UNIVERSIDAD NACIONAL DEL

ALTIPLANO
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

PATOLOGA CLNICA VETERINARIA

INFORME DE PRCTICAS: N5
CONTEO DE GLOBULOS ROJOS Y GLOBULOS BLANCOS,
DIFERENCIACION CELULAR

NOMBRE Y APELLIDOS: Alexander Barra Huamani

GRUPO: A
DOCENTE: DR. HUGO VILCANQUI MAMANI
 I. PRACTICA N: 5
II. CONTEO DE GLOBULOS ROJOS Y GLOBULOS BLANCOS
,DIFERENCIACION CELULAR
III. INTRODUCCION:
En conteo de glbulos rojos es un anlisis de sangre que el mdico veterinario
usa para saber cuntos glbulos rojos se tiene en la sangre .a este
procedimiento tambin se le denomina recuento de glbulos rojos. Este
anlisis es muy importante porque los glbulos rojos contienen hemoglobina,
que transportan oxgeno a todos los tejidos del organismo. Los tejidos
necesitan oxgeno para funcionar eficazmente. Adems permite al mdico
determinar patologa de forma, color ,madures de los glbulos rojos.
Por otro parte tambin se realiza un examen de recuento de glbulos blancos o
de leucositos,que mide la cantidad de leucocitos en la sangre, este conteo da
como resultado la formula lecusitaria,que es un anlisis de sangre que mide el
porcentaje de cada tipo de glbulo blanco que un individuo tiene en la sangre
y tambin revele si hay algunas clulas inmaduras o anormales .

IV. OBJETIVOS:

1. OBJETIVOS GENERALES:
.

Determinar la cantidad de clulas sanguneas en la muestra tomada

en caninos (glbulos blanco y rojos) y reconocer su morfologa.

2. OBJETIVOS ESPECIFICOS:

Realizar la frmula leucocitaria.

V. REVISION BIBLIOGRAFICA:

CONTEO DE GLOBULOS ROJOS

Cuadrantes dentro de la cmara de Neubauer donde se realizara el conteo celular,

contaremos cada uno de los glbulos rojos que encontremos en los cuadrantes que estn
marcados con la letra R y en el orden como se indica en las flechas.

De los 25 cuadrados en que se encuentra subdividido, se cuentan los cuatro angulares y el

central, con un recuento total representativo de 1/5 de milmetro cuadrado. Sobre la base de
 una dilucin de 200, de un recuento de 1/5 mm2 y una profundidad de 0.1 mm, el clculo se
efecta como sigue:

Eritrocitos contabilizados X 5 X 200 X 10 = NUMERO DE ERITROCITOS POR mm3, o

bien
Eritrocitos contabilizados X 10,000 = NUMERO DE ERITROCITOS/ mm3

CONTEO DE GLOBULOS BLANCOS

Para evaluar a los leucocitos primero se realiza un conteo mediante mtodos

electrnicos o con las pipetas de Thoma.

Las pipetas se llenan de sangre hasta la marca de 0.5 y el resto, con la solucin de Turk
(a base de cido actico glacial y violeta de genciana), hasta la marca de 11 para lograr
una dilucin de 1:20; se mezcla perfectamente evitando que se salga lquido.
Despus de unos minutos, se eliminan tres gotas, y las siguientes son empleadas para
llenar el hemocitmetro. ste debe tener un cubreobjetos especial y limpio que se
coloca sobre las barras humedecidas con agua (no poner saliva). Hay que dejar unos
minutos en reposo para que sedimenten las clulas y efectuar la cuenta de manera
cmoda (en caso de tener otras actividades, dejar el hemocitmetro sobre un papel
hmedo y bajo una caja de Petri para evitar que se deshidrate la muestra).
La plataforma de conteo tiene nueve grandes cuadros con diferente nmero
dedivisiones:

Para la cuenta de leucocitos se toman los cuatro extremos, que tienen 16 cuadros
pequeos.
A 40 X lo observamos as:

Un cuadro de la esquina izquierda llevado a 100X aumentos:

El conteo se realiza de izquierda a derecha, se debe tener cuidado de no contar dos
veces la misma clula, pues al final se reflejar con una diferencia enorme de lo que
tiene en realidad el animal.

El cuadro superior izquierdo a 400 aumentos.

Se requiere contar las clulas que estn sobre la lnea izquierda y la lnea superior
para incluirlas en ese cuadro.
Por el contrario, las clulas que se encuentren sobre la lnea derecha o la inferior del
cuadro no se incluyen en la cuenta (O) para evitar contarlas dos veces.
Ya que se tiene la cuenta final (en la cual no debe haber una diferencia superior de
25% entre cada cuadro de las esquinas), se emplea la siguiente frmula para la
obtencin de leucocitos X 109/L:

Por ejemplo, si la cuenta es de 60, entonces:

Posteriormente se prepara la confeccin de extendidos (frotis) sanguneos.

Se deben emplear laminillas limpias, no melladas, sin huellas (porque la grasa hace
impermeable la laminilla e impide que se adhiera la pelcula celular a sta).
Antes de efectuar el extendido, se ensaya el deslizamiento sin tocar la muestra, para
detectar imperfecciones en el lavado o en el borde de la laminilla que va a extender, y
reemplazarla, de ser necesario.
Posteriormente se desliza el portaobjetos de manera suave, manteniendo el ngulo
hasta terminar el extendido. ste debe suspenderse antes del lmite de la laminilla.

Con un ngulo de 45 se rebasa la muestra completamente.

Se deben notar tres diferentes densidades en el extendido:

1. Zona muy densa, no sirve para evaluar los leucocitos, eritrocitos o plaquetas,
pues se encuentran demasiado encimados o contrados y no permite su
diferenciacin.
 2. Zona ideal para la evaluacin del extendido, las clulas se encuentran bien
extendidas sin deformaciones, como en la zona 3.
3. Zona muy delgada, se emplea para la bsqueda de microorganismos en
eritrocitos que hayan perdido su hemoglobina, se verifica que no hayan
agregados de plaquetas, microfilarias o grandes clulas.

Antes de iniciar el diferencial, en un frotis teido con Wright, se debe hacer un

reconocimiento panormico (40 X, esto es, el objetivo de 4X y ocular de 10X) del frotis
(para detectar microfilarias o agregados de plaquetas), ver la distribucin y
seleccionar el campo para iniciar el diferencial de 100 leucocitos (neutrfilos,
linfocitos, monocitos, eosinfilos y basfilos), observar a 1 000 X y aceite de
inmersin. Empezar desde la parte intermedia (2) hacia la parte ms gruesa (1).

La direccin en zigzag que debe llevar la evaluacin est relacionada con la

reparticin de las clulas en el extendido, ya que sta no es equilibrada. Los eritrocitos
pequeos y los linfocitos se van a ubicar en el centro del extendido, mientras que
sobre los bordes se van a encontrar grandes eritrocitos, granulocitos y algunos
linfocitos, y sobre el borde final del frotis (3) se van a encontrar los elementos de
mayor tamao (monocitos, agregados de plaquetas, microfilarias, etc.).
Cuando se detectan eritrocitos nucleados en los extendidos sanguneos, se debe hacer
la correccin del nmero de leucocitos, ya que estas clulas se contabilizan como
leucocitos en tcnicas, tanto manuales, como electrnicas, porque resisten los
hemolisantes al igual que los leucocitos.

Para realizar esta correccin se aplica la siguiente frmula:

Nm. de leucocitos corregidos = 100 X nm. clulas contadas

100 + eritrocitos nucleados

Ejemplo: Leucocitos 7 X I09/L y 25 eritrocitos nucleados/100 leucocitos.

Nm. de leucocitos corregidos = 100 X 7 = 700 = 5.6 X 109/L

100 + 25 125
En este caso, antes de la correccin, los valores de leucocitos estn en los lmites
normales, pero despus de la correccin, estos valores indican un estado de
leucopenia.

LEUCOGRAMA

Existen cinco variedades leucocitarias: neutrfilos, linfocitos, monocitos, eosinfilos y

basfilos.
Un aumento o una disminucin en los valores absolutos de alguno de ellos pueden
orientar hacia el diagnstico. Es un grave error (muy frecuente) interpretar los
valores relativos de los leucocitos, es decir, en porcentajes, ya que inducen a
confusin.
La nica sub variedad que debe ser evaluada, tanto en valores absolutos, como
relativos (porcentaje), son los neutrfilos en banda o no segmentados. Un aumento en
cualquiera de los dos valores es indicativo de un proceso inflamatorio.

VI. MATERIALES Y METODOS:

1. MATERIALES

6.1. a. Materiales biolgicos:

Muestra sangunea con tiempo de preservacin no mayor a 24 horas, en

un tubo bacutainer de tapa morada (EDTA).

6.1. b. Materiales qumicos o reactivos :

solucin de turk.
solucin de gower.

6.1. c. Equipos o instrumentos:

Pipeta diluidora de Thoma para globulos blancos.
Pipeta diluidora de Thoma para globulos rojos.
Microscopio.
Cmara de Neubauer.
Goma de aspiracin.
Guantes.
Cubre objetos.
 2. METODOLOGIA:

Para conteo de glbulos rojos

i. Obtener sangre total siguiendo el protocolo ya conocido.

ii. Con la boquilla y la pipeta de Thoma aspirar sangre hasta la marca 0.5
(SIN BURBUJAS)
iii. Aspirar diluyente (TURK o GOWER) hasta la marca 101 de la pipeta
iv. Agitar la pipeta por 3 min.
v. Desechar las 5 o 6 primeras gotas de la pipeta de Thoma
vi. Colocar el cubreobjetos sobre la cmara de Neubauer y llenarla,
tratando que fluya libremente por difusin el lquido evitando llenar en
exceso o formacin de burbujas
vii. Dejar en reposo 2 o 3 minutos el Hemacitmetro con el fin de que los
eritrocitos sedimenten.
viii. Localizar la cuadricula de la cmara de Neubauer con el objetivo seco
dbil (10X); enseguida enfocar con seco fuerte (40X)
ix. El recuento se realizara en los cuadros ms pequeos de la cmara,
contando los hemates localizados en los 4 cuadros de los extremos y en
el del centro, haciendo un total de 5 cuadros.
x. Realizar los clculos para determinar la cantidad de eritrocitos
resultantes

Para conteo de globulos blancos

i. preparacin de los materiales y personal

ii. hacer la coloracin en el frotiz.
iii. Empapar el frotis con colorante de whrite por 5 min.
iv. Luego empapar con la solucin amortiguadora y dejar 10 min.
v. Enjuagar con agua a chorro lento y secar.
vi. Echar con aceite de inmersin.
vii. Usar el microscopio para su vista a 100 x
viii. Determinar el conteo de la muestra de los glbulos blancos.

VII. RESULTADOS Y DISCUSIONES:

 Para glbulos rojos:
a) Primer cuadrante: 98
b) Segundo cuadrante: 98
c) Tercer cuadrante: 98
d) Cuarto cuadrante: 98 = 392 x 50 =19600gb
e) Conteo de glbulos rojos: 19600gb

Para glbulos blancos:

a) Neutrfilos 56=0.56
b) Eosinofilos 6=0.06
c) Basfilos 2=0.02
d) Monocitos 3=0.03
e) Linfocitos 33=0.33

DISCUSIONES:

Al conteo de cada uno de los tipos de glbulos blancos obtenidas en % se determinaron de esta
manera.

Neutrfilos 10976
linfocitos 6468
monocitos 588
Eosinofilos 1176
Basfilos 392 que hacen un total de 100%.

VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:

1. LaFleur-Brooks, M. (2008). Exploring Medical Language: A Student-Directed
Approach (7th edicin). St. Louis, Missouri, US: Mosby Elsevier.
p. 398. ISBN 978-0-323-04950-4.
2. Vital and Health Statistics Series 11, No. 247 (03/2005) (PDF). Consultado el 2
de febrero de 2014.
3. Bruce Alberts, Alexander Johnson, Julian Lewis, Martin Raff, Keith Roberts, and
Peter Walter (2002). Leukocyte functions and percentage breakdown. Molecular
Biology of the Cell (4th edicin). Nueva York: Garland Science. ISBN 0-8153-
4072-9.
4. Orkin, SH; Zon, LI (Feb 22, 2008). SnapShot: hematopoiesis.. Cell 132 (4):
712. PMID 18295585.