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    Practica 7 Antibiograma

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    HansMautong
    Este documento describe el procedimiento para realizar un antibiograma, que evalúa la sensibilidad o resistencia de una bacteria a diversos antibióticos. Explica los pasos para preparar el inóculo bacteriano, sembrarlo en placas de agar con antibióticos, e interpretar los resultados después de la incubación mediante la medición de los halos de inhibición del crecimiento. El objetivo es determinar si la bacteria es sensible, resistente o tiene sensibilidad intermedia a cada antibiótico.

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    Este documento describe el procedimiento para realizar un antibiograma, que evalúa la sensibilidad o resistencia de una bacteria a diversos antibióticos. Explica los pasos para preparar el inóculo bacteriano, sembrarlo en placas de agar con antibióticos, e interpretar los resultados después de la incubación mediante la medición de los halos de inhibición del crecimiento. El objetivo es determinar si la bacteria es sensible, resistente o tiene sensibilidad intermedia a cada antibiótico.

    Descripción original:

    Prcatica de laboratorio

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    UNIVERSIDAD DE ESPECIALIDADES ESPIÍRITU SANTO

    FACULTAD DR. ENRIQUE ORTEGA MOREIRA


    ESCUELA DE MEDICINA

    NOMBRE:
    FECHA:
    SUBGRUPO:

    REPORTE DE LABORATORIO Nº7

    TEMA: ANTIBIOGRAMA

    Objetivo.-

    Evaluar la sensibilidad o resistencia a diversos antibióticos de una bacteria de crecimiento


    rápido aislada en prácticas anteriores. El método utilizado es el de difusión en agar o de Kirby-
    Bauer.

    Fundamento.-

    1. Preparación del inóculo

    La técnica de antibiograma sólo es aplicable a especies bacterianas en cultivo puro. Por ello,
    previamente se procederá, si es preciso, a hacer un aislamiento en placa.

    1.1 Material
     Tubo con 5 ml de solución salina
     Cultivo de la bacteria problema.
    1.2 Procedimiento
    Preparar una suspensión directa a partir del cultivo en placa usando el siguiente método:
     Tomar una colonia aislada con el asa y resuspender en el tubo de solución salina
    frotando en la pared del tubo.
     Homogeneizar bien y ajustar a la densidad óptica con un patrón de turbidez Nº 0.5 de
    MacFarland (0.5 de cloruro de bario de 0.048M y 99.5 ml de ácido sulfúrico 0.36M).
    Esto equivale aproximadamente a una densidad de 108 células/ml. Diluir si es
    necesario la suspensión o añadir más inóculo.
    2. Siembra y colocación de los discos:

    2.1 Material
     Placas con medio de cultivo Mueller-Hinton
     Hisopos
     Pinzas
     Discos 6mm de diámetro impregnado con antibiótico.

    2.2 Procedimiento

     Impregnar una torunda con la suspensión del inóculo; escurrirla contra la pared del
    tubo y sembrar con ella toda la superficie de la placa en varias direcciones hasta el
    borde para asegurar el crecimiento bacteriano.
     Antes de los 15 minutos colocar los discos de antibióticos, con pinzas flameadas y frías.
    Se dispondrán los discos sobre las placas de forman que disten unos 15mm del borde
    la placa y unos 30 mm entre sí.
     Adherir cada disco al agar presionando ligeramente con las pinzas.
     Incubación de las placas a 37°C durante 18-24 horas.

    3. Interpretación del antibiograma:

    Medir el diámetro de los halos con el calibrador de vernier o regla graduada, considerando la
    zona que está libre de crecimiento. La presencia de colonias en el interior del halo indica
    contaminación, cultivo mixto o aparición de resistencia.

    Consultar el cuadro para interpretar el antibiograma. Teniendo en cuenta la especie bacteriana


    y el antibiótico, decidir si la bacteria es sensible (S), resistente (R) o su sensibilidad no puede
    definirse con claridad (intermedio o indeterminada).
    Resultados.-

    Conclusiones.-

    Consejos para la realización de un antibiograma

    1. No se debe realizar el antibiograma sobre una población mixta de microorganismos,


    debiéndose proceder previamente al aislamiento y cultivo en pureza de los distintos
    microorganismos encontrados en la muestra clínica, para, posteriormente, realizar un
    antibiograma para cada uno de los distintos tipos de microorganismos de significación clínica
    hallados.
    2. No deben incluirse un número muy elevado de antibióticos.

    Referencias bibliográficas

     Guías de prácticas de Microbiología, Departamento de Microbiología II, Universidad


    Complutense 2007/2008.
     Laboratory Experiments in Microbiology. Tenth Edition. Pearson 2013

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