Prácticas de Disoluciones

Prácticas de disoluciones
Aprendices
Brayan Paucar
Marcela Parra
David Correa
Tecnología en control de calidad de los alimentos
Ficha 1905781
Instructora
Olga Beatriz Ladino Soto
Sena-CAB
Guadalajara de Buga
2020
Introducción
Este trabajo tiene como objetivo primordial el investigar acerca de las diluciones

que son un tema muy importante en la materia de microbiología; teniendo en
cuenta la norma NTC-4491-1 preparación de diluciones, de igual forma se vieron
las principales características de las diluciones y su concentración.
También cuenta con una introducción general del tema que habla un poco acerca
de lo básico que se debe de saber para poder adentrarse en el tema de las
diluciones, este habla acerca reconocimiento del laboratorio de microbiología,
equipos y materiales utilizados para análisis en esta rama, después se realizó el
procedimiento de preparación de diluciones.
Justificación
En esta práctica de laboratorio se diseñó y se realizó una dilución homogénea de

dos o más sustancias puras que no reaccionan entre sí, cuyos componentes se
encuentran en proporciones variables, esto de acuerdo a la aplicación de los
conocimientos obtenidos de la norma NTC-4491-1.
Posteriormente a la toma de la muestra y como parte del análisis, se hace una

dilución primaria cuya finalidad es lograr obtener una muestra representativa del
alimento, esto es un tanto en el aspecto cualitativo (diferentes tipos de
microorganismos) como en el cuantitativo, y así lograr una distribución lo más
uniforme posible, dentro de los contenidos en la muestra destinada para el
análisis.
Objetivo General
Preparar diluciones para muestras microbiológicas

Objetivos Específicos
Determinar los materiales y equipos para la preparación de diluciones
Determinar las cantidades de diluyente a preparar
Proceder al peso del polvo para el diluyente
Hacer la solución con el diluyente agua peptonada
Se esteriliza el diluyente con el material de vidrio
Se preparo la disolución con la muestra
Desarrollar habilidades y competencias en la valoración o estandarización de

análisis microbiano en productos lácteos.
Procedimiento y metodología
Preparación de la dilución:
1. Muestras líquidas no viscosas (leche) en las cuales la distribución de

microorganismos es homogénea o fácilmente homogeneizable por medios
mecánicos como la agitación.
2. Se determina los materiales y equipos a utilizar los cuales son: pipetas,
Erlenmeyer, balanza analítica, tubos de ensayo, Probetas graduadas y
autoclave.
3. Utilizando papel y cinta de enmarcascar se envuelven los materiales de vidrio
(pipetas, tubos de ensayo) y se introducen en la Autoclave durante 45 min
para su esterilización.
4. Después de los 45 min de la esterilización se retira cuidadosamente el papel
envuelto en el material de vidrio para iniciar con la disolución de 10-1.
5. En condiciones asépticas se disuelve cuantitativamente 9 ml de agua
peptonada en los tubos de ensayo con ayuda de las pipetas de 10 ml y se
marca cada tubo de ensayo con identificación para las muestras de la
disolución.
6. Se procede a diluir con 1 ml de muestra de leche, el cual debe encontrarse a

una temperatura similar a ésta, evitando el contacto entre la pipeta y el
diluyente.
7. Agitar la muestra manualmente en un arco de 30 cm., con 25 movimientos de
arriba abajo, efectuados en un tiempo de 7 segundos.
8. Una vez preparadas las diluciones “10-1", "10-2","10-3","10-4" y ""10-5" es
más fácil detectar que cantidad de microorganismos que podemos detectar en
la muestra de leche.
Resultado
Después de efectuar el análisis en cuestión microbiológica al aplicar el factor

de dilución en una muestra homogénea que sea considerada suficientemente
representativa; y por tratarse de diluciones decimales, el factor es el inverso
de la dilución. Es decir, que si los resultados estadísticamente confiables se
obtuvieron en la dilución 10-3, el factor de dilución es 103. Si se usó otra
proporción en las diluciones, el inverso de la proporción en que se diluyó será
el factor de dilución. Se reporta como se indica para cada grupo microbiano,
por gramo o mililitro de muestra, redondeando el número de microorganismos
a 2 cifras significativas y potencias de 10, y se especifica las condiciones de la
muestra analizada.
Conclusiones
Esta técnica es la primera etapa en el análisis de la mayoría de las prácticas

en las que se determina cuantitativamente algún microorganismo o grupo
microbiano; por lo tanto, con la determinación específica cuando se trabaja
con alimentos líquidos, fácilmente homogenizables, que pueden distribuirse
con pipetas de 1 o 10 mL, y con bajo contenido microbiano, los diluyentes más
utilizados son la solución amortiguadora de fosfatos, el agua peptonada y la
solución salina isotónica, pero pueden utilizarse otros diluyentes que cumplan
con las funciones de dispersar y homogenizar la carga microbiana y de facilitar
la recuperación de los microorganismos en estudio, mediante condiciones de
osmolaridad, pH, etc., adecuadas para ellos.
En estudios donde se busca la presencia o ausencia de una determinada

especie de microorganismos en 0.1 mL ó 0.1 g, se debe tener en cuenta que
no es necesario preparar diluciones mayores.
En este caso se prepararon diluciones que permitieron obtener resultados
dentro del rango de sensibilidad del método, por lo menos en una de cinco
diluciones; como el rango de sensibilidad del método generalmente va de n a
10n (de 15 a 150 ó de 25 a 250 colonias, por ejemplo), el obtener resultados
dentro del rango en 2 diluciones subsecuentes se considera evidencia de que
se ha logrado la distribución uniforme y se han controlado los factores de
variación, dando como resultado una forma fácil de verificar la carga
microbiana que cuenta la muestra.

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En esta práctica de laboratorio se diseñó y se realizó una dilución homogénea de

Posteriormente a la toma de la muestra y como parte del análisis, se hace una

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Determinar los materiales y equipos para la preparación de diluciones

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Se esteriliza el diluyente con el material de vidrio

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