Location via proxy:   [ UP ]  
[Report a bug]   [Manage cookies]                

Metodos de Identificacion

Descargar como docx, pdf o txt
Descargar como docx, pdf o txt
Está en la página 1de 42

Universidad Privada Norbert Wiener

Tema: Mtodos de identificacin

Curso: Toxicologa y Qumica Legal

QF: Manuel Hernndez

Integrantes:

- Beltrn Ore, Marilia

- Cruz Bello, Jhoselin

- Candela Snchez, Giovana

- Snchez Prez, Guillermo

- Gamarra Surita, Ida

- Alvarez Olivera, Claudia

- Rimac Nio, Angela

Seccin: FB9N1

2017
SILDENAFILO

FUNDAMENTOS:

El acetonitrilo: es el compuesto qumico con frmula CH3CN. Este lquido incoloro


es el nitrilo orgnico ms simple. Se produce principalmente como un subproducto
de la fabricacin del acrilonitrilo.

Sildenafilo: Es un polvo fino de color blanco, sin olor y libre de material extrao,
con punto de fusin de 187 189 C y de ebullicin de 672.4 C a 760 mm Hg, es
soluble en agua y etanol.

VALORACIN. MGA 0241, CLAR

Solucin de trietilamina pH 3.0. Diluir 7.0 mL de trietilamina grado CLAR a 1 L.


Ajustar el pH de la solucin a 3.0 0.1 con cido fosfrico y mezclar.

Diluyente. Mezcla de acetonitrilo y agua (90:10)

Fase mvil. Mezcla filtrada y desgasificada de solucin de trietilamina pH 3.0,


metanol y acetonitrilo (58:25:17 v/v/v).

Preparacin de referencia. Preparar una solucin de la SRefFEUM de citrato de


sildenafilo con una concentracin equivalente a 0.02 mg/mL de sildenafilo en fase
mvil.

Preparacin Concentrada de la muestra. Dispersar 1 tableta en al menos 5 mL


de diluyente con la ayuda de ultrasonido. Ya que la tableta est completamente
dispersada, transferir a un matraz volumtrico de 250 mL y llevar a volumen con
fase mvil mezclando de manera rotatoria. Centrifugar una porcin de la muestra a
3000 rpm durante 5 minutos y usar el sobrenadante para la preparacin diluida.

Preparacin diluida de la muestra. Transferir un volumen del sobrenadante,


medido con precisin a un matraz volumtrico adecuado, de tal manera que
cuando se afore, la concentracin final sea de aproximadamente 0.02 mg/mL de
sildenafilo. Diluir a volumen con fase mvil y mezclar.

Condiciones del equipo. Detector de luz UV, a una longitud de onda de 290 nm;
columna de 15 cm x 3.9 mm; empacada, con Ll de 5 m mantenida a 30oC, flujo
1.0 mL/min. Tiempo de corrida: no menos de 1.5 veces el tiempo de retencin de
sildenafilo.

Procedimiento. Inyectar al cromatgrafo repetidas veces, volmenes iguales de


la preparacin de la referencia (20 L), registrar el rea de los picos. El factor de
coleo es no mayor que 1.3 para el pico de sildenafilo y el coeficiente de variacin
no es mayor que 3.0 %. Una vez obtenidos los parmetros de operacin, inyectar
al cromatgrafo, por separado, volmenes iguales (20 L) de la preparacin de
referencia y de la preparacin diluida de la muestra. Obtener sus cromatogramas
correspondientes y calcular el rea de los picos.

http://www.farmacopea.org.mx/Repositorio/Documentos/507.pdf
MISOPROSTOL

FUNDAMENTO

Misoprostol: Lquido oleoso incoloro o amarillento. Higroscpico. Soluble en


alcohol; moderadamente soluble en acetonitrilo y prcticamente insoluble en agua.

VALORACIN

Sistema cromatogrfico - Emplear un equipo para cromatografa de lquidos con


un detector ultravioleta ajustado a 200 nm, una columna de 25 cm
4,6 mm con fase estacionaria constituida por octadecilsilano qumicamente unido
a partculas de slice de 5 m de dimetro con un rea de superficie especfica de
220 m2 /g y una carga de carbono de 7 %. Mantener la columna aproximadamente
a 40 C. El caudal debe ser de aproximadamente 0,75 ml por minuto.

Fase mvil - Agua, acetonitrilo y solucin de cido fosfrico al 2,45 % (55:45:0,5).

Preparacin estndar - Pesar exactamente alrededor de 10 mg de Misoprostol


SR-FA, transferir a un matraz aforado de 5 ml, disolver y completar a volumen con
acetonitrilo.

Preparacin muestra - Pesar exactamente alrededor de 10 mg de Misoprostol,


transferir a un matraz aforado de 5 ml, disolver y completar a volumen con
acetonitrilo.

Aptitud del sistema (ver 100. Cromatografa) - Cromatografiar la Preparacin


estndar y registrar las respuestas de los picos segn se indica en Procedimiento:
la resolucin R entre misoprostol y los picos de impureza A de misoprostol no
debe ser menor de 1,9. El tiempo de retencin para misoprostol debe ser
aproximadamente 20 minutos. Los tiempos de retencin relativos deben ser
aproximadamente 0,9 para las impurezas A, C y el primer pico de la impureza B
de misoprostol, y 0.95 para el segundo pico de la impureza B de misoprostol,
siendo el primer pico de la impureza B una mezcla de 7-[(1RS,2SR,3RS)-3-hidroxi-
2-[(1E,4RS)-4-hidroxi- 4-metilocten-1-il]-5-oxociclopentil]heptanoato de metilo y 7-
[(1RS,2SR,3RS)-3-Hidroxi-2-[(1E,4SR)-4-hidroxi -4-metilocten-1-il]-5-
oxociclopentil]heptanoato de metilo (12-epimisoprostol) y la impureza C una
mezcla de 7-[(1RS,2RS,3RS)-3-hidroxi-2-[(1E,4RS)-4-hidroxi- 4-metilocten-1-il]-5-
oxociclopentil]heptanoato de metilo y 7-[(1RS,2RS,3RS)-3-Hidroxi-2-[(1E,4SR)-4-
hidroxi -4-metilocten-1-il]-5-oxociclopentil]heptanoato de metilo (11-
epimisoptrostol).
Procedimiento - Inyectar por separado en el cromatgrafo volmenes iguales
(aproximadamente 10 l) de la Preparacin muestra y la Preparacin estndar,
registrar los cromatogramas y medir las respuestas de los picos principales.
Calcular la cantidad de C22H38O5 en la porcin de Misoprostol en ensayo.

http://www.anmat.gov.ar/webanmat/fna/pfds/Libro_Segundo.pdf
IDENTIFICACIN DE COCANA

1.- Prueba de Scott

Reactivos:

El reactivo tiocianato de cobalto puede ser preparado disolviendo


10 g de tiocianato de cobalto(II) en una mezcla de 490 mL de agua destilada y 500
mL de glicerol.

Fundamento:
La prueba del tiocianato de cobalto es llevada a cabo colocando aproximadamente
2 a 4 mg de una sustancia objetivo en un tubo de ensayo de vidrio, luego se
agregan 5 gotas de reactivo de tiocianato de cobalto. Despus de agitar, se
agrega 1 o 2 gotas de cido clorhdrico concentrado (tambin pueden usarse otros
cidos1), y se agita nuevamente el tubo. Finalmente se agregan 10 gotas
de cloroformo (o un solvente similar), y se mezclan los lquidos en un mezclador
de vrtice, permitindoles luego reposar y separarse en dos capas. El color final
de la fase del cloroformo (orgnica) es registrado.
Resultado:

La adicin de reactivo de tiocianato de cobalto a clorhidrato de cocana resulta en


la superficie de las partculas volvindose de un azul brillante (azul dbil para la
pasta bsica de cocana).
Conclusin:
-Posible presencia de cocana en la muestra.
- La difenhidramina y la lidocana tambin dan fases orgnicas azules. Estos
compuestos son conocidos por dar falsos positivos para la cocana.
Identificacin de Marihuana

1.-Prueba de Duquenois Levine

Reactivos:
El reactivo de Duquenois-Levine, utilizado en esta prueba, puede ser preparado
agregando 10 g de vainillina y 5 mL de acetaldehdo a 500 mL de etanol.

Fundamento:
Esta prueba es efectuada colocando aproximadamente 10 a 20 mg de una
sustancia objetivo en un tubo de ensayo de vidrio, luego se agrega 10 gotas del
reactivo de Duquenois. Despus de agitar, se agrega 10 gotas de cido
clorhdricoconcentrado, y el tubo es agitado nuevamente. Se registra cualquier
color que resulta despus del paso de agregar cido clorhdrico. A continuacin se
agregan 20 gotas de cloroformo (o un solvente similar), y el contenido del tubo es
mezclado en un mezclador de vrtice, luego se le permite reposar y separar en
dos fases. Se registra cualquier color que se transfiera a la fase orgnica.
Resultado:
La marihuana se vuelve prpura con la adicin del reactivo de Duquenois-Levine y
cido clorhdrico. Al agregarse el solvente orgnico, el color prpura se transfiere a
la fase orgnica, indicando una prueba positiva para cannabinoides.

Conclusin:
-Posible presencia de marihuana en la muestra.
CIANURO

Ensayo cualitativo

Se basa en la formacin de un complejo azul de ferriferrocianuro (azul de Prusia)


con los iones ferrosos.

Muestras: Contenido estomacal y residuos de la escena.

Tener cuidado con las muestras que contienen cianuros ya que liberan cido
cianhdrico en contacto con el agua y a pH cido.

Reactivos:

Solucin acuosa de hidrxido de sodio (100 g/l).

Solucin acuosa de sulfato ferroso (100 g/l) recientemente preparada.

Solucin acuosa de cido clorhdrico (100 ml/l).

Procedimiento:

Diluir 1 ml de la muestra con 2 ml de solucin del hidrxido de sodio. Agregar 2 ml


de solucin de sulfato ferroso. Agregar cido clorhdrico en cantidad suficiente
para disolver el precipitado de hidrxido ferroso.

Resultado: Un color azul indica la presencia de cianuro. No existen fuentes


comunes de interferencia.

Sensibilidad: 10 mg/l.

Ensayos cuantitativos

Muestras:

Sangre entera heparinizada (0,1 - 1,0 ml) que puede ser conservada a 4C
durante 1-2 das si el anlisis no se realiza inmediatamente. El cianuro en sangre
es poco estable si se guarda a temperatura ambiente (20C)

Mtodos por microdifusin

Se basan en la liberacin de cianuro de hidrgeno y la formacin subsiguiente de


un complejo coloreado.

Mtodo del p-nitrobenzaldehdo / o-dinitrobenceno

Reactivos:
Solucin acuosa de hidrxido de sodio (0,5 mol/l).

Solucin acuosa de cido sulfrico (3,6 mol/l).

p-nitrobenzaldehdo (0,05 mol/l) en 2-metoxietanol.

o-dinitrobenceno (0,05 mol/l) en 2-metoxietanol.

Testigos:

Solucin acuosa de cianuro de potasio (10 mg/l, correspondiente a 4 mg/l de in


de cianuro).

Procedimiento:

Tomar tres cmaras de microdifusin y agregar a cada una en el compartimiento


central.

0,5 ml de solucin del p-nitrobenzaldehdo.


0,5 ml de solucin del o-dinitrobenceno.
0,1 ml de solucin del hidrxido de sodio.
En el compartimiento exterior agregar 0,1 ml de:

Cmara N 1 Agua destilada


Cmara N 2 Solucin patrn de cianuro de potasio
Cmara N 3 Muestra de sangre problema
A cada cmara en la parte exterior agregar 0,5 ml de agua destilada y en el lado
opuesto, 1,0 ml de cido sulfrico diluido.

Se tapa cada cmara usando silicona y cuidadosamente se mezclan los


componentes del compartimiento externo.

Incubar a temperatura ambiente durante 20 minutos y agregar 1 ml de solucin


acuosa de metanol (1:1) en el compartimiento interno.

Transferir el contenido del compartimiento interno de la cmara a un tubo


graduado de 5,0 ml y llevar a volumen (5 ml) con solucin acuosa de metanol
(1:1)

Resultados:

El color rojo obtenido con las soluciones que contienen cianuro son estables
durante aproximadamente 15 minutos.
Medir la absorbancia de las soluciones de las cmaras 2 y 3 a 560 nm contra
blanco de agua destilada (cmara N 1).

Calcular la concentracin del in cianuro en la muestra utilizando la concentracin


y la absorbancia obtenida del patrn.

Sensibilidad: 0,5 mg/l.

FENOTIAZINA

REACCION CROMTICA- Mtodo de determinacin cualitativa:

De acuerdo al grupo funcional:

Grupo funcional: fenotiazinas

Ensayo o reaccin: Tricloruro frrico; Formaldehdo-sulfrico; FPN

Procedimiento:

A 1 ml de orina agregar 1 ml del reactivo y mezclar durante 5 segundos.

Resultado: un cambio de coloracin del rosa a rojo, naranja, violeta o azul, hace
pensar en la presencia de fenotiazinas.
INSECTICIDAS ORGANOCLORADOS:

Los Insecticidas Organoclorados (O-C) son compuestos Aryl, carbocclicos o


heterocclicos de peso molecular entre 291 y 545 que actan como insecticidas de
ingestin y de contacto.

Se derivan en 04 grupos:

Derivados del clorobenzeno: DDT, metoxicloro.


Derivados de ciclohexano (C6H6Cl6): HCH, lindano
Ciclodienos o derivados del indano: aldrn, dieldrn, clordano, heptaclor.
Canfenos clorados: clordecona, toxafn.

Fueron los primeros insecticidas qumicos. Su cintica est condicionada por su


alta liposolubilidad y por la ineficacia de las vas metablicas de varios de ellos
que condiciona su bioacumulacin.

Todos ellos se absorben por la piel, va respiratoria y digestiva. La absorcin


drmica es variable.

Su intensa lipofilia les hace muy afines a los tejidos grasos donde tienden a
acumularse en proporcin inversa al grado de biotransformacin orgnica y de
excrecin. Adems del tejido adiposo se concentran en otros tejidos ricos en grasa
neutra como glndula adrenal, manifestando adems un efecto estrognico.
Los O-C actan cambiando las propiedades electrofisiolgicas y enzimticas de
las membranas de la clula nerviosa, sobre todo a nivel axonal. Producen un
cambio en la cintica del flujo de iones Na y K a travs de la membrana as como
alteraciones del ion Ca y de la actividad Ca-ATPasa y fosfoquinasa. Dan lugar a
un elemento de la repolarizacin que produce la propagacin de potenciales de
accin mltiples para cada estimulo.

El DDT y sus anlogos actan particularmente en el axn nervioso prolongando la


apertura del canal de sodio.

DESARROLLO DEL PROCEDIMIENTO

Principio: Identificacin de la presencia de organofosforados en contenido gstrico,


orina y sangre mediante cromatografa de capa fina.

Preparacin de la muestra.

1. Recepcin de la evidencia en las instalaciones de los laboratorios del Sistema.

2. Verificacin de la informacin documentada adjunta a la evidencia (cadena de


custodia, orden de fiscal, acta de posesin de perito, formato de solicitud de
anlisis en el caso de muestras recibidas en los laboratorios del Sistema).

3. Registro grfico y textual de las condiciones de la recepcin de la muestra.

4. Una vez designado el cdigo alfanumrico a las muestras.

5. Proceder a realizar el respectivo anlisis.

6. Disponer de 5 ml de muestra de sangre, 30 ml de muestra de orina, 10 ml de


contenido gstrico extradas del paciente.

7. Colocar la muestra biolgica en un matraz Erlenmeyer.

8. Acidificar la muestra colocando 1 ml de cido clorhdrico

9. Colocar 15 ml de ter de petrleo a la muestra biolgica

10. Agitar la muestra biolgica manualmente o en un agitador por 30minutos

11. Filtrar directamente la muestra biolgica colocando en un vaso tapado, o en un


matraz Erlenmeyer con un papel filtro que tiene polvo de SO4Na2 anhidro.

12. Evaporar totalmente la muestra biolgica en una sorbona a sequedad.


13. Retomar la muestra biolgica con ter de petrleo en un vaso de precipitacin,
mediante el uso de capilares

14. Sembrar en una placa de cromatografa la muestra biolgica retomada y su


respectivo estndar de referencia empleando capilares

15. Colocar la placa de cromatografa sembrado en un mediocromatogrfico o


cubeta cromatogrfica preparado previamente (hexano 50 ml -cloroformo 50 ml o
diclorometrano 80 ml acetato de etilo 20 ml)

16. Revelar la placa cromatogrfica con reactivo especfico para rgano


fosforados:

-En caso de KOH al 5% en metanol calentar la placa por 10 minutos luego de la


aspersin A 110C

-En caso de reactivo paladiosos luego de la aspersin calentar en un estufa por 15


minutos a 100C.

17. Secar la placa cromatogrfica.

18. Observar la formacin de maculas directamente o con ayuda de una lmpara


ultravioleta.

19. Reportar las pruebas en una bitcora personal y en el respectivo informe


pericial.

NOTA: Para cuantificar los metabolitos en estos ensayos cualitativos se


utilizar la tcnica de cromatografa de lquidos/gases con espectrometra de
masas.
Insecticidas carbamatos:

Los carbamatos se usan como insecticidas, tienen una estructura qumica basada
en el cido carbamico, se absorben por todas las vas del cuerpo humano:
respiratoria, drmica, digestiva, la exposicin ocupacional es ms comn por va
drmica y pulmonar, pudiendo ocurrir durante los procesos de formulacin,
mezcla, aplicacin y almacenamiento. La ingestin es ms comn en casos de
envenenamiento voluntario.

No se acumulan en el organismo, se distribuyen rpidamente por todos los


rganos, tejidos y son inhibidores de la colinesterasa.

Preparacin de la muestra.

1. Recepcin de la evidencia en las instalaciones de los laboratorios del


Sistema.
2. Verificacin de la informacin documentada adjunta a la evidencia(cadena
de custodia, orden de fiscal, acta de posesin de perito, formato desolicitud
de anlisis en los laboratorios del Sistema).
3. Registro grfico y textual de las condiciones de la recepcin de lamuestra.
4. Designacin del cdigo alfanumrico a las muestras.
5. Proceder a realizar el respectivo anlisis.
6. Disponer de 30 ml de muestra biolgica de orina y 10 ml decontenido
gstrico.
7. Colocar la muestra biolgica en un matraz Erlenmeyer
8. Acidificar la muestra colocando 1 ml de cido clorhdrico. 1 N
9. Colocar 30 ml de ter de petrleo a la muestra biolgica
10. Agitar la muestra biolgica manualmente o en un agitador por 30 Minutos
11. Filtrar directamente la muestra biolgica colocando en un vaso tapado, o en
un matraz Erlenmeyer con un papel filtro que tiene polvo deSO 4Na2
anhidro
12. Evaporar totalmente la muestra biolgicas en una sorbona asequedad.
13. Reportar las pruebas en una bitcora personal y en el respectivo informe
pericial.

NOTA: Para cuantificar los metabolitos en estos ensayos cualitativos se utilizar la


tcnica de cromatografa de lquidos/gases con espectrometra de masas.

CODENA
La codena es un analgsico narctico obtenido del opio o por metilacin de la
morfina. La codena es metabolizada por O-demetilacin y N-demetilacin para
dar morfina y norcodena, respectivamente, y por conjugacin forma glucurnidos
y sulfatos de ambas drogas y metabolitos. La dosis fatal estimada de codena en
un adulto es 800 mg. Sin embargo la codena es mucho menos txica que la
morfina y la muerte por codena es rara.

Grupo funcional:

Benzodiacepinas: Formaldehdo-sulfrico

Reacciones de color

Muestras: orina, contenido estomacal, restos de la


escena.

Reactivos

Liebermann:

Procedimiento: agregar 0,5 ml de reactivo a la muestra y calentar en bao mara


durante3 minutos.

Resultados

a) un color naranja lo producen sustancias que contienen un anillo bencnico


monosustitudo no unido a C=O, NC (=O) o un anillo que contiene el grupo
C=NO.

b) un color naranja o marrn es dado por sustancias que contienen 2 anillos


bencnicosmonosustitudos.

c) una amplia gama de colores la dan compuestos que contienen grupos: OH, O
alquil o OCH2O unidos a un anillo bencnico o a un anillo policclico que
contiene un anillo bencnico.

Mandelin:Este reactivo posee cido concentrado por lo que se recomienda no


aspersionarlo sobre laplaca. Exponer la misma a los vapores. Diferentes colores
pueden ser obtenidos segn lasustancia presente.Procedimiento: agregar 0,5 ml
de reactivo a la muestra y calentar en bao mara durante3 minutos.Resultado:
diferentes colores pueden observarse segn la sustancia presente.

Marquis:Este reactivo posee cido concentrado por lo que se recomienda no


aspersionarlo sobre laplaca. Exponer la misma a los vapores. Los alcaloides
relacionados con la morfina danmanchas negras o violetas.
Procedimiento: colocar una pequea cantidad de la muestra (1 a 2 mg de polvo o
una o dosgotas si se trata de un lquido) en una placa y agregar el reactivo de
Marquis gota a gota y noms de tres gotas.Resultado: una gama de colores
permite identificar gran cantidad de compuestos. Estructurasque tienden a dar una
coloracin violcea en orden decreciente de respuesta: anillos sulfricos(con o sin
anillo aromtico); anillos con oxgeno (con anillo aromtico);
compuestosromticos. Los colores especficos se sealan en las monografas de
acuerdo a la sustancia ogrupo de sustancias.
https://es.slideshare.net/lagarteam/informe-alcaloides-final030614?qid=081c830d-
e1fe-4dd0-9750-b87f5ea2b7b0&v=&b=&from_search=1

http://www.bvsde.paho.org/bvstox/e/fulltext/marcha_toxicologica.pdf
https://es.slideshare.net/xFlorlyx/determinacion-de-benzodiacepinas
https://es.scribd.com/doc/68441696/LT-4-SULFOCROMICA

La Mezcla sulfocromica es el cidosulfuricoconcentrado (H2SO4) saturado con


dicromato de potasio K2Cr2O7 (ocromato de potasio, es igual).Cuanto ms
saturado este el cidocon dicromato es mejor.

1. Pesar 60 gramos de dicromato de potasio.

2. colocarlo en un recipiente adecuado, y agregar 200 ml. de agua destilada.

3. Calentar, y dejar enfriar, colocar en un ba;o de hielo.

4. agregar el cidosulfurico, 800 ml., concentrado, lentamente, y con agitacion


constante.

5. utilizar, gafas, mascarilla, y guantes, de preferencia hacerlo en una campana de


extraccion, con la extraccion de vapores toxicos, funcionando.

La mezcla sulfocrmica es una mezcla de cido sulfrico concentrado y cromato


de potasio, que posee importantes caractersticas oxidantes y corrosivas. Es ideal
para limpiar el material de laboratorio, tanto de vidrio como de plstico, pero puede
causar quemaduras muy importantes, porque el cido es muy higroscpico
(reactivo con el agua de la piel) asi que ten mucho cuidado al manipularla y
adems el cromo es txico.

BENZODIAZEPINAS

Ensayo cualitativo

Muestras: orina, contenido estomacal y residuos de la escena.

Es aconsejable realizar sobre una fraccin de la orina la hidrlisis a benzofenona.


Laransformacin a benzofenona se realiza en un medio fuertemente cido durante
una hora a100 C. Luego se lleva a pH alcalino con NaOH 30% y se la extrae con
cloroformo.

Hidrlisis a benzofenonas

Mezclar 3 ml de cido clorhdrico concentrado y 10 ml de muestra en un tubo de


vidrio de 30

ml de capacidad con tapa.

Colocar bajo campana, en bao mara durante 30 minutos.

Enfriar y agregar 10 ml de cloroformo, tapar el tubo y rotar cuidadosamente


durante 10

minutos.

Centrifugar durante 5 minutos y transferir la capa superior, orgnica, a un tubo


limpio.

Evaporar el extracto a sequedad para luego investigar por CCD.

Cromatografa en capa delgada

Muestras: orina, contenido estomacal y residuos de la escena.

Procedimiento: Las benzodiazepinas se pueden investigar por cromatografa en


capa

delgada, utilizando como fase mvil los sistemas: CB, CC, CF y Cloroformo

Mientras que para las benzofenonas se utilizan: CC, CD, Tolueno y Tolueno:
isopropanol:

amonaco (85:15:1)

Revelado para benzodiazepinas

Luz UV (generalmente fluorescencia azulada)


cido clorhdrico al 10%
Aumento de fluorescencia al UV
Dragendorff: positivo
Revelado para benzofenonas

- Formacin de base de Schiff mediante la reaccin de Bratton-Marshall


- Tricloroactico al 15% y para-dimetil-amino-cinamaldehdo (p-DMCA) al 1% en
metanol

Resultados de benzofenonas:

- Reaccin de Bratton-Marshall:todas las benzodiazepinas capaces de formar


benzofenonasreaccionan formando una base de schiff de color rosado, excepto el
diaczepn que da coloramarillo.

- Con el revelado de tricloroactico y p-DMCA se pueden distinguir algunas


benzodiacepinasdebido a que forman compuestos coloreados de sus
benzofenonas.

Benzofenonade Color
nitrazepn amarillo + aureola celeste
clordiazepxido violeta
bromazepn marrn
flunitrazepn amarillo
clonazepn celeste
diazepn fucsia
oxazepn violeta
medazepn incoloro
lorazepn incoloro
triazoln incoloro

Es conveniente utilizar sulfatiazol como testigo en la corrida, ya que con el mismo


secomparan las benzodiazepinas, agrupndolas segn su Rf sea mayor, menor o
igual que el Rfdel sulfatiazol.

La interpretacin de los resultados puede ser difcil ya que muchos compuestos


danmetilaminoclorobenzofenonas y/o el aminoclorobenzofenonas por hidrlisis de
orina. Porejemplo, puede que no sea posible diferenciar entre temazepn u
oxazepn y diazepn onordazepn ya que estos compuestos dan una estructura
qumica similar de benzofenonas.

Los siguientes compuestos no forman benzofenonas por hidrlisis: medazepn,


triazoln,clobazn, norclobazn y midazoln.
CUMARINAS

IDENTIDICACION

Son fluorescentes a la luz ultravioleta y para aumentar la intensidad, se tratan


previamente con amoniaco.

MTODO DE DETECCIN VEGETAL:

Introducir una pequea cantidad de material humectado en agua, en un


tubo de ensayo, el cual se cubre con un papel de filtro previamente
humedecido con sosa diluida
Calentar el tubo al bao mara hirviente durante varios minutos y se
observa el papel de filtro a la luz ultravioleta, debiendo aparecer
fluorescencia amarillo-verdosa.

La mayora de los mtodos empleados para detectar derivados cumarnicos se


basan en la cromatografa del extracto, pulverizando con reactivos como el cido
difenilbrico, ster -aminoetlico, cido sulfanlico diazotado y potasa o bien
acetato de uranilo.

ENSAYO CUALITATIVO

Muestra: plasma o suero (1 ml).

CROMATOGRAFA EN CAPA DELGADA

Los cumarnicos se pueden detectar en cromatografa en capa delgada, previa


extraccin de la muestra de sangre:

A 1 ml de la muestra y testigo se agregan 0,9 ml de cido clorhdrico


diluido, 0,1 ml de acetona y 5 ml de cloroformo.
Mezclar durante 2 minutos en un agitador mecnico y centrifugar por 10
minutos.

Retirar la capa superior acuosa, filtrar el extracto clorofrmico a travs de


papel de filtro. El extracto se evapora a sequedad bajo corriente de aire
comprimido o nitrgeno.

Disolver el residuo en 50 l de cloroformo, sembrar en la placa y


desarrollarla hasta una altura de 10 centmetros.

Fase mvil el sistema: n-butil acetato: cloroformo :solucin acuosa de cido


frmico (850 ml/l) (60:40:10).
REVELADO

Observar la fluorescencia al UV

Warfarina: purprea oscura


Fenprocoumon: prpura ms brillante
Las concentraciones plasmticas aproximadas de estos compuestos pueden ser
evaluadas por la comparacin con los resultados obtenidos con patrones de
concentraciones conocidas, sembrados y corridos en la misma placa.

Sensibilidad: Warfarina o fenprocoumon 0,5 mg/l.


BARBITURICOS

LABORATORIO

Reacciones de color

MUESTRAS: orina, contenido estomacal, resto de la escena.

REACTIVOS: Parry-Koppanyi y Zwikker

PROCEDIMIENTO:

Parry-Koppanyi: Agregar la solucin de nitrato cobaltoso a unas gotas del


extracto en placa de toque. Agregar una gota de solucin de isopropilamina.

Zwikker: Agregar 0,5 ml de la solucin de sulfato de cobre a una fraccin


del residuo de la muestra o a 0,5ml del extracto en un tubo de ensayo.
Incorporar igual volumen de solucin clorofrmica de piridina.

RESULTADOS

Reactivo Parry-Koppanyi: violeta


Reactivo de Zwikker: rojo-violeta

REVELADO

A la luz UV
Cloruro de mercurio- difenilcarbazona
Nitrato de plata: blanco
Permanganato de potasio: Tiobarbitricos y barbitricos con cadena larga
insaturada dan color amarillo con fondo violeta.
Zwikker: barbitricos, prpura; Tiobarbitricos, verde.

ENSAYO CUANTITATIVO

Muestras: sangre entera, plasma o suero (5 ml).

Reactivos
Buffer borato, pH 8,4.
Mezclar 22,4 g de tetraborato disdico con 76 ml de solucin acuosa de
cido clorhdrico (1 mol/l) y diluir a 2 litros con agua destilada.
Solucin acuosa de cido clorhdrico (2 mol/l).
cido sulfrico concentrado (densidad relativa 1,83).
Hidrxido de amonio concentrado (densidad relativa 0,88).
Mezcla sulfato de sodio/carbn activado.
Agregar 100 mg de carbn activado a 100 g de sulfato de sodio anhidro,
mezclar completamente y calentar en una cubeta, para secar la mezcla, a
100C durante 8 horas.
Enfriar y guardar en un frasco hermtico oscuro.

TESTIGOS:

Preparar soluciones de barbital en las concentraciones de 5, 10, 25 y 50 mg/l en


plasma humano (blanco), a partir de una solucin acuosa de barbital sdico que
contenga 1,12 g/l, equivalente a cido dietilbarbitrico en una concentracin de
1,00 g/l.

PROCEDIMIENTO:

Colocar 5 ml de muestra en una ampolla de decantacin de 250 ml de


capacidad, y agregar 2 ml de cido clorhdrico y 60 ml de ter dietlico (con
cuidado). Lubricar con agua destilada el tapn de la ampolla, tapar y
mezclar por inversin durante 2 minutos. Purgar cada tanto la ampolla para
evitar proyecciones de la tapa y lquidos. Dejar descansar 5 minutos y
desechar la capa inferior, fase acuosa, por la parte inferior de la ampolla
donde est la llave.
Pasar el extracto obtenido en ter dietlico a una segunda ampolla de
separacin conteniendo 10 ml de buffer borato y mezclar durante 1 minuto.
Dejar descansar 5 minutos y nuevamente desechar la fase acuosa inferior
por el vstago de la ampolla. Lavar la ampolla con 5 ml de agua destilada,
dejar decantar 5 minutos y nuevamente desechar la fase acuosa.
Agregar aproximadamente 4 g de la mezcla de sulfato de sodio/carbn
activado a la fase etrea de la ampolla, agitar y filtrar el extracto a travs de
papel de filtro recogiendo en un erlenmeyer de 150 ml de capacidad.
Agregar 20 ml de ter etlico a la ampolla de decantacin, agitar y reunir al
extracto orgnico anterior pasando primero a travs de un papel de filtro.
Evaporar el extracto a sequedad en un bao de agua a 40C o bajo una
corriente de aire o nitrgeno.
Agregar 5 ml de agua destilada al extracto seco en el erlenmeyer, mezclar
suavemente y dejar descansar 5 minutos. Fltrar el extracto reconstitudo a
travs de papel de filtro y recoger en un tubo de 12,5 cm. Verificar que el
espectrofotmetro est en 0 a 240 nm con agua destilada en ambas
posiciones, tanto en la muestra y como en referencia.
Agregar 4 ml de filtrado de la muestra en una cubeta limpia y seca, agregue
50 l de hidrxido del amonio concentrado y mezcle con una varilla de
plstico. Controlar que el pH sea aproximadamente 10 (con papel indicador
universal).
Rpidamente medir la absorbancia a 240 nm contra el blanco de agua
destilada. Si fuera necesario, diluir con exactitud una porcin del extracto
con agua destilada y leer nuevamente. Si se dispone de un
espectrofotmetro de barrido espectral hacerlo entre 200 450 nm. Repetir
la lectura o realizar un barrido despus de 5 minutos.
Agregar 0,1 ml de cido sulfrico concentrado a la cubeta correspondiente
a la muestra, mezclar usando una varilla plstica y controlar que el pH sea
aproximadamente 2 (con papel indicador universal). Repetir la lectura (240
nm) o realizar un barrido entre (200-450 nm).

RESULTADOS:

Varios compuestos pueden interferir. La glutetimida es hidrolizada


rpidamente a valores de pH alcalinos, de modo que la absorbancia a 240
decrecer notablemente despus de 5 minutos a pH 11, si este compuesto
est presente. La presencia de otros compuestos, como metaqualona o
fenazona (por ejemplo, dicloralfenazona), puede revelarse barriendo en la
regin 200-450 nm. Agregando 0,1 ml de hidrxido de sodio a 2 mol/l al
extracto amoniacal se produce un cambio espectral caracterstico que
puede ser til en el trabajo cualitativo.
Para realizar la cuantificacin, se mide la diferencia entre la absorbancia a
pH 10 y a pH 2, se construye el grfico de calibracin con el anlisis de las
soluciones estndares del barbitrico y se calcula la concentracin del
barbitrico en la muestra. Alternativamente se puede usar la frmula
siguiente:
cc. de Barbituratos en mg/l= (Absorbancia a pH 10 Absorbancia a pH 2) x
factor de dilucin x 25
Se puede trabajar con volmenes ms pequeos que 5 ml pero se debe
contar con las cubetas y equipamiento apropiado para ello.

Sensibilidad: 2 mg/l.

Barrido al UV

Se puede obtener espectros caractersticos a pH 2, 10 y 14 de acuerdo a lo


que se indica.

Toxicologa libro analtica. Disponible en:


https://www.academia.edu/11474195/Toxicologia_libro_analitica?auto=download.
IDENTIFICACION DE ESTRICNINA
La estricnina es un polvo cristalino blanco, inodoro sin color y amargo que puede ser ingerido,

inhalado o mezclado en una solucin e inyectado directamente en las venas. Se considera un

veneno fuerte y una pequea cantidad puede ocasionar serios efectos de salud, incluyendo la

muerte. Actualmente esta sustancia qumica se utiliza principalmente como un pesticida para

matar ratas, pero tambin puede encontrarse en las drogas de "venta en la calle".

En el pasado, la estricnina estaba disponible en pldoras y se utilizaba para tratar muchas

enfermedades en las personas. Hoy en da, la estricnina es utilizada principalmente como

pesticida, especficamente para matar ratas, en algunos lugares se utilizan para envenenar otros

animales como los perros. Muy rara vez, se encuentra estricnina mezclada con las drogas de la

calle" como el LSD, la herona y la cocana es decir son adulteradas con este alcaloide.

Como puede ser expuesto a la Estricnina?

Si se produce la liberacin de la estricnina en el agua, usted puede estar expuesto al beber del

agua contaminada. Si se produce la contaminacin de los alimentos con estricnina, usted puede

estar expuesto al consumir los alimentos contaminados. Tambin es posible absorber la estricnina

por medio de las membranas de la nariz, los ojos o la boca. Por ejemplo, una persona puede

envenenarse al inhalar el polvo de estricnina que ha sido liberado en el aire. La estricnina puede

fumarse o ser inhalada como parte de las sustancias de las drogas de la calle. Se ha informado de

casos de envenenamiento por estricnina como consecuencia de inyeccin intravenosa y debido a

su inhalacin por la nariz

Aplicaciones y Dosis

Inapetencia, astenia, dispepsias hipo secretoras. Hipotensin arterial, arritmia extrasistlica.

Depresin respiratoria, incontinencia urinaria, enuresis nocturna. Astenia sexual.


Dosis txicas

La dosis letal potencial estimada ha sido difcil de definir. La dosis txica para la estricnina es de

0,2 mg%, la concentracin txica en sangre tiene rangos de 0,5-90 ug/ml. La dosis letal oral

estimada en gatos es de 0,35 mg/kg, 0,4mg/kg en perros y 3,5 mg/kg en quilos.

La dosis teraputica mxima en adultos es de 1-4 mg/24 h, la dosis puede aumentarse en

pacientes coreicos, alcohlicos y comatosos por frmacos depresores del SNC.

La dosis teraputica en nios es de 200 ug/kg/da oral y 600 ug/kg/da IV .Con un lmite de

exposicin de 0,15 mg/m3, y una concentracin mortal en sangre de 0,9-1,2 mg%. La exposicin

mnima letal en un nio es de 5-10 mg, mientras que en adultos se reportan mbitos de 30-120

mg.

La dosis letal intranasal, intravenosa y subcutnea es probablemente menor

También podría gustarte