2017

Inseminación artificial en las

abejas

1-1-2017
 UNIVERSIDAD NACIONAL
“PEDRO RUIZ GALLO”
ESCUELA PROFESIONAL DE M. VETERINARIA

F
INSEMINACION ARTIFICIAL EN LA ABEJA
A
CURSO: APICULTURA

ALUMNOS




GALLARDO YARLAQUE JHON
JIMENEZ RIVERA CLEVER
CORDOVA CARDENAS YERSON
M
E
DOCENTE: ING. Rogelio

LAMBAYEQUE JUNIO DEL 2016

pág. 1

V
1 Contenido

Introducción ................................................................................................................................. 3
1 HISTORIA................................................................................................................................. 4
2 CARACTERES MEJORABLES........................................................................................ 4
3 Anatomía y Fisióloga de los Órganos de Reproducción de las Abejas ..................... 5
3.1 Órganos reproductores de la reina .......................................................................... 5
3.1.3 Espermateca............................................................................................................ 6

3.2 Órganos reproductores de los zánganos ............................................................. 7

3.2.1 Testículos ........................................................................................................................ 7

3.2.4 Canal eyaculador .......................................................................................................... 8

3.2.6 Esperma........................................................................................................................... 9

3. Equipo de Inseminación .............................................................................................. 10

3.1 Bloque de la reina..................................................................................................... 10
4.2 Soporte de la reina ...................................................................................................... 10
4.3 Los ganchos y su fijación ........................................................................................ 10
4 Procedimientos ................................................................................................................. 11
6. ¿Cuál es la utilidad de inseminar instrumentalmente? ........................................... 13
7. Anexos ............................................................................................................................... 14
5 Bibliografía ......................................................................................................................... 15

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 Introducción

Los avances de la agricultura están basados en la crianza selectiva de plantas

y animales. La selección genética de abejas melíferas también es vista como la mejor
solución a largo plazo para los desafíos que enfrenta la industria apícola. Los hábitos
de acoplamiento de la abeja melífera hacen difícil la obtención de cruzas específicas.

La inseminación instrumental, llamada también inseminación artificial, consiste en

introducir semen de zánganos a reinas vírgenes a través de equipos manejados
microscópicamente.

Obtenemos una "duración de vida" de las colonias, artificial, gracias a la cría artificial
de reinas. Sólo la reina aparece y desaparece, la colonia permanece eternamente
joven gracias a la introducción de reinas jóvenes, no envejece y no muere. El
rejuvenecimiento natural por el enjambrado, el nacimiento de nuevas colonias con su
desarrollo y su proceso de crecimiento natural es evitado, así como el proceso innato
en cada organismo, es decir el envejecimiento y la muerte.

Grandes aumentos de rendimiento deben atribuirse a la cría artificial de reinas.La

relación obrera-reina ha podido ser modificada en favor de las obreras, en cuanto a la
intensidad del trabajo y, por lo tanto, aumento del rendimiento en miel.

Desde los trabajos de Goetze (1964),las poblaciones de abejas de la Península Ibérica

(Apis mellifera L.), se consideran constitutivas de la raza ibérica.

Por su situación geográfica y sus características morfológicas, esta raza es una fase
intermedia entre A. m.mellifera y A. m. intermisa (Goetze,1964; Ruttner et al., 1978).
Las poblaciones de Apis mellifera iberica no han sido sometidas en ningún momento a
un programa de selección genéticaque permita el mejor aprovechamiento de la raza.

La inseminación artificial de reinas permite el control de los acoplamientos, y por tanto,

un mejor seguimiento de los caracteres susceptibles de ser seleccionados.

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1 HISTORIA
La técnica moderna de la inseminación instrumental comenzó con el trabajo de
Watson, quien consiguió los primeros resultados en 1927, este utilizó una micro-aguja
fijada a un micromanipulador. La reina se fijaba con un hilo de seda un trozo de
madera. La cámara del aguijón era abierta con una pinza mantenida con la mano.

A partir de 1930, Laidlaw, utiliza como anestésico el anhídrido carbónico y

Mackensen observó en 1947, que una reina tratada dos veces con anhídrido carbónico
está obligada a poner huevos.

En 1944, Laidlaw descubrió el papel de la válvula vaginal; el esperma debe

inyectarse detrás de esta válvula en el oviducto común.

Mackensen y Roberts, en 1948 perfeccionaron un sencillo aparato que en 1937

había construido Nolan. Obtuvieron resultados mejores que sus predecesores. La
cavidad del aguijón se abre con dos ganchos fijados en un soporte. La válvula vaginal
es bajada con ayuda de una sonda y la extremidad de la jeringa se introduce en el
oviducto común de la reina.

Laidlaw, en 1948, construyó un aparato que controla todos los movimientos de

los ganchos y de la aguja con tornillo.

Muy importante es la aportación de Mackensen (1948), que construyó un nuevo

tipo de aguja con membrana. Veseley y Ruttner mejoraron el aparato.

2 CARACTERES MEJORABLES
Los caracteres que se pueden mejorar directa, o indirectamente mediante la
inseminación artificial son fundamentalmente los siguientes:

 Caracteres productivos (rendimiento en kilos de miel, kilos de polen, propóleos,

jalea real, etc.).
 Caracteres de comportamiento (disminuir el instinto de defensa de las abejas, y
por tanto su agresividad, reducir la tendencia a la enjambrazón, etc.).
 Caracteres de resistencia, tolerancia frente a enfermedades (varroa,
ascosferiosis, loques, etc).
 Exigencias de la técnica de Inseminación artificial.
 Selección previa de colmenas progenitoras. Mediante diferentes métodos de
testaje se seleccionan aquellas colmenas que por las características
anteriormente mencionadas sean superiores a la media.

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3 Anatomía y Fisióloga de los Órganos de Reproducción de
las Abejas

3.1 Órganos reproductores de la reina

3.1.1 Ovarios
Son dos y se encargan de la producción de los óvulos. Cuando la reina esta
fertilizada y en la plenitud de sus funciones ocupan gran parte del abdomen. Los
ovarios están formados por una serie de conductos tubulares llamados ovariolas, en
número de 150 a 180, unidos por su extremidad anterior; la más delgada. Se engruesa
progresivamente hacia su parte posterior hasta desembocar en los oviductos laterales
por su extremo más grueso.

Los óvulos se forman en la parte anterior de los ovarios en una masa

protoplasmática multinucleada donde se diferencian las ovogonias que originan los
óvulos, las células nutricias, elemento nutritivo de estas y una delgada capa de células
foliculares, que rodean al óvulo; excepto por el punto de contacto con las células
nutricias, donde se localizan los micrópilos, orificios por donde penetran los
espermatozoides al óvulo. Estos tres elementos celulares forman a lo largo de las
ovariolas, a manera de rosario unos cuerpos alargados y redondeados con dos
compartimientos; en uno van las células nutricias y a continuación el óvulo; en el otro,
según continúen hacia atrás van alimentando y engrosando al óvulo hasta terminar
absorbidas por el. Estos corpúsculos ovulares
se van formando acompasadamente según la
alimentación que recibe la reina, circulando
por las ovariolas hasta transformarse en
óvulos llegan a los oviductos laterales
alternadamente.

3.1.2 Oviductos
Los dos oviductos laterales se unen en
la línea media formando un gran saco
membranoso llamado oviducto medio. El
conducto de la espermateca desemboca en su
pared antero superior y en su parte posterior
se comunica en la vagina, cerrándose con un
repliegue membranoso que semeja el cuello

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del útero en los mamíferos y que actúa como válvula de cierre. En el oviducto medio
es donde se lleva a cabo la penetración de los espermatozoides al óvulo, cuando este
se detiene en la válvula vaginal, quedando los micrópilos justamente a nivel de la
abertura del conducto de la espermateca, recibiendo un paquete de espermatozoides,
generalmente 8, de los cuales uno, dos o más penetran al óvulo para la fecundación
formando el cigoto previa reducción cromática y absorción de los espermatozoides que
penetraron de mas. Esto sucede cuatro horas después de puesto el huevo en la celda
del panal dando normalmente lugar a una abeja hembra.

Si el óvulo pasa sin detenerse no recibe espermatozoides, no se fecunda y

origina una abeja macho (zángano), por el fenómeno llamado partenogénesis que
significa reproducción de una especie por un óvulo no fecundado, por lo tanto estos no
heredan las características de los machos que fertilizaron a su madre. La válvula del
cierre vaginal realiza otra función muy interesante después de la cópula de la reina con
los zánganos; cierra la comunicación entre la vagina y el oviducto, impidiendo que los
espermatozoides almacenados en los oviductos retrocedan y tengan contacto con el
aire, manteniéndolos hasta que por quimiotactismo positivo emigran lentamente a la
espermateca, ayudados por las contracciones de los oviductos laterales y medio, así
como por la acción de la válvula sigmoidea.

3.1.3 Espermateca

Es un saco esférico donde se almacenan de cinco a 7 millones de

espermatozoides para la fecundación de los óvulos durante toda la vida de la reina. Su
pared está sumamente vascularizada por vasos hemolinfáticos y además llegan a ella
numerosas traqueolas donde los espermatozoides depositados en la espermateca
pueden continuar viviendo varios años, durante la vida reproductiva de la reina, ya que
la espermateca tiene un par de glándulas en su superficie anterolateral que produce
una sustancia que nutre a los espermatozoides. La comunicación con el oviducto
medio se efectúa por un conducto que regula el paso de los espermatozoides,
primeramente en su entrada desde el oviducto a la espermateca para su
almacenamiento y después dando salida internamente para fecundar a los óvulos.
Este mecanismo se regula mediante la válvula sigmoidea situada en el trayecto. La
cantidad de espermatozoides que llegan a la espermateca depende del número de
zánganos que la copulen y el número de vuelos realizados por la reina.

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3.1.4 Vagina
Es un gran receptáculo membranoso que comunica el oviducto medio con la cámara
del aguijón; lateralmente tiene dos grandes bolsas, llamadas bolsas copulatrices. La
vagina juega un papel importante durante la cópula, dando entrada y fijando el pene
del zángano que se desprende en el acto quedando en forma de tapón hasta que otro
zángano lo desprende en el aire o las obreras en la colmena. Los espermatozoides
migran a los oviductos y posteriormente a la espermateca.

Cada zángano deposita en la reina un promedio de 10 millones de

espermatozoides de los cuales solo el 6.2 % llega a la espermateca, los demás son
arrojados al exterior. En la postura de huevos, la vagina sirve de paso a los huevos
impulsándolos a salir hasta quedar depositados en el fondo de las celdas del panal,
cuatro horas después de puesto en la celda alcanza su madurez, se lleva a cabo la
reducción cromática y la absorción de los espermatozoides sobrantes y se consuma la
fecundación.

3.2 Órganos reproductores de los zánganos

3.2.1 Testículos
Es un órgano par, compuesto por
numerosos tubillos donde se originan y
maduran los espermatozoides, desde su
primitiva forma de espermatogonias, pasando
por los estadios intermedios hasta llegar a la
completa madurez. Los testículos en el
zángano durante el estadio de pupa ocupan
gran parte del abdomen y en este estadio
producen diez millones de espermatozoides
los que migran a las vesículas seminales. A
medida que las pupas avanzan en edad los
testículos disminuyen su volumen hasta quedar reducido a un muñón de tejidos
grisáceo. Los zánganos emergen de su celda 24 días después de puesto el óvulo y
doce días más tarde alcanzan la madurez sexual y son aptos para fertilizar a la reina.

3.2.2 Vesículas seminales

Tienen forma de saco alargado, sirven para almacenar los espermatozoides
procedentes de los testículos hasta el momento de la cópula. Para esta función es
necesario que el zángano tenga más de doce días de edad.
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3.2.3 Glándulas mucosas
Son dos grandes órganos accesorios que se unen por su base a la salida de
las vesículas seminales. Segregan una sustancia mucosa que en contacto con el aire
y el agua se solidifica. En el momento de la eyaculación empujan hacia el exterior al
semen por el conducto eyaculador dentro de la vagina de la reina.

3.2.4 Canal eyaculador

Conduce al semen desde las glándulas accesorias hasta el orificio terminal del
bulbo del pene. Durante la vida del zángano no existe comunicación entre las
glándulas y el lumen del canal, sin embargo durante la cópula se rompe el tejido por la
violenta contracción de los músculos de la base de las glándulas, lo que permite su
salida por el canal

3.2.5 Órgano de copulación

Mientras que los machos de los insectos tienen por lo general un pene exterior
o ectofalo, duro y rígido, en el zángano este órgano está muy atrofiado. Tiene
solamente dos pares de placas quitinosas finas, pegadas a la pared del cuerpo. Estas
placas no tienen en la abeja melífera ninguna relación con la transmisión del esperma.
Esta función es realizada enteramente por el endofalo que se halla en el interior del
abdomen. El endofalo es un saco blando, membranoso, con varios apéndices y zonas
velludas. Está invaginado en el abdomen como un dedo de guante, siendo casi igual
su longitud a la del abdomen del zángano. Su extremo está ampliado y tiene una placa
quitinosa en forma de coma, conocido por bulbo. El largo conducto eyaculador liga el
endofalo con los testículos y las glándulas mucosas. Debido a su longitud, los órganos
de acoplamiento de los zánganos tienen la forma de S. La parte inferior de la S está
formada por el endofalo, la mediana por el conducto eyaculador y la superior por los
testículos y las glándulas mucosas.

La forma del endofalo se puede ver mejor cuando está completamente fuera,
situación que se puede obtener empujando ligeramente el tórax de un zángano
maduro. Su porción más ancha es la base o vestíbulo de donde salen los dos cuernos.
El siguiente segmento del endofalo es delgado y doblado ligeramente hacia arriba; es
el cuello o cérvix. La extremidad anterior doblada hacia arriba está formada por la
eversión del bulbo. Las placas quitinosas dobladas hacia el exterior se hallan en su
parte superior con los picos orientados anteriormente. El endofalo en eversión es
transparente, está lleno de aire y hemolinfa. En su interior se puede ver el conducto
eyaculador uniformemente delgado que durante el proceso de eversión es sacado de

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la cavidad abdominal con el endofalo y se abre al exterior de los órganos de
acoplamiento del zángano, por los que salen el esperma y el mucus.

3.2.6 Esperma
El esperma maduro, de color crema amarillento, se puede obtener mediante la
eversión artificial sólo de zánganos de doce a dieciséis días de edad. El esperma está
formado por dos componentes distintos según su procedencia: Los espermatozoides
de los testículos: Son filamentos que en estado vivo tienen movimientos serpenteados.
El líquido de la vesícula seminal y del bulbo del endofalo. El esperma se puede
diferenciar muy bien del mucus blanco como nieve y homogéneo. Su color es amarillo.
Cuanto más elevado sea el contenido de espermatozoides, tanto más intenso será el
color y mayor la viscosidad. El esperma del zángano tiene reacción neutra o sea un pH
de 6’8 a 7 y se mezcla bien con cualquier medio acuoso. La movilidad de los
espermatozoides es incrementada por las secreciones de la vesícula, del bulbo y por
la secreción ligeramente alcalina de las glándulas de la espermateca. El agua y la
hemolinfa matan enseguida el esperma.

Se recomienda como diluyente en el caso del llenado de la jeringa, una

solución fisiológica de cloruro sódico (9 x 1000 de ClNa). Un milímetro cúbico de
esperma contiene 7’5 a 9’5 millones de espermatozoos. El volumen del esperma de un
zángano es por término medio 1’7 mm3, pero por lo general en la jeringa de
inseminación se introduce solamente 1 ó 1’5 mm3 . Se puede conservar sin ningún
problema el esperma absorbido en la jeringa varias horas y aún hasta el día siguiente.
Puede mantenerse semen conservado en tubos cerrados a la llama y poseen vitalidad
hasta unos 60 días.

Para la inseminación artificial de las reinas ha dado muy buen resultado. La

eyaculación del esperma empieza un poco después de la contracción de la
musculatura del abdomen. La técnica de recolección del esperma debe ser concebida
de modo que se base en el estímulo de las contracciones de la musculatura abdominal
y no en sacar el esperma por prensado. Sólo un proceso de eyaculación así
provocado puede poner en libertad todo el esperma del zángano, sin mezclarlo con el
mucus.

En una eyaculación en condiciones normales aparece primero el esperma puro

y después completamente aparte el mucus. El esperma y el mucus llegan al bulbo por
el conducto eyaculador, largo y estrecho. Este desplazamiento se puede observar por
la pared transparente del vestíbulo y del bulbo cuando el pene del zángano ha salido

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la mitad. Si el bulbo de estos zánganos está vacío significa que no están maduros o
que están mal cuidados. De estos zánganos prescindiremos para obtener esperma.

En el interior del bulbo se halla un tejido glandular cuya secreción se mezcla

con el esperma e incrementa la movilidad de los espermatozoides. En los zánganos
perfectamente maduros o en el caso de una presión fuerte y prolongada sobre el
abdomen sale también el bulbo. En este caso el eyaculado se halla en la cavidad de
las placas quitinosas en forma de cuchara, en la parte superior del endofalo.

Es preferible que el proceso de eversión se pare antes de que salga también el bulbo

3. Equipo de inseminación
Se compone de los siguientes elementos:

3.1 Bloque de la reina

La reina se fija a un soporte introducida en un pequeño tubo, con la cabeza
hacia abajo. El bloque de la reina facilita también la anestesia con gas y el
establecimiento del ángulo adecuado para la inseminación. El bloque de la reina se fija
al soporte a través de su pieza central. Por una abertura en medio de la pieza central
pasa el tubo de alimentación con gas, que en su extremidad tiene una arandela fijada
al soporte para la reina.

4.2 Soporte de la reina

El soporte para la reina se compone de un tubo de vidrio acrílico transparente
(Lucite). Una de sus aberturas se estrecha cónicamente de 6’6 a 4’8 mm de diámetro
interior. En esta porción, sobre la pared interior, se liman tres ranuras longitudinales
que permiten el paso libre de CO2 a lo largo del abdomen de la reina. Para introducir
la reina en este soporte se emplea un tubito con el mismo diámetro, pero que salvo un
pequeño orificio de ventilación está tapado en una extremidad.

4.3 Los ganchos y su fijación

La cámara del aguijón de la reina fijada se abre con ayuda de dos ganchos
finos. El gancho ventral tiene la forma de un atizador. Tiene simplemente la función de
mantener la última esternita de la reina. El gancho de la aguja tiene en una especie de
cuello doblado, muy delgado, una paleta triangular. El manejo de los ganchos requiere
mucho sentido táctil

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4 Procedimientos
Las reinas vírgenes se acoplan en vuelo con numerosos zánganos de una
fuente de colonias diversas. Las reinas tienen uno o varios vuelos de acoplamiento en
un periodo de pocos días, acoplándose con varios zánganos, desde 1 hasta 60, con
un promedio de 10.

Durante esta ventana crítica de tiempo, el clima debe ser favorable para el
vuelo y debe haber disponible un número suficiente de zánganos maduros. Las
condiciones de crianza de reinas y zánganos son un factor que contribuye al
desempeño de la colonia. La tasa de desarrollo acelerada de las reinas, requiere que
la crianza sea en colonias fuertes y bien alimentadas con una población
proporcionalmente alta de abejas nodrizas, como las encontradas en condiciones de
enjambrazón. La crianza de zánganos es igualmente importante.

Normalmente, tienen una alta tasa de desgaste, por lo tanto este aspecto debe
ser considerado para asegurar un suministro abundante de zánganos maduros cuando
se necesite. El número de zánganos de distintos orígenes que se acoplan con la reina
influenciará el desempeño de la colonia.

Los hábitos de acoplamiento de las abejas melíferas están diseñados para

favorecer el cruzamiento externo (out-crossing) de los individuos para fortalecer la
diversidad genética dentro de la colonia y de la población. Colonias con un alto grado
de diversidad genética han mostrado ser más vigorosas, menos susceptibles a plagas
y enfermedades, tener mayor habilidad para termorregulación, mayor comportamiento
higiénico y mayor habilidad para reclutar.

La inseminación artificial es un método confiable para controlar el acoplamiento

de la abeja melífera, proporcionando una herramienta esencial para investigación y
mejoramiento de stock.

Además proporciona la habilidad para realizar cruzas específicas que no

ocurren naturalmente. Esto ofrece una herramienta única tanto para investigadores
como para criadores de abejas. Por ejemplo, un zángano puede ser acoplado a una o
varias reinas para aislar un rasgo específico con fines de investigación. Además, una
reina puede recibir una porción de semen mezclado de cientos de zánganos para
fortalecer y simplificar un programa de crianza. La técnica de inseminación artificial
tiene una alta repetibilidad y ha llegado a ser fácil de aprender y usar con la
sofisticación del diseño de los instrumentos y opciones de una variedad de
herramientas.

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 Una revisión de los procedimientos y técnicas se señala brevemente Para
obtener el semen, la eversión del endophallus es un proceso en dos pasos, eversión
parcial y total. Durante la eversión parcial se contraerá el abdomen y la cornua será
expuesta (par de especie de cuernos, amarilloanaranjados).

Si el abdomen permanece suave o las cornuas son claras, sin color, quiere
decir que el zángano está inmaduro y no producirá semen. Para exponer el semen, la
eversión parcial se completará estimulando las contracciones de los músculos
abdominales. Los dos pasos del proceso de eversión se desarrollan en pocos
segundos. El semen expuesto es cremoso, color marfil, con una capa inferior de
mucus blanco. Los zánganos jóvenes pueden tener sólo una delgada capa de semen.
El semen de los zánganos mayores es más oscuro, fuertemente agrupado y más fácil
de separar del mucus. La cantidad y consistencia del semen varía, generalmente cada
zángano rendirá cerca de 1 µL.

El semen es tomado con la jeringa separándolo de la capa de mucus, evitando

las burbujas de aire. El mucus viscoso se separa fácilmente del semen más fluido. El
proceso es repetido hasta que se colecta la cantidad de semen deseada. La columna
de semen debe ser homogénea en color y densidad. Para exponer el orificio vaginal
de la reina, los segmentos abdominales son separados usando un par de ganchos o
fórceps.

La larga estructura del aguijón es levantada dorsalmente. El pliegue de la

válvula, una estrecha ala de tejido que cubre el oviducto medio, es desviado por la
punta de la jeringa. La punta de la jeringa es insertada directamente en el oviducto
medio donde se libera el semen. Una medida de semen de 8 a 10 µL es la dosis
estándar para una reina. Con la práctica, la introducción del semen es realizada en
forma rápida y precisa, requiriendo sólo unos segundos para la reina.

El uso de instrumental para inseminación ha llevado a cuestionar cuán bien se

comportan estas reinas comparado con aquellas fecundadas naturalmente.

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6. ¿Cuál es la utilidad de inseminar instrumentalmente?

El 50 % del aporte genético de los zánganos es muy determinante en las distintas

características de las colonias de abejas productoras de miel y sin el control de esta
variable, cualquier esfuerzo que se realice por fijar características “deseables” a las
abejas pierde todo sentido.

Cuando las abejas reinas vírgenes realizan sus vuelos nupciales, pueden ser
apareadas por 7 a 20 zánganos, de los cuales no se sabe su carga genética, ya que
queda al libre alberdrío y sin control de parte del apicultor. Esto explica el por qué
parte de las obreras se ven diferentes a su madre o bien las reinas hijas se ven o se
comportan de una manera diferente a la reina matriz.

La inseminación instrumental asegura que el semen de zánganos seleccionados,

criados para tal efecto, aportarán las características que busca el apicultor que junto
con la carga genética del 50 % de la reina, que ha sido seleccionada de madres
óptimas, aportarán abejas con las mejores características para los apiarios.

Dentro de las características “deseables” que se buscan son: estándar de la raza

base, productividad, mansedumbre, autohigiene, resistencia a enfermedades, baja
enjambrazón, por citar algunas. También la inseminación instrumental sirve para
mantener cepas de abejas puras, hibridaje entre razas mielíferas, hibridaje entre
especies mielíferas y no mielíferas, intercambio de espermios entre continentes.

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7. Anexos

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5 Bibliografía

Goetze, G. 1964. Die Honigbiene in naatürlicherund Hünstlicher Zuchtauslese. Paul

Parey,Hamburg. RFA.

Rinderer, T.E. 1986.Bee genetics and breeding.Academic Press, Inc.

Ruttner, F., L. Tassencour and J. Louveaux.1978. Biometrical statistical analysis of the

geographic variability of Apis mellifica L.Apidologie, 9: 363-382

pág. 15