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Antibiograma Por Difucion en Disco: V Rnlarbkkpx4

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ANTIBIOGRAMA POR DIFUCION

EN DISCO
https://www.youtube.com/watch?
v=rnlarbkkpX4
Métodos
¿Que es el estandarizados para
antibiograma? realizar un
antibiograma

Método de en placa de Kirby


Bauer
Método ideado para evaluar la -para microorganismos de
sensibilidad in vitro de un crecimiento rápido
microorganismo
Para microorganismos exigentes
Da resultados CUALITATIVOS.

E. Test
Antibiograma por difusión en Macro dilución en tubo
disco Micro dilución en placa
PROFUNDIDAD DEL MEDIO ENTRE 4 A 5 mm

Composición del medio ricos en Mg y Ca produce falsa resistencia para los aminoglucosidos y la tetraciclina
en las Pseudomonas

Exceso de Zn resistencia a Carmapenemes

No almacenar el medio por mas de 2 semanas a temperatura de 4 a 8 ºC

Antes de usar atempera el medio a 35ºC.


Tipos de agar usados para el antibiograma

Agar Mueller Hinton enriquecido con sangre al 5%


Para cocos y estreptococos

Medio HTM para las especies de


Haemophylos

Agar- base GC suplementado con hemoglobina


bobina con enriquecimiento al 1% para Neisseria
• PREPARACION DEL INÓCULO:
La turbidez de la suspensión bacteriana a inocular en el medio de cultivo, debe tener
una densidad correspondiente 0,5 Mac Farland (1,5x 108 UFC).
La medición de la turbidez puede ser realizada a través de un turbidímetro o
comparando directa-mente (visualmente) la suspensión preparada con el control 0.5
de Mc Farland bajo luz transmitida.
El estándar de Mc Farland o también llamado etalón, está hecho de sulfato de
bario (0,5 mL BaCl2 1,175% + 99,5 mL H2SO4 1%). Se debe agitar antes de usar y al
terminar su uso se debe guardar protegi-do de la luz. Este estándar puede también
ser obtenido comercialmente y es necesario verificar su vigencia. Se debe tener en
cuenta que:

1.- A mayor densidad hay menor inhibición de los mi-croorganismos y mayor


probabilidad de ocurrencia de falsa resistencia a los antimicrobianos estudiados.

2.- A menor densidad hay mayor inhibición de los microorganismos y mayor


probabilidad de ocurrencia de falsa sensibilidad a los antimi-crobianos estudiados.
Estreptococo, Haemophylus y Neisseria incubar en medio con CO2
Método de kirby bauer
Materiales para la tecnica
Usar un cultivo puro bacteriano
Identificar la caja del Mueller Hinton
en la parte posterior de la caja
Trabajar detrás del mechero
Flamear el aza antes de sacar la muestra
dejar enfriar.
Sacar con el asa de 1 a 3 colonias para
realizar la suspensión.
Poner en un tubo esteril un caldo , no olvidar de
realizar el trabajo detrás de la llama y flamear la boca
del tubo
Realizar una suspensión de la colonia en
una Agua destilada estéril o caldo Mueller
Hinton( 5ml)
Luego de mezclar compara con la escala de
Mack Farland a 0.5 %
Tomar la el inoculo con un hisopo estéril , en las
paredes del tubo escurrir el exceso de inoculo antes de
hacer la siembra
Sembrar con el hisopo en una caja de agar Mueller Hinton previamente identificad.
La siembra se realiza por confluencia en 3 direcciones rotando la caja a 60º cada ves
que se cambie de dirección.

Para finalizar pasar el hisopo por todo el borde de la caja.


Medir la distancia a la que se pondrán los discos y marcarla con un marcador
de vidrio en la parte posterior de la caja.
Luego colocar los discos previo flameado de la pinza en
los lugares marcados
Los discos se colocan a una distancia de 2,5 centímetros unos a otros
La caja no debe ser llenada de disco.
La distancia de los discos con el borde de la caja debe ser no menor a 2,5 cm.
Colocar las cajas en la incubadora durante 18 a 24 horas ( colocarla invertida)
Tomar en cuenta las necesidades del microorganismo
identificado para realizar el cultivo del antibiograma
LECTURA DEL ANTIBIOGRAMA
BASES PARA LA INTERPRETACIÓN
-MEDIR EL HALO DE INHIBICION ENUN FONDO NEGRO Y CON LUZ REFREJADA DESDE LA PARTE TRACERA DE LA CAJA PETRI Y
ANOTAR LOS RESULTADOS DE CADA ANTIBIOTICO. EN CASO DE USAR OTROS AGARES OPACOS LEER ABRIENDO LA TAPA.
-Si no hay halo se considera resistente
- Si el halo esta por debajo de lo esperado y después de haber tomado todas las precauciones en
la realización se considera resistente.
En caso de tener doble halo de inhibición hace la lectura en el halo mas claro
el que esta remarcado
Si el borde no es regular y se ve acerrada o afelpada medir la
zona mas cercana al disco
En bacterias que producen hemolisis no
medir la zona de hemolisis
Comparar los resultados con las tablas
actualizadas de la CLSI
Practica de lectura de antibiograma
• Se obtuvo los siguientes halos se inhibición para el Staphylococcus aureus haga un reporte o
informe al medico verificando con las tablas de CLSI a que antibióticos es sensible y a cuales
es resistente ?

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