Manual de Quimica Sanguinea Veterinaria
Manual de Quimica Sanguinea Veterinaria
Manual de Quimica Sanguinea Veterinaria
INTRODUCCION
En los ltimos aos ha aumentado considerablemente el inters de la aplicacin de los anlisis
clnicos veterinarios en el diagnostico de patologas en animales. El rea de Qumica
sangunea tiene gran importancia en esta aplicacin porque ofrece informacin adicional al
veterinario para realizar un diagnstico ms preciso que conducir al tratamiento especfico es
decir al tratamiento de la causa determinante de la enfermedad en lugar de un tratamiento
e!clusivamente de los sntomas de sta.
"ctualmente e!iste un gran nmero de pruebas #ioqumicas especialmente tiles en los
estudios clnicos $ es claro que el ma$or crecimiento $ el ma$or reto en patologa clnica sern
del rea de la qumica. %or e&emplo cada ao aumenta el nmero de enzimas mensurables que
sabemos se alteran en las enfermedades $ cu$os cambios pueden ser aplicados en el
diagnstico. En la miopata nutricional de los bovinos $ ove&as el nico criterio fiel que indica la
presencia $ e!tensin de la enfermedad es el nivel elevado de la transaminasa glutmica
o!alacetica. 'os valores fuera de lo normal de otras enzimas sricas tambin son de valor en el
diagnstico $ determinacin de la cuanta del dao en el hgado pncreas huesos $ otros
rganos $ sistemas.
El sodio $ el potasio sricos &unto con alteraciones del equilibrio acido(base pueden ser
determinados con precisin $ rapidez suficiente para influir en el tratamiento de un paciente. 'a
pericia tcnica $ los instrumentos necesarios para algunas de estas determinaciones estn
aumentando en comple&idad $ por esta razn algunos valiosos medios de diagnstico tardan en
alcanzar uso prctico.
El presente manual pretende ofrecer al #acterilogo una gua de tcnicas $ procedimientos de
Qumica sangunea que se realizan en el 'aboratorio )lnico *eterinario para lograr as
resultados ms ptimos $ confiables.
%ara lo anterior se plantean una serie de pasos a seguir desde la toma de la muestra pasando
por las determinaciones qumicas hasta la obtencin de los resultados.
+. ,-." /E .0E1,2"
.",E23"'E1
,i&eras bistur algodn gasa solucin $odada alcohol agu&as &eringas vacutainer tubos
secos tubos con anticoagulante 4E/,"5 bolsas para descartar material contaminado.
%2E%"2")3-6 /E' 13,3- /E %06)376
'a posicin adecuada $ su&ecin efectiva del animal son esenciales para un muestreo con
!ito. 0n poco de tiempo empleado haciendo amigos ganando la confianza del animal son
generalmente bien recompensados. 'a prctica apacible $ suave deber minimizar la
necesidad de mane&o fsico humano. 6o solo deben ser minimizados los trastornos fsicos $
psquicos sobre bases humanitarias sino tambin porque la sangre tomada de un animal
asustado adrenalizado puede originar resultados equivocados en varios anlisis por e&emplo
la glucosa $ los cidos grasos no esterificados.
El sitio de puncin debe estar limpio $ libre de patgenos esto inclu$e recortar el pelo lavarlo
con &abn detergente o solucin $odada en dos veces $ despus realizar una limpieza con
alcohol. El corte de pelo puede ser indeseable en animales de e!hibicin por lo que es
necesario pedir el consentimiento del dueo en caso que el corte no sea posible por algn
motivo la limpieza debe ser ms estricta. 'a asepsia debe realizarse en sentido contrario al
crecimiento del pelo del animal $ en forma circular del centro hacia la periferia. /espus de la
puncin el sitio debe de&arse seco limpio $ libre de sangre $a que cualquier humedad o materia
orgnica favorece las infecciones.
%06)3-6 8 13,3-1 /E %06)3-6
'a sangre venosa es la muestra ms comn obtenida de los animales. 'as tcnicas varan de
una especie a otra segn la localizacin de los vasos sanguneos convenientes $ el espesor
dureza $ capa de la piel.
#-*36-1
'a sangre es obtenida de las venas $ugular mamaria 4abdominal subcutnea5 $ caudales $ de
las arterias cartida caudal $ braquiales.
'a vena $ugular puede ser destacada presionando con los dedos el canal $ugular o usando un
cordn. El vaso prominente se ve bien en la ma$ora de las vacas lecheras $ se palpa
fcilmente en los animales obesos. ,iene apro!imadamente 9 cm de dimetro. 1e introduce en
la vena una agu&a larga calibre +: $ de ; cm de longitud o calibre +< $ += cm de longitud.
'a acertada penetracin en el vaso se evidencia al brotar la sangre. otra opcin es introducir
una agu&a ms fina 4cal.+> de ?> mm.5 en ngulo de :;@ con la piel a lo largo de la vena. Este
procedimiento es ms fcil con la agu&a insertada en una &eringa.
'uego de haberse introducido la agu&a se hace un poco de succin con la &eringa si sta entro
en el vaso la sangre aparecer en la &eringa. %uede ocurrir que la agu&a atraviese la vena $ que
la punta quede fuera del vaso entonces retirando la agu&a lentamente se llevar la punta
dentro de la luz de ste. E!trada la sangre se quita la presin sobre la vena $ se aplica
presin manual sobre la puncin antes de sacar la agu&a $ por ?= a <= seg despus para parar
el sangrado.
'a vena mamaria se punciona en forma seme&ante cuidando el operador de ser pateado.
,ambin es ms difcil de limpiar la piel pero es innecesario destacar la vena en la ma$ora de
los casos.
'a vena caudal se encuentra mu$ cerca de la arteria para realizar la puncin se alza la cola $
se clava una agu&a pequea calibre 9= 99 de 9;mm $ a +; cm de la base de la cola
verticalmente en la lnea media hasta que penetre en el bazo. 1e debe identificar la sangre
como venosa o arterialA sta es ms ro&a $ sale con ma$or presin.
-*EB"1
'a vena $ugular es la ms usada pero la vena $ arterias femorales son tambin fciles de
puncionar. 1e hace una particin en la lana a veces previamente cortada para e!poner un
rea de piel limpia. 'a $ugular se encuentra con frecuencia deba&o de la piel pero puede estar
incluida en el te&ido adiposo. 'a piel es blanda $ la agu&a 4calibre +>(99 de 9; mm5 entra con
facilidad $ frecuentemente atraviesa el vaso. Caciendo un poco de succin la sangre penetrar
en la &eringa si la agu&a se encuentra en la luz del vaso.
)"#"''-
%ara sangre venosa se utiliza la vena $ugular. )on el pulgar izquierdo en el surco $ugular a la
mitad de su tra$ecto en el cuello se comprime $ su&eta la vena. 1e clava la agu&a 4cal. +>(9= de
?> mm de longitud5 en ngulo apro!imado de +;@ con la piel + cm arriba del pulgar que est
su&etando el vaso se introduce + 9 cm ba&o la piel se aumenta el ngulo a :;@ $ se empu&a
para que entre en la vena. Esta penetracin debe hacerse en un solo movimiento suave $
continuo. Esto a$uda a disminuir el sangrado al sacar la agu&a. /e la cartida puede obtenerse
sangre arterial poco ms o menos como en la vaca pero el procedimiento requiere prctica $
no debe ser intentado en un animal valioso por una persona ine!perta. Es ms fcil obtener
sangre de la gran arteria metatarsiana situada en una canaladura sobre la cara antero(e!terna
del corve&n entre el tercero $ cuarto huesos metatarsianos. 1e in$ecta en la piel un poco de
anestsico local despus de unos minutos se pincha la arteria con una agu&a de calibre 9= $
9; mm mantenida en ngulo recto con el vaso firmemente enca&ado en el surco seo.
)E2/-
1e usan las venas de las ore&as $ la cola $ la vena cava anterior. /e una ore&a se toma sangre
por incisin de una vena con escalpelo o por puncin con una agu&a. 'a puncin de la vena
cava es peligrosa $ deber ser practicada por una persona e!perta.
%E22- 8 D",-
Es mu$ til el servicio de un a$udante e!perto en el mane&o de animales. 'as venas ceflica $
safena son usadas comnmente en el perro $ algunas veces en el gato. )on una mano el
a$udante su&eta con suavidad la cabeza del animal $ con la otra rodea por detrs arriba del
codo e!tendindolo un poco. )on el pulgar $ los otros dedos de esta mano se fi&a la piel flo&a
para su&etar el vaso firmemente. El operador inmoviliza el vaso con el pulgar e inserta la agu&a
4cal +> 999; o ?> mm5 arriba de este punto.
/e la vena $ugular se toma comnmente sangre en el gato $ algunas veces en el perroA el
procedimiento es seme&ante al descrito para otras especies. 'a sangre arterial se obtiene de la
vena femoral que es palpada en su fosa. Este procedimiento es probablemente ms largo $
doloroso que la venipuncin $ se recomienda el uso de anestesia local.
6-,"E 'a cantidad de muestra obtenida a travs de la puncin debe tenerse en cuenta en las
diferentes especies es as como para las especies ma$ores puede obtenerse por puncin sin
causar trastornos hasta +; ml de sangre $ en pequeas especies la muestra no se puede
e!ceder de += ml.
"*E1
3gualmente que para las otras especies la su&ecin o inmovilizacin es de gran importancia para
el !ito del procedimiento. E!isten varios sitios de puncin que sern elegidos de acuerdo a la
e!periencia del operador.
'a vena radial 4alar5 es el sitio de puncin mas comnmente elegido por su facilidadA se elige
una de las dos alas se levanta se su&eta el ala libre &unto con las patas del animal
seguidamente quien realizara la puncin inmoviliza con los dedos pulgar e ndice la vena alar
previo a esto se debe desplumar el recorrido de la vena con el fin de visualizarla me&or con
agu&a numero 9+ se hace insercin sobre la vena en un ngulo de +;@ se debe tener cuidado
de no e!travasar $a que la pared de la vena es mu$ delgada $ podra ocurrir con facilidad
observndose hematoma inmediatamente si esto no sucede se procede a e!traer la muestra
apro!imadamente de + a 9 ml de sangre en aves de ma$or tamao $ en aves mas pequeas
=; ml $a que una cantidad ma$or puede producir anemias en esta especie. -tros sitios de
puncin menos utilizados son la vena atlantooccipital ubicada entre el atlas $ la regin occipital
la insercin de la agu&a debe hacerse perpendicular al sitio antes mencionado. 'a puncin
intracardiaca debe realizarse con mucho cuidado $a que un error en ella al puncionar las
aurculas puede causar la muerta inmediata del animal.
9. ,2"61%-2,E /E '" .0E1,2"
El cuidado de la muestra sangunea hasta que es analizada en el laboratorio es importante
debe ser correctamente rotulada $ conservada para las pruebas bioqumicas.
%ara el transporte $ conservacin del suero se debe esperar la retraccin del cogulo en
nuestro medio la sangre de los animales se coagula entre 9=(?= minutos sin embargo lo mas
recomendado es esperar +(9 horas a temperatura ambiente cuanto ms tiempo se de&e para
que esta retraccin tenga lugar ma$or cantidad de suero se obtendr aunque la cantidad de
suero no ser nunca ma$or de un :=F del volumen original de sangre. 'a retraccin $
coagulacin se pueden producir mucho ms rpido si se incuba el frasco a ?G@) durante + hora
$ despus se coloca en un frigorfico durante media hora msA despus de la retraccin del
cogulo la muestra debe ser refrigerada a :@) para su transporte colocndola en hielo picado
o en una ca&a fra.
%ara el transporte $ conservacin del plasma no ha$ necesidad de esperar que la sangre se
sedimente despus de obtenida debe ser refrigerada para su envo al laboratorio en nevera
porttil con hielo seco o picado.
El suero $ el plasma no deben ser conservados ms de < horas en refrigeracin sin ser
separados de los dems componentes sanguneos porque esto trae como consecuencia
alteracin en los diferentes metabolitos de la sangre a determinar $ por lo tanto errores en los
resultados del laboratorio.
%ara la conservacin de la muestra se emplean anticoagulantes apropiados para algunas
determinaciones como por e&emploE se utiliza fluoruro para la glucosa o heparina para la
insulina etc. /ebemos tener conocimiento de la aplicacin de estos anticoagulantes en nuestro
medio para me&orar en lo posible el transporte $ conservacin de las muestras a nuestro
laboratorio $ evitar errores en las determinaciones.
'a transferencia de muestras de una persona a otra o de un lugar a otro no debe hacerse
descuidadamente la obtencin transporte $ anlisis de una muestra de sangre siempre debe
registrarse en forma oficial. El incumplimiento de los procedimientos formales de registro
descalifica la muestra para todo tratamiento ulterior.
?. ."6EB- /E '" .0E1,2"
En el laboratorio dependiendo de la muestra 4suero o plasma5 se procede de la siguiente
maneraE
?.+. %'"1."
El tubo que contiene sangre ms anticoagulante se debe centrifugar a +;== ( 9=== r.p.m.
durante +=(+; minutos para separar las clulas del plasma. El plasma que constitu$e la capa
ms e!terna se puede e!traer entonces empleando una pipeta %asteur o un cuenta gotas $ se
transfiere a un tubo de almacenamiento. 1e debe tener mucho cuidado para no alterar la capa
celular por lo que la pipeta no se debe poner demasiado cerca de la capa de clulas $a que la
succin puede alterar $ e!traer cierto numero de clulas de la superficie que podran alterar las
determinaciones bioqumicas. %ara esto se recomienda centrifugar nuevamente este
sobrenadante $ repetir el paso anterior obteniendo el plasma con menos clulas interferentes.
?.9. 10E2-
El tubo que contiene sangre sin anticoagulante se debe centrifugar a +;== r.p.m. durante +=
minutos para separar las clulas del suero. 'uego con una pipeta %asteur se debe separar el
suero o sobrenadante $ transferir a un tubo de almacenamiento para la realizacin de las
diferentes pruebas.
'a separacin del suero del cogulo es generalmente mucho mas sencilla cuando se emplean
recipientes de vidrio o de poliestireno especialmente tratados puesto que el coagulo se retrae
con suavidad de las paredes del frasco o del tubo $ eventualmente queda como una pequea
protuberancia en la base entonces el suero se puede verter o aspirar fcilmente con pipeta $
transferir a un tubo para almacenamiento. ,ambin se recomienda como en el caso del plasma
centrifugar nuevamente el suero $ obtenerlo libre de clulas que pueden interferir en las
determinaciones.
?.?. )-61E2*")3-6 /E '" .0E1,2"
'as muestras de suero o plasma previamente separadas de las clulas pueden conservarse a
temperatura ambiente 49=(?=@)5 durante un da sin que se deterioren en la parte refrigerada
de un frigorfico 4:@)5 durante : dasA en el congelador 4(+; a (9=@)5 durante una semana o
indefinidamente. %articularmente debe evitarse hacer congelaciones $ descongelaciones
repetidas para que las enzimas no pierdan su actividad inicial. 'as muestras congeladas deben
descongelarse lentamente hasta la temperatura ambiente $ entonces las muestras
descongeladas se deben mezclar completamente por inversin. /e esta manera se
conservaran me&or los metabolitos se obtendrn resultados mas acertados $ diagnsticos ms
e!actos.
:. EQ03%- H".E1 Q03I '"#H
:.+. )"2"),E231,3)"1 /E' EQ03%- H".E1 Q03I '"#.H
El equipo ".E1 Q03I '"# traba&a con programas especficos de mtodos prefi&ados estos
programas mane&an parmetros como la longitud de onda factor estndar valores de
referencia etc que estn almacenados en el mdulo Q03I '"#.
En el traba&o de rutina se pueden seleccionar estos programas oprimiendo simplemente la tecla
de la determinacin deseada $ automticamente el instrumento selecciona los parmetros
necesarios para la determinacin.
'as condiciones ambientales de traba&o tienen una temperatura de +;(?;@) $ una humedad
relativa de +;(>; F adems mane&a dos tipos de temperatura la temperatura de medida 49;@
?=@ $?G@)5 $ una temperatura de referencia 49;@ ?=@ $?G@)5 las cuales deben ser iguales en el
momento del anlisis.
El tiempo de medida utilizado es de :; J= $ +>= seg segn cada determinacin. En cuanto a la
longitud de onda posee filtros interferenciales de precisin colocados en un rotor con
posiciones de ::= :=; ;== ;:< ;G> $ <9= nanometros apro!imadamente.
El volumen de la cubeta va de ;== m ' a 9+== m ' para tcnicas micro $ semimicro.
:.9. -%E2")3-6E1 /E E6)E6/3/-
+. Encender el equipo del interruptor %-KE2 que se encuentra en la parte trasera del
equipo.
9. Esperar ? minutos la seal auditiva del equipo para iniciar procedimiento.
?. Elegir la temperatura necesaria segn cada determinacin. "sE
a. -primir la tecla H%2-D2".H
b. -primir la tecla H?H
c. .ediante la tecla HLH elegir la temperatura deseada segn la tcnica.
d. -primir la tecla HE6,E2H.
e. -primir la tecla H>H.
f. .ediante la tecla HLH elegir la temperatura interna del equipo la cual debe ser igual a la
temperatura de la tcnica.
g. -primir la tecla HE6,E2H dos veces.
:. -primir la tecla correspondiente a la determinacin a realizar.
E6 E1,E .-.E6,- E' EQ03%- E1,"2" E6 -%,3."1 )-6/3)3-6E1 %"2" 363)3"2 E'
%2-)E/3.3E6,- /E )"/" %20E#".
;. /E,E2.36")3-6E1 #3-Q03.3)"1
'as determinaciones bioqumicas en nuestro laboratorio se realizan utilizando suero como
principal muestra se prefiere traba&ar con suero porque este se hemoliza menos
probablemente que el plasma adems no contiene anticoagulantes los cuales pueden interferir
en las determinaciones que se va$an hacer o pueden e!traer el agua de las clulas sanguneas
originando la dilucin de los constitu$entes. 1in embargo el plasma puede ser utilizado en las
determinaciones de urea $ glucosa porque no e!iste una diferencia mu$ marcada en la
concentracin de estos metabolitos en los hemates $ en el plasma pero la diferencia en las
concentraciones de otros constitu$entes es mas elevada. En nuestro laboratorio se realizan con
ma$or frecuencia $ con fines diagnsticos las siguientes determinacionesE
;.+. D'0)-1"
El nivel de glucosa sangunea refle&a las condiciones nutricionales emocionales $ endocrinas
del su&eto. /espus de la comida aumenta Hhiperglucemia alimentariaH en animales
monogastricos pero no en los rumiantes. /urante la e!citacin aumenta probablemente como
efecto de la liberacin de norepinefrina. %or esta razn es costumbre obtener la sangre de
individuos posabsortivos quietos para determinar la Hglucosa sangunea en a$unasH. 'a
concentracin de glucosa en lo hemates se apro!ima a la concentracin de glucosa en plasma
en la ma$ora de los monogastricos $ rumiantes &venes. 'os eritrocitos de los equinos
contienen tambin poca glucosa la concentracin de glucosa en el plasma e!cede
generalmente a la de glucosa en sangre en += a ?= mgM +== ml en rumiantes $ caballos
adultos.
'a concentracin de glucosa sangunea aumenta por la norepinefrina epinefrina $ glucagn
tres substancias glucogenolticas $ por los glucocorticoides que inhiben la utilizacin de la
glucosa $ estimulan la gluconeognesis. ,ambin se elevan los valores de glucosa por
diabetes mellitus asociada con hiperadrenocorticalismo debido a una hipersecrecin de las
hormonas adrenocorticales por neoplasia o superdosificacin de corticoesteroides se asocia
tambin con hipertiroidismo $ convulsiones.
'a concentracin de glucosa disminu$e por el a$uno o por el e&ercicio prolongado por el
e!ceso de insulina $a sea por un insulinoma o por dosis altas de insulina como terapiaA en
to!emia inanicin $ lesiones hepticasA tambin disminu$e en hipoadrenocorticalismo debido a
una reduccin en la secrecin de las glndulas adrenales o a una produccin reducida de
"),C por la glndula pituitaria.
2E1%-61"#'E.
#acterilogo.
.E,-/-.
D-/(%-/. ,est color ( enzimtico. Dlucosa ( o!idasa ( pero!idasa.
%236)3%3-.
'a glucosa es transformada por la glucosa o!idasa 4D-/5 en cido glucnico $ en per!ido de
hidrgeno el cual en presencia de pero!idasa 4%-/5 o!ida el cromgeno 4:(
aminofenazonalMfenol5 convirtindolo en un compuesto de color ro&o el cual es cuantificado por
el fotmetro del equipo.
.0E1,2".
1uero o plasma con E/,".
EQ03%-.
Q03)I '"#
2E"),3*-1.
+ reactivo 4tampnMenzimasMcromogeno5
+ " Nenol
'a solucin + es estable a 9(>@) durante 9 meses $ a +; (9;@) durante 9 semanas.
)-6/3)3-6E1.
El animal en lo posible debe estar en Ha$unasH. 4.nimo > horas5.
Evitar en lo posible la fuerza en el momento de la toma de muestra para minimizar las
condiciones de estres que pueden alterar el metabolismo de los carbohidratos.
'36E"'3/"/.
'a linealidad del mtodo se obtiene hasta ;==mgMdl.
%2-)E/3.3E6,-
%reparar fotmetro a una temperatura de ?G@).
#lanco 1tandard .uestra
1olucin + +=== m l +===m l +===m l
1olucin standar (( +=m l ((
1uero problema (( (( +=m l
3ncubar a ?G@) en bao de .ara por +; min o a temperatura ambiente por ?= min.
)olocar el #lanco en la cubeta de reaccin $ presionar la tecla H#'"6IH luego colocar el
estndar $ presionar la tecla H)"'3#2",EH por ltimo colocar la muestra $ presionar la tecla
H"6"'81EH.
"))3-6E1 )-22E),3*"1 %"2" 2E10',"/-1 36")E%,"#'E1
)alibracin del equipo.42emitirse al manual del equipo5.
)entrifugar muestras lo ms rpido posible.
)ambio de lote de sueros multicalibradores $ reactivos realizar nueva calibracin del
equipo.
*erificar reactivos que correspondan a la prueba pedida $ evitar agotamiento de los
mismos.
2echazar muestras hemolizadas e insuficientes.
.uestras que no se preparan el mismo da refrigerar a :O).
)onfirmar la linealidad de la prueba $ si es necesario realizar las diluciones
respectivas.
EP%2E13-6 /E 2E10',"/-1.
'os resultados para esta prueba en nuestro laboratorio se e!presan en mgMdl.
;.9. )-'E1,E2-' ,-,"'
El colesterol ha recibido gran atencin en medicina humana porque se halla implicado en la
ateroesclerosis pero su importancia en las enfermedades de los animales domsticos no ha
sido aun demostrada.
El colesterol se encuentra en todas las fracciones lipdicas de la sangre. %ara los fines de
patologa clnica el colesterol se valora en el plasma como colesterol total $ a veces se divide
en dos fraccionesE HlibreH $ esterificado.
El colesterol HlibreH esta unido a lpidos pero no esterificado.
'a ma$ora de los animales pueden tener niveles elevados de colesterol despus de
alimentarse con grasa tambin en disfuncin heptica inclu$endo la obstruccin del conducto
biliar porque la destruccin de las clulas hepticas trae como consecuencia una disminucin
en la actividad metablica del hgado $ se reduce mas la degradacin del colesterol que la
sntesis por lo que los niveles en sangre aumentan. En hipotiroidismo los niveles de colesterol
aumentan porque la carencia de hormonas tiroideas reduce la actividad metablica de las
clula hepticas as como tambin de las clulas de otras partes del organismo. ,ambin
aumentan los niveles de colesterol en diabetes mellitus en nefrosis $ puede presentarse un
ligero incremento con infarto al miocardio.
'os niveles ba&os de colesterol pueden indicar debilidad o malabsorcin de grasa pero son de
mu$ rara incidencia.
'a determinacin de colesterol total por el laboratorio es supremamente til en el hipotiroidismo
$ en la nefrosis en la disfuncin heptica $ diabetes mellitus se deben realizar otras pruebas
mas especificas.
2E1%-61"#'E1.
#acterilogos.
.E,-/-.
,est Enzimtico )olorimtrico.
%236)3%3- /E' "6"'3131.
'os steres del colesterol son hidrolizados por la colesterol ster hidrolasa a colesterol libre $
cidos grasos. El colesterol libre e!istente &unto con el producido por la reaccin es o!idado
por la colesterol o!idasa a colestenona $ per!ido de hidrogeno. Este ultimo en presencia de
pero!idasa o!ida el cromogeno 4: aminofenazonaMcido 9(hidro!ifenilacetico5 a un compuesto
de color ro&o.
.0E1,2".
1uero plasma con E/,".
EQ03%-1.
Q03I '"#
2E"),3*-1.
+ ,".%-6M ")3/- 9(C3/2-P3NE63'")E,3)-M ,E61-"),3*-1
+ " ,".%-6 M E6Q3."1 M:( ".36-NE6"Q-6" M NE22-)3"602- %-,"13)-.
%",2-6E )olesterol de 9==mgMdl listo para ser utilizado.
'a solucin + es estable de 9(> @) durante un mes.
'a solucin de traba&o 4+R95 es estable de 9 a > @) durante dos semanas si esta guardada en
botella oscura.
)-6/3)3-6E1.
%ara un optimo resultado de laboratorio es preferible que el animal tenga un a$uno mnimo de
+9 horas $ que durante la toma de la muestra no se encuentre en condiciones de estres esto
es supremamente difcil en nuestro medio pero si es posible realizarlo se obtendrn resultados
mas acertados.
'36E"'3/"/
'a linealidad del mtodo es de J== mgMdl.
%2-)E/3.3E6,-1.
%reparar el fotmetro a una temperatura de ?G@).
#'"6)- 1,"6/"2 .0E1,2"
1olucin + +===m l +===m l +===m l
1olucin standar (( +=m l ((
1uero problema (( (( +=m l
3ncubar a ?G@) en bao de .ara por ; min o temperatura ambiente por +; min.
)olocar el #lanco en la cubeta de reaccin $ presionar la tecla H#'"6IH luego colocar el
estndar $ presionar la tecla H)"'3#2",EH por ltimo colocar la muestra $ presionar la tecla
H"6"'81EH.
"))3-6E1 )-22E),3*"1 %"2" 2E10',"/-1 36")E%,"#'E1.
*er acciones correctivas de glucosa.
EP%2E13-6 /E 2E10',"/-1
'os resultados para esta determinacin se e!presan en mgMdl o en mmolM'. En el laboratorio se
e!presan los resultados en mgMdl.
;.?. 02E"
'a urea es un compuesto orgnico relativamente simple producido por los mamferos en el
hgado como producto final del catabolismo de las protenas. Es una de las substancias ms
difusibles en el cuerpo $ se encuentra en todos los lquidos del cuerpo. Es relativamente
at!ica aunque en concentraciones altas desnaturaliza protenas con la formacin de
productos t!icos.
'a urea se elimina principalmente por los riones pero una porcin de ella por la piel sobre
todo en los animales que sudan.
1e a observado que el nitrgeno ureico sanguneo no se eleva en perros salvo pocas
e!cepciones hasta que al menos el G;F del rin funcional se ha destruido $ se aconse&a
hacer la determinacin en todos los pacientes quirrgicos de mas de ; aos $ en toda
enfermedad en perros vie&os antes de iniciar el tratamiento.
'a urea se aumenta en sangre por trastornos renales como la insuficiencia renal crnica $
agudaA por obstruccin de las vas urinariasA e!cesiva destruccin de protenas como en
estados de fiebre to!icidad o sepsis e!tensa. ,ambin se pueden aumentar los niveles de urea
por una hemoconcentracin debida generalmente a graves vmitos o diarreasA cuando e!iste
alteracin de la funcin cardiaca que reduce el flu&o de sangre a travs del rin se ve
aumentada la concentracin de urea en sangre.
El descenso en los niveles de urea son raros tericamente pueden presentarse en asociacin
con graves enfermedades hepticas o malnutricin de protenas.
2E1%-61"#'E.
#acterilogo.
.E,-/-.
0* a tiempo fi&o.
%236)3%3-.
'a urea se hidroliza en presencia de ureasa en amoniaco $ di!ido de carbono. El amoniaco
producido en esta reaccin se combina con a (cetoglutarato $ 6"/C en presencia de
dehidrogenasa de glutamato para producir glutamato $ 6"/. 'a cantidad consumida de 6"/C
determinado por la disminucin de absorbancia en el ultra violeta es proporcional a la cantidad
de urea en la muestra.
.0E1,2".
1uero plasma con E/," $ orina diluida +E;= con agua destilada.
EQ03%-.
Q03I '"#
2E"),3*-1
+ E6Q3."1M )-E6Q3."M 10#1,2",-
+ " ,ampn
%",2-6E 0rea >=mgMdl. 'isto para su uso.
'a solucin + se mantiene estable durante : semanas de 9( >@) $ durante una semana de +;(
9;@).
)-6/3)3-6E1.
El animal debe tener un Ha$unoH de +9 horas antes de la toma de muestra.
"unque la urea es estable en suero plasma u orina durante varios das ba&o refrigeracin las
muestras especialmente la orina debern valorarse a las pocas horas para evitar la
contaminacin bacteriana que podran provocar una perdida rpida de la urea.
'36E"'3/"/.
En suero $ plasma la linealidad del mtodo es hasta ?==mgMdl $ +;= gMl para la orina. %ara
concentraciones altas diluir la muestra +E9 con agua destilada repetir la valoracin $ multiplicar
el resultado por 9.
%2-)E/3.3E6,-.
%reparar el fotmetro a una temperatura de ?=@).
1tandar .uestra
1olucin de traba&o +=== m l +===m l
1olucin 1tandar +=m l ((
1uero problema (( +=m l
'eer inmediatamente colocando muestra por muestra.
)olocar la solucin standar $ presionar la tecla H)"'3#2",EH luego colocar la muestra $
presionar la tecla H"6"'81EH.
"))3-6E1 )-22E),3*"1 %"2" 2E10',"/-1 36")E%,"#'E1.
*er acciones correctivas de glucosa.
EP%2E13-6 /E 2E10',"/-1.
'os valores en el laboratorio se e!presan en mgMdl.
;.:. )2E",3636"
'a creatinina esta en el cuerpo principalmente en forma de fosfato de alta energa. En los
msculos es fuente de energa. En animales &venes de crecimiento se encuentra en ma$ores
cantidades. 'a creatinina es una substancia mu$ difusible $ distribuida de manera uniforme en
el agua corporal. 1e elimina del plasma apro!imadamente en la tasa de filtracin glomerular.
"l estudiar la e!crecin de creatinina tiene valor el hecho de que los niveles sricos de
creatinina casi no son afectados por la creatinina e!gena de los alimentos por la edad el
se!o el e&ercicio o la dieta. %or lo tanto los niveles elevados solamente se presentan cuando se
altera la funcin renal.
'a medicin de los niveles de creatinina en sangre proporcionan la misma informacin para el
diagnostico $ pronostico de la funcin renal que la obtenida por la medicin del nitrgeno
urico.
2E1%-61"#'E1.
#acterilogos.
.E,-/-.
%icrato alcalino con desproteinizacin
%236)3%3-.
'a creatinina reacciona en un medio alcalino que no contenga protenas con pricato para
formar un compuesto ro&o Sanaran&ado 42eaccin de Baffe5.
.0E1,2".
1uero o plasma.
-rinaE diluidaE +E;= con agua destilada
EQ03%-.
Q03I '"#
2E"),3*-1.
+ %icrato de sodio............ ::mmolM'
9 Cidr!ido de sodio....... :.= 6
%",2-6E )reatinina 9 mgMdl. 'isto para ser utilizado.
'os reactivos + $ 9 son estables a temperatura ambiente de +; a 9;@) hasta la fecha de
caducidad que viene indicada en la etiqueta.
)-6/3)3-6E1.
6o requiere a$uno previo porque su e!crecin depende mu$ levemente de la alimentacin $ la
diuresis.
6o debe estar el animal sometido a estres intenso que puede ser causado en el momento de la
toma de muestra por la resistencia que el animal e&erza.
'36E"'3/"/.
El mtodo es lineal hasta +9 mgMdl de creatinina. %ara concentraciones ma$ores mezclar un
volumen de la muestra con un volumen igual de agua destilada repetir el ensa$o $ multiplicar
el resultado por 9.
%2-)E/3.3E6,-.
%repara el fotmetro a una temperatura de ?=@).
1tandar .uestra
1olucin de traba&o +=== m l +===m l
1olucin 1tandar +==m l ((
1uero problema (( +==m l
'eer inmediatamente colocando muestra por muestra.
Control de calidad en laboratorios clinicos medico veterinarios
AUTOR(E
S)
Villouta Cabello, Gladys, Dra. (M.V.)
Coordinadora Laboratorio de Patologa Clnica Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad
de Cile
CITA
Villouta Cabello, Gladys, Dra., Control de calidad en laboratorios clnicos !edico veterinarios.
"#C$%V#", Dicie!bre &''(, )*o +(,)
tt-.//000.tecnovet.ucile.cl/CD)/tecnovet1articulo/2,&+2',3C4D567,D'86'56768434D
567,D+7(,22.t!l
'a utilizacin de e!menes de laboratorio hematolgicos de qumica sangunea de orina $ de
otros lquidos orgnicos es cada da ms importante en .edicina *eterinaria tanto en la
medicina clnica individual de las especies de compaa como en las deportivas con el ob&eto
de realizar un correcto diagnstico formular un pronstico $ controlar la evolucin clnica del
paciente luego de la aplicacin de la terapia apropiada. "n ms esta rea ha trascendido
como herramienta diagnstica de enfermedades nutricionales $ metablicas en especies
productivas como bovinos ovinos $ caprinos a nivel de rebaos o poblaciones 4perfiles
metablicos5 donde la deteccin de ligeras variaciones de los constitu$entes sanguneos sobre
o ba&o la media o del rango de referencia indican un estado patolgico o de anormalidad.
%ara la correcta interpretacin de los resultados de estos e!menes el mdico veterinario
clnico o el especialista en produccin animal debe contar con los valores de referencia de
acuerdo a la especie $ estado productivo $ as como debe conocer de las modificaciones de
enzimas metabolitos aniones u otros componentes en las distintas patologas tambin debe
tener conocimiento de las variaciones de los resultados asociadas a los procedimientos
analticos de los distintos laboratorios. 1e reconocen entonces variaciones biolgicas $
analticas respectivamente.
Fuentes de variacin de los examenes
Variaciones biolgicas Este tipo puede originarse del su&eto mismo $ se llama intraindividual
se relaciona principalmente con el ritmo biolgico la edad el estado nutricional e inmunolgico.
1e describe tambin una fuente de variacin nterindividual o variacin entre su&etos de la
misma especie relacionada con la heterogeneidad de las poblaciones o grupos lo que da
origen a los valores de referencia para cada especie.
Variaciones anal!ticasE 'os resultados de los e!menes de laboratorio de una muestra de
sangre por e&emplo pueden variar segn tres fuentes.
"# $re instrumental o %re anal!tica es la suma de variaciones desde el momento de la
obtencin de la muestra hasta el anlisis de ella en el laboratorio. )omprende el efecto de la
falta de a$uno cuando se requiere de la hemlisis o coagulacin de la muestra por una tcnica
de e!traccin incorrecta de la e!citacin del paciente. del almacenamiento inadecuado de la
muestra $ tambin del uso de medicamentos que pueden producir interferencia con algunos
constitu$entes sanguneos.