Toma de Muestra Inmunologia
Toma de Muestra Inmunologia
Toma de Muestra Inmunologia
OBJETIVO:
Obtener de forma precisa suero sanguneo para su uso en pruebas inmunolgicas
INTRODUCCION:
La toma de muestra es el conjunto de procedimientos destinados a obtener una parte
representativa cualicuantitativamente a partir de un todo, en nuestro caso, el paciente.
La muestra obtenida debe tener las siguientes caractersticas:
Comnmente las muestras obtenidas para su anlisis en inmunologa son muestras sanguneas y
lquidos corporales como suero, plasma, lquido pleural, sinovial, cefalorraqudeo, etc. En serologa
la determinacin de pruebas inmunolgicas es mayormente en suero.
Obtencin de Muestra de Sangre. Para efectuar anlisis serolgicos, las muestras de sangre
pueden ser de sangre capilar o perifrica y de sangre venosa.
Sangre capilar o perifrica. Es la que fluye despus de aplicar una puncin superficial
cutnea. Se puede obtener de la yema del dedo. Algunas pruebas pueden realizarse con
sangre capilar o perifrica y se aconseja cuando no es posible obtener una muestra de
sangre venosa o no se desea puncionar la vena.
Sangre venosa. Esta muestra se obtiene por puncin de una de las tres venas del pliegue
del codo: la baslica, la ceflica o la mediana cubital.. Previamente se realiza la limpieza del
rea elegida con torunda y alcohol. Antes de puncionar se coloca el torniquete
aproximadamente a 8 cm de distancia arriba del pliegue del codo. No debe olvidar soltarlo
tan pronto empiece a obtenerse la muestra. La cantidad mxima de sangre a extraer ser
estrictamente la necesaria para las pruebas.
Anticoagulantes. Los anticoagulantes ms usados son el citrato de sodio, oxalato de sodio y EDTA.
El citrato de sodio se emplea al 3.8% y el oxalato de sodio al 1.4%. Se usan en relacin de una parte
de anticoagulante por cada nueve partes de sangre, habitualmente se usan 0.25ml de la solucin
para completar a 2.5ml de volumen total con la muestra de sangre. El EDTA (cido etilen-diaminotetra-actico) se utiliza al 10% y es uno de los anticoagulantes de eleccin para el trabajo de rutina.
Manejo y conservacin de la muestra. La muestra debe rotularse correctamente y separase segn
el caso en plasma o suero, y dependiendo del tipo de anlisis debe analizarse inmediatamente o
puede conservarse adecuadamente refrigerada entre 4 y 8C para el anlisis posterior.
MATERIALES Y REACTIVOS:
Jeringas de 3, 5 o 10 ml
Torniquete
Alcohol etilico
Algodn
Tubos de hemolisis
Bao Maria
Centrifugadora
PROCEDIMIENTO:
- Para obtener la muestra sangunea:
Realizar la asepsia de la regin elegida (red venosa de la flexura del codo, en nios a nivel
yugular)
- El tubo que contiene sangre sin anticoagulante, al que fue transferida la muestra de sangre
completa, debe dejarse 10 minutos en reposo en bao Mara a temperatura ambiente, para que
coagule
- Luego centrifugar a 3000 r.p.m. durante 5 minutos para separar las clulas del suero.
- Luego con una pipeta Pasteur se debe separar el suero o sobrenadante y transferir a un tubo de
almacenamiento para la realizacin de las diferentes pruebas.
CONCLUSIONES:
El suero sanguneo es principalmente agua, de un color amarillento puesto que se disuelve con
protenas, hormonas, minerales y dixido de carbono, as como tambin es una fuente muy
importante de electrolitos.
El plasma contiene suero y factores de coagulacin, una vez se eliminan los coagulantes como la
fibrina este lquido se convierte en suero.
Muchas de las pruebas serolgicas se realizan en suero sanguneo, por lo tanto la obtencin de
este debe ser de importante conocimiento.
Dilucin directa: tienen el inconveniente de que cuando es necesario hacer una dilucin
alta por ejemplo 1/ 10 000, se desperdicia mucho reactivo o se incurre en un error de
medicin.
Dilucin en serie: soluciona los inconvenientes que presenta las diluciones altas. Permite el
clculo de la muestra de estudio, de la cual se toma una alcuota que se diluye en varios
tubos. La diferencia entre la dilucin de dos tubos consecutivo se conoce como factor de
dilucin, siendo 2, 4 y 10 los ms usados. Solo el primer tubo lleva la alcuota de la muestra
sin diluir, los dems tubos toman la alcuota ya diluida del tubo previo. El nmero de tubos
100 ml
50 ml
x = 1,5 ml
100 ml
30 ml
x = 3 ml
100 ml
80 ml
x = 4 ml
100 ml
40 ml
x = 6 ml
C1 * V1 = C2 * V2
V1 =
V1 =
V1 = 1 ml
R. Medir 1 ml de solucin inicial y enrasar a 10 ml con agua
3.
50 ml
3 ml
x = 0,06 ml
20 ml
5 ml
x = 0,25 ml
80 ml
10 ml
x = 1,25 ml
1000 ml
50 ml
x = 0,05 ml
=2
2 ml
20 ml
x = 10 ml
= 15
1 ml
15 ml
50 ml
x = 3,33 ml
= 1,6
1 ml
1,6 ml
100 ml
x = 62,5 ml
= 20
1 ml
20 ml
30 ml
x = 1,5 ml