benigna y los tejidos cancerosos de la prstata. Muchos factores pueden influir en la sntesis y produccin de la p30, de ellos los ms importantes son los niveles de andrgenos, cido retinoico y el factor de estimulacin del crecimiento /16/. Se han experimentado avances significativos en el conocimiento de las isoformas moleculares de PSA. En el lquido seminal , el PSA parece estar parcialmente ligado a la serpina (inhibidor de la protena C). En suero, est predominantemente asociado a la alfa-1 anti-quimotripsina, y en pequea cantidad a la alfa-2 macroglobulina. Estos nuevos hallazgos tendrn, sin duda, implicaciones para su aplicacin clnica como marcador del cncer de prstata. Se han desarrollado

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ensayos comerciales para la deteccin del PSA en suero y, a pesar de que ya cuenta con un amplio uso, se ha publicado poco sobre sus caractersticas inmunolgicas. En este sentido, la demostracin de cinco epitopos principales en el PSA est referida en un estudio de Belanger /17/, con el empleo de anticuerpos poli y monoclonales.

a las reacciones inmunolgicas, la prueba positiva de la p30 excluye cualquier duda sobre el posible origen vegetal con relacin a la coloracin positiva de la fosfatasa cida. En cuanto a la deteccin de indicios de semen en los exudados o lavados vaginales, la prueba para la p30 es de valor limitado a causa de la sensibilidad restringida del inmunoensayo existente. La supervivencia de la p30 en los lquidos vaginales postcoitales parece ser paralela a la de la actividad de la fosfatasa cida, pero, en vista de que el anlisis inmunolgico actual para la p30 es casi diez veces menos sensible que el anlisis de la fosfatasa cida, la p30 en estos momentos puede detectarse slo en el material vaginal postcoital, que contenga una cantidad relativamente grande de residuo seminal. En el caso usual, la dilucin eficaz de semen en la mezcla vaginal es tal que la concentracin de p30 est por debajo de los lmites actuales de deteccin. Si los procedimientos de anlisis ms sensibles verifican la especificidad de la p30, relativa a las secreciones vaginales normales, su deteccin podra adquirir un valor an mayor como prueba definitiva para la identificacin de indicios de semen en la mezcla vaginal despus del coito. Cabe sealar, que el inmunoensayo para la p30 difiere de la prueba inmunolgica convencional. Los antisueros evaluados para las pruebas inmunolgicas convencionales deben demostrar que el supuesto marcador especfico del semen sea sintetizado en uno de los tejidos asociados con el aparato reproductor masculino y debe evidenciarse que la sntesis del marcador se limite a ese tejido. Por ejemplo, los espermatozoides se conocen como marcadores especficos del semen, porque ellos son el nico producto del tejido de la cadena de clulas germinales masculinas en los testculos. Por extensin, las protenas especficas de los espermatozoides como la lactato-deshidrogenasa tambin son especficas del semen. No obstante, la especificidad biolgica de la fosfatasa cida prosttica depende de su actividad elevada en el semen; la enzima en s parece ser genticamente idntica a las isoformas sintetizadas en otros fluidos, entre ellos el vaginal. Esta breve discusin seala que, aunque la demostracin de la especificidad emprica y la

Discusin general
Un buen marcador para un lquido fisiolgico como el semen debe ser estable, especfico, detectable en concentraciones mnimas y estar presente en todos los individuos. A partir de estos criterios, la cuestin de la especificidad es el centro de la atencin y tambin la que se presta a mayor confusin. La especificidad de una prueba para el semen puede definirse en trminos empricos y biolgicos. La especificidad emprica se demuestra al indicar que el marcador del semen no puede detectarse en ningn material, con excepcin de las secreciones y tejido del aparato reproductor masculino. Sin embargo, la especificidad emprica es por definicin condicional, porque siempre es posible que el marcador pueda detectarse, con excepcin del material del aparato genital masculino, por una prueba ms sensible o bajo diferentes condiciones de ensayo. Adems, la especificidad emprica es tambin relativa, porque se extiende slo hasta los materiales probados; existe la posibilidad de que el supuesto marcador pueda aun ser encontrado en algn material no evaluado. La definicin de la especificidad en trminos biolgicos implica diferentes criterios. Se necesitan mtodos de anlisis ms sensibles para verificar estas indicaciones de la especificidad /10/. Con relacin a los criterios de especificidad definidos, el inmunoensayo para la p30 puede ser empleado conjuntamente con la prueba de la fosfatasa cida como confirmacin de la deteccin del semen. La protena al parecer es estable en las manchas del semen y est presente en el mismo en concentraciones suficientes como para ser detectada rpidamente en extractos de la mancha. Del mismo modo, debido a la especificidad de especie inherente

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biolgica se superponen considerablemente, las dos definiciones se basan sobre diferentes criterios y tienen diferentes limitaciones. Debe quedar claro, que la demostracin general de la especificidad tiene que tener en cuenta tanto las consideraciones empricas como las biolgicas. Por estas evidencias, la eleccin de la p30 como marcador especfico del semen resulta prometedor. La protena parece ser sintetizada en la prstata, de donde es secretada hacia el semen /10, 15/ y se han obtenido conocimientos recientes que han ayudado a conocer sobre la regulacin de su sntesis y secrecin, e incluso, estudios posteriores han determinado que su sntesis se limita a la prstata. En los lmites actuales de deteccin, la p30 no se ha encontrado en ningn otro tejido o secrecin. La prueba inmunolgica para la p30 no experimenta interferencias por ninguno de los materiales no biolgicos evaluados hasta ahora. Los ensayos inmunolgicos convencionales emplean usualmente antisueros preparados contra el semen humano total, que han sido adsorbidos con el suero sanguneo para extraer los anticuerpos que reconocen las protenas inespecficas encontradas en ambos lquidos. Las especificidades de estos antisueros se definen, de este modo, segn los anticuerpos restantes, presumiblemente especficos, y no segn los antgenos que ellos reconozcan. El problema con este mtodo se ilustra en el hallazgo de que todos los antisueros anti-semen comerciales contienen anticuerpos contra la lactoferrna, una protena hallada a niveles insignificantes en la sangre, pero a niveles perceptibles en el semen y en otros lquidos fisiolgicos. Al ser la p30 el centro de atencin en la actualidad como posible protena marcadora para el diagnstico genrico de semen, deben ser abordados directamente los problemas concernientes a la especificidad biolgica y empirica /18/.

Conclusiones
1. En funcin de los patrones emprico y biolgico de la especificidad, ha sido definido el antgeno especfico de la prstata (PSA), seminoprotena del tipo gamma o p30 como un marcador especfico del lquido seminal humano. 2. Con los nuevos conocimientos que se han obtenido sobre esta protena, se hace necesario profundizar en su fisiologa y su relacin con tejidos cancerosos.

Recomendaciones
1. Estandarizar mtodos para el aislamiento y purificacin de la protena p30 a partir del plasma seminal humano. 2. Sustituir las tcnicas de la fosfatasa cida y la investigacin citolgica por inmunoensayos, con la obtencin de un reactivo anti-p30 para el diagnstico genrico en la investigacin criminalstica de semen.

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