UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLÁN

INGENIERÍA QUÍMICA
LABORATORIO QUIMICA ANALITICA III

INFORME 1 :
” ESPECTROFOTOMETRIA DE UV-VIS DE AZUL DE TIMOL”

EQUIPO 1

INTEGRANTES:

 Cruz Carrasco Miguel Ángel

 Luna Delgado Angélica Lizbeth
 González Escobar Martin

CARRERA: Ingeniería Química

GRUPO: 1701- A/B

SEMESTRE: 2017-l

PROFESORA:

Fecha de entrega 23/08/2016

 OBJETIVOS GENERAL

 Determinar la concentración de azul de timol en una solución problema mediante

una curva de calibración patrón externo por espectrofotometría visible

OBJETIVOS PARTICULARES

 Conocer los
fundamentos, partes
básicas y el manejo
general de
espectrofotómetro
Conocer los
fundamentos, partes
básicas y el manejo
general de
espectrofotómetroConoc
er
 Conocer los fundamentos, partes básicas y el manejo general del espectrofotómetro UV-
Vis.
 Realizar la curva de espectro de absorción del Azul de timol e identificar la longitud de
onda óptima.
  Construir una curva de calibración y emplearla como método para la determinación de la
concentración de una sustancia de interés (azul de timol).
 Relacionar la Ley de Lambert-Beer con la ecuación de una recta, comprendiendo que
dicha ley afirma que la absorbancia es proporcional a la concentración.
 Entender la importancia de identificar la longitud de onda de absorción para la
caracterización de sustancias.

 Distinguir la diferencia
entre
espectrofotometría y
espectroscopía.
 Entender la
importancia de
identificar la longitud
máxima de absorción
INTRODUCCION

Como es sabido, las técnicas espectroscópicas se basan en la interacción de la radiación

electromagnética con la materia. A través de esta interacción las moléculas pueden pasar
de un estado energético basal a otro estado energético excitado absorbiendo una
cantidad de energía radiante.

Una de las técnicas de análisis química más empleada, en la industria y la investigación,

son las curvas de calibración que son gráficos que relacionan una propiedad de la
sustancia de interés con la concentración de la misma.
Para medir la absorbancia se hace uso de la técnica espectrofotométrica, que se
refiere al uso de la luz para medir las concentraciones de sustancias qu ímicas, el
fundamento teórico es el siguiente:

Fig. 1

Se hace incidir un haz de luz que pasa por la muestra, la cual absorbe una parte del haz y esta
sale con una menor energía de radiación, (ver figura 1). La cantidad de haz que es capaz de
absorber la muestra, está relacionada directamente con la concentración debido a que entre más
moléculas de la sustancia estén presentes en la muestra, mayor energía radiante absorberán.
Ahora bien, un indicio de que las sustancias son capaces de absorber radiación en el intervalo del
espectro electromagnético visible, es el color, y las sustancias que poseen color deben dicha
cualidad a contener grupos cromóforos (que contienen electrones de valencia con energías de
excitación relativamente bajas).

La espectroscopia UV-Visible (espectros electrónicos), se debe a la transición de los

electrones más externos de los átomos de las moléculas, desde niveles fundamentales a
niveles más altos de energía.
En la práctica que se realizó se llevó a cabo la construcción de una curva de calibración
y la propiedad medida fue la absorbancia del azul de timol por medio del
espectrofotómetro UV-VIS (poner nombre). En la fig. 2 se observa la estructura química
de la sustancia a estudiar.

Fig 2

En la cual se puede ver que posee electrones, σ ,π y n (libres), y son

precisamente los que participan en las transiciones de energía y que producen el color en
la molécula.
MATERIAL

Material Reactivos y equipos

1 Pipeta volumétrica 1 ml Espectrofotómetro UV-VIS
1 Micro pipeta volumétrica Azul de timol
1 Vidrio de reloj
5 Matraz volumétrico 10 ml
2 Matraz volumétrico 25 ml
2 propipetas

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

 Se realizaron los cálculos necesarios para preparar una solución de azul de timol estándar
de concentración 2.7432 x 10−3 M
 Se prepararon 5 sistemas de azul de timol a partir de la solución estándar aforando en
medio ácido (HCl=0.1M) para adquirir una tonalidad rojiza en los intervalos de 5 X 10−6 y
2.5 X 10−5
 A partir de la solución más concentrada se trazó la curva de Espectro de Absorción para
determinar la longitud de onda óptima.
 Una vez obtenido ese dato, se determinó la absorbancia y se realizó la curva de
calibración del analito con los 5 sistemas antes mencionados.
 Con la muestra problema se preparó una dilución de 1/25 y se aforo en medio ácido, se
midió el valor de absorbancia y se realizó una interpolación con la ecuación obtenida dela
regresión lineal para determinar la concentración del sistema problema, así como dela
solución problema.

RESULTADOS

Tabla No. 1. Resultados para el espectro de absorción de azul de timol

λ A
380 0,146
385 0,15
400 0,146
410 0,143
420 0,135
430 0,122
440 0,114
450 0,107
460 0,097
470 0,096
 480 0,106
490 0,124
500 0,155
510 0,203
520 0,269
530 0,335
540 0,387
550 0,389
560 0,329
570 0,232
580 0,148
590 0,084
600 0,045

Longitud de onda vs. Absorbancia

0.45
0.4
0.35
0.3
Absorbancia

0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0
350 400 450 500 550 600 650
Longitud de onda

Grafica 1. Espectro de absorción del azul de timol

Análisis de Resultados
Curva de calibración a 550 nm
 Longitud de onda vs. Absorbancia
0.45
0.4
0.35
0.3
Absorbancia

0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0
350 400 450 500 550 600 650
Longitud de onda

Con la ayuda de la gráfica 1 se obtuvo la longitud de onda óptima, con un valor de 550
nm, con la cual se trabajó en la primera parte del presente experimento.
Una vez conocido el valor de la longitud de onda óptima se procedió a elaborar la curva de
calibración con ayuda de los 5 sistemas obtenidos previamente de la solución stock de
concentración conocida.
Recordando que las concentraciones de los 5 sistemas son:
C sistema 1=2.74 ×1 0−6 M
C sistema 2=4.11 × 10−6 M
C sistema 3=5.48 ×1 0−6 M
C sistema 4=6.85× 10−6 M
C sistema 5=8.22 ×1 0−6 M

Enseguida, se hizo la lectura de absorbancia de cada uno de los sistemas, obteniéndose los
siguientes datos:
Absorbanciasistema 1=.07
Absorbancia sistema 2=.15
Absorbanciasistema 3=.31
Absorbancia sistema 4=.395
Absorbanciasistema 5=.42

Concentración (M) Absorbancia

0,00000274 0,07
0,00000411 0,15
0,00000548 0,31
0,00000685 0,395
 0,00000824 0,42

Después se graficaron dichos sistemas contra sus respectivas absorbancias, obteniendo la

siguiente curva de calibración:

Absorbancia vs Concentración
0.45
f(x) = 68736.45 x − 0.11
0.4 R² = 0.95
0.35
0.3
Absorbancia

0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Concentración

Debido a que el valor del coeficiente de correlación r fue de r =0.94 , se consideró ajustar la
regresión, suprimiendo los dos valores que se encontraban más alejados de la ecuación de
la recta, los cuales corresponden a los sistemas 3 y 4.

Con lo cual se obtuvo una nueva curva de calibración:

Absorbancia vs Concentración
0.45
0.4 f(x) = 64039.38 x − 0.11
0.35 R² = 1
0.3
Absorbancia

0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0
0 0 0 0 0 0 0 0
Concentración
Se procedió a calcular la concentración de la muestra problema con la curva de calibración
previamente relizada, interpolando la ecuación obtenida con la curva de calibración corregida
correspondiente a 550 nm

y=64039 x−.1088

Recordando que la ley de Lambert-Beer establece que hay una relación entre la absorbancia
monocromática y la concentración de un cromóforo en solución:

A=ε ×C × l
Donde
A = absorbancia
b = longitud del paso óptico (cm)
c = concentración ( M )
ε= coeficiente de absortividad molar ( M ¿ ¿−1 cm−1) ¿ (sus unidades dependen de C y l)

Considerando la ecuación de la recta como:

y=mx+b=A=ε ×l× C=64039 x−.1088

Por lo que en el presente informe se consideró que:

y= A

m=ε × l=64039

x=C

b=−.1088

Ya establecida la manera en que se tratarían los datos, se retomó el cálculo de la

concentración de la solución problema. Dicha solución problema estaba conformada por
una alícuota de 1 ml y posteriormente fue aforada en 25 ml. De la solución aforada se
tomó una pequeña parte a la cual se le midió la absorbancia para luego interpolar con la
curva de calibración antes obtenida y así continuar con el cálculo de la concentración de
dicha solución problema.

El valor de absorbancia del sistema problema fue de: A=0.131

Sustituyendo en la ecuación de la regresión lineal:

0.131=64039 x−0.1088
Despejando la concentración:

.131+.1088
=x=3.744 ×10−6
64039
Donde x corresponde a la concentración del sistema problema aforado a 25 ml
Con el objetivo de conocer la concentración real de la solución problema se multiplicó por
el inverso del factor de dilución:

25
C real=3.744 ×10−6 × =9.361 ×10−5 M
1

Para el cálculo del coeficiente de absortividad molar se partió de que el valor de la pendiente de la
regresión lineal es igual al producto de coeficiente de absortividad molar por la longitud de paso
óptico (largo de la celda espectrofotométrica)

m=ε × l=64039

Entonces se despejó el término que se deseaba saber y como la longitud de la celda es 1 cm:

64039
ε= =64039 M −1 cm−1
1 cm

El mismo procedimiento fue repetido para la curva de calibración a 510 nm

Curva de Calibracion a 510 nm

Concentración (M) Absorbancia

0,00000274 0,07
0,00000411 0,15
0,00000548 0,31
0,00000685 0,395
0,00000824 0,42

Se procedió a graficar dichos sistemas contra sus respectivas absorbancias obteniéndose la

siguiente curva de calibración:
 Absorbancia vs Concentración
0.25

0.2 f(x) = 32737.89 x − 0.05

R² = 0.93
Absortividad

0.15

0.1

0.05

0
0 0 0 0 0 0 0 0
Concentracion

Una vez obtenida la curva de calibración se procedió a calcular la concentración de la muestra

problema interpolando con la ecuación obtenida con la curva de calibración correspondiente a
510 nm

y=32738 x−.0543

El valor de absorbancia del sistema problema fue de: A=.070

Sustituyendo en la ecuación de la regresión lineal:

.070=32738 x−.0543
Despejando la concentración:

.070+.0543
=3.796 ×10−6
32738
Donde x corresponde a la concentración del sistema problema aforado a 25 ml

Para conocer la concentración real de la solución problema se multiplicó por el inverso del
factor de dilución:

25
C real=3.796 × 10−6 × =9.492 ×10−5
1

Cálculo del coeficiente de absortividad a 510 nm

m=ε × l=32738

Entonces se despejó el término que se deseaba saber y como la longitud de la celda es 1 cm:
 32738
ε= =32738 M −1 cm−1
1 cm

λ=510 nm λ=550 nm
Concentración Concentració Concentració Concentración
sistema n solución ε n sistema solución ε
problema problema problema problema
Molarida ppm M ppm M −1 cm−1 M ppm M ppm M −1 cm−1
d
3.796 ×10−61.77 9.49 ×10−5
44.2 32738 −6
3.744 ×101.74 −5
9.361 ×1043.68 64039
1 8 7 4

Como se puede apreciar, en ambos cálculos a las distintas longitudes de onda (550 y 510
nm) se pueden tratar las absorbancias del azul de timol y hacer uso de ellas para
determinar la concentración de la solución problema en la curva de calibración
establecida, sin embargo, el cálculo correcto es a la longitud de onda optima la cual es de
550 nm debido a que esta longitud de onda es posible obtener un mayor índice de
absorbancia respecto a las demás longitudes de onda del espectro de azul de timol. Por lo
que se puede concluir que el valor correcto de la concentración del sistema problema es
de:

Y la concentración dela solución problema es de 3.744 ×10−6 M , mientras que la

−5
concentración de la solución problema es: C real 9.361× 10 M

Además cabe mencionar que dicha longitud de onda optima (550 nm) es válida solo para
el medio en el que se trabajó, el cual era ácido clorhídrico

AQUI VA TU PARTE MARTIN

AZUL DE TIMOL

CONCLUSIONES

BIBLIOGRAFIA
Memoria de cálculo

CALCULOS

Azul de timol en medio acido (HCl 0.1M).

PM: 466.6 g/mol

25 ml

Masa obtenida: 0.032 mg

Solución Stock

32 g
= 0.06858 mol.
466. 6gmol

0.06858 mol .
=2.7432 x 10−3 M
25 ml

Sistema 1

10µL-----0.01 ml

C1= 2.7432 x 10−3 M

V1= 0.01 ml

V2= 10 ml

C1V1=C2V2

(2.7432 x 10−3 M )(0.01ml) −6

C2= = 2.7432 x 10 M
10 ml

Sistema 2

15µL-----0.015 ml

C1= 2.7432 x 10−3 M

V1= 0.015 ml

V2= 10 ml

C1V1=C2V2
 (2.7432 x 10−3 M )( 0.015 ml) −3
C2= =4.1148 x 10 M
10 ml

Sistema 3

20µL-----0.020 ml

C1= 2.7432 x 10−3 M

V1= 0.020 ml

V2= 10 ml

C1V1=C2V2

(2.7432 x 10−3 M )( 0.020 ml) −6

C2= =5.4864 x 10 M
10 ml

Sistema 4

25µL-----0.025 ml

C1= 2.7432 x 10−3 M

V1= 0.025 ml

V2= 10 ml

C1V1=C2V2

(2.7432 x 10−3 M )( 0.025 ml) −6

C2= =6.858 x 10 M
10 ml

Sistema 5

30µL-----0.030 ml

C1= 2.7432 x 10−3 M

V1= 0.030 ml

V2= 10 ml

C1V1=C2V2

(2.7432 x 10−3 M )( 0.030 ml) −6

C2= =8.2296 x 10 M
10 ml
Cálculos para pasar de Molaridad a ppm

A 510 nm

mol 466.6 g 1000 mg

C sistema problema =3.796× 10−6 |
L 1mol ||g |
=1.771 ppm

mol 466.6 g 1000 mg

C solución problema 9.49× 10−5 |
L 1mol | g |
=44.28 ppm

A 550 nm

mol 466.6 g 1000 mg

C sistema problema =3.744 ×10−6 | || |
L 1 mol g
=1.747 ppm

mol 466.6 g 1000 mg

L | 1 mol || g |
C solución problema =9.361×10−5 =43.68 ppm

BIBLIOGRAFIA

 Harris D. C., Análisis Químico Cuantitativo. Grupo Editorial Iberoamérica;.México. 1992

 Fundamentos de Química Analítica. Skoog, West, Holler y Crouch. Ed. Thomson. 8º
Edición.