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Resumen Experimento de Meselson y Stahl

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Replicación semiconservativa:

Experimento de Meselson y Stahl (1958)

Después de que el modelo Watson y Crick de la doble hélice fue propuesto


comenzaron a surgir nuevos cuestionamientos acerca del DNA y el como se réplica,
nuevas teorías se hicieron presentes, sin embargo aún no se tenía en claro cuál era el
correcto.

Algunos de los modelos que se usaron para explicar la replicación fueron:


Conservativo, que decía que la cadena de ADN servía como un molde para producir
una nueva cadena. Después de la replicación, teníamos nuevamente la cadena original
y una nueva copia; Semiconservativo, en esta se explicaba que cada hebra del ADN
servía como molde para generar una nueva. Después de la replicación, teníamos dos
cadenas de ADN con una hebra original y una copia; y el Dispersivo, dónde la cadena
se fragmentara, se replicara y con los retazos formar dos cadenas nuevas.

Fue donde ahí cuando el experimento de Meselson y Stahl pudo dar una respuesta
definitiva. El objetivo de este experimento era descubrir cuál de las teorías
anteriormente mencionadas era realmente la verdadera. El principio en el que se basa
el experimento es en la abundancia natural de los átomos, es decir los isótopos.Para el
experimento decidieron utilizar a la bacteria E. Coli porque se ha estudiado
extensamente y conocían muy bien sus ciclos de replicación y reproducción. También
utilizaron el isotopo del nitrógeno N15. El nitrógeno es uno de los elementos
fundamentales del DNA y mientras que este isotopo no es radioactivo, es más pesado.
En primer lugar, extrajeron el DNA de bacterias criadas en un medio normal con tal de
obtener mediante una centrifugación con un gradiente de cloruro de cesio (CsCl) la
densidad del DNA de dicha bacteria. Después, dejaron crecer las bacterias en un
medio con N15 y volvieron a extraer el DNA y lo centrifugaron para obtener su
densidad, que lógicamente era mayor que la del DNA extraído de las bacterias en un
medio de N14 .

Seguidamente, dichas bacterias cultivadas con el isotopo pesado del nitrógeno fueron
cambiadas a un medio de N14 y se les dio el tiempo justo para que solo pudiesen
replicarse una única vez. Se volvió a extraer el DNA y se centrifugó. Esta vez, la banda
que apareció no se correspondía con ninguna de las anteriores mediciones, si no que
era un punto intermedio. Este hecho permitió descartar la teoría conservativa, ya que
según los supuestos de esta teoría se habrían obtenido dos bandas: una
correspondiente a la densidad del DNA materno (banda de N14) y otra que se
emparejaría con las bacterias cultivadas en un medio con N15 . Con tal de descartar
una de las dos últimas teorías restantes, se extrajo el DNA de bacterias que también
habían crecido durante varias generaciones en un medio de N15 pero que habían
tenido ocasión de replicarse dos veces en un medio con N14. Una vez que se
aseguraran que el ADN solo contiene N15, tomarían una muestra y separaría el DNA.
Al centrifugar este DNA se observaron dos bandas: una que se correspondía con la
medición de las bacterias que solo se habían replicado una vez y la otra que equivalía
al DNA creado únicamente a partir de N14. Este resultado fue definitivo, puesto que
siguiendo los principios de la teoría dispersa no debería haber aparecido una segunda
banda, puesto que todas las cadenas de DNA tendrían, en mayor o menor medida,
fragmentos del DNA original.

Fue así como los patrones que obtuvieron fueron el del modelo semiconservativo.
Gracias a este experimento se demostró que la teoría de replicación semiconservativa
del DNA propuesta por Watson y Crick era correcta.
- Meselson, M. and Stahl, F.W. (1958). «The Replication of DNA in Escherichia coli»

-Delbrück M (September 1954). "ON THE REPLICATION OF DESOXYRIBONUCLEIC


ACID (DNA)"

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