Bio_54 2018

Enzimas

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Energía de activación

Energía necesaria para

que se lleve a cabo una
reacción química

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SITIO
ACTIVO SUSTRATOS

ENZIMA

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Sitio activo 2018

• Agrupación de determinados aminoácidos,

distribuidos espacialmente de manera precisa
• En el sitio activo participan los radicales de aá a
veces distantes, que convergen en una zona
específica de la proteína
• El sustrato interacciona con los aá del sitio
activo por enlaces no covalentes de tipo
pte.hidrógeno, pte. salino, interacciones
hidrofóbicas y fzas de van der waals

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¿Cómo funciona una enzima?

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+ +

sustratos enzima complejo

enzima-sustrato

enzima producto
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complejo
enzima-
enzima sustrato

E+S [ES] E+P

sustrato producto

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ENERGÍA DE
ACTIVACIÓN SIN
CATALIZADOR

ENERGÍA DE
ACTIVACIÓN CON
CATALIZADOR

REACTIVOS
ENERGÍA

PRODUCTOS
CURSO DE LA REACCIÓN
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Enzima
• Establece una asociación con los sustratos

• Baja la energía de activación

• Acelera la velocidad de la reacción 

CATALIZADOR BIOLÓGICO

• Los catalizadores biológicos son las enzimas de

naturaleza proteica y las RIBOZIMAS o ARN

catalíticos.
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Reacción de hidrólisis

ENZIMA SUSTRATO

COMPLEJO ENZIMA
PRODUCTO SUSTRATO
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Características de las enzimas 2018

• Proteinas globulares de estructura 3° ó 4°

• Específicas
• Saturables
• Inalterables  reutilizables
• Eficientes en pequeñas concentraciones
• Sensibles a la temperatura y el ph
• Regulables

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 Modelo de encaje llave-cerradura
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Modelo de Fischer

Modelo de encaje inducido

Modelo de Koshland
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Clasificación de enzimas

Simples

Apoenzima
Porción
proteica Coenzima
Enzimas
(NAD-FAD)

Cofactor
(unión no
Conjugadas covalente)

Ión

Porción NO
proteica Grupo
prostético
(unión
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covalente)
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Nomenclatura de las enzimas
• Nombre del sustrato que modifican + sufijo
“asa”:
lipasa, proteasa, sacarasa, etc.

• Nombre de la actividad que ejercen +

sufijo “asa”:
hidrolasas, deshidrogenasas, ligasas,
polimerasas, quinasas, isomerasas, etc.

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Determinación de la actividad enzimática

La actividad de una enzima puede

determinarse midiendo la cantidad de
producto formado, o de sustrato
consumido, en un tiempo dado.

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 Factores determinantes de la
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actividad enzimática

• Concentración de enzima

• Concentración de sustrato

• Temperatura

• pH

• Inhibidores

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Concentración de enzima

VELOCIDAD DE LA REACCIÓN

CONCENTRACIÓN ENZIMA
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Bio_54 Concentración de sustrato 2018

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Bio_54 Concentracion de sustrato 2018

Vmax

Vmax/2

Km concentración de sustrato
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Km: constante de MICHAELIS-MENTEN
• La Km corresponde a la concentración de
sustrato con la cual la velocidad de reacción
alcanza un valor igual a la mitad de la velocidad
máxima.

• Indica indirectamente, el grado de afinidad de la

enzima con el sustrato: a mayor Km menor
afinidad y viceversa.

• En condiciones definidas de temperatura y pH, la

Km tiene un valor fijo para cada enzima y sirve
para caracterizarla.
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 Bio_54
Temperatura y pH 2018

Al disminuir la Al aumentar la Al modificar el pH se

temperatura disminuye el temperatura se desnaturaliza la enzima
choque molecular desnaturaliza la enzima

Temperatura óptima pH óptimo

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inhibidores
enzimáticos

irreversibles reversibles

no
competitivos
competitivos

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 Bio_54 2018
Inhibidores irreversibles

• Alteran permanentemente a la enzima

• Provocan pérdida de la actividad enzimática

. Penicilina: inhibidor de la enzima

transpeptidasa ( pared bacteriana)

. Venenos organofosforados (insecticidas):

inhibidor de la enzima colinesterasa (sistema
nervioso)
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Inhibidores reversibles

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 Bio_54 2018
Inhibidor competitivo
SUSTRATO INHIBIDOR

ENZIMA ENZIMA

ÁCIDO p AMINOBENZOICO
SULFAMIDA
(precursor del ác. Fólico)
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Inhibidor competitivo

el inhibidor se fija al sitio activo de

la enzima impidiendo la fijación
del sustrato

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Bio_54 2018

E ES E+P
I
Inhibición
Competitiva

NO PRODUCTIVO
EI

Las fijaciones de sustrato e inhibidor son

mutuamente excluyentes;
el complejo EI no es productivo
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con inhibidor:
no se modifica la Vmáx.
aumenta el Km: disminuye la afinidad de E por S
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Inhibidor no competitivo
SUSTRATO INHIBIDOR

SE MODIFICA
EL SITIO
ACTIVO

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Inhibidor no competitivo

el inhibidor no impide la fijación

del sustrato, pero si impide la
catálisis

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 Bio_54 2018

S
E ES E+P
I I
Inhibición
S No Competitiva

EI ESI
NO PRODUCTIVOS

El inhibidor se fija indistintamente a la enzima libre E

y al complejo enzima-sustrato ES; ni el complejo EI
ni el complejo ESI son productivos
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 Cu 2+ / Hg2+ se unen a SH de la cisteína 2018
Bio_54

con inhibidor:
cae la Vmáx.
no se modifica el Km
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Bio_54 2018
Vía metabólica: Complejos
multienzimáticos

A B C Y Z
metabolitos
intermediarios

precursor producto final

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A Sustrato inicial X
E1
E1
V
B Í A B
A
E2 E2
L E5
I VÍA CÍCLICA
C N
C
E3
E
A Y
L

Y E4
E3

E4 D
Z Producto final Z
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Regulación de la actividad enzimática

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 Bio_54 2018
Control genético o regulación de la síntesis

Implica un cambio en el número total de

moléculas enzimáticas:

- inducción o activación de la síntesis de

enzimas

- represión de la síntesis de enzimas

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Bio_54 2018
Regulación de la actividad catalítica

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 Bio_54 Regulación de la catálisis 2018

implica cambio en la actividad enzimática SIN

variación en el número de moléculas de enzima

-inhibición por producto final

-regulación alostérica
-regulación por modificación covalente reversible
-regulación covalente irreversible
-compartimentalización
-regulación de la vida media de una enzima
-isoenzimas
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Inhibición por producto final

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Bio_54 2018
Enzimas alostéricas
Sitio activo

Sitio alostérico

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 Bio_54 2018
Conformación de alta Conformación de baja
afinidad con el sustrato afinidad con el sustrato

Sustrato
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Modulador Modulador
positivo negativo

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 Bio_54
Efecto cooperativo 2018

Cuando un modulador se une a una subunidad, se produce un

cambio conformacional que se transmite a las otras subunidades
y modifica la aptitud del sitio activo para recibir al sustrato.

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Bio_54 2018
Curva de saturación

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Curva
Bio_54 de saturación enzimas Michaeliana
2018

Vs. enzima alostérica

Hiperbólica Sigmoidal

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CONCENTRACIÓN DE SUSTRATO
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Enzimas alostéricas

• Proteínas cuaternarias u oligoméricas

• En cada subunidad existe un sitio activo y

uno alostérico

• Entre subunidades se genera un efecto

cooperativo

• En el sitio activo acopla el sustrato

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 Bio_54 2018
• En el sitio alostérico acopla el modulador o
efector alostérico:

. Positivo  si aumenta la afinidad de la

enzima por el sustrato

. Negativo  si disminuye la afinidad de la

enzima por el sustrato

• Curva de saturación sigmoide

• Catalizan pasosProf.cruciales
Andrea Lassalledel metabolismo
Bio_54 2018

Regulación por modificación

covalente

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Bio_54 2018

Enzimas convertidoras
fosforilación quinasa
desfosforilación fosfatasa

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 Bio_54
zimógenos o proenzimas 2018
(regulación covalente irreversible)
• precursores inactivos de ciertas enzimas
• en general se activan por hidrólisis
• son proenzimas algunos componentes de los jugos
digestivos (ej: tripsinógeno) y del plasma (proceso de
coagulación)

HIDRÓLISIS

ESPECÍFICA

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Bio_54
Compartimentalización 2018

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 Regulación de la vida media de una
Bio_54 2018

proteína
PROTEASOMA
UBIQUITINA

PROTEÍNA PROTEÍNA UBIQUITINIZADA

OLIGOPÉPTIDOS

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Isoenzimas
• enzimas diferentes que
catalizan la misma reacción LDH

• se diferencian isoenzimas
en función del tipo de tejido
• la LDH pasa a la sangre
ante toda destrucción de los
tejidos (traumática,
infecciosa o neoplásica),
por lo que su elevación en
el suero es un signo de que
un órgano o tejido ha sido
lesionado.
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Bio_54 2018

¿Qué contenidos
mínimos debo saber?

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 Bio_54 2018
1. ¿Qué es una enzima? Menciona y explica tres propiedades
de las enzimas.
2. ¿En qué se diferencian las enzimas de las ribozimas?
3. Describe el mecanismo de acción de una enzima.
4. ¿A qué se llama Km de una enzima?
5. ¿Qué factores afectan la cinética enzimática?¿Cómo actúa
cada uno?
6. ¿En qué se diferencian las enzimas alostéricas de las
michaelianas?
7. ¿Qué sucede con el número de las moléculas de enzima
disponibles si la regulación es a nivel genético?¿y si es a
nivel catalítico?
8. Define los siguientes términos: isoenzima, zimógeno, efector
alostérico, sitio activo, inhibidor competitivo.
9. ¿En qué consiste la inhibición por producto final?
Prof. Andrea Lassalle
 Bio_54 2018
10. ¿Qué efectos puede producir en la catálisis, la fosforilación
de una enzima?
11. Cómo puedes explicar la siguiente observación:
“cae la velocidad máxima de la reacción sin afectar la Km
de la enzima”
12. ¿Cuál de las curvas indica la acción de un efector alostérico
positivo, la “a” ó la “b”?

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Bio_54 2018

Practicando para el parcial

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1-Las enzimas:
Bio_54
4- En las holoenzimas, la 2018
parte
a- Modifican la energía de los proteica se denomina:
sustratos y los productos a-Apoenzima
b- Aumenta la energía de activación b-Coenzima
acelerando la reacción c- Grupo prostético
c- Disminuye la energía de activación d- Cofactor
retrasando la reacción 5-Si una enzima se inactiva por
d- Disminuye la energía de activación fosforilación, el mecanismo de
acelerando la reacción química regulación que actúa es:
2-Las enzimas son sensibles a los a- Modificación covalente irreversible
cambios de: b- Alosterismo
a- pH c- Inducción genética
b- Temperatura d- Modificación covalente reversible
c- Concentración de sustrato
d- Todas son correctas 6-Si una enzima que tiene una
Km = 10-2 M se coloca en presencia
3-Las enzimas que presentan un
de un inhibidor competitivo, la Km:
sitio diferente del sitio activo se
a- aumenta
denominan:
b- disminuye
a- Simples
c- se mantiene igual
b- Conjugadas
d- ninguna es correcta
c- Alostéricas Prof. Andrea Lassalle
d- Ribozimas