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LA MEMBRANA PLASMTICA: MODELOS, BALSAS Y SEALIZACIN*

RESUMEN La membrana plasmtica es la estructura que delimita a la clula. Inicialmente conceptualizada como una barrera inerte, divisoria del interior y exterior celular, en la actualidad se le reconoce como un elemento dinmico y fundamental en el mantenimiento de la integridad de la clula. Su pltora de componentes lipdicos y proteicos propicia su participacin en muy diversos e importantes procesos por ejemplo: transporte y permeabilidad selectiva de sustancias e iones, excitabilidad, movilidad, diferenciacin, exocitosis, reconocimiento intercelular y transduccin de seales extracelulares. La presente revisin incluye un breve recuento de los principales modelos que han conducido a la concepcin actual de su estructura y de sus propiedades funcionales y destaca las implicaciones del modelo vigente de balsas de membrana en procesos de sealizacin intracelular. ABSTRACT The plasma membrane is the structure that delimits the cell. Originally, it was just considered a physical barrier that separates the inside from the outside of the cell. But now, it is visualized as a dynamic structure, enclosing diverse lipids and proteins elements, which is involved in several important processes e.g., ion permeability and transport, excitability, cell migration, hormone and neurotransmitter secretion, extracellular signal transduction, cell differentiation, and cell to cell recognition. This review contains a brief overview of the development of the plasma membrane concept, including its current model that involves the dynamic nanoscale heterogeneities denominated membrane rafts. The functional relevance of membrane rafts is also discussed.

PALABRAS CLAVE: Balsas lipdicas, caveolas, sealizacin, colesterol

KEY WORDS: Lipid rafts, caveolae, signaling, cholesterol

1.

Origen y desarrollo del concepto de membranas biolgicas

Una de las primeras referencias al concepto de membrana biolgica se adjudica al botnico alemn Pfeffer (1887) (1), quien lo habra postulado al describir la similitud del comportamiento osmtico entre clulas y membranas artificiales (Tabla 1). En particular, Pfeffer observ que las propiedades osmticas exhibidas por las membranas de algunos tipos de clulas vegetales semejaban a las de las membranas obtenidas al precipitar ferrocianuro cprico sobre paredes porosas de cermica. Posteriormente, Overton (1899) (1) demostr que las
*Recibido: 14 de junio de 2010

sustancias lipoflicas penetraban la clula con mayor facilidad que aquellas que no lo eran, lo que le llev a concluir que la estructura que delimita a la clula debera estar constituida por una capa lipdica. Ms tarde, el valor de la capacitancia elctrica de la membrana plasmtica fue reportado. En este sentido, Fricke (1923) (2) determin el valor de 1.0 Fcm-2 para la membrana de eritrocitos, mientras que en otros tipos celulares el valor fluctu entre 1.0 y 6.0 Fcm-2. Esta aparente inconsistencia fue adjudicada a la variabilidad en el espesor de las membranas analizadas. En su estudio clsico, Gorter y Grendel (1925) (3) determinaron el valor del rea ocupada por los lpidos extrados a partir

Aceptado: 28 de octubre de 2010

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Meza U, Romero-Mndez AC, Licn Y, Snchez-Armss S TABLA 1 CRONOLOGA DEL MODELO DE LA MEMBRANA PLASMTICA

Ao 1887 1899 1923 1925 1934

Autores Pfeffer Overton Fricke Gorter y Grendel Danielli y Harvey Danielli y Davson

Observacin Similitud del comportamiento osmtico entre clulas vegetales y membranas artificiales. Naturaleza lipdica de la membrana plasmtica. Determinacin del valor de capacitancia elctrica especfica de la membrana plasmtica. Organizacin de los lpidos de la membrana plasmtica en bicapa. Presencia de protenas en la membrana plasmtica. Teora paucimolecular de las biomembranas. Teora unitaria de las membranas biolgicas. Modelo del mosaico fluido. Segregacin de dominios lipdicos en el plano lateral de la membrana. Existencia de microdominios de esfingolpidos. Modelo de balsas lipdicas e importancia del colesterol como elemento de las mismas. Incorporacin de protenas a balsas lipdicas a travs de un proceso jerrquico. Presencia de nanodominios lipdicos en la monocapa interna de la membrana plasmtica sin correspondencia necesaria con balsas lipdicas en la capa externa. Sustitucin del concepto de balsa lipdica por el de balsa de membrana. Revaloracin del modelo de balsas como principio organizador de las funciones de las membranas biolgicas.

Ref. 1 1 2 3 4 5 6 7 8 14 15 24 16 17 20

1959 1972 1975 1988 1997 2002

Robertson Singer y Nicolson Chapman Simons y van Meer Simons e Ikonen Anderson y Jacobson Zacharias y cols.

2006 2010

Pike Ligwood y Simons

de la membrana plasmtica de eritrocitos e inesperadamente, encontraron que dicho valor corresponda al doble del de la superficie calculada para un nmero conocido de estas clulas (asumiendo una forma discoidal para ellas). Estos investigadores infirieron, acertadamente, que la membrana de los eritrocitos est constituida por una bicapa de lpidos con un espesor de 5.0 6.0 nm. Posteriormente, al comparar la tensin superficial de la membrana plasmtica de ovocitos de erizo de mar (0.2 dinascm-1) con la de una interfase artificial lpidosolucin acuosa (10.0 -15.0 dinascm-1), Danielli y Harvey (1934) (4) evidenciaron el requerimiento de un factor adicional que explicaba la atenuacin de este parmetro en las membranas biolgicas,

el cual adjudicaron a la presencia de protenas. Otro avance significativo en la consolidacin del concepto de biomembrana se atribuye a Danielli y Davson (1934) (5), quienes propusieron la teora paucimolecular de la membrana, segn la cual las membranas biolgicas presentan un grupo mnimo de constituyentes moleculares que incluye: una regin central de naturaleza lipdica no polar y espesor variable, bordeada (a ambos lados) por una monocapa de fosfolpidos cuyos extremos polares estaran orientados hacia el exterior y una monocapa ms externa de protenas globulares. En 1959, Robertson (6) postul la denominada teora unitaria de la membrana, la cual establece que todas las membranas biolgicas estn constituidas por una

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bicapa lipdica. El sustento de esta propuesta fueron imgenes de membranas celulares obtenidas por microscopa electrnica en las que era posible distinguir una regin intermedia de baja densidad electrnica delimitada por estructuras perifricas de mayor densidad; la regin intermedia corresponda a las cadenas hidrocarbonadas de los lpidos y las estructuras perifricas a los grupos hidrfilos de los lpidos y/o a las protenas asociadas. El anlisis detallado de este tipo de imgenes permiti a Robertson hacer extensivo su modelo al conjunto de membranas intracelulares. El modelo unitario estableca, adicionalmente, que los componentes proteicos se alojan principalmente sobre las superficies de la bicapa lipdica y slo una proporcin muy reducida de su estructura se localiza en la regin central hidrfoba de la membrana. An cuando este modelo defina a la bicapa lipdica como una barrera al libre flujo de iones y molculas hidrfilas, no descartaba la posible presencia de canales acuosos a travs de los cuales pudiese darse el transporte de estos materiales. Esto ltimo, bajo la condicin de que dichos canales, de existir, deberan expresarse en muy baja densidad ya que su presencia difcilmente era detectable en las micrografas electrnicas. 1.1. Propiedades dinmicas de las biomembranas Los modelos hasta aqu mencionados se refieren, bsicamente, a las caractersticas estructurales estticas de las membranas biolgicas. Y no fue sino hasta finales de los aos sesentas cuando surge el concepto de fluidez de membrana que incorpora los aspectos dinmicos (por ejemplo: difusin, recambio, intercambio e interacciones moleculares) que se presentan en, o se dan entre, los elementos constitutivos de las biomembranas (7, 8). En 1972, Singer y Nicolson (7) incluyeron esta novedosa perspectiva en su conocido modelo de mosaico fluido, al postular que la membrana plasmtica est constituida por una bicapa fluida de lpidos capaz de alojar diversos conglomerados o mosaicos proteicos. Estos ltimos, pueden estar parcialmente inmersos, o bien, pueden atravesar la bicapa lipdica y, en ambos casos, protruir de ella. El modelo de mosaico fluido, adicionalmente, resalta las interacciones hidrfobas que se establecen entre las protenas y los lpidos constitutivos de la membrana, as como la distribucin aleatoria que ambos elementos guardan como resultado de su difusin en el plano de la membrana. Posterior a su planteamiento, surgieron diversas observaciones y crticas a este modelo. Por ejemplo, estudios sobre las propiedades mecano-qumicas de las membra-

nas de eritrocitos indicaron que los parmetros intrnsecos de los materiales de la membrana (por ejemplo: densidad, mdulo elstico, viscosidad, energa libre superficial y mdulo de deformacin) mostraban diferencias significativas con respecto a los observados en bicapas lipdicas artificiales. Este hallazgo resultaba inconsistente con el modelo de mosaico fluido, ya que una biomembrana conteniendo estructuras proteicas muy separadas (a manera de icebergs) y sin restriccin de movimiento, se esperara que exhibiera propiedades muy semejantes a la de una bicapa lipdica artificial. Cuestionamientos de este tipo promovieron diversas modificaciones al modelo original. As, por ejemplo, se incorpor la nocin de asimetra entre las dos monocapas de la membrana (9, 10) y se resalt la naturaleza selectiva de las interacciones moleculares que propician la difusin y segregacin lateral de sus variados elementos lipdicos en dominios discretos (8, 11). Estos ltimos, presentaron grandes dificultades en la definicin de su tamao, forma y vida media. Problemas que se adjudicaron, en gran medida, a la variabilidad entre ellos y entre las membranas que los alojaban (12). Una estrategia alternativa para su estudio consisti en caracterizar las fases lipdicas en equilibrio en modelos de membrana generados a partir de mezclas definidas de lpidos (por ejemplo: 2-3 componentes), asumiendo que dichas fases, conceptualmente, representaban sus anlogos. La caracterizacin de estas fases en monocapas y bicapas sintticas permiti establecer los principios termodinmicos que subyacen la segregacin de fases inter e intramonocapas. Un modelo ampliamente utilizado en este tipo de estudios es el de las vesculas gigantes unilamelares. Estas bicapas lipdicas esfricas (dimetro >20 m) incorporan colorantes fluorescentes que se particionan de manera diferencial en las fases segregadas, permitiendo la discriminacin de estas ltimas a travs de imgenes de microscopa de fluorescencia (13). 1.2. El modelo vigente: balsas de membrana El concepto de segregacin de lpidos fue retomado por Simons y van Meer (1988) (14) en su modelo de microdominios lipdicos, el cual postularon a partir de sus estudios sobre la distribucin diferencial de esfingolpidos hacia la membrana apical de clulas epiteliales. En dicho modelo, se plantea el ensamblaje de microdominios de esfingolpidos de manera especfica en la monocapa luminal de la membrana del aparato de Golgi, donde operaran como centros de reclutamiento de aquellas protenas destinadas a incorporarse a la monocapa externa de la membrana apical de dichas clulas. Un elemento adicional

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Meza U, Romero-Mndez AC, Licn Y, Snchez-Armss S su asociacin con protenas de soporte relativamente pequeas (21-24 kDa) denominadas caveolinas, las cuales contribuyen a estabilizar su estructura a travs de su interaccin con la monocapa interna de la membrana plasmtica. Las caveolinas funcionan como estructuras de andamiaje para diversas protenas de sealizacin y como transportadores del colesterol (sintetizado de novo) desde el retculo endoplsmico hacia la membrana plasmtica. Se han identificado tres isoformas de caveolinas. Dos de ellas se expresan ubicuamente (Cav-1 y Cav-2), mientras que la expresin de la tercera (Cav-3) est restringida a miocitos cardiacos y esquelticos (19). En neuronas, las caveolinas generalmente estn ausentes, aunque se ha reportado un grupo de protenas anlogas denominadas flotilinas (18). La significancia funcional de las balsas lipdicas es un tema vigente y de gran inters debido a la propuesta de que la compartimentacin subcelular de procesos podra acompaarse de un incremento en su especificidad y eficiencia (18, 20). 1.3. Problemas del modelo de balsas de membrana Una crtica inicial muy fuerte al modelo de balsas tiene que ver con el aislamiento y caracterizacin de los dominios de membrana resistentes a detergentes (MRDs), definidos operacionalmente como balsas lipdicas (21). Diversos autores han argumentado que los MRDs corresponden a agregados de dominios de membranas promovidos por las condiciones establecidas durante su aislamiento (es decir, uso de Tritn X-100 a 4oC; ambos tratamientos inducen cambios de fase) y no necesariamente al estadio que tales dominios pudieran haber guardado previo a su aislamiento (22). Otro cuestionamiento importante se refiere a la localizacin que guardan las protenas transmembranales (por ejemplo: receptores, canales inicos, ATPasas o acarreadores) en el plano de la membrana. Con respecto a la posibilidad de que su insercin pudiera darse al interior de las balsas de membrana, se han esgrimido argumentos termodinmicos que sealan la baja probabilidad de este evento (23). Sin embargo, tambin existe un cmulo de evidencias bioqumicas y biofsicas que sustenta su insercin en tales dominios de la membrana (18, 24, 25). Ms an, se ha propuesto que su incorporacin pudiera ser un factor clave en el establecimiento y patrn de distribucin de las balsas en la membrana plasmtica (20). El ensamble de ciertas protenas al interior de las balsas de membrana pudiera ser, asimismo, condicin indispensable para promover su funcionalidad (26). Una hiptesis muy provocativa con

al modelo de la estructura de las membranas biolgicas, el colesterol, fue incorporado ms tarde por Simons e Ikonen (1997) (15) como un importante coorganizador de nanodominios o balsas lipdicas. El planteamiento de estos autores es que los complejos de glicoesfingolpidos-colesterol se mantienen estrechamente empaquetados y se comportan como unidades o balsas dentro de la monocapa externa de la membrana plasmtica. A pesar que desde 1973 ya se haban expuesto consideraciones tericas que predecan el que la fase ordenada de la monocapa externa podra inducir el empaquetamiento de regiones de la monocapa interna correspondiente, hasta mediados de los aos 1990s la posible existencia de balsas se hallaba confinada a la monocapa externa de las membranas biolgicas. Posteriormente, se ha mostrado que una organizacin equivalente de nanodominios est tambin presente en la monocapa citoplsmica (16), a pesar de que esta ltima es pobre en esfingolpidos, especialmente en esfingomielina (9,10). Sin embargo, ni su correspondencia fsica con las balsas de la monocapa externa, ni sus propiedades y componentes estructurales han sido totalmente caracterizados. Otro aspecto importante de este modelo tiene que ver con la interaccin que se da entre protenas y balsas lipdicas; donde slo algunos elementos proteicos son incluidos o anclados a las balsas, mientras que otros son excluidos de sus lmites en funcin de su naturaleza molecular y de sus propiedades termodinmicas (15). Ms recientemente, se ha consensuado la redefinicin del concepto de balsas lipdicas (lipid rafts) en favor del de balsas de membranas (membrane rafts): Las balsas de membrana son dominios pequeos (10-200 nm), heterogneos, altamente dinmicos, enriquecidos en esteroles y esfingolpidos que compartimentan procesos celulares. Estas pequeas balsas pueden, eventualmente, ser estabilizadas para formar plataformas de mayor tamao a travs de interacciones protena-protena y protena-lpido (17). Es importante sealar que esta definicin, dada la necesaria inclusin de esfingolpidos, excluye a los dominios ordenados de la capa interna de la membrana plasmtica como balsas de membrana. A la fecha, se reconocen dos tipos de balsas de membrana: balsas planas y caveolas (18, Fig. 1). Las primeras estn alineadas en el plano de la membrana y su caracterizacin ha sido muy difcil debido a su pequeo tamao (10-200 nm) y gran dinamismo (17). Las caveolas, por su parte, corresponden a invaginaciones de la membrana plasmtica (50-100 nm de dimetro) y, aun cuando estn involucradas en los procesos de transcitosis y potocitosis, muestran un dinamismo mucho menor que el de las balsas planas (15). Una caracterstica distintiva de las caveolas es

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Figura 1. Tipos de balsas de membrana. La membrana plasmtica incluye dos tipos de balsas de membrana: planas y caveolas. En ambos, se destaca la presencia de colesterol, esfingomielina y protenas asociadas. Se ilustra tambin la localizacin especfica de caveolina en caveolas.

relacin al proceso de incorporacin de protenas a las regiones ordenadas de la membrana refiere a un proceso jerrquico (20, 24) en el que la etapa inicial correspondera a la asociacin de protenas individuales con una cubierta o monocapa lipdica (lipid shell) enriquecida en glicoesfingolpidos y colesterol (~7 nm), lo que facilitara su incorporacin a balsas de membrana de mayor tamao (50-200 nm) y eventualmente, su confluencia en plataformas funcionales asociadas a procesos de sealizacin y/o trfico de membranas. Finalmente, tampoco se descarta la posibilidad de que las protenas transmembranales pudieran localizarse en la frontera comn entre las regiones desordenadas y las balsas de membrana. Con respecto a las denominadas protenas perifricas (no transmembranales) asociadas a la membrana plasmtica, es generalmente aceptado que stas se particionan en los dominios ordenados

y/o las MRDs como resultado de su fuerte anclaje a la monocapa exterior a travs de anclas lipdicas de glicosilfosfatidilinositol (GPI) o bien, mediante su asociacin a la monocapa interna va procesos de acilacin o prenilacin (16) (Fig. 1). Ejemplos representativos de protenas perifricas asociadas a la monocapa interna de la membrana plasmtica son las protenas de la familia Src, la subunidad de las protenas G, las flotilinas (a travs de sus procesos de acilacin), caveolinas (mediante su unin al colesterol) y anexinas (por medio de su asociacin con fosfolpidos). 2. Lipidmica de las biomembranas El contenido total de colesterol y de fosfolpidos (incluyendo el tipo de cidos grasos que los componen) en la membrana plasmtica y membranas intracelulares est bien caracterizado en distintos

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Figura 2. Asimetra lipdica de la membrana plasmtica. Estructura qumica y porcentaje constitutivo de los principales lpidos de la membrana plasmtica en sus monocapas externa e interna.

tejidos, tipos celulares y organelos intracelulares (12, 27, 28). En general, el porcentaje de colesterol alojado en la membrana plasmtica es significativamente mayor (~25% del total de lpidos) al del aparato de Golgi (~8%), retculo endoplsmico rugoso (~6%), retculo endoplsmico liso (~10%) o mitocondrias (~3%) (12, 28, 29). La innegable relevancia de la lipidmica de membranas biolgicas conocida a la fecha, desafortunadamente es eclipsada por la mnima proporcin de elementos comnmente referidos (<15), no obstante la amplia gama de especies lipdicas (~1000) que se plantea est presente en estas membranas (30). Sin lugar a dudas, resulta indispensable ampliar nuestra actual perspectiva de la asociacin de procesos celulares con los elementos lipdicos de las membranas biolgicas. 3. Asimetra lipdica de las membranas Las primeras evidencias de la distribucin asi-

mtrica de lpidos en membranas biolgicas se obtuvieron a partir de experimentos realizados en eritrocitos expuestos a fosfolipasas y esfingomielinasas (9, 10). El compendio de estos y posteriores reportes ha llevado a concluir que la monocapa externa de la membrana plasmtica est compuesta principalmente de fosfatidilcolina y esfingomielina, mientras que la monocapa interna preferentemente incluye fosfatidilserina y fosfatidiletanolamina (Fig. 2). Los glicoesfingolpidos de la monocapa externa usualmente poseen un cido graso de cadena larga (18-24 carbonos) que interacciona con las cadenas aclicas de los lpidos de la monocapa interna de la membrana. Lateralmente, se asocian entre s a travs de puentes de hidrgeno y de las interacciones dbiles que se establecen entre sus carbohidratos. Por su parte, aquellas regiones de la membrana que exhiben un mayor grado de fluidez generalmente involucran molculas de fosfatidilcolina con cidos grasos insaturados. Se acepta que las regiones

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Figura 3. Efecto dual del colesterol sobre la viscosidad de bicapas lipdicas. El colesterol disminuye o aumenta la viscosidad de bicapas lipdicas al incorporarse a regiones en fase cristalina o lquido-desordenado, respectivamente. Las cadenas aciladas de la fase resultante lquido-ordenado presentan menor movimiento trmico que las de la fase lquido-desordenado. Ntese que los cambios de temperatura indicados ( Calor) traspasan su valor crtico (Tc) o de transicin. Ts representa la temperatura del sistema. Diagrama modificado de Chapman (36).

ordenadas y fluidas pueden intercalarse en el plano de la membrana plasmtica. La asimetra lipdica tambin est presente en la membrana del aparto de Golgi y de endosomas. En contraste, sta no se observa en la membrana del retculo endoplsmico (30). La asimetra lipdica entre las monocapas de las biomembranas se genera a travs de distintos procesos: transferencia espontnea de componentes lipdicos entre las monocapas (flip-flop), actividad de ATP-asas transportadoras de especies lipdicas y retencin especfica de ciertos lpidos en una u otra de las monocapas. La distribucin asimtrica de los lpidos reviste gran importancia, ya que previene el desarrollo de ciertos tipos de sndromes autoinmunes que pudieran comprometer la integridad de la membrana plasmtica y, por lo tanto, la viabilidad celular. El patrn de distribucin de colesterol entre las monocapas es un aspecto que a la fecha no est del todo dilucidado; existen reportes que lo ubican de manera preferente en la monocapa interna de la membrana plasmtica, otros que lo

sitan principalmente en la monocapa externa o, incluso, aquellos que sostienen que su rpida trasferencia entre las dos monocapas propicia su distribucin homognea (29). 4. Viscosidad de la membrana La viscosidad es una propiedad de los fluidos que provee informacin acerca de su orden molecular. En el caso de las membranas biolgicas este parmetro vara entre 1.5 y 3.8 P (P, poise = 1 gcm1s1), dependiendo del tipo celular (12), mientras que en la fase fluida del citoplasma (en ausencia de colisiones o uniones a macromolculas citoplsmicas del indicador de viscosidad) su valor es similar al del agua: 0.007 P, a 37oC. La monocapa externa de la membrana posee una menor viscosidad que su contraparte interna (31) y cada una de ellas, a su vez, presenta un gradiente de viscosidad decreciente de la periferia hacia el centro (31). Interesantemente, la incorporacin de colesterol modula en ambos sentidos la viscosidad

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Figura 4. Balsas de membrana y sealizacin. Las balsas de membrana favorecen la transduccin de seales extracelulares al actuar como estructuras de andamiaje donde convergen distintos elementos implicados en las vas de sealizacin.

de las bicapas lipdicas en funcin de la fase en que se encuentren las cadenas aciladas; la disminuye al actuar sobre fases cristalinas (L) y la aumenta al incorporase a la fase de lquido-desordenado (L) (26, 32) (Fig. 3). Mediante la tcnica de 31P-NMR (resonancia magntica nuclear) se ha demostrado que la presencia de colesterol disminuye de manera importante la difusin lateral de fostatidilcolina en liposomas. El efecto promotor de orden del colesterol se adjudica primordialmente a su estructura tetracclica, la cual favorece su interaccin con cidos grasos saturados en conformacin all-trans (26, 32). Este aumento en la viscosidad de la membrana se acompaa de un incremento en su grosor, una reduccin en su permeabilidad a compuestos hidrfilos y la segregacin de algunos de sus componentes debido al desfasamiento (mismatch) hidrfobo generado por la incorporacin del colesterol. La reduccin de la permeabilidad a

compuestos hidrfilos por la adicin de colesterol a bicapas lipdicas se puede explicar por el efecto aditivo o la interaccin de los siguientes mecanismos: a) Efecto condensante del colesterol que promueve una reduccin en el rea molecular de los fosfolpidos; en ausencia de colesterol las molculas de fosfolpidos (a 0oC) ocupan un rea de 0.60 nm2 y con colesterol 0.51 nm2. b) Formacin de un cinturn de puentes de hidrgeno en la interfase de la bicapa entre el 3-hidroxilo del colesterol, el carbonilo del cido graso esterificado y el agua. Aproximadamente, 11 molculas de agua se unen al grupo polar de un fosfolpido en la bicapa. A partir de mediciones de la capacitancia elctrica de liposomas se ha determinado que (partiendo del extremo carbonilo) las molculas de agua penetran la bicapa hasta alcanzar el tercer o cuarto residuo metileno. En consistencia con lo anterior, estudios de resonancia del spin del electrn (ESR) sugieren

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que las molculas de agua penetran al menos hasta el segundo residuo metileno. c) La estructura tetracclica rgida del colesterol restringe los movimientos de los carbonos 2 -10 de las cadenas aciladas que lo rodean, sin afectar la movilidad del metilo terminal de la cadena hidrocarbonada. La insercin de colesterol en regiones ordenadas de la membrana, en contraste, promueve su fluidez al inhibir el empaquetamiento de las cadenas aclicas de los cidos grasos o su cristalizacin. Otros compuestos como esfingomielina, Ca2+ y Mg2+, tambin se ha reportado que modifican la viscosidad de las biomembranas (32). 5. Balsas de membrana y sealizacin Diversos estudios han adjudicado un papel importante a las balsas de membrana en la organizacin espacial y temporal de los distintos elementos involucrados en la transduccin de seales extracelulares, apoptosis, infeccin viral, adhesin y migracin celular, transmisin sinptica, organizacin del citoesqueleto y direccionamiento de protenas durante los procesos de endocitosis y exocitosis (15, 18). Una estrategia ampliamente utilizada en la evaluacin de estas tareas consiste en propiciar el desacople de los elementos constitutivos de las balsas de membrana (planas o caveolas) mediante el uso de frmacos que secuestran (por ejemplo: filipina, nistatina y anfotericina) o disminuyen (por ejemplo: metil--ciclodextrina) el colesterol alojado en las membranas celulares (Fig. 4). En el caso de las caveolas, su desmantelamiento tambin se logra al eliminar o interferir con el funcionamiento de sus protenas constitutivas: las caveolinas. La efectividad de ambos procedimientos est bien documentada (18). As por ejemplo, el pre-tratamiento con metil--ciclodextrina elimina la tpica inhibicin de los canales de potasio sensibles al voltaje (KV7.2/7.3) inducida por la

estimulacin de receptores muscarnicos (M1 o M3) co-expresados en clulas HEK293 (33). Por otra parte, se ha demostrado que la expresin de caveolina-3 en miocitos cardiacos es esencial para que se d la modulacin de los canales CaV1.2 (tipo L) por receptores 2-adrenrgicos (34). Finalmente, tambin se ha reportado que la desestabilizacin de las balsas puede afectar la expresin y/o la actividad (tanto en el sentido de prdida como de ganancia de funciones) de diversas protenas de membrana al modificar el ambiente lipdico que las rodea (33-35). 6. Conclusin El concepto de membrana plasmtica ha cambiado radicalmente desde su propuesta inicial, basada en sus propiedades osmticas, a finales del siglo XIX. La incorporacin de diversas y novedosas caractersticas estructurales y funcionales a lo largo de estos aos ha propiciado el establecimiento de un modelo dinmico que incluye la presencia de heterogeneidades denominadas balsas de membrana. Segn este modelo, tales dominios representan plataformas estructurales lpido-proteicas que propician la eficiente modulacin de procesos fisiolgicos asociados a la membrana plasmtica. Los principios que subyacen la dinmica de ensamblaje-disociacin de las balsas de membrana, as como sus posibles repercusiones funcionales (como la sealizacin) en los diferentes ambientes y contextos celulares, incluso en las membranas intracelulares, actualmente son materia de intenso estudio. Agradecimientos. La realizacin de este trabajo fue apoyada parcialmente por los siguientes convenios: CONACyT 61248 y C09-FRC-07-28.28-UASLP a U.M.; C10-FAI-05-46.75-UASLP a S.SA.; P/PIFI 2009-24MSU0011E-12 a U.M. y S.SA.

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