OBJETIVO GENERAL

Utilizar técnicas sencillas para extraer el ADN del tomate y naranja observando su estructura y
cómo estas técnicas ocasionan cambios en las células haciendo que se pueda llevar a cabo este
proceso que es de gran importancia para el estudio del ADN.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

 Extraer el ADN del tomate y naranja.

 Observar el ADN extraído

INTRODUCCIÓN.

La extracción de ADN se ha realizado de manera casera, es decir, se han utilizado objetos que
fácilmente se podrían encontrar por casa o en la universidad. Obviamente en un laboratorio
científico profesional este experimento se podría llevar a cabo más efectivamente. (molecular,
2011)

No se ha pretendido explorar todos los aspectos a fondo, sino que se ha intentado abarcar todos de
una forma eficaz. Así pues, se ha demostrado que se puede realizar una extracción casera de ADN
de una manera simple y apta para todos los estudiamtes. (Malajovich, 2015)

El ADN genómico se obtiene con gran facilidad a partir de cualquier célula o tejido de un ser vivo.
En este experimento vamos a ver como se extrae de forma sencilla con un procedimiento que
podemos realizar en casa. (molecular, 2011)

La extracción de ADN casero de un trozo de una fruta pulposa. Este trabajo se hace con el fin de
reconocer y aprender a extraer ADN no solo del cuerpo humano sino también de frutas o vegetales
entre otras sustancias, este trabajo nos puede ayudar en el futuro ya que esto nos deja una enseñanza
de las diferentes maneras de extraer el ADN de un producto, alimento, etc… (Malajovich, 2015)

Este experimento está basado es una extracción de ADN real con instrumentos sofisticados propios
de un laboratorio científico profesional. El experimento de laboratorio para extraer ADN lleva una
materia técnica a la práctica y puede inspirar a los alumnos que se interesen en la biotecnología y
genética. En la practica que se realiso se reforzaro las clases teóricas que hemos tenido sobre las
células, el ADN y la biología molecular. (Malajovich, 2015)
MARCO TEORICO.

Se deberá colocar la fruta en una bolsa de plástico y cerrarla. Triturar la fruta con las manos. Es
importante que el tejido carnoso de la fruta quede completamente disgregado. Este paso se conoce
como homogenización de tejidos y en los laboratorios usualmente se realiza con nitrógeno líquido
y en un mortero de porcelana. Abrir la bolsa y agregar un par de gotas de lavatrastes líquido a la
fruta triturada. (Malajovich, 2015)

Cerrar la bolsa y homogenizar otra vez durante un par de minutos. Los detergentes son muy buenos
para eliminar grasas. En este caso, esas grasas son los lípidos que componen a las membranas
celulares y de los diferentes orgánulos: el cloroplasto, la mitocondria, el aparato de Golgi y el
retículo endoplasmático, así como el núcleo. Este paso nos permite lisar a las células, es decir,
romperlas para liberar su contenido: proteínas, ácidos nucleicos y diferentes metabolitos.
(molecular, 2011)

Filtrar sobre el vaso de cristal el extracto de frutas con ayuda de un filtro o papel toalla. También
se puede utilizar un colador o escurridor de verduras. Procurar que el tamaño de los agujeritos del
colador o el escurridor sean lo suficientemente pequeños para que sólo obtengamos el jugo de la
fruta. Agregar una pizca de Bicarbonato. Al lisar a las células se libera una gran cantidad de
proteínas, algunas de estas proteínas tienen como función degradar al ADN de patógenos como son
las bacterias y los virus. (Malajovich, 2015)

Si no detenemos a estas proteínas (conocidas como nucleasas) nuestro ADN será degradado. Para
evitarlo tendremos que agregar la Bicarbonato, el cual contiene proteasas, es decir, proteínas
especializadas en la degradación de otras proteínas. (molecular, 2011)

Cada hebra de ADN está cargada de manera negativa y como sabemos, las cargas de mismo signo
se repelen. Para minimizar esta repulsión electrostática agregaremos una pizca de sal. La sal está
compuesta de átomos con carga positiva (el sodio) y negativa (el cloro). Los iones positivos serán
atraídos por las cargas negativas del ADN y “apantallaran” a estas cargas, como resultado, la
repulsión entre las hebras de ADN disminuirá. Inclinar el vaso de cristal y agregar muy lentamente
el alcohol al jugo de frutas. Habrá que hacerlo muy cuidadosamente y procurando que el alcohol
resbale por la pared del vaso. (Malajovich, 2015)

El objetivo aquí es crear dos fases: en la parte inferior tendremos una fase del color de nuestra
fruta, y en la parte superior una fase transparente (alcohol). (molecular, 2011)
El ADN es soluble en agua, pero se precipita en soluciones no polares. El alcohol y la sal nos
ayudarán a sacar al ADN del jugo de las frutas. Es importante no mezclar las fases. Observa con
detenimiento qué sucede en la frontera entre las dos fases, es decir, en la interfase. Si nuestra
homogenización de tejidos y el lisado de las células fueron eficientes, observaremos unos hilillos
blancos en la fase transparente. (Malajovich, 2015)

Después de unos minutos se podrá observar que los hilillos se convierten en aglomerados blancos
de consistencia viscosa. Esa sustancia está compuesta por los ácidos nucleicos que estaban
contenidos en el interior de las células de la fruta. Utilizar un agitador, palito de madera, varilla de
cristal o cuchara para agitar suavemente y en círculos al alcohol, procura no mezclar las fases.
(molecular, 2011)

La agitación circular nos permitirá concentrar a nuestra sustancia de ADN en el centro del vaso.
Una vez que esté en el centro, intenta sacarlo del alcohol. Ya tenemos nuestro ADN listo para
trabajar con él. (Malajovich, 2015)

1. La extracción de ADN requiere una serie de etapas básicas: En primer lugar tiene que
romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la
célula. A continuación debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el
ADN. Los jabones utilizados como lavavajillas emulsionan los lípidos de las membranas
celulares y las rompen.
2. La sal evita la unión de las proteínas al ADN.
3. Para aislar el ADN hay que hacer que precipite en alcohol. El ADN es soluble en agua, pero
cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interfase entre el alcohol y el
agua. Además de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes
celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa.
MATERIALES.

 Material vegetal
 Licuadora
 Filtro
 Vasos de precipitado
 Agua mineral
 Sal
 Bicarbonato
 Detergente
 Alcohol (96%)

PREPARACIÓN

1. Licuar el tomate bien troceado, añadiendo agua mineral. (Fase mecánica)

2. Filtrar la mezcla
3. En un recipiente aparte preparamos ¼ de litro de agua mineral, una cucharada de sal, 6
cucharadas de bicarbonato sódico y dos cucharadas de detergente. (Tampón de lisis)
4. Agitamos por dos minutos
5. Mezclamos 50 ml de la mezcla inicial con 100 ml del tampón de lisis.
6. Agitamos por dos minutos
7. Filtramos la mezcla
8. Fase de precipitación. Añadimos 10 ml de la mezcla y añadimos 20 ml de alcohol poco
a poco.
9. Recogemos el ADN con pipetas pasteur
CONCLUSIONES

 Al agregar sal a la mezcla esta permite que las moléculas de ADN se junten y se observen
en forma de grupos, y cuando se añadió detergente liquido a las mezcla, este se encargo de
romper la membrana plasmática de la célula y permitió que el ADN pudiera salir.
 El sumo de limón contiene enzimas necesarias que terminan de romper la membrana
plasmática de la célula y finalmente liberar el AND y al agregar alcohol a la mezcla se logro
que las cadenas de ADN subieran a la superficie, ya que este no es soluble en alcohol. Las
moléculas de ADN pudieron ser percibidas, observándose como pelusas rojas en el alcohol.

RECOMENDACIONES

 Por lo dicho hasta aquí el procedimiento se recomienda que si las fibrillas de ADN
comenzaron a expandirse, y concluyentemente han salido de un color blanco precipitado
sobre el alcohol componiendo una mezcla heterogénea. Resta por obtener y sacar del tubo
de ensayo el ADN.
 En caso de que el ADN de la muestra vegetal no se pueda apreciar muy claramente, tenemos
que agitar el tubo un poco para poder apreciarlo mejor. Con esto podemos saber cómo es el
procedimiento del extracto del ADN, así como su estructura de una forma fácil y sencilla.

BIBLIOGRAFIA

Malajovich, M. A. (16 de 2 de 2015). Biotecnología:. Obtenido de

https://bteduc.com/guias_es/68_Extraccion_de_ADN_(experimento_ambiguo).pdf

molecular, G. y. (23 de 6 de 2011). Genetica y biologia molecular. Obtenido de

https://es.slideshare.net/yulibeth07/extraccin-de-adn-en-el-tomate
ANEXOS

Materiales para la realizacion de la practica.

Tubos de ensayo. Vasos de precipitados. Vasos de precipitados con

el triturado de tomate y
naranja.

alcohol 70 Gl. Detergente y bicarbonato Jabon liquido

Procederemos a preparar las diluciones que emplearemos para observar material que
buscamos, la extraccion de ADN