UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

Escuela Profesional de Ingeniería Química

ASIGNATURA: ANÁLISIS INSTRUMENTAL

INFORME DE LABORATORIO

TEMA Nº: 3 DETERMINACION DEL ESPECTRO DE ABSORCION Y CURVA DE

CALIBRACION DE Co(II) Y Ni(II)- REGION VISIBLE

PRESENTADO POR: Huaman Chujutalli Jorge Washington

CODIGO: 1416120438

BELLAVISTA 19 DE ABRIL DEL 2018

2018-A
Objetivos
 Determinación de Co(II) Y Ni(II) como cloruros, con las aplicación de la ley de Beer-
Lambert
 Determinación del espectro de cada una de las sustancias y su curva patrón
 Identificar la concentración de sustancias desconocidas, haciendo uso del espectro de
absorción de sustancias conocidas
Marco teórico
La espectrometría de absorción se refiere a una variedad de técnicas que emplean la
interacción de la radiación electromagnética con la materia. En la espectrometría de
absorción, se compara la intensidad de un haz de luz medida antes y después de la
interacción con una muestra. Las palabras transmisión y remisión se refieren a la dirección
de viaje de los haces de luz medidos antes y después de la absorción. Las descripciones
experimentales por lo general asumen que hay una única dirección de incidencia de la luz
sobre la muestra, y que un plano perpendicular a esta dirección pasa por la muestra.

En la transmisión, la luz es dispersada desde la muestra hacia un detector en el lado opuesto de la

muestra. En la remisión, la luz es dispersada desde la muestra hacia un detector en el mismo lado de
la muestra. 
La radiación remitida puede estar formada por dos clases de radiación: reflexión especular (cuando
el ángulo de reflexión es igual al ángulo del frecuencia) y reflexión difusa (en todos los demás
ángulos).

Espectrometría ultravioleta-visible
La espectrometría ultravioleta-visible o espectrofotometría UV-Vis implica la espectroscopia de
fotones en la región de radiación ultravioleta-visible. Utiliza la luz en los rangos visible y
adyacentes (el ultravioleta (UV) cercano y el infrarrojo (IR) cercano. 
En esta región del espectro electromagnético, las moléculas se someten a transiciones electrónicas. 

Esta técnica es complementaria de la espectrometría de fluorescencia, que trata con transiciones

desde el estado excitado al estado basal, mientras que la espectrometría de absorción mide
transiciones desde el estado basal al estado excitado.
Aplicaciones

La espectrometría UV/Vis se utiliza habitualmente en la determinación cuantitativa de soluciones

de iones metálicos de transición y compuestos orgánicos muy conjugados.

Soluciones de iones metálicos de transición 

Las soluciones de iones metálicos de transición pueden ser coloreadas (es decir, absorben la luz
visible) debido a que los electrones en los átomos de metal se pueden excitar desde un estado
electrónico a otro. El color de las soluciones de iones metálicos se ve muy afectado por la presencia
de otras especies, como algunos aniones o ligandos. Por ejemplo, el color de una solución diluida de
sulfato de cobre es muy azul; agregando amoníaco se intensifica el color y cambia la longitud de
onda de absorción máxima.

Compuestos orgánicos

Los compuestos orgánicos, especialmente aquellos con un alto grado de conjugación, también
absorben luz en las regiones del espectro electromagnético visible o ultravioleta. Los disolventes
para estas determinaciones son a menudo el agua para los compuestos solubles en agua, o el etanol
para compuestos orgánicos solubles. Los disolventes orgánicos pueden tener una significativa
absorción de UV, por lo que no todos los disolventes son adecuados para su uso en espectrometría
UV. El etanol absorbe muy débilmente en la mayoría de longitudes de onda. La polaridad y
el pH del disolvente pueden afectar la absorción del espectro de un compuesto orgánico. La tirosina,
por ejemplo, aumenta su máximo de absorción y su coeficiente de extinción molar cuando aumenta
el pH de 6 a 13, o cuando disminuye la polaridad de los disolventes.
Ley de Beer-Lambert

La espectrometría UV-Vis se utiliza con mayor frecuencia en forma cuantitativa para

determinar las concentraciones de especies absorbentes en solución, usando la Ley de Beer-
Lambert:

donde A es la absorbancia medida, I0 es la intensidad de la luz incidente a una determinada

longitud de onda, I es la intensidad de transmisión, L la longitud de ruta a través de la
muestra, y c la concentración de las especies absorbentes. Para cada especie y longitud de
onda, ε es una constante conocida como absortividad molar o coeficiente de extinción. Esta
constante es una propiedad fundamental molecular en un solvente dado, a una temperatura
y presión particular, y tiene como unidades 1/M * cm o, a menudo, U/M * cm.

La absorbancia y extinción ε a veces son definidas en términos de logaritmo natural en

lugar de logaritmo de base 10.

La ley de Beer-Lambert es útil para la caracterización de muchos compuestos, pero no sirve

como relación universal para la concentración y absorción de todas las sustancias. En
moléculas complejas de gran tamaño, como los tintes orgánicos (Xylenol Naranja o Rojo
Neutro, por ejemplo), a veces se encuentra una relación polinómica de segundo orden entre
la absorción y la concentración.
Espectrofotómetro Ultravioleta –Visible
El instrumento utilizado en la espectrometría ultravioleta-visible se llama espectrofotómetro UV-
Vis. Mide la intensidad de luz que pasa a través de una muestra (I), y la compara con la intensidad
de luz antes de pasar a través de la muestra (Io). La relación I / Io se llama transmitancia, y se
expresa habitualmente como un porcentaje (%T). La absorbancia (A) se basa en la transmisión:

A = - log (%T) 

Las partes básicas de un espectrofotómetro son una fuente de luz (a menudo una bombilla
incandescente para las longitudes de onda visibles, o una lámpara de arco de deuterio en el
ultravioleta), un soporte para la muestra, una rejilla de difracción o monocromador para separar las
diferentes longitudes de onda de la luz, y un detector. El detector suele ser un fotodiodo o un CCD.
Los fotodiodos se usan con monochomadores, que filtran la luz de modo que una sola longitud de
onda alcanza el detector. Las rejillas de difracción se utilizan con CCDs, que recogen la luz de
diferentes longitudes de onda en píxeles.

Un espectrofotómetro puede ser único o de doble haz. En un instrumento de un solo haz (como el
Spectronic 20), toda la luz pasa a través de la célula muestra. La Io debe medirse retirando la
muestra. Este fue el primer diseño, y todavía está en uso en la enseñanza y laboratorios industriales.

Parte experimental
 Equipos y materiales
 EQUIPO: Espectrofotómetro Lambda 35 doble haz

 M
ATERIALES:

Cubeta uv
vaso precipitado
 Piceta

Procedimiento de datos
 A partir de la de sal de CoCl2*6H2O Y NiCl2*6H2O, preparar solución patrón de 0.15M a
un volumen de 200ml, los cuales se completaran con ácido clorhídrico al 1%
 A partir de las soluciones patrón se preparan estándares de 0.03; 0.06; 0.09; 0.12 en ácido
clorhídrico al 1% en 25ml
 Se calibro el espectrofotómetro a cero con el ¨Blanco¨ (solución con todos los componentes
de la solución menos la sustancia trabajada, esto es , sin el colorante , es decir para esta
práctica el ácido clorhídrico al 1%
 Ya calibrado el equipo con el blanco para la solución se empieza a hallar las absorbancias a
diferentes longitudes de onda en un rango determinado para la solución coloreada, a su vez
se determina el punto máximo de absorbancia y el % de transmitancia que nos ayudara
también a determinar una óptima longitud de onda óptima para la solución, haciendo uso
del método grafico a partir de la curva de calibración aplicando la ley de LAMBERT-BEER
 Luego de hallar la longitud de onda optima procedemos a medir las absorbancias de las
soluciones de diferente concentración recolectando los datos y graficándolas en una tabla de
absorbancia vs concentración
 Luego mediremos la absorbancia de soluciones de concentraciones desconocidas y
usaremos el método gráfico y el de absortibidad molar para hallar sus concentraciones.
Procedimiento experimental
 A partir de la solución diluida que contiene Ni +2, cuya absorbancia máx. Entra dentro del
rango de medida de espectrofotómetro, veremos el valor de absorbancias a diferentes λ
frente a un blanco .A partir del espectro de absorción se obtendrá el valor de λ máx,

Determinación de la longitud optima de Ni+2

λ(nm) ABSORBANCIA
ABS 1 ABS 2 ABS 3 ABS PRO TRAMITANCIA
650 0.091 0.091 0.093 0.0916 0.8097
655 0.094 0.094 0.096 0.0946 0.8041
660 0.095 0.095 0.096 0.0953 0.8029
665 0.095 0.095 0.096 0.0953 0.8029
670 0.095 0.095 0.096 0.0953 0.8029
675 0.095 0.095 0.096 0.0953 0.8029
680 0.095 0.096 0.097 0.0960 0.8017
685 0.096 0.096 0.098 0.0966 0.8004
690 0.097 0.097 0.099 0.0976 0.7986
695 0.098 0.099 0.100 0.0990 0.7962
700 0.100 0.100 0.102 0.1000 0.7931
705 0.102 0.102 0.103 0.1023 0.7901
710 0.103 0.104 0.105 0.1040 0.7870
715 0.104 0.105 0.106 0.1050 0.7852
720 0.105 0.106 0.107 0.1060 0.7834
725 0.106 0.107 0.107 0.1066 0.7822
730 0.105 0.107 0.107 0.1063 0.7828
735 0.105 0.106 0.106 0.1056 0.7840
740 0.104 0.105 0.105 0.1046 0.7858
745 0.103 0.104 0.104 0.1036 0.7877
750 0.101 0.102 0.102 0.1016 0.7913

- Realizando la gráfica ABS vs λ

 Longitud onda vs Absorbancia
0.11

0.11

0.1

0.1

0.09

0.09

0.08
640 660 680 700 720 740 760

 El punto máximo de Absorbancia determina la longitud de onda óptima.

Λopt = 725 nm

T vs Longitud de Onda
0.82
0.81
0.81
0.8
0.8
0.79
0.79
0.78
0.78
0.77
0.77
640 660 680 700 720 740 760

 el punto mínimo de transmitancia determina la longitud de onda óptima de la solución

Λopt = 725 nm

 Preparamos la solución patrón a partir del CaCl2*6H2O Y NiCl2*6H2O 0,15 M en un

volumen de 200 ml completando el enrase con. ácido clorhídrico al 1%
  A partir de las soluciones de concentraciones conocidas preparamos soluciones diluidas de
0.03; 0.06; 0.09; 0.12 en ácido clorhídrico al 1% en 25ml
 Ambos de 5ml; 10ml y 15 ml en 25 ml – Co y Ni.

Para el CoCl2*6H2O

Igualamos equivalentes gramo Concentraciones a volúmenes de 5ml; 10ml y

(C 1∗V 1=C 2∗V 2 ¿ 15 ml; 20ml, en 25 ml

(C 1∗25=0.15∗5 ¿ C 1=0.03 M

(C 2∗V 1=0.15∗10 ¿ C 2=0.06 M

(C 3∗V 1=0.15∗15 ¿ C 3=0.09 M

(C 4∗V 1=0.15∗20¿ C 4=0.12 M

para el NiCl2*6H2O

Igualamos equivalentes gramo Concentraciones a volúmenes de 5ml; 10ml y

(C 1∗V 1=C 2∗V 2 ¿ 15 ml; 20ml, en 25 ml

(C 1∗25=0.15∗5 ¿ C 1=0.03 M

(C 2∗V 1=0.15∗10 ¿ C 2=0.06 M

(C 3∗V 1=0.15∗15 ¿ C 3=0.09 M

(C 4∗V 1=0.15∗20¿ C 4=0.12 M

 Luego de hallar la longitud de onda optima, procedemos a medir las absorbancias de las
soluciones de diferente concentración recolectando los datos y graficándolas en una tabla de
absorbancia vs concentración
Para el Ni+2

Concentración ABS 1 ABS 2 ABS 3 ABS PRO

(M)

0.03 0.108 0.113 0.113 0.1113

0.06 0.166 0.174 0.181 0.1737
0.09 0.188 0.202 0.192 0.1940
0.12 0.247 0.26 0.263 0.2567
X 0.086 0.09 0.09 0.0887
Y 0.197 0.197 0.203 0.1990

Absorbancia vs Concentracion
0.3

0.25
f(x) = 1.52 x + 0.07
R² = 0.97
0.2
absorbancia

Valores Y
0.15
Linear (Valores Y)

0.1

0.05

0
0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14
concentraciones

LA PENDIENTE, el coeficiente de extinción molar (ɛ)=1.5217

Hallamos la el coeficiente de extinción molar (Ɛ) de cada punto

A
Ɛ=
b∗c
 0.1113 Ɛ 1=3 .711
Ɛ 1=
1 cm∗0 .03 mol /l

0 . 1737 Ɛ 1=2.894
Ɛ 2=
1cm∗0 .06 mol/l

0 . 1940 Ɛ 1=2.156
Ɛ 3=
1cm∗0 . 09mol /l

0 .256 Ɛ 1=2.139
Ɛ 4=
1 cm∗0 . 12 mol/l

Ɛ promedio =2.75

Usando el coeficiente de extinción molar (ɛ) del grafico (ɛ)=1.5217

Muestra Concentración

Ai−0.0698
c i=
1.5217

x 0.0887−0.0698 c x =0.0124
c x=
1.5217

y 0.199−0.0698 c y =0.0849
c y=
1.5217

Usando el coeficiente de extinción molar (ɛ) promedio =2.75

Muestra Concentración

Ai
c i=
2.75

x 0.0887 c x =0.0323
c x=
2.75

y 0.199 c y =¿0.0724
c y=
2.75
Para el Co+2

Concentración ABS 1 ABS 2 ABS 3 ABS PRO

(M)

0.03 0.237 0.194 0.239 0.2233

0.06 0.373 0.34 0.375 0.3627
0.09 0.492 0.499 0.497 0.4960
0.12 0.599 0.600 0.598 0.5990
X 0.271 0.270 0.272 0.2710
Y 0.516 0.520 0.520 0.5187

Valores Y
0.7

0.6
f(x) = 4.2 x + 0.11
R² = 1
0.5
absorbancia

0.4
Valores Y
0.3 Linear (Valores Y)

0.2

0.1

0
0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14
concentracion

LA PENDIENTE, el coeficiente de extinción molar (ɛ)=4.2013

Hallamos la el coeficiente de extinción molar (Ɛ) de cada punto

A
Ɛ=
b∗c
 0.2233 Ɛ 1=7 . 4433
Ɛ 1=
1 cm∗0 .03 mol /l

0 . 3627 Ɛ 1=6.045
Ɛ 2=
1cm∗0 .06 mol/l

0 . 4960 Ɛ 1=5.511
Ɛ 3=
1cm∗0 . 09mol /l

0 .5990 Ɛ 1=4.99
Ɛ 4=
1 cm∗0 . 12 mol/l

Ɛ promedio =5.99

Usando el coeficiente de extinción molar (ɛ) del grafico (ɛ)= 4.2013

Muestra Concentración

Ai−0.1052
c i=
4.2013

x 0.2710−0.1052 c x =0.0394
c x=
4.2013

y 0.5187−0.1052 c y =0.0984
c y=
4.2013

Usando el coeficiente de extinción molar (ɛ) promedio =5.99

Muestra Concentración

Ai
c i=
2.75

x 0.0887 c x =0.0148
c x=
5.99
 y 0.199 c y =¿0.03322
c y=
5.99

CUESTIONARIO

 ¿Por qué cree usted que usan en el experimento celdas de vidrio?

 Determinación de la absortividad molar para cada una de las sustancias en el experimento

Para el Ni+2 Ɛ promedio =2.75

Para el Co+2

Ɛ promedio =5.99

 Calcular la absorbancia y tramitancia de una solución cuya absortividad molar 1.4*10 4,

cuya concentración es 5ppm y es medida en una cubeta de 1.5cm. (PM=237.93)

Hallamos la el coeficiente de extinción molar (Ɛ)

A
Ɛ=
b∗c

Donde:
Ɛ (absortividad molar )=1.4∗1 0 4
Concentración (C)=5mg/L
b:lado de la cubeta uv =1.5cm
Solución
 5 mg
∗1 mol
L 2.104∗10−5 mol
C= =
237.93 g L
A=Ɛ ∗c∗b
−4 L cm∗2.104∗10−5 mol
A=1.4∗10 ∗1.5
MOL∗cm L
A=4.4184∗10−9
tramitancia=99. 9%
concluciones
 Se puede concluir que atraves de esta práctica se puede hallar la concentración problema
teniendo en cuenta la concentración estándar y la absorbancia estándar.
 Se observa el cumplimiento de la Ley de Lambert-Beer ya que el aumento de concentración
se corresponde con un incremento lineal de la Absorbancia.

Referencias bibliográficas
 Hernandez-Hernandez, L González Pérez , Introducción al análisis instrumental. Capítulo
3 .2002
 Harris. D.C Análisis Químico Cuantitativo. 3° Ed. Capítulo 18. Ed. Reveste , 2007.
 Higson, S.P.J . Química Analítica. 1° ed. Cap 5 .Ed Mc Graw Hill , 2007.