Instituto Tecnológico Nacional-INTECNA Granada

Trabajo Escrito de Pruebas Microbiológicas

Asunto: Exposición acerca del ciclo de Krebs

Integrantes:  Jostin Morraz
 Miguel Canizales
 Francisco Reyes
 Javier Arana

Especialidad: Lab. Y Anal Qco II TM

Fecha: 19-09-2018
 Ciclo de Krebs:
El ciclo de Krebs (conocido también como ciclo de los ácidos tricarboxílicos o ciclo
del ácido cítrico) es un ciclo metabólico de importancia fundamental en todas las
células que utilizan oxígeno durante el proceso de respiración celular. En estos
organismos aeróbicos, el ciclo de Krebs es el anillo de conjunción de las rutas
metabólicas responsables de la degradación y desasimilación de los carbohidratos,
las grasas y las proteínas en anhídrido carbónico y agua, con la formación de
energía
Proceso del ciclo de Krebs:
 El proceso comienza con la oxidación del piruvato, produciendo un acetil-
CoA y un CO2.
 El acetil-CoA reacciona con una molécula de oxalacetato (4 carbonos) para
formar citrato (6 carbonos), mediante una reacción de condensación.
 A través de una serie de reacciones el citrato se convierte de nuevo en
oxalacetato. El ciclo consume netamente 1 acetil-CoA y produce 2 CO2.
También consume 2 NAD+ y 1 FAD, produciendo 3 NADH y 3 H+ y 1 FADH+.
 El resultado de un ciclo es (por cada molécula de piruvato): 1 GTP, 3 NADH,
1 FADH2, 2CO2
 Cada molécula de glucosa produce (vía glucólisis) dos moléculas de piruvato,
que a su vez producen dos acetil-CoA, por lo que por cada molécula de
glucosa en el ciclo de Krebs se produce: 2 GTP, 6 NADH, 2 FADH2, 4CO2.

Importancia del Ciclo de Krebs:

Este ciclo es la ruta final de la oxidación del piruvato, ácidos grasos y cadenas de
carbono de los aminoácidos. Dicho ciclo se lleva a cabo en la mitocondria.

Etapas del ciclo de Krebs

 Reacción 1: Citrato sintasa (De oxalacetato a citrato):
La Citrato sintasa es una enzima del grupo de las Liasas, que cataliza la
condensación del Oxalacetato y la Acetil-CoA, para formar Citrato. Esta reacción se
considera la principal vía de entrada de Carbono al ciclo, pues la Acetil-CoA se
produce en grandes cantidades durante el catabolismon de Glucidos, Lípidos y
Aminoácidos, y su oxidación en el ciclo, produce la mayor parte de la energía
metabólica. Citrato Sintetasa, Citrato Oxalacetato Liasa, Citrogenasa y Enzima
Condensante, son nombres que a recibido esta enzima a través de los años, todos
hacen referencia a la formación del citrato, pero en la nomenclatura enzimática
moderna, ya no se aconseja su empleo. La enzima es grande y estable.
 Reacción 2: Aconitasa (De citrato a isocitrato):
Esta enzima, también conocida como Aconitato Hidratasa, cataliza la
transposición de un grupo OH del citrato, para convertirlo en Isocitrato. Pertenece
al grupo de las Liasas, porque se considera que la isomerización reversible, se
lleva a cabo a través de reacciones de deshidratación (eliminación) e hidratación
(adición) sucesivas,
a través del cis-Aconitato, que sería un intermediario unido a la enzima. Sin
embargo, evidencias espectroscópicas sugieren que el intermediario de la
reacción es un ión carbonio, capaz convertirse en Isocitrato, Citrato o cis-
Aconitato. A pesar de ello, en muchos textos se incluye el cis-Aconitato como
intermediario.
 Reacción 3: Isocitrato deshidrogenasa (De isocitrato a oxoglutarato):
La isocitrato deshidrogenasa mitocondrial es una enzima dependiente de la
presencia de NAD+ y de Mn2+ o Mg2+. Inicialmente, la enzima cataliza la
oxidación del isocitrato a oxalsuccinato, lo que genera una molécula de NADH a
partir de NAD+. Sucesivamente, la presencia de un ión bivalente, que forma un
complejo con los oxígenos del grupo carboxilo en posición alfa, aumenta la
electronegatividad de esa región molecular. Esto genera una reorganización de los
electrones en la molécula, con la consiguiente rotura de la unión entre el carbono
en posición gamma y el grupo carboxilo adyacente. De este modo se tiene una
descarboxilación, es decir, la salida de una molécula de CO2, que conduce a la
formación de a-cetoglutarato, caracterizado por dos carboxilos en las
extremidades y una cetona en posición alfa con respecto de uno de los dos grupos
carboxilo.
Es una Oxido-reductasa de especificidad absoluta, que cataliza la reacción de
descarboxilación oxidativa del 2R,3S-Isocitrato producido por la Aconitasa.

 Reacción 4: a-cetoglutarato deshidrogenasa (De oxoglutarato a Succinil-

CoA)
Después de la conversión del isocitrato en a-cetoglutarato se produce una segunda
reacción de descarboxilación oxidativa, que lleva a la formación de succinil CoA. La
descarboxilación oxidativa del a-chetoglutarato es muy parecida a la del piruvato,
otro a-cetoácido.
Ambas reacciones incluyen la descarboxilación de un a-cetoácido y la
consiguiente producción de una unión tioéster a alta energía con la coenzima A. Los
complejos que catalizan tales reacciones son parecidos entre ellos.
La a-cetoglutarato deshidrogenasa (o, más correctamente, oxoglutarato
deshidrogenasa), está compuesta de tres enzimas diferentes:
 Subunidad E1: las dos cetoglutarato deshidrogenasas.
 Subunidad E2: la transuccinilasa.
 (La subunidad E1 y E2 presentan una gran homología con las de la piruvato
deshidrogenasa.)
 Subunidad E3: la dihidrolipoamida deshidrogenasa, que es el mismo polipéptido
presente en el otro complejo enzimático.
 Reacción 5: Succinil-CoA sintetasa (De Succinil-CoA a succinato)
El succinil-CoA es un tioéster a alta energía (su ?G°' de hidrólisis está en unos -33.5
kJ mol-1, parecido al del ATP que es de -30.5 kJ mol-1). La citrato sintasa se sirve
de un intermediario con tal unión a alta energía para llevar a cabo la fusión entre
una molécula con dos átomos de carbono (acetil-CoA) y una con cuatro
(oxalacetato). La enzima succinil-CoA sintetasa se sirve de tal energía para fosforilar
un nucleósido difosfato purinico como el GDP.
La energía procedente del tioéster viene convertida en energía ligada a una unión
fosfato. El primer paso de la reacción genera un nuevo intermediario a alta energía,
conocido como succinil fosfato. Sucesivamente, una histidina presente en el sitio
catalítico remueve el fosfato de la molécula glucídica, generando
el producto succinato y una molécula de fosfohistidina, que dona velozmente el
fosfato a un nucleósido difosfato, recargándolo a trifosfato. Se trata del único paso
del ciclo de Krebs en el que se produce una fosforilación a nivel de sustrato.
El GTP está implicado principalmente en las rutas de transducción de señales, pero
su papel en un proceso energético como el ciclo de Krebs es, en cambio,
esencialmente trasladar grupos fosfato hacia el ATP, en una reacción catalizada por
la enzima nucleósido difosfoquinasa.
 Reacción 6: Succinato deshidrogenasa (De succinato a fumarato)
La parte final del ciclo consiste en la reorganización de moléculas a cuatro átomos
de carbono hasta la regeneración del oxalacetato. Para que eso sea posible, el
grupo metilo presente en el succinato tiene que convertirse en un carbonilo. Como
ocurre en otras rutas, por ejemplo en la beta oxidación de los ácidos grasos, tal
conversión ocurre mediante tres pasos: una primera oxidación, una hidratación y
una segunda oxidación. Estos tres pasos, además de regenerar oxalacetato,
permiten la extracción ulterior de energía mediante la formación de FADH2 y NADH.
La primera reacción de oxidación es catalizada por el complejo enzimático de la
succinato deshidrogenasa, la única enzima del ciclo que tiene como aceptor
de hidrógeno al FAD en vez de al NAD+. El FAD es enlazado de modo covalente a
la enzima por un residuo de histidina. La enzima se vale del FAD ya que la energía
asociada a la reacción no es suficiente para reducir el NAD+.
El complejo enzimático también es el único del ciclo que pasa dentro de la
membrana mitocondrial. Tal posición se debe a la implicación de la enzima en la
cadena de transporte de los electrones. Los electrones pasados sobre el FAD se
introducen directamente en la cadena gracias a la unión estable entre la enzima y
el cofactor mismo.
 Reacción 7: Fumarasa (De fumarato a L-malato)
La fumarasa cataliza la adición en trans de un protón y un grupo OH- procedentes
de una molécula de agua. La hidratación del fumarato produce L-malato.
 Reacción 8: Malato deshidrogenasa (De L-malato a oxalacetato)
La última reacción del ciclo de Krebs consiste en la oxidación del malato a
oxalacetato. La reacción, catalizada por la malato deshidrogenasa, utiliza otra
molécula de NAD+ como aceptor de hidrógeno, produciendo NADH.
Funciones Anabólicas del Ciclo del Ácido Cítrico:
Además de participación en el catabolismo, el Ciclo de Krebs también participa en
el anabolismo ya que varios de sus intermediarios sirven como precursores para la
síntesis de todo tipo de moléculas.
El Citrato, cuando se acumula en la mitocondria, sale al citoplasma donde se
rompe liberando Acetil-CoA para la síntesis de Ácido Grasos. También en el
citoplasma actúa como modulador de la Glicólisis.
El Cetoglutarato es precursor para la síntesis de Glutamato y Glutamina.

La Succinil-CoA es la materia prima para la síntesis del grupo Hemo de las

hemoproteínas.

El Oxalacetato es precursor para la síntesis de Glucosa en el citoplasma y también

para la síntesis de Aspartato y Asparagina, Por esta razón con frecuencia es el
reactivo limitante del Ciclo del
Ácido Cítrico.

Otras Funciones Catabólicas del Ciclo del Ácido Cítrico:

Además de la oxidación de Acetil-CoA del catabolismo de Glúcidos y Lípidos, el

ciclo también oxida esqueletos de carbono provenientes del catabolismo de
Aminoácidos y de la degradación de las bases Pirimídicas de los ácidos nucleicos.
Los esqueletos de carbono de los aminoácidos se incorporan al ciclo del ácido
cítrico en forma de varios intermediarios.
-Cetoglutarato. Así se incorporan Glutamato, Glutamina, Arginina, Prolina e Histidina.
Succinil-CoA. Es la entrada del carbono de Valina, Metionina, Treonina y parte de
Isoleucina, Fenilalanina y Tirosina. También es el punto de entrada de los carbonos del
esqueleto de Timina.
Fumarato. Una parte del esqueleto de Fenilalanina y Tirosina entran al ciclo en este
punto.
Oxalacetato. Esta es la forma de incorporación del Aspartato y la Aspargina.
Piruvato. Los aminoácidos Alanina, Glicina, Serina, Cisteina y Triptofano producen
Piruvato
puede entrar al ciclo.
Acetoacetil-CoA o Acetil-CoA. Lisina y Leucina, junto con algunos carbonos
provenientes de la degradación de Isoleucina, Fenilalanina, Tirosina y Triptofano entran así
al ciclo, lo mismo que los carbonos de Uracilo y Citosina.
Anexos:
Reacciones: