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Bioquímica Grupo C, Departamento de Ciencias Agrarias, Universidad de Pamplona. Programa de Ingeniería Agronómica

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EXTRACCIÓN DE ADN

JHON CARLOS GARCIA MARCIALES (1094277060) JOSE LUIS BERMEO BARRETO


(1094282672) ROLDAN PERICO VALERO (1007469716)
bioquímica Grupo C, Departamento de Ciencias Agrarias, Universidad de Pamplona. Programa de
ingeniería agronómica.

RESUMEN
En el siguiente informe se realizó con el fin de extraer el ADN de frutas y verduras mediante procesos
químicos, donde se prepara una solución de lisis seguidamente se toma la fruta y se macera en la
solución de lisis seguidamente se le agrega etanol frio y allí se puede observar la estructura de los
ácidos nucleicos.
PALABRAS CLAVEZ
ácidos nucleicos, extracción, solución de lisis
INTRODUCCION
La siguiente práctica sobre extracción de ácidos nucleicos vegetales, permite ver las dos clases de
ácidos, desoxirribonucleico (ADN) y ribonucleico (ARN), las cuales son macromoléculas que almacenan
y transfieren información genética. El ADN es la molécula de la herencia en todas las formas de vida
celular, su función principal es dirigir su propia replicación durante la división celular y la transcripción
de moléculas de ARN complementarias. El ARN se encarga de dirigir las síntesis ribosómicas de
proteínas mediante el proceso de traducción del ARN mensajero obteniendo las secuencias del ADN.
Igualmente, los ácidos nucleicos se caracterizan por ser moléculas polares que permiten obtener
solubilidad en medio acuoso; en el caso de las proteínas, estas van a ser solubles en agua, con la
desnaturalización expondrá a grupos no polares disminuyendo solubilidad en agua permitiendo
solubilizar líquidos en solventes no polares, extraer soluciones acuosas y precipitar proteínas. Se
utilizarán reactivos y muestras como agua destilada, etanol, cloruro de sodio (NaCL) y muestras para la
extracción del ADN como trozos de cebolla, banano, tomate, fresa, cilantro y jugo de piña, permitiendo
realizar la extracción de ácidos por medio de la preparación en solución de lisis del tratamiento de la
muestra y precipitaciones del ADN.
ESTRUCTURA DE ADN

https://www.todamateria.com/adn/

1
METODOS
Preparación de la solución de lisis:
- Se toma un vaso de precipitado de 250ml
- Se le agregan 180 ml de agua destilada y 20ml de jabón de manos
- Se mezclan
- Se agrega 20 gramos de NaCl
- Se agita con una barrila de vidrio asta homogenizar la muestra

Figura 1. Solución de lisis


Preparación de la muestra:
- Se toma el banano y 10ml de solución de lisis y se maceran en un mortero
- Se agrega la mezcla ya macerada a una bolsa Ziploc, se agita
- Se filtra la muestra en un vaso de precipitado y se agregan 3 gotas de jugo de piña
- Se miden 10ml del extracto filtrado con una pipeta graduada y se depositan en una probeta de
50ml
- Se le agregan 10ml de etanol frio y se dejan pasar unos minutos

Figura 2. Muestra de banano


Muestra en caja de Petri:
- Se miden 3ml del extracto filtrado de banano y se agrega a una caja de Petri
- Se agregan 3ml de etanol frio y se deja por unos minutos

2
Figura 3. Muestra de banano en caja de Petri Figura 6. Muestra de ADN de
fresa

Figura 4. Muestra de ADN de cilantro figura 7. Muestra de ADN de


hígado

Figura 5. Muestra de ADN de cebolla

3
ANALISIS DE RESULTADOS

Figura1: pasos de la obtención de la solución de lisis


Se toma cierta cantidad de agua y se le agregan jabón de cocina. Los orgánulos que contiene el ADN
están rodeos por una membrana cubierta de lípidos y el detergente nos ayuda a romper estas
membranas. se agra sal de cocina esta nos ayuda a neutralizar las cargas negativas de los grupos
fosfato del ADN. (1)
Se macera en banano junto a un a un poco de solución de lisis en un mortero con el fin de romper las
células del banano lo que hace que se liberan los orgánulos contenidos en el citoplasma en ADN va a
estar contenido en el núcleo seguidamente se filtra la muestra para que no pasen residuos de mayor
tamaño a muestro filtrado. (1)
Se le agregan unas cuantas gotas de zumo de piña contiene bromelaína enzima capas de hidrolizar las
proteínas y capaz de separar el ADN de las histonas este proceso ayuda a que el ADN se desempaque
y sea más fácil su extracción. (2)
se obtiene la solución de lisis o tapón de lisis casero que nos servirá para romper las barreras de lípidos
y así liberar el ADN o ácidos nucleicos a la solución. En esta solución el objetivo es romper las
membranas y poder extraer el ADN de ellos.
Figura2-3: ya obtenidos nuestro estrato filtrado se toman y se le agrega etanol(C2H5OH) se agita y se
observa cómo se forma un precipitado en nuestra solución que sería nuestro ADN que una no es pura.
Estas relaciones se realizan en muy corto tiempo ya que los métodos caseros son muy efectivos en la
extracción de ácidos nucleicos.
Figura 4-7: en estas figuras se toman las muestras de los demás grupos de laboratorio donde se puede
decir que se usó el mismo procedimiento en la extracción de ácidos nucleicos y en la obtención de
dicho resultado baria según el tipo demuestra y formas de estructura de ADN. Donde en cada una de
las muestras se observa dichas estructuras que corresponde a nuestro ADN.

CONCLUCIONES
 Pudimos concluir que el ADN se puede extraer de cualquier tipo de célula o ser vivo.
 Se pudo observar aquello que no podemos ver a simple vista ya que son fragmentos muy
pequeños.
 La extracción del a de ADN pasa por una serie de etapas que sufre la célula.

BIBLIOGRAFIA
1. http://www.revistas.unam.mx/index.php/req/article/view/65732
2. http://genetica.uab.cat/base/documents/genetica_gen/Laura%20Mart%C3%ADnez%20Mart%C3
%ADn2015_4_19P21_19.pdf
4
3. https://www.youtube.com/redirect?q=http%3A%2F%2Fakademeia.ufm.edu%2Fdev%2F%3Fcurs
o%3Dintroduccion-a-la-
biologia%26guest%3Dwelcome&v=a8d8ZNSX880&event=video_description&redir_token=qKud
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4.

ANEXOS
¿Qué hace la lisis en la extracción del ADN?
separa las proteínas del ADN, una vez suspendido la fase acuosa aislado por precipitación con etanol.
¿Cuál es la función del detergente presente en la solución de lisis?
Romper las membranas cubiertas por lípidos y liberar el ADN al medio. (1)
¿En qué etapa del experimento se separa el ADN de las proteínas?
En la purificación del ADN
¿Cómo podrías purificar el ADN del ARN?
Se hace eliminando proteínas o lípidos de membrana
La purificación se hace agregando solventes orgánicos con el fenol luego se centrifuga que permite la
formación de dos etapas una acuosa es la que contiene el ADN por lo tanto se trasvasa a otro tubo
estéril y la etapa que es orgánica que contiene proteínas. En el nuevo tubo donde se encuentra en ADN
se agrega cloroformo en este paso son eliminados residuos lipídicos que pueden estar presentes en la
muestra y luego se pasa el ADN a otro tubo estéril y se procede a precipitarse se lleva a cabo
agregando etanol absoluto a la fase acuosa de ADN recuperada se centrifuga para remover el sobre
nadante y se descarta y nos queda el botón de ADN y se lava con etanol al 70% con el objetivo de
remover todas las sales que puedan estar aún presentes se centrifuga y se deja secar el etanol a
temperatura ambiente luego que el etanol se allá evaporado el ADN se puede re suspenderse en agua
para su uso.(3)
¿Cómo podrías confirmar que el precipitado blanco es ADN?
cuando al realizar el procedimiento las fibrillas de ADN comienzan a salir de un color blanco precipitado
sobre el alcohol por medio de una mezcla homogénea.

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