EFECTIVIDAD ANTIMICROBIANA DEL DIGLUCONATO DE CLORHEXIDINA AL 0.

2% Y DEL
CLORHIDRATO DE BENCIDAMINA AL 0.15%, USADOS COMO IRRIGANTES
INTRACONDUCTO CONTRA Enterococcus faecalis. UN ESTUDIO IN VITRO.





PRESENTADO POR:


Santiago Correa Pelez

Edgar Ocampo Granada

Juan David Ochoa



Asesor: Dr Juan David Ochoa




INSTITUTO DE CIENCIAS DE LA SALUD CES-




Medelln


2007










2
TABLA DE CONTENIDO


1. INFORMACIN GENERAL DEL PROYECTO
2. RESUMEN EJECUTIVO
3. DESCRIPCIN DEL PROYECTO:
3.1-PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA DE INVESTIGACIN Y SU JUSTIFICACIN
EN TRMINOS DE NECESIDADES Y PERTINENCIA
3.2- MARCO TERICO Y ESTADO DEL ARTE
3.2.1- Microbiologa del conducto radicular
3.2.2- Bencidamina
3.2.2.1- Introduccin.
3.2.2.2- Descripcin qumica.
3.2.2.3- Farmacologa.
3.2.2.4- Acciones propias de los AINES
3.2.2.5- Accin anestsica tpica.
3.2.2.6- Accin antimicrobiana.
3.2.2.7- Farmacocintica.
3.2.2.7.1- Aspectos generales.
3.2.2.7.2- Absorcin.
3.2.2.7.3- Distribucin.
3.2.2.7.4- Metabolismo.
3.2.2.7.5- Excrecin.
3.2.2.8- Administracin tpica.
3.2.2.9- Descripcin del producto.
3.2.2.9.1- Modo de uso.
3.2.2.10.- Indicaciones y usos.
3.2.2.10.1 - Usos generales.
3.2.2.10.2- Usos odontolgicos.
3.2.2.11.- Gingivitis.
3.2.2.12.- Enfermedad periodontal.
3.2.2.13.- Dosificacin.
3.2.2.14.- Efectos secundarios.
3.2.3.- Clorexidina.
3.2.3.1- Eficacia de la clorexidina.
3.3.- HIPTESIS Y OBJETIVOS
3.3.1.- Hiptesis nula.
3.3.2.- Hiptesis alterna.
3.3.3.- Objetivos.
3.3.3.1.- Objetivo general.
3.3.3.2.- Objetivo especfico
3.4.- METODOLOGA
3.4.1.- Tipo de estudio.
3.4.2.- Muestra de estudio.
3.4.3.- Metodologa de incubacin bacteriana
3.4.3.1- Seleccin y estandarizacin de especimenes.
3.4.3.2.- Control de calidad de la esterilizacin.
3.4.3.3.- Cultivo de Enterococcus faecalis y contaminacin de los especimenes
3.4.3.3.1.- Preparacin de la suspensin bacteriana.
3.4.3.3.2.- Grupos experimentales.
3
3.4.3.3.3.- Toma de la muestra
3.5 ANALISIS ESTADSTICO
3.6.- RESULTADOS/PRODUCTOS ESPERADOS
3.7.- IMPACTOS ESPERADOS A PARTIR DE SU USO.
3.8.- ESTRATEGIAS DE COMUNICACIN
4.- CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES.
5.- PRESUPUESTO
5.1.- Presupuesto global de la propuesta por fuentes de financiacin.
5.2.- Descripcin de gastos personal.
5.3.- Descripcin y cuantificacin de los equipos de uso propio.
5.4.- Materiales y suministros bibliogrficos.
6.- BIBLIOGRAFIA.






































4
1- INFORMACIN GENERAL DEL PROYECTO

TITULO:

Efectividad antimicrobiana del digluconato de clorhexidina al 0.2% y del clorhidrato de
bencidamina al 0.15%, como irrigantes intraconducto.

INVESTIGADORES PRINCIPALES:

Edgar Ocampo Granada. Cll 53 # 78-97 antoniocampo@hotmail.com
Santiago Corea Pelez. Cra 26 # 9A-22 correapelaez@yahoo.com
Dr Juan David Ochoa Cll 7 # 39-290 cons 707 ochoamejia@epm.net.co

TOTAL DE INVESTIGADORES: 3

LINEA DE INVESTIGACIN: Desinfeccin de conductos
LUGAR DE EJECUCIN DEL PROYECTO: Instituto Colombiano de Medicina Tropical.
CIUDAD: Medelln
DEPARTAMENTO: Antioquia
DURACIN DEL PROYECTO: 10 meses
TIPO DE ESTUDIO: Estudio experimental
PALABRAS CLAVES: Irritantes, bencidamina, clorhexidina, desinfeccin, conductos radiculares,
Enterococcus faecalis.



























5
2. RESUMEN EJECUTIVO


El objetivo de la terapia endodntica es la adecuada conformacin, limpieza y obturacin del
conducto, que garantice un ptimo selle tridimensional. La limpieza del conducto implica una
correcta remocin de restos tisulares, de microorganismos y de productos que se asocian a la
degeneracin de los tejidos, cuando los hay. El proceso se inicia con la extirpacin de la pulpa
(tejido vital) y el desbridamiento del sistema de conductos (tejidos pulpares no vitales), mediante
el empleo de cucharillas, fresas y limas, seguido por una profusa irrigacin con agentes que,
adems de actuar como lubricantes, tienen por finalidad disolver los restos tisulares y erradicar
los microorganismos que puedan existir en los conductos.

Anteriormente se haca nfasis en la importancia de introducir medicamentos en los conductos,
pero hoy en da se da mayor importancia a la desinfeccin de tipo qumico-mecnico; as que la
irrigacin es un paso muy importante en la limpieza de los conductos radiculares, y ltima etapa
despus de su conformacin, previa a la obturacin tridimensional de los mismos.

El objetivo de este estudio es, comparar la eficacia de la irrigacin con clorhidrato de
bencidamina al 0.15% y de digluconato de clorhexidina al 0.2%, en la desinfeccin del sistema
de conductos de dientes humanos obtenidos de exodoncias mandatorias, que sern
contaminados, in Vitro, con Enterococcus faecalis, y as demostrar la efectividad de dichas
sustancias sobre la desinfeccin, lo que proporcionara a la endodoncia una alternativa ms para
la terapia endodntica exitosa.

Para tal efecto, se utilizarn 55 dientes uniradiculares con integridad coronal, a los cuales se les
tomarn radiografas previas para analizar la anatoma interna de conductos radiculares. Los
dientes se obtendrn de pacientes sometidos a tratamientos ortodnticos y periodontales a los
cuales se les realiz extraccin indicada, con consentimiento para usar los dientes.

Los dientes sern colocados inmediatamente en solucin salina para evitar su deshidratacin. Se
les realizar amputacin coronal dejando los especmenes a una longitud 15 mm. Se obtendr
permeabilidad del conducto con limas Tipo K N20 y se realizar una conformacin inicial del
conducto hasta una lima maestra ISO # 25 previo a la inoculacin de la cepa bacteriana a
evaluar, utilizando RC-prep (perxido de urea al 10% y cido etilen di-aminotetractico al 15%)
entre lima y lima e irrigando los conductos con Hipoclorito de sodio al 5,25%. Posteriormente se
pondrn los dientes en autoclave para su desinfeccin total.
Con el fin de sellar las races externamente, se les pondrn dos capas de barniz en toda la
superficie, y despus, con una jeringa y aguja calibre 27 que contenga Enterococcus faecalis en
dilucin, se inocularn con 1ml intraconducto, y se dejarn en una cmara hmeda durante 7
das,

Luego de la incubacin, la limpieza y conformacin del conducto se har con limas de Nickel
titanio Pro File serie 29, utilizando la tcnica de preparacin corono- apical. Se conformarn
grupos en forma aleatoria, y a cada grupo se le inocular la solucin de Enteroccocus Faecalis.






6
Dichos grupos se conformarn de la siguiente manera:

Se tomar un grupo de 5 dientes elegidos aleatoriamente a los cuales se les mirar en
microscopio electrnico de barrido (SEM) para verificar que los tbulos dentinarios estn sin
barrillo dentinal.

El control positivo: 5 dientes infectados con Enterococcus faecalis y no tratados
endodnticamente.

El control negativo: 5 dientes no infectados y no tratados.

El grupo 1, constituido por 20 dientes, infectados y tratados con digluconato de clorhexidina al
0.2%.

El grupo 2, constituido por otros 20 dientes, infectados y tratados con clorhidrato de
bencidamina al 0.15%.

Se pretende evaluar el grado de desinfeccin lograda por el clorhidrato de bencidamina y por el
digluconato de clorhexidina, respectivamente, en los dos grupos de dientes contaminados con
Enterococcus faecalis.
.





























7
3.- DESCRIPCION DEL PROYECTO.

3.1- PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Y JUSTIFICACIN

La terapia endodntica es esencial para la eliminacin de los procesos infecciosos que se
desarrollan en el complejo pulpar, tanto en la cmara como en el conducto radicular. Dichos
procesos se encuentran en estrecho contacto con el tejido periodontal, lo que frecuentemente,
produce inflamacin periapical.

El mayor obstculo para el xito del tratamiento lo constituyen las variaciones anatmicas que
pueden encontrarse, tales como: deltas apicales, conductos accesorios o conductos muy
estrechos. Las localizaciones de dichas variables anatmicas, dificultan ms an los
procedimientos de limpieza y conformacin; por esta razn, es necesario utilizar sustancias o
medicamentos adicionales en el interior del conducto, que sirvan como complemento de la
preparacin instrumental, cualquiera que haya sido utilizada, y eliminar no slo los desechos
producidos por la instrumentacin sino tambin, toda clase de restos biolgicos que se puedan
encontrar en los conductos radiculares
1


Siempre que se habla de desinfeccin en endodoncia tenemos que pensar que estamos frente a
una microbiota diversa, y aunque existen muchos mtodos para lograr la descontaminacin, se
ha considerado al hipoclorito de sodio como un irrigante intraconducto con excelentes
propiedades porque posee baja tensin superficial, capacidad neutralizante de productos
txicos, efecto bactericida, es facilitadora de la instrumentacin, tiene pH alcalino, disuelve el
tejido pulpar, solubiliza las sustancias proticas, acta rpidamente y tiene accin detergente.
Sin embargo, cada da se investiga ms para tratar de encontrar un irrigante que produzca
mejores resultados que el hipoclorito.

Es aqu donde cobra mayor importancia la irrigacin qumica, al eliminar restos necrticos que
normalmente no pueden ser eliminados mecnicamente, y permite una limpieza ms completa
del conducto por cuanto cumple una funcin tanto bactericida como lubricante
1
, lo que hace que
se facilite la instrumentacin mecnica, adems de la disminucin de posibles patologas
periapicales post tratamiento endodntico convencional.

Las soluciones irrigantes y lubricantes de las que se dispone en la actualidad son: hipoclorito de
sodio (NaOCL), perxido de hidrgeno (H2O2), Clorhexidina, Acido Etilendiamino Tetra Acetico
(EDTA), RC-Prep, Acido Etilendiamino Tetra Actico (EDTAC), las cuales son efectivas para el
control bacteriano, pero algunas son lesivas, por lo que su uso intraconducto se asocia,
frecuentemente, con inflamacin de los tejidos periapicales y periodontales. De igual manera, la
solucin de hipoclorito de sodio que es la ms frecuentemente utilizada como irrigante
1
presenta
efectividad comprobada como bactericida, pero no elimina completamente, ni los desechos
inorgnicos, ni la totalidad de la microbiota bacteriana, en especial cuando se trata del
Enterococcus faecalis, husped habitual del conducto radicular en estados patolgicos. Adems,
debido a su toxicidad, conlleva a inflamacin periapical
1,2


En la actualidad, el digluconato de clorhexidina se usa como enjuague oral coadyuvante en el
tratamiento de las enfermedades periodontales y como irrigante o medicamento intraconducto
en el tratamiento endodntico, debido al buen efecto bacteriosttico que posee contra el
Enterococcus faecalis, produciendo menor irritacin periapical y, por consiguiente, menos
incomodidad para el paciente
2-4

8

El clorhidrato de bencidamina es un antisptico bucofarngeo que slo se usa como ayudante
profilctico en la higiene oral por sus efectividad comprobada contra la microbiota patgena
bucal, en especial contra el Enterococcus faecalis, gran culpable de la mayora de las patologas
periapicales
5 -9


El Enterococcus faecalis es una bacteria que se halla presente en infecciones de la cavidad oral
en compaa de otros grmenes, tanto aerbicos como anaerbicos; comnmente es aislado del
conducto radicular y se relaciona frecuentemente con el fracaso del tratamiento endodntico.

En vista de que, con los protocolos actuales de tratamiento endodntico muchas veces no se
logra eliminar de los conductos esta bacteria, la justificacin de este estudio es establecer si el
clorhidrato de bencidamina al 0,15%. es efectivo y confiable en la desinfeccin de los conductos,
comparndolo con la del digluconato de clorhexidina al 0.2% el cual si logra eliminar el
Enterococcus faecalis y ademas no existe reporte en la literatura tanto in vivo como in Vitro, de
esta sustancia como agente antibacteriano intraconducto en dientes humanos.

3.2 MARCO TERICO.

Desde el punto de vista microbiolgico, la cavidad oral constituye uno de los hbitats ms
complejos que existen. Los diferentes organismos que la habitan pueden encontrarse en estado
planctnico, es decir, suspendidos libremente, y en estado sesil, adherido a superficies y
formando biopeliculas.

El uso de colutorios es un buen complemento de la higiene dental, y tiene mltiples aplicaciones
en la prctica odontoestomatolgica para prevenir las secuelas de infecciones de la cavidad oral.
Debido a su composicin y a sus principios activos, los colutorios poseen diferentes acciones
tales como el control de la placa dental bacteriana y la eliminacin de algunos de los
microorganismos que, en ltima instancia, son los que van a ocupar el conducto radicular
10


3.2.1 MICROBIOLOGIA DEL CONDUCTO RADICULAR.

El conducto radicular constituye un medio ambiente especial donde, determinadas presiones
selectivas, permiten el establecimiento de un grupo restringido de bacterias de la microbiota
oral. Las interrelaciones entre las bacterias y el suplemento nutritivo son factores determinantes
en la aparicin de infeccin.

El tratamiento endodntico no slo elimina las bacterias en forma directa por medios mecnicos
sino que, adems, trastorna por completo la delicada ecologa del conducto, por lo que priva a
las bacterias remanentes de su fuente nutricional.

En la actualidad se reconocen ms de 300 especies bacterianas como huspedes de la cavidad
oral. Recientemente se ha descrito una buena cantidad de especies nuevas, pero muchas
permanecen sin clasificar. Se puede decir que las bacterias que infectan los conductos
radiculares constituyen un grupo selecto, si se compara con la gran cantidad de especies que
constituyen la microbiota bucal.

La mayora de las especies que se han aislado de los conductos radiculares infectados, tambin
han sido aisladas de las bolsas periodontales; sin embargo, la microbiota del conducto radicular
no es tan numerosa y compleja como lo es la microbiota gingival. El nmero y la variedad de
9
especies bacterianas parece tener relacin directa con el tamao de la lesin periapical.
En la infeccin del canal radicular interviene una variada cantidad de bacterias que juegan papel
importante en el desarrollo y perpetuacin de la patologa endodntica cuya caracterstica es el
desarrollo rpido y expansivo de la lesin periapical en la que predominan las bacterias
anaerobias Gram positivas, causantes principales de los fracasos de la terapia endodntica.

La infeccin pulpar es debida a la propagacin bacteriana por las diferentes ramificaciones del
sistema radculo-canalicular que incluye deltas apicales, itsmos y tbulos dentinales;
propagacin que puede ocurrir antes o durante el tratamiento endodntico. La perpetuacin de la
infeccin se debe, posiblemente, a que su ubicacin en esos lugares las resguarda de la accin,
nociva para ellas, de la instrumentacin endodntica y de las soluciones que se usan para irrigar
los conductos radiculares.

Los fracasos endodnticos se asocian con la presencia de determinadas bacterias anaerobias
como: Enterococcus faecalis, Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas endodontalis y
gingivalis, Actinomyces israeli y Propionibacterium acnes. Se ha demostrado que dichas
bacterias penetran a diferentes profundidades en los tbulos dentinarios y entre ellas las ms
sobresalientes son: el Enterococcus faecalis, el Propionibacterium acnes y el Actinomyces israeli
que son capaces de resistir tanto las adversidades del medio, como la constriccin tubular y los
procesos odontoblsticos, por ser capaces de replicarse y avanzar en los tbulos, gracias a sus
peculiares caractersticas fisiolgicas y morfolgicas
16


Otro factor importante lo constituyen las metaloproteinasas de la matriz que son un grupo de
enzimas proteolticas encargadas de la degradacin de la mayora de los componentes de la
matriz extracelular. Evidencias recientes han demostrado que las Metaloproteinasas pueden
intervenir en la degradacin del tejido pulpar, cuando este se encuentra inflamado. Tambin se
ha demostrado que las bacterias anaerobias Gram negativas aumentan la produccin de
metaloproteinasas.

Algunos estudios han demostrado que las especies de Bacteroides pigmentadas de negro
juegan un papel importante en la destruccin y desintegracin del tejido de la matriz extracelular
en las enfermedades pulpares y periodontales, por consiguiente, la activacin de las
metaloproteinasas por el husped puede constituir un proceso de degradacin, inductor de la
patognesis de la enfermedad pulpar y periapical causada por dichos microorganismos.

En la bsqueda de microorganismos capaces de producir infeccin endodntica y abscesos
severos y rpidamente expansivos, se ha encontrado que las especies de Bacteroides
pigmentados de negro tienen especial importancia.

Las metaloproteinasas pertenecen a la familia de las endopeptidasas de zinc neutras, que son
secretadas como precursores enzimticos inactivos que degradan una serie de componentes de
la matriz extracelular. stas juegan un papel importante en la curacin de heridas, en la
reparacin de tejidos lesionados, en la angiognesis y en el desarrollo de la morfognesis del
tejido lesionado. La acumulacin de componentes bacterianos en la pulpa, es un estmulo para
que los monocitos y los macrfagos presentes en el rea produzcan citoquinas y stas, a su vez,
estimulan las clulas pulpares para que produzcan enzimas que degradan la matriz. Los factores
virulentos de las bacterias Gram negativas se producen en la membrana celular. Los
lipopolisacridos son molculas mediadoras en las actividades biolgicas de gran cantidad de
metabolitos bacterianos. La colonizacin de los tejidos por microbios patgenos produce
destruccin de esos tejidos por la activacin de procesos degradativos del husped.
17-19
10
3.2.2.-BENCIDAMINA

3.2.2.1.-INTRODUCCIN

La bencidamina fue desarrollada en Italia en 1966, por el profesor Bruno Silvestrini, director del
Instituto de Investigaciones Angellini Francesco de Roma. El profesor Silvestrini, haba
centrado su atencin en el desarrollo de frmacos antiinflamatorios que tuvieran la capacidad de
interferir, en forma selectiva, con los fenmenos locales de la inflamacin, ms que con los
factores generales que muchas veces condicionan este proceso.
Dentro de esta concepcin, el ensayo de indazoles sustituidos en la posicin 3, di por resultado
el descubrimiento de la bencidamina
26-29.
Esta se diferencia de otros antiinflamatorios en
numerosos aspectos que van desde la estructura qumica hasta sus peculiares acciones
farmacolgicas.

3.2.2.2 DESCRIPCIN QUMICA

Bencidamina es el nombre genrico asignado a la frmula qumica: 1-bencil3-(3 dimetil amino)
propoxi-1H-indazol, que corresponde a la siguiente frmula estructural.

Grfico 1: Estructura qumica de la bencidamina.



La bencidamina se clasifica como un antiinflamatorio no esteroide (AINE), que pertenece a una
clase qumica diferente a todos los antiinflamatorios conocidos, ya que no posee el grupo
carboxilo (COOH), que es el que da a los AINES tpicos la propiedad de compuestos cidos.
Adems de la falta del grupo carboxilo, posee propiedades de base dbil, debidas al nitrgeno
terciario de su cadena lateral, que es capaz de soportar cargas positivas y, por consiguiente,
capacidad de aceptar electrones.
La caracterstica de desempearse como base dbil explica, en parte, la peculiaridad que tiene
la bencidamina de concentrarse en el foco inflamatorio, que es cido, produciendo una
neutralizacin parcial del ambiente cido de dicho foco.

3.2.2.3 FARMACOLOGA

Estudios de farmacologa realizados por Silvestrini et al
26,27
mostraron que la bencidamina posee
propiedades farmacolgicas diversas, algunas de ellas comunes a todos los AINES como son:
efecto analgsico, efecto antipirtico y antiagregante plaquetario. Tiene otros efectos peculiares
como: accin anestsica tpica y propiedades antimicrobianas. La accin fundamental de esta
molcula, tambin muy particular, la constituye su extraordinaria actividad antiinflamatoria de la
11
mucosa bucal, con una mnima absorcin sistmica.

Tabla 1 Propiedades farmacolgicas de la Bencidamina

Propias de los AINES Exclusivas de la bencidamina
Analgsica Anestsica local
Antipirtica Antimicrobiana
Antiagregante Antiinflamatoria tpica bucal
antiinflamatoria


3.2.2.4.- ACCIONES PROPIAS DE LOS AINES

La bencidamina, en concentraciones que oscilan entre 1 y 8 ug/ml, exhibe acciones
farmacolgicas propias de los AINES; es analgsica, antipirtica y antiagregante plaquetaria
28-31

Aunque estas acciones son dbiles, estn correlacionadas con las concentraciones que alcanza
el frmaco en la sangre.
Su accin antiinflamatoria es potente, posiblemente debida a que bloquea la sntesis de
prostaglandinas, accin comn a todos los AINES; pero, otras acciones que ejerce sobre los
mecanismos de la inflamacin, contribuyen en forma decisiva, a ejercer esta propiedad.

Tabla 2. Concentraciones de bencidamina necesarias para que se d su efecto atiinflamatorio.

Accin antiinflamatoria Ug/mL
Antagonismo de aminas vasoactivas 1-2
Estabilizacin de membranas lisosomales 3-6
Estabilizacin de membranas celulares 8-10
Bloqueo de la sntesis de prostaglandinas 400

Sus acciones sobre el proceso inflamatorio, han sido bien documentadas: antagoniza con las
aminas vasoactivas, inhibe la liberacin de las enzimas granulares de los neutrfilos, estabiliza
las membranas celulares y lisosomales, inhibie la produccin de superxidos por los macrfagos
y, finalmente, en concentraciones muy elevadas, inhibe selectivamente la sntesis de
prostaglandinas
32


La sinergia entre todas esas acciones produce una notoria actividad antiinflamatoria, ms an
cuando las concentraciones tisulares necesarias para que cada una de ellas acte son
ampliamente superadas cuando el producto se administra en forma tpica.

3.2.2.5 ACCIN ANSTESICA TPICA

La bencidamina, a diferencia de los AINES tpicos, ejerce acciones farmacolgicas diferentes a
las de ellos; la ms importante es su accin anestsica tpica
33
. Esta propiedad ha sido bien
estudiada experimentalmente en modelos animales en los que la bencidamina, en
concentraciones superiores a 400 ug/ml, demostr que tiene una actividad anestsica local
similar a la tetracana en concentracin al 0.06%.

El efecto anestsico tpico de la bencidamina debe distinguirse del efecto analgsico del
producto que es dbil. El efecto anestsico se debe al bloqueo de los impulsos nerviosos
provenientes de las terminaciones perifricas especializadas en la captacin de la sensibilidad
12
dolorosa y propioceptiva. Dicha accin es muy acentuada sobre las mucosas, de ah su gran
utilidad teraputica, pues permite controlar, in situ, los sntomas patolgicos de ardor, prurito y
dolor.

3.2.2.6 ACCIN ANTIMICROBIANA

En relacin con su efecto antimicrobiano, varios estudios experimentales han demostrado que la
bencidamina, en concentraciones que oscilan entre 325 y 650 ug/ml, inhibe el crecimiento de
diferentes cepas bacterianas
34.
Como estas concentraciones son las que se utilizan en las
soluciones tpicas, con su uso clnico se espera obtener un buen efecto atimicrobiano
35.
Tambin, se ha visto que la accin antibacteriana se logra con el uso de concentraciones
sensiblemente inferiores, a medida que el pH cido del medio se acerca a 7. En la Tabla se
muestran los diferentes tipos de microorganismos que abarca su espectro, y que han sido
probados con CIM (ug/ml).

Tabla 3 Tipos de microorganismos susceptibles a la bencidamina

Microorganismo pH 5 pH 7
Escherichia coli 450 150
Staphylococcus aureus 650 325
Enterococcus faecalis 450 325
Klebsiella pneumoniae 325 150
Bacillus subtilis 325 220
Bacillus cereus 450 225
Candida albicans 325 150
Aspergillus niger 450 150

Lisiana, R. Scorza-Barcelona P. Silvestrini B. Research on the topical activity or Benzidamine.
Eur J. Parmacol 3:157-162,1968.


3.2.2.7 FARMACOCINTICA

3.2.2.7.1 Aspectos generales

Puesto que la bencidamina puede ser administrada por va sistmica: oral y parenteral, o por va
tpica: en la piel o en las serosas oral y vaginal, expondremos sus propiedades farmacocinticas
en dos acpites. En el primero, hablaremos de los aspectos generales; y en el segundo,
abordaremos los pertinentes a la administracin tpica.

3.2.2.7.2 Absorcin:

La bencidamina se absorbe bien cuando se suministra por va oral. Su biodisponibilidad oscila
entre un 87% y un 93%. Su vida media aproximada tiene una duracin de unas 11 a 13 horas.
Dos horas despus de la administracin oral de una dosis de 100 mg alcanza un pico mximo de
concentracin plasmtica de 0.8 ug/ml.

Se ha demostrado que el pico mximo de concentracin plasmtica que se obtiene, tanto con el
suministro por va oral como por va parenteral, con dosis que oscilan entre 25 y 100 mg, no
sobrepasa de 1ug/ml; y aunque se aumente la dosis, las concentraciones plasmticas no
13
sobrepasan los 2 ug/ml. Esto, probablemente es debido a una tasa de depuracin alta:
(aclaramiento sistmico) de 193 ml/min y un alto volumen de distribucin: (213 litros). Sin
embargo, pese a las bajas concentraciones alcanzadas en el plasma, la sustancia tiende a
acumularse en los tejidos inflamados,
28
donde alcanza concentraciones cinco a diez veces
superiores a las plasmticas, lo cual explica su potente accin antiinflamatoria selectiva, en los
tejidos inflamados.

3.2.2.7.3 Distribucin:

Estudios experimentales realizados en animales muestran que tras la administracin de
bencidamina radiactiva suministrada por va oral en dosis de 1, 10 y 100 mg/Kg de peso, y de la
administracin de 10 mg por va intramuscular, intravenosa o subcutnea, la radiactividad
nicamente poda ser detectada en los tejidos afectados por un proceso inflamatorio activo, y
prcticamente no se encontraba en los tejidos sanos, hecho que corrobora la propiedad
farmacocintica que tiene la bencidamina de concentrarse, preferentemente, en los tejidos
inflamados y casi nada en los tejidos sanos.

Es bueno anotar que la bencidamina es capaz de atravesar la barrera hematoenceflica.
Despus de la administracin sistmica, un porcentaje muy bajo, 15 a 20% del frmaco, se une a
las protenas del plasma, porcentaje que es mucho menor del que se observa con otros AINES.
De ah que, su efecto farmacolgico no se ve afectado por la competencia de otros frmacos por
unirse a las protenas plasmticas.

3.2.2.7.4 Metabolismo:

La bencidamina se metaboliza en el hgado mediante procesos de oxidacin, pero tambin
mediante cierto grado de alquilacin. Despus del suministro de las dosis respectivas a
diferentes especies animales, se identific un gran nmero de metabolitos en orina de 24 horas.
En los humanos, los metabolitos ms importantes encontrados son la bencidamina N-xido, y los
conjugados con cido glucurnico como la 5-hidroxibencidamina.

3.2.2.7.5- Excrecin:

Cuando se suministra a humanos una dosis de prueba de 50 mg de bencidamina por va oral, se
demuestra que el 70% es excretada por la orina (39% en las primeras 24 horas) y el 30%
restante posiblemente es excretado por las heces, lo cual indica que hay una fuerte
metabolizacin heptica del frmaco.


3.2.2.8- ADMINISTRACIN TPICA

Debido a la dificultad de conseguir altas concentraciones de bencidamina cuando se administra
por va oral o parenteral, se hicieron estudios farmacodinmicos de la sustancia aplicada
tpicamente, tanto sobre piel como sobre mucosas, y se encontr que por esta va, se alcanzan
concentraciones 1.000 a 1.500 veces superiores a las obtenidas por va sistmica,
especialmente en las mucosas inflamadas, donde se alcanzan concentraciones de hasta 1.200
ug/ml.

La eficacia de la bencidamina en el control de la inflamacin, se debe a que inicia el bloqueo de
la sntesis de prostaglandinas a concentraciones de 400 ug/ml, de ah su importancia de su uso
14
clnico. Su efecto acumulativo en las mucosas inflamadas y su baja difusin en el tejido conectivo
hacen que sea insignificante la cantidad del producto (0.02 ug/ml) que llega a la va sistmica.
Las conclusiones de los estudios farmacocinticos:

1. La bencidamina, suministrada por va sistmica, alcanza concentraciones plasmticas
tan bajas que son insuficientes para conseguir una accin antiinflamatoria potente.
Debido a la propiedad bsica de la molcula, tiende a concentrarse en los focos
inflamatorios cuyo medio es cido, donde alcanza concentraciones 10 veces superiores
a las del plasma.

2. Cuando es suministrada por va tpica en las mucosas, las concentraciones alcanzadas
son extraordinariamente altas, hasta de 1.500 ug/ml, con mnima concentracin
plasmtica.

3. Debido a esta caracterstica, la bencidamina es un frmaco ideal para el tratamiento de
procesos inflamatorios de piel y mucosas, donde ejerce una potente accin
antiinflamatoria, y prcticamente sin repercusiones sistmicas.


3.2.2.9- DESCRIPCIN DEL PRODUCTO

El BENZIRIN VERDE.

Contiene bencidamina al 0.15%, equivalente a 1.5mg de bencidamina por mililitro de solucin.

Presentacin: viene en frascos de 120 ml como colutorio con color verde y sabor a menta.
La composicin de la solucin es la siguiente: ver tabla # 4.


Tabla 4 Composicin del BENZIRIN VERDE por cada 100 ml de solucin

Sustancia Peso gr
Bencidamina clorhidrato 0.15
Excipientes, colorantes, aroma 2.17
Glicerina 5.00
Alcohol etlico 8.00
Agua desmineralizada 84.68
TOTAL 100.00

El pH final de la solucin est alrededor de 6.0 (rango 5.0 y 6.5), lo que la asemeja al pH de la
cavidad bucal normal.

3.2.2.9.1- Modo de uso

La bencidamina se utiliza como colutorio o en spray. Generalmente, el colutorio se recomienda
en los adultos, tanto para las inflamaciones de la boca como para las de la orofaringe, pues
permite la realizacin de enjuagues y de gargarismos, lo que permite que el frmaco entre en
contacto directo con los tejidos inflamados.

Para los enjuagues se puede usar en forma pura o diluida, en cantidad de 15 a 30 ml (1 2
15
cucharadas soperas). En los casos en que las lesiones cursan con mucha irritacin y ardor se
usa en forma diluda para que no cause molestias.
Tanto los enjuagues como los gargarismos se realizan durante uno o dos minutos.


3.2.2.10- INDICACIONES Y USOS

3.2.2.10.1- Usos generales:
La bencidamina est indicada como antiinflamatorio tpico en los procesos patolgicos
inflamatorios de la cavidad oral, por su beneficiosa accin antibacterial, antiinflamatoria y
anestsica.
Es til especialmente en:

A- Gingivo-estomatitis herptica.

Esta afeccin es de origen viral y produce una intensa inflamacin de toda la mucosa oral,
incluidas las encas.

B- Aftas bucales.

Afeccin de etiologa no bien conocida por lo que no tiene tratamiento especfico. Es una
entidad autolimitada y se resuelve espontneamente en ocho a doce das. El tratamiento,
que es puramente sintomtico, se hace con bencidamina con la cual se consigue alivio de
los sntomas mientras se resuelve el cuadro.

C.-lceras de la cavidad bucal

La mayora son causadas por traumas o micro traumas de la mucosa oral y son muy
dolorosas; de todos modos, independientemente de cul sea la causa, el uso de un frmaco
con accin desinfectante y anestsica alivia los sntomas de ardor y dolor, ayuda a controlar
la sobreinfeccin bacteriana y, consecuentemente, acelera la regeneracin del epitelio.

D.-Faringitis agudas.

Son causadas ms comnmente por infecciones bacterianas. La ms frecuente es la
amigdalitis que, por vecindad, produce faringitis y faringolaringitis.

E.-Amigdalitis

Esencialmente es una infeccin bacteriana producida por el estreptococo beta hemoltico del
grupo A. Es una entidad intensamente dolorosa y se compaa de sntomas generales. La
droga de eleccin para su tratamiento es la penicilina, y en los pacientes alrgicos a ella, la
droga alterna debe ser la eritromicina. Si al tratamiento se adicionan los gargarismos con
bencidamina, sta ayuda muy eficazmente por cuanto disminuye la odinofagia, el edema, la
congestin y ayuda a la recuperacin del paciente.

3.2.2.10.2.- Usos odontolgicos

La bencidamina, es de gran utilidad en el tratamiento de diversas patologas relacionadas con
los dientes y el aparato masticatorio. Es importante tener en cuenta que la aplicacin tpica
16
alcanza altas concentraciones en la mucosa inflamada, por lo que es una gran alternativa en el
alivio de los sntomas causados por procesos inflamatorios de la mucosa oral. Su eficacia es
ms limitada en procesos inflamatorios profundos tales como abscesos y trauma radicular. En
casos de detartrajes y exodoncias s puede ser de gran utilidad.

Tabla 5 Indicaciones Odontolgicas de la Bencidamina



Inflamacin
Mucosa oral


Gingivitis
Por restos alimenticios
Por clculos
Post-traumtica
Otras

Enfermedad periodontal
Estadio I
Estadio II

Ulceracin
Mucosa oral


Aftas
lceras traumticas
Mucositis

Fanaki N. H. El-Nak eeb E.A. Antimicrobial Activity of Benzidamine, a non-steroidal anti-
inflamatory agent. J. Chemother 4(6):347-352.1992.


3.2.2.11.- GINGIVITIS.

Restos alimenticios:
La labilidad de las encas, el sangrado fcil y el ardor y dolor que produce el cepillado en los
casos agudos, son causa de que las primeras sesiones de aseo sean muy molestas y dolorosas
para muchos pacientes por lo que, a veces, tratan de evitarlas con la disculpa de las malas
condiciones de sus encas.
El uso de bencidamina en enjuagues, despus del cepillado y limpieza cuidadosa de los
espacios interdentales con seda, ayuda no slo a una rpida desinflamacin, sino que, por su
marcado efecto anestsico tpico, controla el ardor y el dolor mientras la mucosa se recupera
por completo.

Clculos:
Despus de los detartrajes se produce inflamacin de la mucosa, (gingivitis traumtica) que es
causa de dolor y de molestias para el paciente. Tambin en estos casos vuelven a ser de gran
utilidad los enjuagues con bencidamina, tanto por su efecto anestsico como por su efecto
antiinflamatorio; se hacen durante uno dos minutos, dos o tres veces diarias, durante cinco
das.

Post-trauma:
Tambin, despus de la exodoncia se presenta gingivitis secundaria al trauma instrumental.
Aqu, nuevamente, los enjuagues con bencidamina mitigan la inflamacin, controlan el dolor y,
por sus cualidades antimicrobianas, se disminuye la posibilidad de infeccin sobreagregada.


17

3.2.2.12.- ENFERMEDAD PERIODONTAL

Por su accin antimicrobiana, la bencidamina contribuye a controlar la infeccin subyacente que
acompaa a la enfermedad periodontal en los estadios iniciales. Su excelente penetracin y
concentracin en las mucosas inflamadas es garanta de mejor efecto teraputico del que puede
obtenerse con la administracin de antiinflamatorios sistmicos.

lceras traumticas:

La Bencidamina ayuda a controlar la sobreinfeccin bacteriana, y acelera la reepitelializacin.

3.2.2.13.- DOSIFICACIN

En las estomatitis, gingivitis, gingivoestomatitis y lceras orales en general, se debe administrar
la bencidamina en enjuagues bucales, durante 1 2 minutos, tres o cuatro veces al da, con
15ml de la solucin pura si se desea un rpido efecto anestsico tpico o, con la misma cantidad
diluida en agua para obtener una accin ms suave pero menos rpida. Se aconseja no deglutir
la solucin.
La duracin del tratamiento depende del cuadro clnico. En gingivitis agudas y en ulceraciones, el
promedio de duracin del tratamiento es de cinco das. Despus de exodoncias y curetajes el
promedio de duracin puede ser de 10 das.

3.2.2.14.- EFECTOS SECUNDARIOS

El bajo ndice de efectos adversos se debe a su excelente tolerancia y a que la aplicacin tpica
del producto conlleva a concentraciones sanguneas muy bajas, debido a la baja tasa de
absorcin por esa va. Sin embargo, a pesar del buen perfil de seguridad de la bencidamina,
ocasionalmente se pueden presentar efectos secundarios frecuentes aunque son pasajeros y de
poca intensidad tales como: ardor en el sitio de la aplicacin, nuseas o vmito. Otros muy
ocasionales y de carcter leve son: irritacin, tos, resequedad de la boca, somnolencia,
sensacin de sed y cefalea.

El clorhidrato de bencidamina es una molcula con propiedades antiinflamatorias, anestsicas,
analgsicas y antibacterianas demostradas en procesos odontolgicos
25,26
, gracias al poder
inhibitorio que posee contra algunas citocinas proinflamatorias, como el factor Alfa, la
interleuquina 1Beta
27
, porque produce estabilizacin del las membranas celulares y lisosomales,
efecto que fue demostrado experimentalmente por inhibicin de las prostaglandinas producidas
por los fibroblastos gingivales, estimulados por las citoquinas proinflamatorias.



3.2.3.- CLORHEXIDINA.

El Digluconato de Clorhexidina es reconocido como un efectivo agente antimicrobiano oral y,
rutinariamente, es usado en la prevencin de la caries y en la terapia periodontal
21
. Desde los
aos cincuentas, la Clorhexidina se ha usado en la forma de sal, como antisptico bucal en
enjuagues, como dentfrico y en forma de chicle. Posee accin antimicrobiana de amplio
espectro, especialmente contra grmenes Gran-positivos y Gram-negativos
22
. El efecto
antimicrobiano se debe a su forma catinica que se une a la membrana de la clula bacteriana
18
cuya carga inica es negativa, por lo que altera el equilibrio osmtico de la bacteria causndole
la muerte. Adems, presenta sustantividad y poca toxicidad. La sustantividad antimicrobiana se
ha identificado como elemento protector del conducto durante mucho tiempo despus de la
instrumentacin, por lo que protege la dentina de la reinfeccin hasta por 72 horas, propiedades
que sugieren que dicha solucin puede ser usada en endodoncia como irrigante y como
medicamento intraconducto.

La clorhexidina en su forma qumica es una bis-biguanida catinica identificada, primariamente,
como una sal gluconato. La forma de enjuague oral disponible en el comercio, contiene: 0.12%
de digluconato de clorhexidina en una base acuosa, 11.6% de alcohol, glicerina, agentes
saborizantes y sacarina. Ms o menos el 30% del ingrediente activo se retiene en la cavidad oral
despus del enjuague y es lentamente liberado en los fluidos orales
22.


3.2.3.1.- EFICACIA DE LA CLORHEXIDINA EN EL CONDUCTO RADICULAR.

El xito del tratamiento endodntico depende de la reduccin o eliminacin de la infeccin en el
canal radicular. De ah la importancia de hacer una preparacin quimiomecnica,
esmeradamente. Sin embargo, se ha demostrado que las bacterias pueden sobrevivir en el canal
radicular aun despus de una cuidadosa preparacin quimiomecnica del conducto.

El Enterococcus faecalis es la bacteria que debe ser evaluada preferentemente en estos
estudios, por las siguientes razones: 1) Es el patgeno reconocido como el que ms
frecuentemente se presenta en la periodontitis apical persistente en dientes sometidos a
tratamiento endodntico. 2) Es fcil de cultivar y crece rpidamente. 3) Coloniza fcilmente los
tbulos dentinales de las races y puede penetrar totalmente la dentina circunpulpar despus de
dos das de haber sido inoculados. 4) Se ha usado, con mucho xito, en diversos estudios.
Se ha demostrado que el Enterococcus faecalis es incapaz de colonizar los tbulos dentinales
despus de 21 das de haber sido tratada la dentina con clorhexidina al 0.2% durante 7 das.

Estos hallazgos confirman que la sustantividad antimicrobial de la clorexidina en la dentina
tratada, se extiende al menos tres veces ms el perodo durante el cual fue usada. La
clorhexidina es ms efectiva que el NaOCl cuando es usado como irrigante intraconducto el cual
es inducido por la sustantividad.

El Enterococcus faecalis puede ser resistente al desbridamiento mecnico lo mismo que a los
medicamentos intraconducto usados comnmente, tales como el hidrxido de calcio. El E.
faecalis es difcil de erradicar durante el retratamiento de dientes con periodontitis apical
persistente, y su presencia, en esta entidad, conduce a un pronstico sombro; ms, sin
embargo, es sensible a la clorhexidina que, aplicada en forma prolongada, puede ser efectiva en
los retratamientos.

Estudios hechos en dentina de bovinos, demostraron que la clorhexidina fue tan efectiva en la
primera semana como despus de la tercera semana de haber sido aplicada
24.
Otra de sus
aplicaciones ha sido en la desinfeccin pre y pos operatoria en apicectoma y ciruga periodontal.






19
3.3.- HPTESIS



3.3.1.- HIPTESIS NULA:

En el tratamiento endodntico, el poder de desinfeccin del clorhidrato de bencidamina contra el
Enterococcus faecalis en el complejo de conductos radiculares es igual al poder desinfectante
del digluconato de clorhexidina

3.3.2.- HIPTESIS ALTERNA:

En el tratamiento endodntico, el poder de desinfeccin del clorhidrato de bencidamina contra el
Enterococcus faecalis en el complejo de conductos radiculares es diferente al poder
desinfectante del digluconato de clorhexidina



































20
3.3.3 OBJETIVOS



3.3.3.1.- Objetivo General

Determinar el grado de desinfeccin contra el Enterococcus faecalis del clorhidrato de
bencidamina comparado con el digluconato de Clorhexidina como irrigantes intraconducto.



3.3.3.2.- Objetivos especficos


* Determinar el grado de contaminacin con Enterococcus faecalis, en los conductos
previamente irrigados con digluconato de clorhexidina al 0.2% y con clorhidrato de bencidamina
al 0.15%.



* Comparar el grado de contaminacin con Enterococcus faecalis, en los conductos previamente
irrigados con digluconato de clorhexidina y clorhidrato de bencidamina




























21
3.4.-METODOLOGA

3.4.1.- TIPO DE ESTUDIO:

Este estudio ser de tipo experimental, con asignacin aleatoria a los grupos de estudio, simple
ciego, debido a que la persona que tomar las muestras de los dientes, no sabr el tipo de
sustancia empleada para la desinfeccin del los conductos.

3.4.2.- MUESTRA DEL ESTUDIO:

Se utilizar una muestra por conveniencia ya que no hay reportes en la literatura sobre estudios
previos que evalen la bencidamina como irrigante intraconducto, consistente en 55 dientes
humanos unirradiculares, sin caries radicular, recolectados de consultorios odontolgicos de la
ciudad de Medelln; estos especmenes van a ser obtenidos de pacientes con enfermedad
periodontal, en donde el tratamiento a seguir fue la extraccin mandatoria y de pacientes con
tratamiento ortodntico que requieren extracciones indicadas. En estos no se tendr en cuenta el
sexo y cada paciente firmar un consentimiento informado por medio del cual autoriza a los
investigadores a realizar el estudio en dichas muestras.


3.4.3 METODOLOGA DE INCUBACIN BACTERIANA


Esta metodologa es modificada por la descrita por el Dr V.B. Berber , F.J. Souza Filho, en
2006.


3.4.3.1 SELECCIN Y ESTANDARIZACIN DE LOS ESPECIMENES:

Un total de 55 dientes humanos extrados uniradiculares, observados radiogrficamente, sern
seleccionados para este estudio.
Sus coronas sern removidas con un disco de diamante e irrigacin abundante con agua
corriente. La superficie externa de todos los dientes y el cemento sern limpiadas con curetas
periodontales, y sus races sern estandarizadas a una longitud de 15 mm. Los conductos se
instrumentarn con limas tipo K desde una lima # 10 hasta una lima #20 a nivel del foramen
apical, las cuales irn previamente impregnadas con RC-Prep y se irrigaran con abundante
NaOCL al 5.25% entre lima y lima, recapitulando siempre con la lima # 10. Luego se
instrumentaran con limas Profile serie 29, iniciando con una lima #15 hasta una lima #40 a una
longitud de 15mm, las cuales se impregnarn de RC-Prep entre lima y lima y abundante
irrigacin con NaOCL al 5.25%. Se corroborar la permeabilidad apical entre limas con una lima
#20. Posteriormente se irrigarn con EDTA al 17% para eliminar el barrillo dentinario por 10
minutos seguido por NaOCL al 5.25% durante 10 minutos y agua corriente por una hora como
fue descrito por diferentes autores (Ferraz y col en el 2001).
Pasado este proceso, se pondrn en autoclave a 121C durante 15 minutos y 15 libras de
presin para lograr su completa esterilizacin.
Luego se les aplicaran dos capas de barniz transparente en las superficies radiculares externas,
con el objetivo de evitar contaminacin por esa va. La eficiencia del estudio se observara en una
prueba piloto con el uso de SEM para verificar la presencia de tbulos dentinales abiertos.


22
3.4.3.2 CONTROL DE CALIDAD DE LA ESTERILIZACIN

Se tomar el 10% de la muestra total de los dientes, elegidos al azar y se pondrn en tubos de
vidrio los cuales contendrn 5ml de caldo cerebro corazn (BHI). Ellos sern mantenidos en una
incubadora a 37 C por 48 horas para ver la eficacia de la esterilizacin.
Si las muestras en los tubos no presentan turbidez del medio, quiere decir que el control de
calidad pasa la prueba.


3.4.3.3 CULTIVO DEL Enterococcus faecalis Y CONTAMINACION DE LOS ESPECIMENES.

3.4.3.3.1 PREPARACION DE LA SUSPENSIN BACTERIANA:


Los cultivos puros de Enteroccocus faecalis ATCC 29212, sern previamente cultivados en caldo
cerebro corazn (BHI) por 24 horas y despus cultivados en agar sangre y medio de
Enterococossel
TM
, con el objetivo de verificar tanto la viabilidad, como la pureza de la
suspensin.
La concentracin de la suspensin se ajustar a la escala 0.5 de Mc Farland, que equivale a una
concentracin de 1.5x 10
8
UFC/ml.
Se pretende evaluar el grado de desinfeccin causada por el clorhidrato de bencidamina al
0.15% y por el digluconato de clorhexidina al 0.2%, respectivamente, en los dos grupos de
dientes inoculados con Enterococcus faecalis, cada dos das durante un tiempo de 21 das.


3.4.3.3.2 GRUPOS EXPERIMENTALES

Dichos grupos se conformarn de la siguiente manera:

El control positivo: estar conformado por 5 dientes infectados con Enterococcus faecalis y no
tratados endodnticamente.
El control negativo estar conformado por 5 dientes no infectados y no tratados.
El grupo 1, constituido por 20 dientes, ser infectado y tratado con digluconato de clorexidina al
0.2% con una cantidad de 5ml durante un tiempo de 3 min.
El grupo 2, constituido por otros 20 dientes, ser infectado y tratado con clorhidrato de
bencidamina al 0.15% con una cantidad de 5ml durante un tiempo de 3 min.


3.4.3.3.3 TOMA DE LA MUESTRA.

Antes y despus de usar las sustancias en estudio, se irrigarn los conductos de los dientes con
1 ml de solucin salina y se proceder a introducir un cono de papel con una longitud de 15mm
dentro de los conductos por 1 minuto y luego las puntas de papel sern sumergidas dentro de un
tubo que contiene BHI para confirmar la presencia del Enterococcus faecalis en los conductos.

Posteriormente se realizarn repiques en agar sangre y Enterococossel para realizar el recuento
de las colonias.



23
3.5 ANALISIS ESTADSTICO.

Para el objetivo general se har la determinacin de las frecuencias absolutas y relativas de la
cantidad de bacterias de los conductos irrigados con digluconato de clorhexidina al 0.2% y
clorhidrato de bencidamina al 0.15%.
Para los objetivos especficos se utilizar la prueba de X2 de tendencia para establecer si hay
diferencia en las frecuencias observadas de bacterias con los dos irritantes: digluconato de
clorhexidina al 0.2% y clorhidrato de bencidamina al 0.15%.
Se usar un nivel de significancia >0 0.5%.



TABLA DE VARIABLES

Variable Definicin
operacional
Naturaleza Nivel de
medicin
Codificacin
Nmero de
colonias
Cantidad de
microorganismos
presentes, de una
sola especie, medida
en nmero de
colonias de
Enterococcus
faecalis
Cuantitativa

Ordinal. Leve

Moderada

Severa
Desinfeccin de
acuerdo al nivel
de corte
Ubicacin de las
colonias de acuerdo
al corte histolgico
Cualitativa

Nominal
politmica
Tercio apical

Tercio medio

Tercio coronal
Tipo de
Sustancia
desinfectante
Tipo de irrigante
utilizado, para
eliminar las
bacterias en el
conducto
Cualitativa Nominal
dicotmica
1- Digluconato
de clorhexidina

2- Clorhidrato
de bencidamina



3.6.- RESULTADOS Y PRODUCTOS ESPERADOS

Evaluacin de una sustancia que no se ha utilizado como desinfectante intraconducto.
Un artculo de publicacin nacional y otro internacional

3.7.- Impactos esperados a partir del Resultado.
Lograr resultados confiables en cuanto al uso de la Bencidamina como agente irrigante para la
desinfeccin de conductos radiculares en el tratamiento endodntico.

24

3.8- Estrategias de Comunicacin
Se elaborar un protocolo para el aislamiento de patgenos endodnticos, a partir de muestras
del sistema de conductos radiculares en dientes con tratamiento endodntico previo; as como,
un protocolo para la identificacin de E. faecalis mediante la utilizacin de caldo cerebro corazn
(BHI), los cuales se anexarn al Manual de Procesos del Laboratorio de Microbiologa Oral del
Instituto Colombiano de Medicina Tropical. Dichos protocolos, podrn ser empleados en otras
investigaciones, as como con fines de diagnstico para prestar un servicio de extensin.
Se elaborar un artculo de revisin acerca de la etiologa, signos clnicos, diagnostico y
tratamiento de las infecciones de tipo endodntico. Dicha revisin, se sometern a evaluacin
en una revista nacional indexada.
Se escribir un artculo original, a partir de los resultados obtenidos en esta investigacin, el cual
ser sometido a evaluacin por una revista internacional indexada.
Se realizar al menos una presentacin en un evento nacional, de los resultados obtenidos en
este estudio.
























25

4.- CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES

ACTIVIDAD
MESES CALENDARIO

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Adquisicin de
materiales y
reactivos.

Estandarizacin de
una tcnica para la
toma de muestras
del sistema de
conductos
radiculares, en
dientes con
tratamiento
endodntico
previo.

Estandarizacin de
un medio de
cultivo, caldo
cerebro corazn
(BHI) y
Enterococossel
para la
identificacin
especie-especfica
de Enterococcus
faecalis

Elaboracin del
informe preliminar

Recoleccin de las
muestras.

Anlisis
microbiolgico de
las muestras.

Tabulacin y
anlisis estadstico
de los resultados.

Elaboracin del
informe final

Elaboracin del
artculo original













26
5.-Presupuesto
Tabla 5.1. Presupuesto global de la propuesta por fuentes de financiacin (en
miles $)
FUENTES
RUBROS
CES ICMT TOTAL
PERSONAL 8.500 2.500 11.000
EQUIPOS 14.620 14.620
MATERIALES Y REACTIVOS 6.000 6.000
TOTAL 14.500 17.120 31.620



Tabla 5.2. Descripcin de los gastos de personal (en miles $)
RECURSOS
(CONTRAPARTIDA)

TOTAL NOMBRE FORMACIN FUNCIN HORAS/SEM
CES ICMT 12 meses
Juan David Ochoa
Garca
Odontlogo,
Endodoncista
Investigador
Principal
4 8.500 8.500
Lina Mara
Salazar Pelez
Bacteriloga,
MSc en
Biotecnologa
Co-
Investigador
4 2.500 2.500
Edgar Ocampo
Granada
Odontlogo,
Residente de
Endodoncia
Tesista 4
Santiago Correa
Pelez
Odontlogo,
Residente de
Endodoncia
Tesista 4
TOTAL 8.500 2.500 11.000

Tabla 5.3. Descripcin y cuantificacin de los equipos de uso propio (en miles $)
EQUIPO VALOR
Nevera (4C) 80
Freezer (-20C) (SAMSUNG) 300
Desionizador de agua (Biocel, Milli Q) 1.000
Balanza analtica (Chyo JL-200) 300
Propipeteador (BioHit, Proline Midi) 50
Micropipetas (GILSON )(#6) 600
Agitador magntico (Corner) 80
pHmetro (SCHOTT, CG 840-B) 300
Autoclave 1.000
27
Centrifuga de mesa (KUBOTA, MICRO II KM-100) 250
Centrfuga refrigerada (KUBOTA 5700) 1.000
Bao Mara (95C y 37C) (#2) 500
Ultracentrifuga refrigerada (Beckman, Avanti J-25I) 4.000
Vrtex (MIXER) 60
Cabina de flujo laminar (C4) 1.000
Tecnica Visin 950
1 equipo odontolgico 900
1 pieza de alta velocidad 200
TOTAL 12.575


Tabla 5.4 Materiales, suministros y bibliografa (en miles $)

MATERIALES TOTAL
Material fungible 600
Reactivos 5.400
TOTAL 6.000


























28
6.- BIBLIOGRAFIA

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Endodoncia. Rev. Esp. De Endodoncia. Vol.7 No. 1. 2001.

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11. Landry R G, Torn Bulls Howley T. Effectiveness of Benzidamine HCL in the treatment
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31
CONSENTIMIENTO INFORMADO




Yo________________________________, identificado con (CC) (TI)
#______________________de________________, doy constancia de que se me ha realizado
una valoracin clnica en modelos de yeso, fotografas y radiografas; de donde mi odontlogo
me ha informado que algunos de mis dientes (_________________) sanos necesitan ser
extrados por motivos de espacio y para poder realizar de manera correcta mi tratamiento
ortodntico. De esta manera, yo __________________, y en caso necesario mi
acudiente______________________ (CC) #_____________, autorizamos bajo ninguna presin
la extraccin de los dientes.

Tambin se me ha informado que los dientes que se me van a extraer, podrn ser empleados en
el estudio Efectividad antibacteriana de varios protocolos de irrigacin sobre clulas
planctnicas y biopelculas de Enterococcus faecalis, en su fase ex vivo y que se trata de una
investigacin ya aprobada por el Comit Tcnico y de tica de Investigacin del Instituto de
Ciencias de la Salud CES.

No recibir ningn pago para participar en el estudio y este no tendr para mi ningn costo.

Para constancia, en uso de todas mis facultades legales y mentales, firmo con la presencia de un
testigo, quien tambin se identifica en este consentimiento






___________________________ _________________________
Paciente Acudiente


___________________________
Odontlogo














32
ANEXO
CARTA DE INTENCIN



Medellin Septiembre 6 de 2005



Seores
COMITE DE INVESTIGACION
Facultad de Odontologa
Instituto de Ciencias de la Salud CES
Ciudad.




Quiero manifestar mi intencin de participar como investigador en el proyecto de grado
Estudiocomparativo, in Vitro, de la efectividad antimicrobiana del digluconato de clorhexidina al
0.2% y del clorhidrato de bencidamina al 0.15%, usados como irrigantes intraconducto,
adelantado por los estudiantes del Postgrado de Endodoncia Santiago Correa Pelez y Edgar
Ocampo Granada, asumiendo los siguientes compromisos


1. Acompaamiento como asesor e investigador del estudio.
2. Comunicar oportunamente cualquier tropiezo que se tenga en el desarrollo de la investigacin
desde su inicio hasta la publicacin final al comit de Investigaciones.
3. Trabajar en beneficio de los aspectos ticos y jurdicos relacionados con la consecucin de los
especmenes y de las normas de propiedad intelectual
4. Participacin en la organizacin del protocolo.
5. Participacin en el anlisis y discusin de resultados.
6. Participacin en la elaboracin del articulo cientfico para publicacin en la Revista CES
Odontologa e internacionalmente.




Cordialmente




Juan David Ochoa
Asesor/ Investigador