Incerto Determinacion de Potasio

Potassium liquiUV
Prueba UV enzimtica en suero o plasma
Clculo y calibracin
1. Este ensayo debe calibrarse empleando [STD1] y [STD2] includos en el
estuche.
Presentacin del estuche

[REF]
10120
2. Grafique la lnea de calibracin usando las dos medias A para [STD1] y

[STD2] y las concentraciones respectivas.
40 ml
Estuche completo
[IVD]
Mtodo
Los iones de potasio se determinan enzimticamente mediante la
actividad de la piruvato kinasa que depende de potasio empleando
fosfoenolpiruvato (PEP) como sustrato. El piruvato producido reacciona
con NADH + H+ en presencia de LDH y forma lactato y NAD+. La
disminucin correspondiente de la absorbancia a 340 nm es proporcional
a la concentracin de potasio.
Principio de la reaccin
Piruvato + ATP
Piruvato + NADH + H
Contenido
30 ml
[SUB]
Caractersticas de la ejecucin
Linealidad
La reaccin es lineal a concentraciones de potasio entre 2 y 7 mmol/l.
Muestras con concentraciones ms altas deben diluirse 1 + 1 con salina
fisiolgica (0,9%). Multiplique el resultado por 2.
www.human.de/data/gb/vr/en-k.pdf o
Piruvato-kinasa
+
4. Este ensayo debe calibrarse cada 9 semanas.
Las caractersticas de la ejecucin de esta prueba pueden consultarse enel

informe de verificacin, accesible a:
K+
PEP + ADP
3. La concentracin de la muestra se interpola desde la lnea de

calibracin con su A respectivo.
www.human-de.com/data/gb/vr/en-k.pdf
LDH
Valores normales
Suero: 3,6 - 5,5 mmol/l
Lactato + NAD
Plasma: 4,0 - 4,8 mmol/l
Reactivo de sustrato (R1)

Buffer Tris
Criptando
PEP
ADP
-oxoglutarato
NADH
GLDH
PK
250 mmol/l
12 mmol/l
3,3 mmol/l
3,15 mmol/l
1,2 mmol/l
0,35 mmol/l
11 U/ml
1,2 U/ml
[ENZ]
10 ml
Reactivo enzimtico (R2)

LDH
65 U/ml
[STD1]
3 ml
Patrn
Potasio (K+), tapa roja
2,0 mmoI/l
[STD2]
3 ml
Patrn
Potasio (K+), tapa verde
7,0 mmoI/l
Control de calidad
Pueden emplearse todos los sueros de control con valores de potasio
determinados con este mtodo.
Notas
1. Utilizacin en analizadores automatizados: Recomendamos fuertemente examinar un posible efecto de arrastrecausado por otros parmetros/ reactivos en la aplicacin sobre analizadores automatizados!
2. Todas las muestras utilizadas en este ensayo deben considerarse como
potencialmente infecciosas. Por favor, tome las medidas de precaucin
comunes necesarias.
3. Dado que las hemates contienen una cantidad de potasio elevadas de
alrededor de un 25 veces, deben separadarse del suero en un perodo de
no ms de una hora despus de la recogida de sangre. De lo contrario,
se encontrarn concentraciones de potassium elevaas.
Preparacin de reactivos
Todos los reactivos son listos para usar.
4. Trazas de detergentes producen turbidez que lleva concentracionesde

potasio falsamente elevadas. Por eso eben evitarse.
Estabilidad del reactivo

Los reactivos ypatrones son estables hasta la fecha de caducidad indicada.
cuando se almacenan a 2...8C, y 9 semanas despus de abierto, si se
tapan bin despus de cada uso.
5. El material de vidrio contaminado es la ms alta fuente de error. El

material de vidrio debe por eso enjuagarse cuidadosamente con agua
desionizada. El material de plstico desechable puede contener
plastificantes que pueden reaccionar con el reactivo y por eso no se
recomienda para el uso.
Muestras
Suero y plasma con heparina.
Procedimiento
Longitud de onda
340 nm
Paso de luz:
1 cm
Literatura
1. Berry M.N. et al., Clin.Chem. 35, 817 (1988)
2. Tietz N.W., Fundamentals of Clinical Chemistry, Saunders, Philadelphia,
4th Edit., 984 (2006)
Temperatura:
37C
Medicin:
Calibracin a dos puntos
EN-K
INF 1012001 E
07-2012-03
Esquemade pipeteo
Pipetee en cubetas
[SUB]
Muestra o
[STD1] o [STD2]
750 l
20 l
Mezcle, incube para 5 minutos a 37 C, y despus agregue [ENZ]

[ENZ]
250 l
Mezcle, incube para 2 min, lea la absorbancia inicial y al mismo tiempo

encienda el cronmetro. Lea la absorbancia de nuevo exactamente
despus de 1, 2 y 3 minutos. Calcule la media A desde las tres A
mesuradas.
Human Gesellschaft fr Biochemica und Diagnostica mbH

Max-Planck-Ring 21 65205 Wiesbaden Germany
Telefon +49 6122-9988-0 Telefax +49 6122-9988-100 e-Mail human@human.de

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4. Este ensayo debe calibrarse cada 9 semanas.

Las caractersticas de la ejecucin de esta prueba pueden consultarse enel

3. La concentracin de la muestra se interpola desde la lnea de

Plasma: 4,0 - 4,8 mmol/l

Reactivo de sustrato (R1)

Reactivo enzimtico (R2)

4. Trazas de detergentes producen turbidez que lleva concentracionesde

Estabilidad del reactivo

5. El material de vidrio contaminado es la ms alta fuente de error. El

Calibracin a dos puntos

Mezcle, incube para 5 minutos a 37 C, y despus agregue [ENZ]

Mezcle, incube para 2 min, lea la absorbancia inicial y al mismo tiempo

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