Guia Hemato 1 Pronto

UNIVERSIDAD PERUANA UNIÓN
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE MEDICINA HUMANA
GUIA PRÁCTICA
MORFOFISIOLOGÍA DEL SISTEMA HEMATO INMUNOLÓGICO
Docente de Prácticas de Laboratorio

Blgo. Miguel Otiniano Trujillo
Blgo. José Luis Yareta Yareta
Mg. Edda Newball Noriega
LIMA – PERU
2020
1
INTRODUCCIÓN
Las prácticas inducen al estudiante en el campo de la experimentación, mediante la

participación en una serie de trabajos experimentales prácticos.
Con el objeto de obtener un mayor aprovechamiento, es necesario que el alumno antes de

cualquier experimento tenga como requisitos básicos:
a) Conocimientos teóricos y los III. CAPACIDADESs de cada trabajo práctico.

b) El material de laboratorio necesario para la realización de dicha práctica.
c) El método seleccionado que permitirá obtener los resultados deseados.
Todo lo anterior redundará en la obtención de mejores resultados, siendo de importancia la

discusión con el fin de estimular un juicio científico crítico sobre los hechos. En cada práctica
de laboratorio, la guía de prácticas de laboratorio debe ser revisada antes del inicio de la
actividad. Al finalizar el curso y el desarrollo de prácticas de laboratorio el estudiante habrá
desarrollado habilidades en la manipulación del material biológico, observación de los
efectos, obtención de resultados y la discusión de los mismos; y destrezas que en un futuro
le permitirán su aplicación clínica.
EP Medicina humana
Morfo-Fisiología Del Sistema Hemato-Inmune
OBJETIVOS DE LAS PRÁCTICAS DE MORFOFISIOLOGÍA HEMATO INMUNE
N Practica Capacidad Laboratorio
Eritrocitos a. identificación y reconocimiento de los elementos formes de la

sangre, en lo que respecta a la serie roja en una muestra de
Identificación de Grupo sangre periférica
Microbiologí
1 sanguíneo a. Identificar en la sangre la presencia o ausencia de los a
antígenos A, B y Rh que se localizan en la superficie de los
Morfología anormal del glóbulos rojos, utilizando anticuerpos específicos para cada
eritrocito uno de ellos.
a. Reconoce y nombra la morfología anormal del eritrocito
a. Usa la técnica consensuada para la obtención del hematocrito

respetando normas de bioseguridad
Hematocrito, b. Determina el hematocrito con la sangre extraída de un
hemoglobina compañero
Microbiologí
c. Calcula la hemoglobina, teniendo como dato el índice a
2 Parámetros hematocrito
hematimétricos d. Calcula la relación entre el hematocrito y el número de
hematíes para obtener el volumen corpuscular medio y el
VSG volumen de hemoglobina corpuscular media.
e. Explica la velocidad de sedimentación globular (VSG) y su
importancia clínica.
f. Describe los procesos en que la VSG se altera.
a. Expone el caso
3 Caso 1 b. Describe las causas, incidencia y factores de riesgo del caso Aula
c. Explica la fisiopatología del caso
d. Interpreta pruebas de laboratorio
En imágenes de frotis de aspirado medular
a. identifica los elementos formes de cada serie.

En imágenes de biopsia de medula ósea:
4 Médula ósea a. calcula la relación tejido hematopoyético/tejido adiposo

b. reconoce la topografía de la progenie Computo 1
a. calcula la relación mieloide/eritroide
b. contrasta los valores calculados con los valores normales de los
criterios anteriores.
En informes de medula ósea:
a. identifica los datos faltantes

b. relaciona los informes anormales con su posible patología
a. Describe las técnicas para la medición del tiempo de
coagulación y sangría
b. Usa la técnica de tiempo de sangría respetando las normas de
Determinación del tiempo Microbiologí
5 bioseguridad a
de coagulación y sangría.
c. Experimenta con anticoagulantes en muestras sanguíneas
Anticoagulantes
d. Compara la actividad anticoagulante de diversos
anticoagulantes
e. Explica la farmacodinamia de los anticoagulantes
a. Expone el caso
6 Caso 2 b. Describe las causas, incidencia y factores de riesgo del caso
Aula
1
EP Medicina humana
d. Interpreta pruebas de laboratorio

a. identificación y reconocimiento de los elementos formes de la
Identificación de los sangre de la serie blanca, y serie plaquetaria, en una muestra
7 elementos formes de la de sangre periférica. Microbiología
serie blanca y plaquetas b. Lee un hemograma
Hemograma c. Contrasta los resultados de un hemograma con los valores
normales
8 I EXAMEN PRACTICO Microbiología
En el cadáver o en imágenes virtuales:
Anatomía de los Órganos a. identifica el conducto torácico, la cisterna del quilo

linfoides b. Identifica la posición de las cadenas linfáticas Computo
9 c. Describe las relaciones de las amígdalas palatinas, linguales,
Estudio por imágenes de faríngeas
los órganos linfoides d. Identifica las estructuras relacionadas con el timo
e. Identifica las estructuras relacionadas con el bazo
f. Identifica el timo, el bazo y las estructuras anatómicas
relacionadas en imágenes de tomografía y resonancia
a. Expone el caso
10 Caso 3 b. Describe las causas, incidencia y factores de riesgo del caso Aula
Histología de los órganos a. Identifica y describe en imágenes microscópicas las

12 Computo 1
linfoides estructuras histológicas del tejido linfoide, folículos linfoides,
amígdalas, timo, ganglio linfático, bazo
a. Observa la reacción de precipitación entre el antígeno y el
anticuerpo.
Reacciones antígeno-
13 b. Distingue entre epítopo y antígeno. Microbiología
anticuerpo
c. Explica la especificidad de los anticuerpos por sus epitopos.
d. Experimenta con reacciones antígeno-anticuerpo
neutralización, floculación
Examen físico del sistema a. Usa la técnica semiológica para la evaluación de los ganglios
14 Multifuncional
linfático linfáticos y el bazo.
e. Describe sus hallazgos
a. Experimenta con una prueba de ELISA rápida
b. Distingue entre el ELISA directo y el ELISA indirecto.
c. Explica cómo se emplea el ensayo de inmunoabsorción ligada
15 ELISA - Wester blot a enzimas (ELISA) como prueba diagnóstica Computo
d. Define seroconversión.
e. Observa el uso de la técnica Western Blotting para detectar
el VIH.
f. Compara la técnica Western Blotting con el ensayo ELISA.
II EXAMEN
16 PRACTICO Microbiología
17 EXAMEN ORAL Aula
2
EP Medicina humana
REGLAS BÁSICAS DE HIGIENE Y SEGURIDAD EN EL LABORATORIO
Para obtener provecho en una práctica de laboratorio, es necesario seguir ciertas normas
que disminuyan al máximo los errores y accidentes.
1. Todos los accidentes personales, por triviales que sean, se comunicaran inmediatamente.
2. Jamás tener prisa a la hora de realizar los experimentos de la práctica.
3. En las prácticas de laboratorio son indispensables: El máximo grado de observación de los

fenómenos. El rigor científico. La limpieza.
4. No confiar nada a la memoria, anotar todas las observaciones. Una parte esencial de
cualquier trabajo científico es la de consignar por escrito la descripción de lo que se ha
hecho y observado en tal forma que permita a cualquiera persona, con cierto conocimiento
del tema, repetir el trabajo realizado sin necesidad de guía especial. Las notas de sus
observaciones deben ser breves, claras y deben realizarse inmediatamente después de cada
paso del trabajo, deben conservarse con orden y limpieza; éstas deben ser una descripción
completa y honesta de todo lo que el estudiante ha visto y realizado.
5. Cualquier equipo que se utilice se manejará dé acuerdo con el instructivo y una vez
utilizado se dejará en condiciones de ser manejado por otra persona.
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EP Medicina humana
PRÁCTICA 1
IDENTIFICACIÓN DE ELEMENTOS FORMES DE LA SERIE ROJA
I. AUTOEVALUACIÓN DE CONOCIMIENTOS PREVIOS:
Lo sé en
N ÍTEM No sé Lo sé Soy capaz de
forma
Nada Poco explicarlo
regular
1 ¿Cuantos glóbulos rojos tenemos por milimetro cubico

de sangre?
2 ¿Cuánto mide el diámetro de un globulo rojo?
3 ¿Qué es un frotis sanguíneo?
4 ¿Qué es la eritropoyesis?
5 ¿Qué son los reticulocitos?
II. FUNDAMENTO TEÓRICO
Las células se diferencian en función de características tales como el tamaño, la forma, la

dispersión óptica, en parte también mediante coloraciones. En la práctica médica, la
4
EP Medicina humana
diferenciación de los elementos formes como leucocitos es importante para establecer el

diagnostico de algunas patologías relacionadas.
En general, los estudios de sangre se hacen en una extensión o frotis sanguíneos, obtenidas
por la expansión de la sangre en un soporte como las láminas portaobjeto
Por lo tanto, la evaluación microscópica y morfológica de extendidos de sangre constituye

la base del diagnóstico hematológico. En esta sesión nos centraremos en la morfología de
las células de la sangre.
Frotis sanguíneo
Durante la preparación de los frotis o extendidos sanguíneos, debe tenerse en cuenta que
sólo 2/3 a 3/4 del portaobjetos puede quedar cubierto por el preparado.
Los portaobjetos son los más adecuados para realizar el frotis (Fig. 1). El grosor del
extendido en el último tercio del preparado debe ser tal que permita que los eritrocitos se
distribuyan parcialmente aislados entre sí y también juntos como pequeñas pilas de
monedas. Los preparados muy gruesos hacen imposible el análisis de las estructuras
celulares finas, dado que las células no se encuentran suficientemente extendidas.
Fig 1. Frotis sanguíneo.
Pautas para la observación microscópica de elementos formes - Frotis de sangre periférica
La observación microscópica de un extendido sanguíneo se realiza en primera instancia con

los III. CAPACIDADESs 10 × y 40 × con un ocular 10 ×, a fin de obtener rápidamente un
panorama general respecto de la cantidad y la calidad de las células presentes en el
preparado, además de presentaciones poco frecuentes.
La verdadera diferenciación del frotis sanguíneo se realiza con ayuda del aceite de
inmersión con III. CAPACIDADES 1000 ×. Se recorre el último tercio del extendido. Por otro
lado, en esta porción del preparado, al igual que en los laterales, pueden buscarse
intencionalmente células patológicas.
5
EP Medicina humana
ERITROPOYESIS
La hematopoyesis es el proceso a través del cual se producen los elementos formes de la

sangre.
La eritropoyesis es el proceso de formación de nuevos glóbulos rojos (eritrocitos). La

producción, diferenciación y maduración de los glóbulos rojos está influenciada por
sustancias como la eritropoyetina y el hierro que actúan en diferentes etapas de la
diferenciación de estas células.
RETICULOCITOS
Los reticulocitos presentan en

su citoplasma restos de ARN y
protoporfirina resultados de
la conversión del normoblasto
ortocromático a reticulocito y
solo se pueden observar con
coloraciones especiales. En
sangre periférica se les puede
observar como elementos
macrocíticos y
policromatófilos.
El reticulocito es un eritrocito
inmaduro que ha perdido su núcleo. Pero que retiene agregado de sus ribosomas una
cantidad de ARN que decrece a medida que el eritrocito madura. Después que el normoblasto
pierde su núcleo, el reticulocito usualmente permanece 2 días en la médula ósea y un día en
la sangre periférica, antes que llegue a ser un eritrocito maduro. El recuento de reticulocito
junto con sus correcciones asociadas puede ser usado para evaluar la actividad eritropoyética
de la médula ósea.
El ARN ribosómico de los reticulocitos pueden ser teñidos con una coloración supravital,
esto es con los eritrocitos en estado vivo. Un reticulocito se define como cualquier eritrocito
no nucleado que contenga 2 o más partículas de material granulado filamentoso teñido.
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EP Medicina humana
III. CAPACIDADES:
a. Identifica las células de la serie roja en una muestra de sangre periférica
IV. MATERIALES Y PROCEDIMIENTO
- Microscopio.
- Baño maría a 37ºC.
- Láminas portaobjetos de vidrio.
- Goteros, frascos.
- Colorante: Azul brillante de cresilo. Filtrar el reactivo antes de usar.
i. Se recomienda sangre total anticoagulada con EDTA, aunque se obtiene

mejores resultados con sangre tomadas en capilares.
ii. Colocar 5 gotas de colorante en un tubo de vidrio.
iii. Luego agregar 5 gotas de sangre total.
iv. Homogenizar.
v. Llevar a baño maría por 10 minutos.
vi. Hacer extendido en lámina portaobjetos.
vii. Dejar secar a temperatura ambiente.
viii. Leer en microscopio con el III. CAPACIDADES 100x con aceite de inmersión.
ix. Seleccionar un área donde los eritrocitos estén cercanos, pero no superpuestos
y donde los reticulocitos aparecen bien teñidos.
x. Contar los reticulocitos y eritrocitos en cada campo.
xi. Continuar contando hasta que se haya observado 1000 eritrocitos.
xii. Calcular los eritrocitos usando la siguiente fórmula:
Reticulocitos (%) = Nº de Reticulocitos x 100

1000 Hematíes observados
VALORES REFERENCIALES:
Los rangos referenciales en adultos van de 0.5% a 2%. El rango puede estar ligeramente
elevado en mujeres y en personas que viven en alturas mayores de 6000 pies/sobre el nivel
del mar. En niños: 2% a 4%, es mayor en neonatos (2.5% a 6.5%) pero desciende a nivel de
adultos aproximadamente de 1-2 semanas.
INTERPRETACION:
Los reticulocitos se incrementan en sangre periferica en las anemias hemolíticas, en anemias

hemolíticas, en anemias con regeneración rápida, policitemias, paludismo, intoxicaciones y
después de una irradiación.
NORMOCITOS O HEMATÍES
7
EP Medicina humana
Discos cuya biconcavidad hace que aparezcan con cierta palidez central al no captar el
colorante en esa zona. Miden aproximadamente de 7,2µm a 7,4µm y puede llegar hasta
ocho. Presenta un pigmento respiratorio que le da el color rosado característico que es la
hemoglobina que se encarga del transporte de oxígeno.
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EP Medicina humana
PRÁCTICA 1B
ALTERACIONES MORFOLÓGICAS DE LOS ERITROCITOS
I. AUTOEVALUACIÓN DE CONOCIMIENTOS PREVIOS:
Lo sé en
N ÍTEM No sé Lo sé Soy capaz de
forma
regular
1 ¿Cuáles son las dimensiones normales de los

eritrocitos?
2 ¿Qué es anisocitosis?
3 ¿Qué es poiquilocitosis?
4 ¿Qué es un drepanocito?
5 ¿Qué son los reticulocitos?
II. FUNDAMENTO TÉORICO

Los hematíes normales presentan
las siguientes dimensiones:
diámetro longitudinal: 7-8 µm
diámetro transversal (espesor): -
diámetro periférico: 2 µm
- diámetro central: 1 µm
superficie: 120-140 µm²
volumen: 80-100 µm³
Las alteraciones de los eritrocitos, se

pueden clasificar de la siguiente
manera:
1. Alteraciones en tamaño.
2. Alteraciones en su forma.
3. Alteraciones de color.
4. Inclusiones anormales.
ALTERACIONES EN EL TAMAÑO
Llamadas también anisocitosis. Pueden ser de dos tipos:
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EP Medicina humana
Macrocitos:
Hematíes que presentan un
tamaño superior al normal
(más de 9m) y su expresión
máxima es el megalocito.
Suelen aparecer en la
anemia megaloblástica
debida a déficit de vitamina
B12 o ácido fólico. Se suele
observar cuando hay un
aumento de la actividad
eritropoyética, como un mecanismo de compensación a la pérdida de los hematíes,
sea por anemia severa o hemorragias. En la sangre periférica se pueden observar
como hematíes grandes policromatófilos o reticulocitos.
Microcitos: Hematíes que presentan un tamaño inferior al normal (menos de 6µm) y

se encuentran en pacientes con anemia ferropénica y talasemias.
ALTERACIONES EN LA FORMA.
Llamadas también poiquilocitosis. Entre éstos tenemos:
Esferocitos: Son hematíes esféricos como unas pelotas, no son bicóncavos, presentan un
diámetro inferior al normal pero más grueso. Su vida media es de 14 días, producen
taponamiento de los vasos sanguíneos. Se encuentran en la enfermedad esferocitosis
hereditaria o enfermedad de Mihkowski-Chauffard (defecto congénito de la
membrana eritrocitaria). También pueden ser adquiridos por factores
extraeritrocitarios.
Dianocitos. En la región central presentan un área con mayor contenido
hemoglobínico (zona densa). La interfase entre la membrana celular y el centro es
transparente. Se encuentran en hemoglobinopatías, talacemias, anemia ferropénica y
en algunas hepatopatías crónicas con aumento de colesterol y fosfolípidos.
Drepanocitos. Son hematíes cuya membrana hemática se altera y se hace falciforme
(forma de hoz o media luna). Su apariencia es propia del estado homocigoto de la
hemoglobina S. Su enfermedad se conoce como drepanocitosis hereditaria.
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EP Medicina humana
Eliptocito: Los hematíes son alargados (ovalocitos). Se encuentran en la enfermedad

llamada ovalocitosis hereditaria. Su presencia se debe a una alteración congénita de
la membrana del hematíe, aunque puede ser adquirida en caso de una anemia
megaloblástica, ferropénica o arregenerativa.
Crenocitos. Son aquellos que presentan membrana ondulante e irregular. Se
encuentran en algunas anemias hemolíticas. Este fenómeno puede ser inducido in
vitro con una solución hipertónica. Cuando la característica es muy notable puede
emplearse el término equinocito.
Equinocitos. También llamados acantocitos. Las prominencias de la membrana
eritrocitaria son más aguzadas (alargadas) y distribuidas irregularmente. Se
encuentran en la acantocitosis que se caracterizan por la ausencia de lipoproteínas
plasmáticas.
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EP Medicina humana
Dacriocitos. Son hematíes en forma de lágrima. Se encuentran en la anemia

ferropénica, anemia megaloblástica y talasemia.
Esquistocitos. Son fragmentos hemáticos. Se encuentran en anemias hemolíticas,
microangiopatías, quemaduras y con más evidencias en individuos
esplenectomizados.
Estomatocitos. Son hematíes que en lugar de una depleción central clara tienen una
banda pálida central que les da un aspecto de boca. Se hereda como carácter
autosómico dominante. Esta enfermedad es causada por anormalidad hereditaria de
la membrana eritrocitaria.
Selenocitos. Son eritrocitos alterados que adoptan forma semilunar. Es un artificio de
técnica que aparece especialmente en frotices sanguíneos de pacientes anémicos.
Excentrocitos: Son hematíes con distribución irregular de la hemoglobina. Su
tamaño es inferior al normal y se caracteriza por poseer contornos parcialmente
arrugados, pero además se observa una distribución irregular de la hemoglobina que
aparece desplegada de la parte interna hacia uno de los extremos.
ALTERACIONES DE COLOR
Aquí observamos las diferentes tonalidades de color de los hematíes dependiendo del
contenido hemoglobínico. Tenemos:
Hipocromía. Son hematíes con disminución del contenido de la hemoglobina y

dependiendo de la cantidad de este pigmento es que observamos a los hematíes con
diferentes caracteres de color. Aquí están incluidos los anulocitos, que son hematíes
en forma de anillo en que solo la membrana eritrocitaria está coloreada y que se
traduce en una hipocromía de grado severo (+++).
12
EP Medicina humana
Hipercromía. Son hematíes ávidos de hemoglobina. Pueden encontrarse en caso de

enfermedades como la policitemia vera o la policitemia fisiológica y esferocitosis
hereditaria.
Policromatofilia. Presencia de hematíes con tonalidad (azul y rojo) morada. Se le
relaciona con inmadurez celular, células nucleadas, presencia de reticulocitos,
macrocitos, etc. Esto debido a su elevada cantidad de ARN.
Anisocromía: Diferentes tonalidades de color como hematíes hipocrómicos,
hipercrómicos, normocrómicos y policromatófilos. Se encuentran en ciertas anemias
refractarias.
INCLUSIONES ANORMALES
Punteado basófilo. Son gránulos basófilos presentes en el citoplasma de los hematíes.

Puede tratarse de un reticulocito por su elevado contenido de ARN. Se encuentra en
una intoxicación por plomo llamada saturnismo.
Cuerpos de Heinz. Son formaciones redondeadas de hasta 3µm de diámetro localizadas
habitualmente en la periferia de la célula. Se observan con colorantes para
reticulocitos. Estos cuerpos son abundantes en sujetos esplenectomizados.
Anillos de Cabot. Se cree que sean restos de membrana nuclear eritroblástica o restos
después de una mitosis anormal. Se observan en forma de anillo u ocho invertidos.
Pueden ser precipitados de ARN o proteína carente de importancia diagnóstica.
Cuerpos de Howel-Jolly. Son restos de cromatina nuclear, resultados de la pérdida
del núcleo por parte del normoblasto ortocromático hasta la conversión del hematíe.
Se les considera signos de regeneración celular. Se observan en pacientes
esplenectomizados.
Siderocitos. Son hematíes con contenido de hierro libre no hemoglobínico de color
verde azulado.
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EP Medicina humana
Gránulos de Shuffner. Son gránulos que presentan algunos hematíes en caso de

parasitismo por Plasmodium vivax.
Gránulos de Maurer: Son gránulos de color violeta oscuro que se encuentran en
pacientes con parasitismo por Plasmodium falciparum.
Granulacion azurófila: Son pequeñas granulaciones eritrocitarias color violeta
púrpura y corresponden a restos de normoblastos ortocromáticos producto de la
cariorrexis y del paso de un elemento inmaduro a otro maduro. Se observa tanto en
síndromes diseritropoyéticos congénitos o adquiridos.
III. MATERIALES Y PROCEDIMIENTO
- Microscopio.
- Láminas portaobjetos de vidrio con frotis coloreado.
- Aceite de inmersión.
i. Las láminas portaobjetos con extendidos coloreados, serán observados al

microscopio. Para lo cual será importante iniciar la observación desde el III.
CAPACIDADES de menor aumento como 10x, para luego observar a 40x.
ii. Con la ayuda del aceite de inmersión, se podrá observar con el III. CAPACIDADES de
100x.
iii. Seleccionar un área donde los eritrocitos se encuentren distribuidos
homogéneamente.
iv. Observar y graficar los eritrocitos.
Alteraciones de tamaño de los eritrocitos
Dibuje o esquematice didácticamente un macrocito y microcito.
14
Alteraciones del color de los eritrocitos
Dibuje o esquematice 3 eritrocitos alterados en su color y 3 eritrocitos con

inclusiones anormales.
COLOR
INCLUSIONES
Alteraciones de la forma de los eritrocitos
Dibuje o esquematice 6 tipos de eritrocitos alterados morfológicamente.

EP Medicina humana
PRÁCTICA 1 C
GRUPO SANGUÍNEO
I. AUTOEVALUACIÓN DE CONOCIMIENTOS PREVIOS
N Lo sé en
ÍTEM No sé Lo sé Soy capaz de
forma
regular
1 ¿Cuáles son los sistemas sanguíneos?
2 ¿Qué es el sistema sanguíneo Duffy?
3 ¿Qué es el factor Rh?
4 Una persona de sangre de tipo O+ ¿Qué

anticuerpos tendrá en su plasma?
5 Una persona de sangre de tipo AB- ¿Qué

anticuerpos tendrá en su plasma?

Todas las células del cuerpo humano tienen glucocálix, que contiene glucoproteínas o
glucolípidos, determinadas genéticamente, estas glucoproteínas actúan también como
antígenos.
17
EP Medicina humana
Un antígeno es una sustancia capaz de producir anticuerpos. Los anticuerpos son específicos
para cada antígeno y reaccionan, se unen a él.
El antígeno de los glóbulos

rojos también recibe el
nombre de aglutinógeno
Los anticuerpos del plasma

sanguíneo también reciben
el nombre de aglutininas
Los grupos sanguíneos del

sistema ABO están
determinados por la
presencia o ausencia de dos
antígenos: el tipo A y el tipo
B.
Una persona en su plasma sanguíneo, tiene anticuerpos sólo contra los antígenos que no
están en sus glóbulos rojos, por lo que una persona con sangre del grupo A tendrá
anticuerpos anti-B.
Si el receptor de una transfusión de sangre tiene anticuerpos, que reaccionan con los
antígenos presentes en los glóbulos rojos, éstos se agruparán, o aglutinarán, y luego se
romperán, lo que resulta en una reacción a la transfusión de sangre potencialmente mortal.
18
EP Medicina humana
¿Por qué hay estos tipos sanguíneos?

Cada persona tiene dos alelos (I) del gen para estos antígenos, una copia de cada progenitor.
Estos alelos pueden ser dominantes (I) o recesivos (i)
El alelo A y el alelo B son dominantes
Una persona con sangre del grupo AB tiene un alelo para el antígeno de tipo A y un alelo
para el antígeno de tipo B.
Una persona con sangre del grupo O tiene dos alelos recesivos
Una persona con sangre del grupo A puede tener dos alelos para el antígeno de tipo A o un
alelo para el antígeno de tipo A y el otro alelo es recesivo
Una persona con sangre del grupo B puede tener dos alelos para el antígeno de tipo B o un
alelo para el antígeno de tipo B y el otro alelo es recesivo
El factor Rh es otra proteína determinada

genéticamente que puede estar presente sobre las
membranas de los glóbulos rojos.
Aproximadamente el 85% de la población es Rh + y sus
glóbulos rojos tienen ésta proteína en su superficie. Los
anticuerpos contra el factor Rh no se encuentran
preformados en el plasma. Son producidos por un
19
EP Medicina humana
individuo Rh-, sólo después de la exposición a células sanguíneas de una persona que es Rh+.
III. CAPACIDADES
a. Identifica el tipo sanguíneo de una persona utilizando anticuerpos
IV.MATERIALESYPROCEDIMIENTO
Tubos de ensayo 12 x 75 mm.
Laminas portaobjeto.
Punteras amarillas.
Pipeta pasteur con bulbo.
Aplicadores de madera.
Guantes.
Antisuero “A”.
Antisuero “B”.
Antisuero Rh (Anti - D).
PROCEDIMIENTO
Para determinar el grupo sanguíneo de un individuo, se mezclan gotas de una muestra de su

sangre por separado con el antisuero que contiene anticuerpos bien para los antígenos de
tipo A o bien contra los antígenos de tipo B, o bien para los antígenos Rh. Una reacción de
aglutinación (que muestra agrupamiento) indica la presencia del aglutinógeno.
1. MUESTRA REQUERIDA:1 mL de Sangre completa con o sin anticoagulante
2. Rotular las láminas de vidrio.
3. Depositar 01 gotas de sangre en una placa portaobjeto, realizar este proceso en tres
láminas para cada antisuero.
4. Depositar los antisueros respectivos. (anti A, anti B, anti D).
5. Con un aplicador de madera mezclar la suspensión.
6. Leer la presencia de aglutinación haciendo movimientos de vaivén suavemente.
Interpretación de los resultados
Grupo A: Si aglutina la placa con anti A. (Celeste).

Grupo B: Si aglutina la placa con anti B. (Amarillo).
Grupo O: No aglutinan las placas con anti A y anti B.
Factor Rh: Rh Positivo si aglutina el anti D. Rh Negativo si no aglutina.
20
EP Medicina humana
RESULTADOS DE GRUPOS SANGUÍNEOS
Aglutinación con Aglutinación con Aglutinación con Grupo

suero anti - A suero anti - B suero anti - Rh
Sangre del Paciente sanguíneo
identificado
V. INVESTIGACIÓN
1) ¿Cuantos glóbulos rojos tenemos por milímetro cubico de sangre?

4 - 5,5 millones/mm³ de sangre
2) ¿Cuanto mide el diámetro de un glóbulo rojo?

Mide entre 7,2 a 7,4nM
3) ¿Qué es un frotis sanguíneo?

El frotis es una técnica que consiste con la extensión de una gota de sangre
sobre la superficie de un portaobjetos, con el fin de analizarlos posteriormente al
microscopio.
4) ¿Qué es la eritropoyesis?
La eritropoyesis, es la formación continuada de eritrocitos o glóbulos rojos.
5) ¿Qué son los reticulocitos?

Son glóbulos rojos que no han alcanzado su madurez
6) ¿Cuáles son las dimensiones normales de los eritrocitos?

VOLUMEN: 80 – 100nM³
SUPERFICIE: 120 – 140nM²
DIAMETRO: 7 – 8nM
7) ¿Qué es anisocitosis?
Es un término que significa disparidad en el tamaño de algunas células,
principalmente eritrocitos
8) ¿Qué es poiquilocitosis?
Son variaciones en la forma de los eritrocitos.
9) ¿Qué es un drepanocito?
Las globulas rojas que normalmente tienen la forma de un disco, presentan
una forma semilunar
10) ¿Qué son los reticulocitos?

Son glóbulos rojos que no han alcanzado su madurez
11) Ernesto de 14 años presenta cansancio, palidez y duerme en clase. Sus padres
le hacen un análisis de sangre y los resultados dan 2.800.000 glóbulos rojos por
mm³. ¿Qué es lo que puede estar padeciendo?
Ernesto está padeciendo de una anemia, porque sus niveles de glóbulos
rojos están abajo del normal (4.7 a 6.1 millones de células/mcL).
12) ¿Qué es la hemoglobina?

La hemoglobina es una hemoproteina de la sangre, cuja función consiste en
captar el oxígeno de los alveolos pulmonares y comunicalos a los tejidos
13) Elabore un esquema de la eritropoyesis

Prorietoblastos –> eritroblasto basófilo –> eritroblasto policromatico ->
eritroblasto ortocromatico –> reticulocitos –> eritrocitos
14) Los anticuerpos contra los antígenos A y B se encuentran en el plasma, y una
persona tiene anticuerpos solo para los antígenos que no están presentes en sus
globulos rojos. Usando esta información indica los antígenos que se encuentran en
los globulos rojos y los anticuerpos del plasma, para los grupos sanguíneos:
AB-: anti D, aglutinógenos A y B

O+: anti A y B, aglutinógenos D
B-: anti A y D, aglutinógeno B
A+: anti B, antigenógenos D y A
15) Si una persona recibe un trasplante de medula ósea de alguien con grupo
sanguíneo ABO diferente, ¿Qué ocurre con el grupo sanguíneo ABO del receptor?
En caso de incompatibilidad, el receptor sufrirá hemolisis postransplante,
pues habrá aglutinación.
BIBLIOGRAFIA
https://salud.uncomo.com/articulo/sintomas-de-la-anisocitosis-40819.html
https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-laboratorio/frotis-de-sangre/
Guia practica de Morfologia del sistema Hemato Inmunologico de la Upeu
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EP Medicina humana
PRÁCTICA 2A
DETERMINACIÓN DEL HEMATOCRITO Y LA
HEMOGLOBINA I. CONOCIMIENTOS PREVIOS
Lo sé en
No sé Lo sé Soy capaz de
N ÍTEM forma
regular
1 ¿Qué es el hematocrito?
2 ¿Cuáles son los elementos formes de la sangre?
3 ¿Cuál es el significado de la “capa leucocítica” después

de centrifugar la muestra de sangre?
4 ¿Qué porcentaje del glóbulo rojo es ocupado por

la hemoglobina?
5 ¿Cuáles son los valores normales de la Hemoglobina?
El índice hematocrito es el volumen que ocupan las diferentes porciones que se forman al
centrifugar un tubo de sangre con anticoagulante.
La parte corpuscular (Hematíes) por ser más densa queda en el fondo del tubo, mientras
que sobrenada la fracción plasmática. La cantidad y proporción relativa de cada una de
estas partes se denomina valor o índice hematocrito.
Los tubos utilizados tienen distintas formas y tamaños, según los autores que los idearon
(Hedin, Hamburger, Westergren, Wintrobe, etc.). Los que son capilares permiten recoger la
sangre por punción digital.
23
EP Medicina humana
III. CAPACIDADES:
a. Explica el índice hematocrito.

b. Describe las técnicas para la obtención del hematocrito.
c. Determina el hematocrito con la sangre extraída de un compañero
d. Calcula el número de hematíes a partir del hematocrito
e. Calcula la hemoglobina, teniendo como dato el índice hematocrito
f. Investiga el uso del hematocrito para la práctica clínica
• Alcohol Etanol 70°

• Algodón.
• Lancetas estériles.
• Tubos capilares de 75 mm de largo y 2 mm de diámetro interior y con anticoagulante

heparina desecada.
• Regla milimetrada
• Plastilina.
• Timer o cronometro.
• Centrifuga.
1. Desinfectar la yema del dedo con alcohol, secándola posteriormente con algodón.
Utilizar siempre guantes y lancetas estériles. Los tubos de microhematocrito deben
de ser preferiblemente heparinizados.
2. Punzar la yema del dedo con la lanceta y presionar el mismo para que salga sangre.
3. Llenar el capilar del micro-hematocrito apoyando uno de los extremos sobre la gota
de sangre del dedo.
4. Taponar el extremo más próximo a la sangre con plastilina.
5. Centrifugar el capilar durante 5 minutos a 12000 rpm en una centrífuga específica

para microhematocrito.
6. Con la regla medir la longitud que ocupa en el capilar la columna formada por
glóbulos rojos sedimentados y referirla en tanto por ciento a la longitud total que
ocupa la sangre que llena el capilar.
24
EP Medicina humana
RESULTADOS
N° de Longitud Longitud de Valor del Observaciones

Muestra total (mm) paquete hematocrito
hemático (mm) (%)
Cálculo del número de hematíes a partir del hematocrito
A partir del índice hematocrito se puede deducir la cifra de hematíes. Si los hematíes son de
forma, tamaño y contenido en hemoglobina normal o poco alterada, la relación entre
número de hematíes e índice hematocrito (Hto) es una constante, es decir:
Hto · K = # de hematíes
El porcentaje del paquete hematológico multiplicado por una constante nos proporciona el
número de hematíes por milímetro cúbico.
Se ha calculado esta constante en 110.000; así, si suponemos que el valor hematocrito de

un paciente es de 40 por 100 (paquete de hematíes), si se multiplica por 110.000 nos da
4.400.000, que representa el número de hematíes por milímetro cúbico.
25
A. Mujer: 35%
B. Varon: 50%
C. Mujer: 45%
D. Varon: 55%
E. Mujer: 57%
HEMOGLOBINA
Hb=(%)Hto/3.03 = 35/3.03= 11,55g/dL BAJO
Hb=(%)Hto/3.03 = 50/ 3.03= 16,5g/dL NORMAL
Hb=(%)Hto/3.03 = 45/ 3.03= 14,85g/dL NORMAL
Hb=(%)Hto/3.03 = 55/ 3.03= 18,15g/dL LEVEMENTE ALTO
Hb=(%)Hto/3.03 = 57/3.03= 18,81g/dL LEVEMENTE ALTO
ERITROCITO
Hto . K = # de hematíes = 35x110.000=3,850,000 BAJO
Hto . K = # de hematíes = 50x110.000=5,500,000 NORMAL
Hto . K = # de hematíes = 57x110.000=6,270,000 ALTO
VCM
VCM= hto.10/eritrocitos = 35x10/3,8=92,10fl NORMOCITICAS
HCM
HCM= Hb.10/eritrocitos= 11,55x10/3,8= 30,39pg NORMAL
HCM= Hb.10/eritrocitos= 16,5x10/5,5= 30pg NORMAL
CHCM
CHCM= Hb.100/hto= 11,55x100/35=33g/dL NORMAL
CHCM= Hb.100/hto= 16,5x100/50=33g/Dl NORMAL
CHCM= Hb.100/hto= 14,85x100/45=29,7g/Dl BAJO
EP Medicina humana
PRÁCTICA 2B
DETERMINACIÓN DE PARÁMETROS
HEMATIMÉTRICOS I. CONOCIMIENTOS PREVIOS
Lo sé en
N ÍTEM forma
regular
1 ¿Cuáles son los Índices Hematimétricos?
2 ¿Cuáles son los valores normales de la Hemoglobina?
3 Según el VCM ¿Cuándo el eritrocito es microcítico?
4 Según la HCM ¿Cuándo el eritrocito es hipocrómico?
5 En la anemia ferropénica ¿Cómo son los eritrocitos?
II. FUNDAMENTOS TEÓRICOS
Los índices eritrocitarios también se denominan como índices hematimétricos o índices

corpusculares. Son una serie de parámetros que expresan diferentes características de los
hematíes.
Los índices eritrocitarios tradicionales son:
1. Volumen corpuscular medio (VCM)
2. Hemoglobina corpuscular media (HCM)
3. Concentración hemoglobínica corpuscular media (CHCM)
26
EP Medicina humana
Volumen Corpuscular Medio (VCM). Señala el volumen de cada eritrocito, expresado en

femtolitros (fl). El valor promedio normal (media ± 2 DS) es de 89.5 ± 5 fl. Se calcula
mediante la siguiente fórmula:
La exactitud varía si el recuento de glóbulos rojos se efectúa por el método manual o

automatizado. En los contadores electrónicos, este valor absoluto se mide simultáneamente
con el recuento de glóbulos rojos. El VCM es un valor útil para categorizar el tipo de anemia,
valores por encima de 96 fl indican macrocitosis, y microcitosis si es inferior a 76 fl. En
recién nacidos y niños el VCM está generalmente aumentado.
Concentración de Hemoglobina Corpuscular Media (CHCM). Indica la concentración media

de hemoglobina por litro de una masa de hematíes. Se calcula de la siguiente forma:
Se expresa en g/dl, siendo el promedio normal en el adulto de 32.5± 2.5 g/dl. Los valores en
los recién nacidos y niños no son significativamente más altos que lo normal.
Cuando su valor deriva de determinaciones manuales, es un índice valioso para averiguar la

presencia de hipocromía, si es menor de 31g/dl.
Hemoglobina Corpuscular Media (HCM). Indica la hemoglobina contenida en un hematíe y

se expresa en picogramos. Se calcula:
Siendo el valor normal 30.5 ± 2 pg.
El VCM y CHCM medidas por técnicas manuales estándar, miden el recuento de GR, Hb y Hto
directamente y los índices derivan indirectamente por cálculo utilizando estas mediciones.
27
EP Medicina humana
Estas mediciones en conjunto con el aspecto de los eritrocitos en el frotis ayudan a formarse
una idea apropiada acerca de las características de los eritrocitos.
El VCM y HCM basados en recuentos de GR visuales se consideran inexactos, y la única

medición confiable es la de CHCM. Los contadores electrónicos pueden medir el VCM y
CHCM, teniendo valores sumamente confiables.
Los nuevos índices eritrocitarios son:
1. Índice de distribución de los hematíes (IDH) o (IDE)
2. Anchura de la distribución de la hemoglobina (ADH)
Índice de distribución de los hematíes (IDH) o (IDE) describe el grado de heterogeneidad en

el tamaño de los hematíes, y tanto la destrucción como el déficit en su producción conllevan
un aumento de su valor. También se denomina anchura de la distribución eritrocitaria o ADE
(en inglés, RDW) y como CV-GR
28
EP Medicina humana
Los valores normales (Media ± 2 DS) = 13 ± 1.5%
Anchura de la distribución de la hemoglobina (ADH)
Es la desviación estándar de las concentraciones de hemoglobina de los hematíes. También

se la conoce como HDW y como ET-Hb.
Su valor normal está comprendido entre 2,2 y 3,2 g/dl.
29
EP Medicina humana
Haremos una analogía, para entenderlo mejor:
Imaginemos que los hematíes son cajas, y las partículas de hemoglobina son bolas dentro de las cajas.
Tenemos cajas de varios tamaños, y si quiero saber el tamaño medio de las cajas (hematíes),
tenemos el Volumen Corpuscular Medio (VCM) para decirnos ese valor, indicando si los
hematíes están en un estado macrocítico, normocítico o microcítico.
Si quiero saber el número medio de bolas en las cajas (cantidad de hemoglobina por
hematíe), tendré la Hemoglobina Corpuscular Media (HCM), indicando si los hematíes
están en un estado hipercrómico, normocrómico o hipocrómico.
Sin embargo, si quiero saber si las cajas están muy vacías o muy llenas de bolas (cantidad
de hemoglobina en relación al tamaño de los hematíes), que es un parámetro que dependerá
tanto del número de bolas en la caja como del tamaño de la caja, la Concentración de
Hemoglobina Corpuscular Media (CHCM).
Por último, si queremos saber si las cajas tienen tamaños muy discrepantes entre sí
(uniformidad o discrepancia en el tamaño de los hematíes), usaremos el índice de
Amplia distribución de células rojas en la sangre (RDW).
30
EP Medicina humana
CITOGRAMA
El citograma de eritrocitos se realiza mediante la combinación de las lecturas del HCM y el VCM;
proporciona la distribución de eritrocitos en 9 poblaciones. Los límites de los nueve cuadrantes se fijan a
partir de límites de normalidad, se grafica el VCM en el eje Y y la HCM en el eje X. A partir de esta
distribución se calcula el porcentaje de cada una de las 9 poblaciones: microcíticos normo, hipo o hiper
crómicos; normocíticos normo, hipo o hiper crómicos y macrocíticos normo, hipo o hiper crómicos.
¿Y cuál será el uso de esos índices?
Una vez evidenciada la anemia por el valor de la Hemoglobina, los índices hematimétricos
serán útiles para guiarnos hacia qué tipo de anemia está en curso en el momento. Es útil, por
lo tanto, para el diagnóstico diferencial de las anemias. Los patrones más comunes
observados y lo que indican son:
Microcítica / hipocrómica:
1. Anemia Ferropenica;
2. Anemia de la enfermedad crónica;
3. Anemia Sideroblástica.
Normocítica / normocrómica:
1. Anemia hemolítica;
2. Anemia de la enfermedad crónica;
3. Anemia de la enfermedad renal crónica;
4. Anemia aplásica;
5. Pérdida aguda de sangre.
31
EP Medicina humana
MACROCÍTICA:
1. anemia megaloblástica
III. CAPACIDADES
a. Explica las definiciones de volumen corpuscular medio y hemoglobina corpuscular

media
b. Calcula el volumen corpuscular medio y el volumen de hemoglobina corpuscular
media.
c. Investiga el uso de los parámetros hematimétricos para la práctica clínica
1. Calcula el VCM y el CHCM de un sujeto varón con un recuento de eritrocitos de

3
4´000,000/ mm , un hematocrito de 40% y una concentración de hemoglobina de
12 g/dl.
2. Los glóbulos rojos del individuo ¿Son normocitos, normocrómicos?
Valores de referencia:
PARAMETROS NEONATOS 1 MES - 11 AÑOS ADULTOS
RBC 4.1-6.7 X 10/6 3.8-5.3 X 10/6 4.5-5.5 X 10/6
HB 15-22 g/dl 10.5-14.4 g/dl M 12-16 g/dl

H 14-18 g/dl
HTO 44-66 % 32-43 % M 40-44 %
H 46-50 %
VCM 102-115 fl 72-90 fl 80-100 fl
HCM 33-39 pg 24-32 pg 27-32 pg
CHCM 28-36 g/dl 28-36 g/dl 32-36 g/dl
PLAQUETAS 150000-450000 150000-450000 150000-450000
32
EP Medicina humana
PRÁCTICA 2C
VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN GLOBULAR (VSG)
I. EVALUACIÓN DE CONOCIMIENTOS PREVIOS
Lo sé en
N ÍTEM forma
regular
1 ¿Qué es la velocidad de sedimentación globular?
2 ¿Cuáles son las tres etapas de la sedimentación globular?
3 ¿Qué es el fenómeno de rouleaux?
4 ¿Cuáles son los valores normales de la VSG?
5 ¿por qué se puede incrementar la VSG?
La VSG consiste en una prueba diagnóstica que consiste en la medición de la velocidad con la
que sedimentan los eritrocitos. Previamente se trata la muestra de sangre con anticoagulante
(citrato sódico) y se deja reposar durante una hora para observar los resultados
33
EP Medicina humana
La sedimentación globular se realiza en tres etapas:
1. Hemaglutinación o tendencia a formar “pilas de monedas”, conocido como

fenómeno de rouleaux.
2. Sedimentación de los hematíes hacia el fondo del recipiente.
3. Acúmulo de los hematíes en el fondo del recipiente.
De estas etapas la más importante es la primera, porque de esta dependerá la velocidad de

todo el proceso. Cuantos mayores sean los agregados más rápido se producirá la
sedimentación. En un individuo normal la VSG se mantiene constante gracias a un equilibrio
entre la albúmina y el resto de proteínas plasmáticas.
34
EP Medicina humana
La VSG es una prueba muy inespecífica, pero de gran utilidad ya que su aumento es siempre
un signo de enfermedad. La VSG también se correlaciona con la actividad de la enfermedad
y puede ser útil para el seguimiento de ciertas afecciones entre las que destacan los
procesos inflamatorios crónicos (artritis reumatoide, polimialgia reumática y tuberculosis).
III. CAPACIDADES
a. Explica la velocidad de sedimentación globular (VSG) y su importancia clínica.
b. Describe los procesos en que la VSG se altera.
c. Lee la VSG de un compañero.
d. Investiga el uso del VSG para la práctica clínica
35
EP Medicina humana
IV. MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS.

• Sangre total.
• Solución anticoagulante (citrato trisódico 109 mmol/L o 3.2%)
• Tubo o Pipeta de eritrosedimentación, longitud 100 mm y calibre 2,5 mm. En su superficie
tiene grabada la escala en mm.
• Soporte que inmovilice la pipeta en posición vertical.
• Cronómetro.
1. Extraemos una muestra de sangre venosa.

2. Depositamos y mezclamos en un tubo con citrato sódico. En proporción 1:10.
3. Depositamos la muestra con ayuda de una pipeta de pasteur en un tubo de

eritrosedimentación y esta sobre un soporte de manera vertical.
4. Tomar registró del tiempo y en una hora observamos los resultados.
5. Registrar la VSG en milímetros / hora.
Resultados
Identificación de Velocidad de sedimentación Observaciones
Muestra globular (mm)
Interpretación de los resultados
La VSG según la técnica utilizada en esta práctica en niños es inferior a 10 mm. En adultos
varones es menor de 7 mm. En mujeres adultas menor de 15 mm. La VSG varía según edad y
sexo. Hay situaciones fisiológicas que también la pueden modificar como el embarazo. En
condiciones patológicas el aumento de proteínas plasmáticas sobretodo Ig M propios de
procesos agudos, enfermedades reumáticas y la presencia de para proteínas determinan un
aumento de la hemaglutinación y por tanto aumento de la VSG. La VSG es influenciada por
la edad, sexo, ciclo menstrual, embarazo y drogas.
Los valores normales con el método estándar son los siguientes:
36
EP Medicina humana
Varones de 17- 50 años 1 - 7 mm
Mayores de 50 años 2 - 10 mm
Mujeres de 17 – 50 años 3 - 9 mm
Mayores de 50 años 5 - 15 mm
V. INVESTIGACIÓN
1) ¿Qué es el hematocrito?
Es el porcentaje que ocupa la fraccion solida de una muestra de sangre
anticoagulada.
2) ¿Cuáles son los elementos formes de la sangre?

Eritrocito, leucocito, trombocito y plasma.
3) ¿Cuál es el significado de la capa leucocitica después de centrifugar la muestra

de sangre?
La capa leucocitica es la fracción de una muestra de sangre anticoagulada
que contiene la mayoría de los GB y plaquetas.
4) ¿Qué porcentaje del glóbulo rojo es ocupado por la hemoglobina?

33,3%
5) ¿Cuáles son los valores normales de la hemoglobina?

Hombre 13,8 – 17,2g/dL; mujeres 12,1 – 15,1g/dL
6) ¿Cuáles son los índices hematimetricos?

VCM, HCM, CHCM, VSG
7) ¿Cules son los valores normales de la hemoglobina?

Hombre 13,8 – 17,2g/dL; mujeres 12,1 – 15,1g/dL
8) Según el VCM ¿Cuándo el eritrocito es microcitico?

VCM menor que 80fl
9) Según la HCM ¿Cuándo el eritrocito es hipocromico?

HCM menor que 27pg
10) ¿En qué situaciones clínicas se alteran los índices hematimetricos? Mencione 2
ejemplos por cada índice
Anemia microcistica con VCM menor de 80fl
Anemia macrocistica con VCM mayor que 100fl
11) En la anemia ferropénica ¿Cómo son los eritrocitos?

Microcistica
12) ¿Qué es la velocidad de sedimentación globular?
Es medir la velocidad con la que sedimentan los GR por el tiempo.
13) ¿Cuáles son las tres etapas de la sedimentación globular?

Hemaglutinación, sedimentación y acumulo de depósitos en el fondo.
14) ¿Qué es el fenómeno de rouleaux?

Es cuando los hematíes tienen un aspecto anómalo cuando se observan en
microscopio, hemaglutinación o tendencia formar “pilas de monedas”.
15) ¿Cuáles son los valores normales de la VSG?

Niños 10mm; hombres menos de 7mm; mujeres menos de 15mm
16) ¿Por qué se puede incrementar la VSG?

Embarazo, condiciones de patología, tuberculosis, artritis reumatoides,
polimialgia reumática, etc
BIBLIOGRAFIA
https://es.wikipedia.org/wiki/Fen%C3%B3meno_de_Rouleaux
Guia práctica del sistema Hemato Inmunologico de la Upeu
37
EP Medicina humana
PRÁCTICA 3
MÉDULA ÓSEA
Lo sé en
N ÍTEM forma
regular
1 Según las etapas de la vida ¿en dónde se realiza

la hematopoyesis?
2 ¿De dónde se puede extraer la medula ósea?
3 ¿Qué elementos encontramos en la medula ósea?
4 ¿Cuáles son los parámetros a evaluar en una biopsia

de medula ósea?
5 ¿Cuál es la celularidad normal de la médula ósea en

una persona de 20 años?
La médula ósea es el tejido

esponjoso blando que se
encuentra en el interior
hueco de los huesos
largos. En los adultos,
médula en los huesos
grandes produce células
de sangre nueva. Médula
ósea forma alrededor de
4% del peso corporal total
(alrededor de 2,6 kg en un
adulto sano).
Tipos de médula ósea

Hay dos tipos de médula ósea:
1. médula roja que se encarga de producir glóbulos rojos, glóbulos blancos y plaquetas
2. médula amarilla consisten principalmente en las células de grasa
38
EP Medicina humana
Para la mayoría de las personas, la médula ósea comprende 3.5% a 6% del peso corporal
total. Es el principal órgano de la hematopoyesis y es un órgano linfoide primario y
secundario que proporciona un entorno para el desarrollo celular y la interacción
inmunológica. La médula consiste en células hematopoyéticas y tejidos adiposos y
estromales. El estroma está compuesto por tejido conjuntivo y estructuras vasculares que
incluyen arteriolas, vénulas, capilares y un sistema de sinusoides.
La hematopoyesis en la médula ósea comienza en el tercer y cuarto mes de gestación y es

el principal sitio de hematopoyesis después de 6 meses. En el primer año de vida, la
hematopoyesis ocurre a través del esqueleto axial y radial. A la edad de 25 años, la
hematopoyesis se limita a los huesos planos del esqueleto central y la cuarta parte proximal
de los ejes del fémur y el húmero. La hematopoyesis consiste en dos linajes celulares
principales, mieloides y linfoides. Su precursor común es una célula madre pluripotente de
médula ósea. La diferenciación y la maduración de los cuatro tipos de células mieloides
(granulocitos, monocitos, eritrocitos y megacariocitos) y algunas células linfoides se
producen en la médula ósea; la mayoría de los linfocitos, sin embargo, se diferencian y
maduran principalmente fuera de la médula ósea.
39
EP Medicina humana
Todos los tipos de células mieloides tienen un progenitor común. El primer precursor
morfológicamente reconocible de cada uno de los cuatro linajes mieloides es un blasto. Los
neutrófilos se pueden dividir en dos grupos funcionales en la médula: los grupos mitótico y
de almacenamiento. Los primeros precursores (mieloblastos, promielocitos y mielocitos)
están presentes en el grupo mitótico durante 2 a 3 días, donde se multiplican y maduran.
Las células del conjunto mitótico se encuentran principalmente en ubicaciones
paratrabeculares y perivasculares. La maduración adicional ocurre en el grupo de
almacenamiento, que está compuesto de metamielocitos, bandas y neutrófilos
segmentados. Normalmente, las células permanecen en el grupo de almacenamiento
durante aproximadamente 5 a 7 días. Los neutrófilos se mueven de la reserva de
almacenamiento de forma unidireccional a la sangre y finalmente a los tejidos
Los monocitos tienen un origen estrechamente relacionado con el de los neutrófilos, pero
las etapas de maduración están menos definidas. Los histiocitos, la forma tisular de los
monocitos, se observan comúnmente en la médula ósea. A medida que los precursores
eritroides maduran en la médula ósea, se vuelven más pequeños y más ricos en
hemoglobina. Los primeros precursores se encuentran en islas celulares distribuidas
40
EP Medicina humana
aleatoriamente que son generalmente perivasculares. Los precursores eritroides nucleados

más maduros extruyen sus núcleos para convertirse en reticulocitos, que luego pasan un
total de 1 a 2 días en la médula ósea mientras su citoplasma continúa madurando. Los
megacariocitos están normalmente presentes como células individuales que se distribuyen
de forma esencialmente aleatoria por toda la médula ósea, aunque normalmente no
ocupan una ubicación paratrabecular. A medida que maduran, se vuelven progresivamente
más grandes y aumentan sus lóbulos nucleares.
La médula ósea proporciona un entorno para el desarrollo de linfocitos e interacción

inmunológica. Un número variable de precursores de células B (hematogonas) están
presentes en la médula ósea, especialmente en los niños. Sin embargo, la mayoría del
desarrollo de linfocitos ocurre en sitios extramedulares, especialmente en los ganglios
linfáticos. Los marcadores inmunológicos pueden caracterizar las etapas de maduración
linfoide, pero una secuencia de desarrollo morfológico no se reconoce en los linfocitos en
la medida en que se encuentra en las células mieloides. Los linfocitos comprenden
aproximadamente el 10% de las células de la médula ósea en adultos normales. Las células
41
EP Medicina humana
plasmáticas se encuentran principalmente en una distribución perivascular y representan

aproximadamente del 1% al 2% de las células hematopoyéticas de la médula ósea.
Los osteoblastos y los osteoclastos se encuentran a lo largo de la superficie endostial de las

trabéculas óseas en las biopsias, pero son poco frecuentes en los frotis de aspirado
normal, excepto en los niños; se pueden encontrar en aspirados en varias condiciones
patológicas. Los mastocitos se encuentran adyacentes a las células endoteliales y en las
localizaciones perivasculares y son un componente menor de la médula ósea normal
Biopsia de medula ósea

La
biopsia de médula ósea y la aspiración de médula ósea son procedimientos que permiten extraer y
analizar la médula ósea (el tejido esponjoso que se encuentra en el interior de algunos de los huesos
más largos). La aspiración y la biopsia de médula ósea pueden indicar si la médula ósea se encuentra
sana y si produce las cantidades normales de células sanguíneas. Se utilizan estos procedimientos
para diagnosticar y controlar las enfermedades de la sangre y de la médula, como algunos tipos de
cáncer y fiebre de origen desconocido. La aspiración y la biopsia de médula ósea suelen realizarse al
mismo tiempo. Juntos, estos dos procedimientos pueden denominarse «estudio de médula ósea»
42
EP Medicina humana
ESQUEMA BÁSICO DE VALORACIÓN DE LA BIOPSIA DE MÉDULA ÓSEA

1. Celularidad: Relación tejido hematopoyético/tejido adiposo
2. Arquitectura: Topografía de las progenies
3. Relación mieloide/eritroide
4. Características de la serie eritroide
5. Características de la serie mieloide
6. Características de la serie megacariocitica
7. Presencia de tejido linfoide y células plasmáticas. Fenotipo de los linfocitos
8. Evaluación de la trama reticular
9. Evaluación del hierro medular
Relación tejido hematopoyético/tejido adiposo
a. Calcula la cantidad de tejido hematopoyético y de tejido adiposo en el cilindro óseo.

Se expresa en %
b. Relación inversa con la edad (Regla practica: 100 – edad)
Mas % del esperado para la edad: hiperplasia

Menos % del esperado para la edad: hipoplasia
43
EP Medicina humana
Topografía de las progenies
La médula ósea es un órgano con una disposición arquitectural determinada y su

valoración en un parámetro importante para el diagnóstico de las biopsias medulares.
En la médula normal la eritropoyesis se dispone en agregados discretos en el interior del

espacio intramedular, fácilmente reconocibles por el tamaño y forma redondeada de sus
núcleos y por la densidad elevada de la cromatina de los eritroblastos (“núcleos en tinta
china”). La eritropoyesis puede presentar una hiperplasia extrema en otras dos situaciones
que siempre deben recordarse: las anemias hemolíticas y las anemias megaloblásticas.
44
EP Medicina humana
La serie blanca no se dispone de una forma tan estructurada como la serie roja; en adultos
sanos las formas inmaduras se disponen en las zonas paratrabeculares y también alrededor
45
EP Medicina humana
de los vasos (arteriolas y sinusoides) y desde allí las células mieloides van madurando hacia
el espacio intramedular donde se pueden encontrar entremezcladas con los agregados
eritroides y los megacariocitos, de manera que se pueden delimitar dos zonas, una
paratrabecular ocupada por mieloblastos, promielocitos y mielocitos y otra en el interior
del espacio intramedular donde predominan los metamielocitos, cayados y segmentados.
Esta distribución en muchas ocasiones resulta difícil de apreciar debido al propio dinamismo
del tejido medular, capaz de movilizar con rapidez las células mieloides maduras en caso
necesario y por otra parte a la sensibilidad de la población mieloide a los fármacos
mielotóxicos. Por estos motivos a veces resulta difícil comprobar la normal distribución de
la mielopoyesis.
46
EP Medicina humana
Los megacariocitos se encuentran distribuidos de forma regular en el tejido medular,

dispuestos por lo general aislados y en relación o próximos a sinusoides medulares.
Su número es muy variable de manera que el rango de normalidad en cuanto a
número y ploidía se sitúa en un rango muy amplio.
En resumen:
1. Serie Mieloide:
a. Paratrabecular
b. Perivascular
2. Serie Megacariocitica
a. perisinusoidal
3. Serie eritroide
Cerca de estructuras vasculares, con macrófago central (distribuidas en islas “al azar)
47
EP Medicina humana
Relación mieloide/eritroide: Proporción de las series

En condiciones normales la mielopoyesis supera a la eritropoyesis en una razón de 3 a 1.
Características de las series
Presencia de tejido linfoide y células plasmáticas. Fenotipo de los linfocitos
La médula ósea es uno de los principales órganos de la linfopoyesis y el principal productor

de anticuerpos del organismo. Aunque los linfocitos pueden suponer una fracción
importante en el recuento de los aspirados, no suelen observarse agregados en las biopsias
salvo en contadas ocasiones (siempre en función de la calidad y tamaño de las biopsias) y
sólo muy raramente se observan folículos linfoides. Los linfocitos normales se observan
dispersos por el intersticio medular de forma homogénea, con una abundancia algo mayor
alrededor de capilares y arteriolas y son predominantemente células T.
48
EP Medicina humana
Linfocitos y células plasmáticas
La médula ósea es uno de los principales órganos de la linfopoyesis y el principal productor

de anticuerpos del organismo. Aunque los linfocitos pueden suponer una fracción
importante en el recuento de los aspirados, no suelen observarse agregados en las biopsias
salvo en contadas ocasiones (siempre en función de la calidad y tamaño de las biopsias) y
sólo muy raramente se observan folículos linfoides. Los linfocitos normales se observan
dispersos por el intersticio medular de forma homogénea, con una abundancia algo mayor
alrededor de capilares y arteriolas y son predominantemente células T.
Las células plasmáticas también suponen una parte apreciable en los recuentos medulares
suelen mantenerse por debajo del 15% de la celularidad global. En condiciones normales se
disponen alrededor o próximas a estructuras vasculares. Es muy importante recordar que su
número va en aumento con la edad de los pacientes de manera que a partir de los 60 años y
en especial en ancianos pueden ser muy numerosas
Evaluación de la trama reticular
Las fibras de reticulina normalmente están dispuestas como líneas dispersas sin intersecciones
Evaluación del hierro medular

Se observa el depósito de hierro, con la coloración azul de Prusia
49
EP Medicina humana
III. CAPACIDADES
a. Identifica en imágenes de biopsia y aspirado medular, las células de cada serie.

b. Reconoce una imagen anormal de un estudio de medula ósea.
c. Identifica lo anormal en un informe de biopsia de medula ósea

Guía de practica
Cartillas plastificadas don imágenes de biopsia y aspirado de médula ósea
Experimento 1
El docente muestra las imágenes de la biopsia de la medula ósea y el estudiante

reconoce las células de cada serie y realiza una evaluación según los criterios
señalados anteriormente
Experimento 2
El siguiente informe una biopsia de un paciente de 75 años ¿es normal? ¿por qué?
V. INVESTIGACIÓN
1) Según las etapas de la vida ¿en dónde se realiza la hematopoyesis?

Fase mesoblastica, fase hepática e fase medular.
2) ¿De donde se puede extraer la medula osea?

Puede extraer de los huesos largos y huesos planos.
3) ¿Qué elementos encontramos en la medula osea?
Mielocitos, eritrocitos, osteoblastos, adipocitos, eosinofilos, osteoblastos,
osteoclastos.
4) ¿Cuáles son los parámetros a avaluar en una biopsia de medula osea?

Celularidad, arquitectura, relación mieloide/eritrocito, característica eritrocede,
característica mieloide, característica megacariocito, trama reticular
5) ¿Cuál es la celularidad normal de una medula ósea en una persona de 20 años

60-70%
6) ¿Cómo sera la biopsia de medula ósea de un paciente con leucemia?

Grande cuantidad de leucocitos anômalos. Son leucocitos enfermos que
pierden su función de defesa del organismo.
7) Cómo será la biopsia de medula ósea de un paciente con anemia aplásica?

Normalmente la biopsia de medula ósea muestra acelularidad.
8) En condiciones normales ¿Quién es mayor la eritropoyesis o la mielopoyesis?

¿En que relación?
En condiciones normales la mielopoyesis supera a la eritropoyesis en una
razon de 3:1.
50
EP Medicina humana
PRÁCTICA 4
CASOS I
Lo sé en
N ÍTEM forma
regular
¿Cuál es el rol del hierro, del folato y de la vitamina
1
B12
en la hematopoyesis?
2
¿Qué es anemia?
3
¿Cuáles son los tres mecanismos que pueden producir
anemia?
4 ¿Cuáles son los índices hematimétricos de
los reticulocitos?
5 Mencione 3 anemias por disminución de
la hematopoyesis
La anemia se define como una disminución en el número de glóbulos rojos (o hematíes) en la

sangre o en los niveles de hemoglobina respecto a los valores normales.
La principal función de los glóbulos rojos es el transporte de oxígeno en la sangre y su liberación

en los distintos tejidos. El oxígeno se transporta en el interior del hematíe unido a la hemoglobina.
La anemia puede ser la manifestación de una enfermedad hematológica o una

manifestación secundaria a muchas otras enfermedades .
52
EP Medicina humana
III. CAPACIDADES
a. Expone el caso
b. Describe las causas, incidencia y factores de riesgo del

caso c. Explica la fisiopatología del caso
d. Interpreta resultados de laboratorio
a. Casos 1,2 y 3
b. Los estudiantes investigan el caso, proponen las causas, los factores de riesgo, la
fisiopatología, interpretan los resultados de laboratorio y lo exponen
CASO 1
CASO 2
CASO 3
V. INVESTIGACIÓN
1. ¿Cuál es el rol del hierro, del folato y de la vitamina B12 en la hematopoyesis?
La falta de ac folico, vitamin B12 y hierro muy grave causa transtornos de
maduracion de los eritrocitos, el hematie no es capaz de ampliar su funcion.
2. ¿Qué es anemia?
La anemia es una afección en la cual careces de suficientes glóbulos rojos
sanos para transportar un nivel adecuado de oxígeno a los tejidos del cuerpo.
3. ¿Cuáles son los tres mecanismos que pueden producir anemia?

Cuando hay una deficit en la produccion de globulos rojos, hemolisis y perdida
grande de sangre.
4. ¿Cuáles son los índices hematimétricos de los reticulocitos?
1% a 2%
5. Mencione 3 anemias por disminución de la hematopoyesis

Ferropenica, perniciosa y por enfermedad cronica.
BIBLIOGRAFIA
https://www.mayoclinic.org/es-es/diseases-conditions/anemia/symptoms-causes/syc-20351360
53
P Medicina humana
PRÁCTICA 5
DETERMINACIÓN DEL TIEMPO DE SANGRÍA, TIEMPO DE COAGULACIÓN.
ACCIÓN ANTICOGULANTE IN VITRO
Lo sé en Soy capaz
No sé Lo sé
N ÍTEM forma de
Nada Poc
regular explicarlo
o
1 ¿Qué acción tiene un Anticoagulante?
2 Según su mecanismo de acción ¿Cómo se clasifican los

anticoagulantes?
3 ¿Cuántos son los factores intervienen en la coagulación?
4 ¿Cuál es la enfermedad en la que hay deficiencia del factor VIII?
5 ¿De qué está compuesto el anticoagulante EDTA?
Se denomina coagulación al proceso por el cual la sangre pierde su liquidez

convirtiéndose en un gel, para formar un coágulo. Este proceso potencialmente
desemboca en la hemostasia, es decir, en el cese de la pérdida de sangre desde un vaso
dañado, seguida por su reparación. El mecanismo de coagulación involucra la activación,
adhesión y agregación plaquetaria, junto con el depósito y maduración de la fibrina.
55
EP Medicina humana
Durante la vida, la coagulación ocurre fuera de los vasos, ya sea dentro del organismo,
como en los hematomas, ya sea fuera de él, como en el tubo de ensayo. En ambos
casos el mecanismo de la coagulación se desencadena por liberación de tromboplastina
(tromboplastinógeno) principalmente de las plaquetas a medida que se destruyen al
adherirse a los tejidos y paredes del tubo
CAPACIDADES
56
EP Medicina humana
a. Describe las técnicas para la medición del tiempo de coagulación y sangría

b. Ejecuta la técnica de tiempo de sangría
c. Describe la cascada de la coagulación.
d. Experimenta con anticoagulantes en muestras sanguíneas
e. Compara la actividad anticoagulante de diversos anticoagulantes
f. Explica la farmacodinamia de los anticoagulantes.
IV. MATERIAL Y MÉTODO
Tiempo de Sangría
Al realizar una punción de tamaño y profundidad estandarizados, la acción conjunta de los

vasos y plaquetas detendrá el sangrado en un corto tiempo, el cual es medido y comparado
con el normal.
El tiempo de sangría mide la interacción de las plaquetas con los vasos sanguíneos y la
posterior formación del coágulo o tapón hemostático. Mide adecuadamente la fase vascular
de la coagulación.
Se toma con una leve punción en el antebrazo o lóbulo de la oreja (Duke, esta
descontinuado, pero a veces se solicita y por esto es necesario conocerlo), recogiendo las
gotas de sangre en un papel de filtro hasta que espontáneamente cesan. Se mide el tiempo
que transcurre entre la aparición de la primera gota de sangre y la última.
El método de Ivy es el más recomendado actualmente y sus valores referenciales van de 3 a

6 minutos. En la Toma de Muestra es fundamental saber si el paciente estuvo ingiriendo
fármacos anticoagulantes (ejemplo aspirina) o antiinflamatorios no esferoidales (por
ejemplo ibuprofeno, naproxeno).
El tiempo de sangría es una prueba de tamizaje para los desórdenes cualitativos y

cuantitativos de las plaquetas y para la enfermedad de von Willebrand, independientes de
los mecanismos de coagulación, aunque en los daños severos de estos, también suele
resultar prolongado. El tiempo de sangría anormal evidencia el defecto en la fase
plaquetaria y/o en fase vascular.
Materiales:
• Lancetas estériles
• Torundas de algodón con alcohol (70%)
• Papel filtro.
57
EP Medicina humana
• Un Cronometro
Procedimiento
• Método de Duke:
1. Seleccione uno de los lóbulos de la oreja del paciente (libre de lesiones), dar un masaje
suave (esto favorece a la circulación) hasta que la zona este tibia.
2. Limpiar el lóbulo de la oreja con una torunda de algodón con alcohol dejar secar la región
limpiada.
3. Hacer una punción con la lanceta en el sitio elegido, al mismo tiempo echar a andar el
cronometro. La punción debe hacerse en un solo movimiento, y sin hacer movimientos
laterales para no rasgar la piel.
4. Sin tocar la piel ni presionar se seca la gota de sangre que salga por el sitio de la punción
con papel filtro cada 15 segundos.
5. Cuando el papel filtro ya no absorba sangre parar el cronometro.
6. Anotar el tiempo.
RESULTADO
N° TECNICA TIEMPO DE SANGRÍA OBSERVACIONES
(Valor referencial : 1 – 3
1 Método de Duke
minutos)
a) Acción anticoagulante in – vitro
La sangre circula por el interior de los vasos sanguíneos en forma líquida mediante un flujo
laminar. Cuando un vaso es lesionado, la sangre tiende a salir de su continente, lo que pone
en marcha una serie de mecanismos que intentan evitarlo, obturando el lugar de salida de la
sangre con un tapón hemostático, y que recibe el nombre de hemostasia.
El trauma vascular: Estimula una respuesta simpática vasoconstrictora y a la liberación de

sustancias como la serotonina y tromboxano; la puesta en contacto de las plaquetas con
las fibras colágenas promueve cambios físicos en su constitución al aumentar su viscosidad
favoreciendo su adhesividad, fenómeno en el que interviene también el tromboxano.
Paralelamente se produce la fase plasmática de la coagulación que consiste en la activación

sucesiva de los factores de la coagulación, sea por la vía intrínseca o extrínseca que tienen
como común la activación del factor X, el factor Xa promueve la conversión de protrombina
(factor II) en trombina que es una proteasa sérica y que cataliza la conversión de fibrinógeno
(factor I), proteína plasmática soluble, en fibrina insoluble, que inicialmente forma una red
laxa de bandas entrelazadas, que luego se convierte en un agregado denso, apretado, por la
58
EP Medicina humana
formación de enlaces covalentes entrecruzados catalizada por el factor XIII activado y en

presencia de Ca++. Esta red sólida de fibrina sirve de soporte al tapón hemostático, atrapa a
las plaquetas y al resto de elementos formes constituyéndose así el coágulo definitivo que
tapona la herida vascular.
Existe un equilibrio entre las reacciones que favorecen y las que limitan la coagulación
sanguínea dentro de los vasos sanguíneos. Estas incluyen la interacción entre el efecto
agregador plaquetario del tromboxano A2 y el efecto contrario de la prostaciclina.
La antitrombina III, es una proteasa circulante que bloquea la actividad coagulante de las
proteasas de serina en el sistema de coagulación. Esta acción es facilitada por la heparina,
anticoagulante endógeno producido por los mastocitos o células cebadas, mezcla de
polisacáridos de alto peso molecular que promedian 15,000 a 18,000.
El endotelio vascular intacto de los vasos sanguíneos funciona también de manera activa
previniendo la extensión de coágulos al interior de los vasos, gracias a la producción de
trombomodulina, proteína fijadora de trombina, este complejo activa a la proteína C que
junto con la proteína S inactiva los factores V y VIII.
La activación sucesiva de los factores de la coagulación, conocida como cascada de la

coagulación, tiene como final la conversión de fibrinógeno en fibrina, es decir convertir la
sangre líquida en sólida; esto sólo es posible si están presentes todos y cada uno de los
factores de la coagulación.
En este axioma basan su acción los anticoagulantes.
Anticoagulantes: Son sustancias que impiden o retardan la normal coagulación de la sangre.
59
EP Medicina humana
De acuerdo a su mecanismo de acción se clasifican en:
Anticoagulantes Directos: Son los que actúan interviniendo directamente en la cascada de

la coagulación, inactivando factores o bloqueando alguno de sus pasos lo que impide la
conversión de fibrinógeno en fibrina.
Agentes descalcificantes: que fijan al Ca++ de la sangre extraída in-vitro: los oxalatos y
citratos que forman sales insolubles con el Ca++, o agentes quelantes que fijan al calcio
iónico, acción in-vitro.
Heparina: muco polisacárido de peso molecular alrededor de 16,000 daltons, se
encuentra almacenada en los mastocitos o células cebadas, contribuye a la homeostasis
de la sangre por su acción anticoagulante. Es inactiva por la heparinasa.
La heparina exógena (liquemine) se extrae el pulmón del ganado bovino, y tiene
estructura química similar a la endógena. Actualmente contamos con heparina de bajo
peso molecular como la enoxaparina (3,500 a 5,500), tedelparina (4,000 a 6,000),
nadoparina (4,000 a 5,000) entre otras.
Mecanismo de acción: Bloquea la conversión de protrombina en trombina.

Antagoniza la trombina.
Estimula la acción de la antitrombina III.
No actúan por vía oral debido a su estructura química, por lo que se administra por vía
parenteral: EV o SC. No se recomienda la vía IM por la posibilidad de producir
hematomas. La sobredosis se maneja administrando Sulfato de protamina.
Anticoagulantes Indirectos: también llamados A.C. orales o sintéticos o anti-vitamina K, no

intervienen directamente en la cascada, sino que al disminuir la producción de algunos
factores, bloquea la conversión de fibrinógeno en fibrina al no completarse la cascada de la
coagulación.
Su mecanismo de acción consiste en antagonizar a la vitamina K en el hígado, lo que

bloquea la producción de los factores II, VII, IX y X que requieren la presencia de vitamina K
para su elaboración. Carece de acción sobre estos factores ya formados, lo que explica su
largo período de latencia que puede llegar hasta 48 horas, tiempo que lleva consumir los
factores previamente formados. Comprende:
Cumarinas: bishihidroxicumarina o dicumarol, biscumacetato de etilo, warfarina

sódica, acenocunarol, etc.
Inandionas: fenindiona, difenadiona y anisindiona.
La administración es por vía oral. Se distribuyen unidas a las proteínas plasmáticas.

Atraviesan la barrera placentaria y pasan a la leche materna, en mucha menor medida al
líquido céfalo raquídeo. Se metabolizan en el hígado y se eliminan por vía renal.
Otra clasificación de los fármacos anticoagulantes: Por su modo de acción
60
EP Medicina humana
Acción in vitro: Sustancias descalcificantes

Acción in-vivo: Anticoagulantes orales o anti-vitamina K.
Acción in-vitro e in-vitro: Heparina.
Experimento
A. Fármacos:
Heparina
Solución de Warfarina al 1 %
Solución de Citrato de Sodio al 5 %
Solución de Oxalato de Sodio al 2
%
B. Materiales:
Gradilla.
Seis tubos de ensayo.
Jeringa descartable de 10 cc.
Aguja N° 21.
Alcohol.
Algodón.
Ligadura.
EXPERIMENTO Nº 2: ACTIVIDAD ANTICOAGULANTE
PROCEDIMIENTOS
1. Colocar 06 tubos de ensayo en Baño María a 37° C, conteniendo las siguientes soluciones:
TUBO Nº 1: 0,05 ml de Heparina sódica.
TUBO Nº 2: 0,10 ml de Dicumarol (Warfarina) Sol 1 %.
TUBO Nº 3: 0,10 ml de Citrato de Sodio Sol 5 %.
TUBO Nº 4: 0,10 ml de Citrato de Sodio Sol 5 % y 0,20 ml de Cloruro de calcio al 10%.
TUBO Nº 5: 0,10 ml de Oxalato de Potasio Sol 2 %.
TUBO Nº 6: Control (Sin solución anticoagulante).
2. Extraer la sangre de un alumno voluntario, realizando la toma de muestra con previa

asepsia local en venas del brazo, usando aguja Nº 21 y jeringa estéril.
3. Registrar con el cronometro el tiempo de coagulación para cada fármaco, que se inicia
desde la extracción de muestra respectiva.
4. Colocar un volumen de 1 ml de sangre en cada tubo, invirtiendo a fin de que se mezcle

con el fármaco.
61
EP Medicina humana
5. Colocar los tubos de ensayo en el baño maría a 37º C.
6. Observar la coagulación agitando e invirtiendo lentamente los tubos y cuando aparezca la

acción, anotar el tiempo cuando se forma el coágulo completo.
RESULTADOS
COAGULANTES Y ANTICOAGULANTES
TIEMPO DE
TUBOS FÁRMACO OBSERVACIONES
COAGULACIÓN
1 Heparina sódica
2 Warfarina
3 Citrato de Sodio
4 Citrato de Sodio + Ca Cl
5 Oxalato de calcio
(Valor referencial : 5 – 10
6 Control
minutos)
V. INVESTIGACIÓN
1.Marque verdadero (V) o falso (F) a las siguientes proposiciones:

El fibrinógeno produce la agregación de las plaquetas ( V)

El factor de Von Willebrand es producido en el hígado ( F)

El factor de Von Willebrand media la adhesión plaquetaria ( V)
2.¿Qué es la hemostasia y describa las 4 fases que tiene?

Es el conjunto de mecanismos que el organismo emprega para coibir la
hemorragia. Fase 1: Adesion plaquetaria, Fase 2: Activacion de las
plaquetas, Fase 3: Secretacion, Fase4: Agregacion plaquetaria
3. Describa el mecanismo de acción de la heparina

La heparina eutraliza la trombina evitando la conversión del fibrinógeno a
fibrina. Previene la formación de un coágulo estable por inhibición del factor
estabilizador de la fibrina.
4.Describa el mecanismo de acción de la Warfarina.
La warfarina produce su efecto anticoagulante por la inhibición de la epóxido
reductasa de la vitamina K, la enzima que cataliza el paso de la vitamina K oxidada
a su forma reducida. La vitamina K reducida induce la carboxilación de los residuos
de glutamato de los factores II, VII, IX y X de la cascada de la coagulación.
5. Esquematice el proceso de hemostasia
BIBLIOGRAFIA
https://www.vademecum.es/principios-activos-heparina-c05ba03
https://accessmedicina.mhmedical.com/content.aspx?bookid=1552&sectionid=90376354
https://es.khanacademy.org/science/high-school-biology/hs-human-body-systems/hs-body-structure-
and-homeostasis/a/homeostasis
62
EP Medicina humana
PRÁCTICA N° 7
“IDENTIFICACIÓN DE ELEMENTOS FORMES – SERIE BLANCA”
I. CONOCIMIENTOS PREVIOS
Lo sé en
forma
N ÍTEM Nada Poco explicarlo
regular
(+ó-)
1 ¿Qué es frotis de sangre periferica?
2 ¿Cuantos tipos de glóbulos blancos conoce?
3 ¿Cuál es el valor normal de los leucocitos en sangre?
4 ¿Qué es un Hemograma?
5 ¿Para qué se usa la coloración WRIGHT?
Los leucocitos son un conjunto heterogéneo de células sanguíneas que son ejecutoras de la
respuesta inmunitaria, interviniendo así en la defensa del organismo contra sustancias
extrañas o agentes infecciosos (antígenos). Se originan en la médula ósea y en el tejido
linfático. Los leucocitos son producidos y derivados de unas células multipotenciales en la
64
EP Medicina humana
médula ósea, conocidas como células madre hematopoyéticas. Los glóbulos blancos se
encuentran en todo el organismo, incluyendo la sangre y el tejido linfoide.
Existen cinco diferentes y diversos tipos de leucocitos, y varios de ellos (incluyendo

monocitos y neutrófilos) son fagocíticos. Estos tipos se distinguen por sus características
morfológicas y funcionales.
El número de leucocitos en la sangre suele ser un indicador de enfermedad. El recuento

normal de glóbulos blancos fluctúa entre 4 y 11 x 109/L, y suele expresarse como 4000-11
000 glóbulos blancos por microlitro. Conforman, aproximadamente, el 1% del volumen
sanguíneo total de un adulto sano. Al aumento del número de leucocitos por arriba del
límite superior se le llama leucocitosis, y al decrecimiento por debajo del límite inferior se le
llama leucopenia.
Hemograma
En medicina, el hemograma, CSC (Conteo Sanguíneo Completo) o biometría hemática es
uno de los elementos de diagnósticos básicos. Es un cuadro de fórmulas sanguíneas en el
que se expresan cantidad, proporción y variaciones de los elementos sanguíneos. El análisis
consiste en:
 Cantidad de eritrocitos, hematocrito, hemoglobina e índices eritrocitarios.
 Recuento y fórmula leucocitaria.
 Cantidad de plaquetas (en algunos laboratorios este valor no se incluye en el hemograma y debe
ser solicitado aparte).
Ejemplo de resultados de laboratorio de un Hemograma:
65
EP Medicina humana
En general, los estudios de sangre se hacen en una extensión o frotis sanguíneos, obtenidas
por la distribución de la sangre en un soporte como las láminas portaobjeto
En la práctica médica, la diferenciación de los elementos formes como leucocitos es
importante para establecer el diagnostico de algunas patologías relacionadas.
Por lo tanto, la evaluación microscópica y morfológica de extendidos de sangre constituye
la base del diagnóstico hematológico, que se complementa con la determinación de enzimas
características y otros componentes celulares mediante técnicas cito químicas. En esta
sesión observaremos las diferentes morfologías de las células de la sangre.
Tinción de Wright
Esta coloración es conocida como policromática debido a que produce varios colores. Es una
solución de alcohol metílico de un colorante ácido (eosina) y otro básico (azul de metileno).
El alcohol sirve como un fijador del frotis sanguíneo al portaobjetos. El amortiguador, que
consiste en una solución tamponada, mantiene el pH del colorante y favorece la mejor
absorción por los diferentes componentes celulares.
66
EP Medicina humana
Materiales:
 Colorante de Wright: para 100 mL se requiere de colorante de Wright (0.3g), metanol
(97.0 mL) y glicerol (3.0 mL).
 Disolver en un mortero el colorante con el glicerol.
 Una vez disuelto se adiciona el metanol trasvasándolo a un frasco oscuro.
 Agitar. Filtrar antes de usar.
 Solución amortiguadora tamponada: en un litro de agua destilada se agregan

3.76 g de hidrofosfato disódico (Na2HPO4* 2H20) y 2.10g de fosfato de potasio
dihidrogenado (KH2PO4). Mezclar todos los reactivos y guardar en frasco de vidrio
en lugar fresco. Ajustar el pH a 7.2.
 Rejilla horizontal o soporte de tinción.
Colocar el frotis secado al aire sobre una rejilla o cubeta de tinción con la sangre hacia
arriba. Cubrir completamente el portaobjetos o cubreobjetos con el colorante de Wright
gota a gota. Dejarlo que permanezca en el frotis aproximadamente de 5-8 minutos, para
fijar los glóbulos sanguíneos.
El colorante deberá cubrir completamente el portaobjetos, pero no debe derramarse por los
bordes. Deberá agregarse una cantidad adicional si éste se comienza a evaporar.
Agregar directamente al colorante un volumen igual de amortiguador de Wright, para evitar la
coloración débil. Esperar la formación de brillo metálico. Puede usarse de igual manera
agua desionizada. Dejar actuar de 10-15 minutos.
Lavar con agua en el chorro cuidadosamente hasta que la extensión presente un aspecto
rosado al examinarlo a simple vista.
Limpiar el dorso del portaobjetos con una gasa o algodón humedecido en alcohol para
eliminar cualquier resto de colorante.
Secar al aire y observar con el microscopio con el objetivo de inmersión.
Resultados:
Los eritrocitos se observarán de color naranja o rosado.
El citoplasma de los monocitos presentará una tonalidad azul grisácea con gránulo rojizos
bastante finos y sus vacuolas características. El citoplasma de los linfocitos presentará varias
tonalidades azules.
Los núcleos de los linfocitos y neutrófilos aparecerán de color púrpura oscuro. Los núcleos
de los monocitos de color púrpura algo más claros (lila).
Los gránulos de los eosinófilos son de color rojo-anaranjado intenso. Los gránulos de los
basófilos púrpura azulado muy oscuro. Los gránulos de los neutrófilos se aprecian de color
lila, bastante finos.
Las plaquetas toman coloración violeta o púrpura. Observaciones:
Los tiempos varían de acuerdo a cada lote o tiempo de maduración del colorante. De ahí
que si los frotis recién teñidos resultan demasiado pálidos se corrige aumentando el tiempo
de tinción o disminuyendo el tiempo de lavado.
67
EP Medicina humana
Si en la preparación se observa precipitados de colorante puede ser debido a varias causas:

lavado insuficiente al final del proceso, utilización de porta o cubreobjetos sucios, mala filtración
del colorante, mala distribución del colorante a lo largo de la extensión por no
mantenerse en posición horizontal.
Durante la tinción el tampón fosfato controla el pH del colorante. Si el colorante es
demasiado ácido la extensión resultará demasiado rojiza y si por el contrario es demasiado
alcalina la precipitación presentará un aspecto azulado.
Pautas para la observación microscópica de elementos formes
La observación microscópica de un extendido sanguíneo se realiza en primera instancia con

los objetivos de 10 × y 40 × con un ocular 10 ×, a fin de obtener rápidamente un panorama
general respecto de la cantidad y la calidad de las células presentes en el preparado,
además de presentaciones poco frecuentes.
La verdadera diferenciación del frotis sanguíneo se realiza con ayuda del aceite de inmersión
con Se recorre el último tercio del extendido. Por otro lado, en esta porción del preparado, al
igual que en los laterales, pueden buscarse intencionalmente células patológicas.
Es importante realizar la observación esquemáticamente, casi como si se siguiera una lista,
para no olvidar nada:
• Eritrocitos: ¿Tinción? ¿Tamaño en relación a los linfocitos? ¿Morfología? (p. ej.,

esferocitos, inclusiones – malaria, fragmentocitos, etc.).
• Plaquetas: ¿Número en relación a los eritrocitos? ¿Agregados? ¿Tamaño normal?

¿Megaplaquetas? Etc.
• Células nucleadas: ¿Cantidad? ¿Composición? ¿Signos de displasia de los neutrófilos?

¿Modificaciones reactivas de los linfocitos? ¿Células patológicas? ¿Precursores
nucleados de la serie roja?
Durante la evaluación de la composición cuantitativa de leucocitos, debe tenerse presente

un recuento habitual de 100 células. El intervalo de confianza de 95% para un valor de 5%
sobre 100 células evaluadas es de entre 0,64 y 9,36%.
68
EP Medicina humana
LEUCOGRAMA
Los leucocitos de dividen en:
GRANULOCITOS
Aquellos que tienen gránulos específicos: neutrófilos, eosinófilos y basófilos. Los gránulos
observados en extendido están cargados de lisosomas y enzimas hidrosolubles que son
agentes antibacterianos necesarios para la digestión de partículas fagocitarias.
Neutrófilos
Neutrófilos abastonados. Es el granulocito en banda. Mide de 10µm a 14µm, núcleo

condensado que puede presentar una ó dos constricciones, pero no tiene puente de
cromatina. El citoplasma presenta gránulos específicos e inespecíficos, membrana celular
lisa, citoplasma de color ligeramente rosado dependiendo de la coloración.
Neutrófilos segmentados. Mide igualmente de 10um a 14um, núcleo que presenta mayor
condensación y está formado por varios lóbulos (hasta 4) unidos por puentes de cromatina.
El citoplasma está cargado de gránulos.
Alteraciones leucocitarias de los neutrófilos

Granulaciones tóxicas. Son gránulos basófilos más oscuros que lo normal y se
observan durante el transcurso de infecciones severas y estadios tóxicos.
Vacuolas tóxicas Se observan en el citoplasma de los neutrófilos durante infecciones
severas y estados tóxicos.
Cuerpos de Dohle. Son áreas teñidas de azul en el citoplasma de los
polimorfonucleares neutrófilos y se encuentra en infecciones, especialmente en
neumonías.
69
EP Medicina humana
Palillo de tambor. Es un pequeño apéndice (cromatina sexual) que permite conocer

el sexo del individuo mediante una simple observación en un frotis de sangre
Polisegmentación. Son neutrófilos con 5 o más lobulaciones. Se observa en las

anemias por deficiencia de vitamina B-12 y ácido fólico, Síndrome de Down y otras
anomalías.
Desviación a la izquierda. Significa el aumento de las formas inmaduras (en banda o
cayado, y juveniles) dentro de los neutrófilos. Constituye un importante valor
diagnóstico y pronóstico. Puede observarse en: infecciones e intoxicaciones.
Desviación a la derecha. Corresponde a la hipersegmentación nuclear. La mayoría

de PMN presenta más de 5 lobulaciones.
Eosinófilos. Son parecidos a los neutrófilos, pero son algo mayores. Generalmente el núcleo
es bilobulado y lo que más caracteriza a esta célula es la presencia de gránulos color
naranja-marrón notorios, muchas veces estos gránulos hacen que se pierda la membrana
celular por el rompimiento de ésta, ya que estas células son muy frágiles.
Basófilos. La característica más importante de esta célula es la cantidad de gránulos de color

azul negruzco que se encuentra ocupando toda la célula (cuando la célula es madura) y
parte de la célula cuando ésta es inmadura. Presenta un núcleo que no se logra observar por
la cantidad de gránulos que contienen histamina y heparina.
70
EP Medicina humana
Maduración de la serie granulocítica
AGRANULOCITOS
No poseen gránulos. Aquí tenemos a los linfocitos y monocitos.
Linfocitos. Pueden ser: Linfocitos grandes y Linfocitos pequeños.
Linfocitos grandes. Miden de 15µm a 25µm, presentan generalmente un núcleo

ligeramente oval discretamente indentado, la cromatina es densa pero no tanto como en el
linfocito pequeño (esto lo puede confundir con el monocito). Citoplasma abundante, azul
pálido y puede contener gránulos azurófilos inespecíficos.
Linfocitos pequeños Miden de 9µm a 15µm, presentan un núcleo que ocupa casi toda la
célula, excéntrico, cromatina fuertemente densa. El citoplasma es escaso, basófilo y puede
contener gránulos azurófilos inespecíficos.
Monocitos. Son los leucocitos de mayor tamaño en la sangre (14m a 20m). Su núcleo es
generalmente excéntrico, aunque puede ser central. Su cromatina nuclear es laxa,
distribuida en forma regular, la forma del núcleo generalmente es de una madeja de lana o
arriñonada, aunque puede tener forma de un abastonado. El citoplasma es de color gris y
puede presentar gránulos inespecíficos (azurófilos) que carecen de significado clínico.
71
EP Medicina humana
Maduración de la serie linfocítica
Maduración de la serie monocítica
72
EP Medicina humana
III. CAPACIDADES
 Identificación y reconocimiento de los elementos formes de la sangre de la serie
blanca, y serie plaquetaria, en una muestra de sangre periférica.
 Lee un hemograma
 Contrasta los resultados de un hemograma con los valores normales

Materiales
Microscopios
Aceite de inmersión
Alcohol isopropílico
Láminas montadas de frotices sanguíneos
Procedimiento
A los estudiantes se les dará láminas fijadas para que ubiquen en el
microscopio a objetivo de inmersión los diferentes tipos celulares de la
serie blanca.
 Reconocerán e identificarán los leucocitos diversos y dibujarán sus
observaciones.
V. INVESTIGACIÓN
1) Dibuje los tipos de células blancas observadas
2) Mencione las causas que producen la leucocitosis y la leucopenia

Leucopenia: consumo de diferentes fármacos, problemas en la MO, dieta,
quimioterapia, hiperesplenismo, etc
Leucocitosis: infecciones virales, problemas en la MO, inflamaciones,

trastorno del sistema inmunitario que aumenta la producción de glóbulos blancos
como la artritis reumatoide, tabaquismo, etc
3) ¿Que es y porque se produce la neutrofilia?
Neutrofilia es la elevación del número de neutrófilos y es común en personas
con infección bacteriana aguda localizadas y sistemicas.
4) ¿Que es y porque se produce la linfocitosis?

La linfocitosis es una situación que ocurre cuando la cantidad de linfocitos
está por encima de lo normal, considerase linfocitosis cuando son verificadas más
de 3000 linfocitos por mm³ de sangre; las causas se deben por infecciones,
leucemia, mononucleosis, vasculitis, mieloma, tuberculosis.
5) ¿Que es y porque se produce la eosinofilia

La eosinofilia es el aumento de los eosinófilos en la sangre, causada por LMA,
ascariosis, asma, dermatitis, cáncer, trastornos alérgicos o atópico, etc.
6) ¿Que es y porque se produce la basofilia?

Es una causa rara de leucocitosis; el número de aumento de los basófilos se
deben a enfermedades como varicelas, artritis reumatoides, diabetes Mellitus, etc.
BIBLIOGRAFIA
https://cuidateplus.marca.com/enfermedades/medicina-interna/2016/05/07/que-eosinofilia-
112653.html
https://www.msdmanuals.com/es/hogar/trastornos-de-la-sangre/trastornos-de-los-gl%C3%B3bulos-
blancos-leucocitos/trastornos-de-los-bas%C3%B3filos
HEMOGRAMAS
1) HOMBRE 50 ANOS
- globulos blancos: alto (leucocitosis

+ neutrofilos alto
+ linfocitos:bajo
+ monocito: bajo
- Encontramos este cuadro en paciente com infecciones bacterianas
2) MUJER 35 ANOS
-Hb: bajo
- Hto:bajo
- VCM: alto
-RDW: alto
- Macrocitosis, encontramos en la anemia megaloblastica
3) NINO 3 ANOS
- Hb; bajo
- Hto: bajo
-VCM: bajo
- HCM: bajo
-CHCM: bajo
-Monocito:alto
-Eosinofilo: alto
- Anemia hipocitica hipocromica: Ferropenica o cuadro alergico o cuadro de parasitos

(por eosinofilos).
4) MUJER 70 ANOS
- gl blancos: alto (leucocitosis)
-gl rojos: alto
-Hb: alto
-Hto:alto
-Plaquetas: alto
-VPM: alto
-Sindrome Mieloproliferativo, alteracion en las tres lineas.
73
EP Medicina humana
PRÁCTICA Nª 9
ANATOMÍA DE LOS ORGANOS LINFOIDES
Lo sé en Soy capaz
No sé Lo sé
N ÍTEM Nada Poco
forma de
regular explicarlo
1 ¿Cuáles son los órganos linfoides primarios?

¿Qué diferencia hay entre nódulo linfático y
2
ganglio linfático?
¿Cuál es la estructura de un ganglio
3
linfático?
4 ¿Cuáles son las funciones del bazo?

¿Cuáles son las funciones del sistema
5
linfático?
En la respuesta inmune participan células y moléculas distribuidas por todo el organismo,

tanto en la circulación como en los diversos tejidos del organismo. Sin embargo, grupos de
células inmunocompetentes conforman tejidos especializados del sistema inmune, los que a
su vez se integran como órganos linfoides. Los órganos linfoides se dividen funcionalmente
en dos tipos:
 Primarios o centrales. Son aquéllos en los que los linfocitos se originan y maduran,
a través del mecanismo de linfopoyesis (diariamente se generan aproximadamente
109 linfocitos) y/o la adquisición de las características que los capacitan a
responder ante un antígeno extraño. En este sitio las células que actúan contra
estructuras moleculares propias son eliminadas y sobreviven únicamente las que
no lo hacen (tolerancia central).
 Secundarios o periféricos. Son estructuras especializadas en la recolección de

antígenos de distintos compartimentos anatómicos. En ellos se lleva a cabo la
activación de los linfocitos maduros, a través de la «presentación» o el contacto
con el antígeno, lo que da inicio a la respuesta inmune específica, con la
consiguiente proliferación clonal y la generación de células de memoria.
 Recientemente se han denominado órganos linfoides terciarios a aquéllos

desarrollados en adultos, en sitios de infección persistente o inflamación crónica. El
desarrollo del resto de los órganos linfoides se restringe a la embriogénesis y a la
etapa postnatal inmediata. En el intestino además del apéndice y de las placas de
Peyer se han detectado, en el segmento delgado, folículos linfoides aislados (ILF:
del inglés Isolated Lymphoid Follicle) también señalados como tejido linfoide
intestinal solitario (SILT) que puede desarrollarse en la vida adulta.
75
EP Medicina humana
Médula ósea
En este órgano se generan las células troncales hematopoyéticas (stem cells) o células madre, origen
de todas las células sanguíneas. En la vida fetal emergen inicialmente del saco embrionario y
posteriormente del hígado y del bazo; al nacimiento, la médula ósea se convierte en el principal
centro hematopoyético. Si la demanda de células es muy grande o hay daño medular, se perfilan
como auxiliares en la hematopoyesis, el hígado y el bazo.
76
EP Medicina humana
La médula ósea se encuentra en el interior del hueso como una estructura reticular inmersa entre
grandes trabéculas, en cuyos espacios se encuentran adipocitos, fibroblastos del estroma y
precursores de las células sanguíneas. En los procesos de crecimiento y diferenciación de las células
progenitoras, participan una variedad de factores estimuladores, entre los que se encuentran las
citocinas: IL-1, 3 (acción multilineal), 6,7 (línea linfoide), 11 (generación de plaquetas) y factores
estimuladores de colonias de granulocitos y monocitos (GM-CSF, G-CSF).
Durante la diferenciación del linfocito B participan activamente las células del estroma con la
liberación de citocinas y factores de crecimiento; en esta etapa, las células B que muestran
autorreactividad son disminuidas por apoptosis, lo que sucede aproximadamente en 50%.
Finalmente, el linfocito B maduro emerge de la médula y a través de la circulación, se dirige a
los órganos linfoides secundarios para ejercer su función efectora.
El linfocito T que también se origina en la médula, sale de ella inmaduro (timocito). A

continuación, el timocito guiado por señales quimioatractantes generadas por quimiocinas en el
timo, ingresa a este órgano para completar su desarrollo y adquirir las características de madurez
que lo facultan para responder a un antígeno.
Timo
Es un órgano bilobulado, situado en la parte anterior del tórax. Cada lóbulo se divide por trabéculas
de tejido conjuntivo en pequeños lóbulos constituidos por varias zonas. En la corteza se encuentran
células epiteliales también llamadas nodriza (nurse) que interaccionan con los timocitos
proporcionándoles, al igual que los otros tres tipos de células epiteliales, hormonas tímicas
(timosina, timopoyetina, factor tímico sérico) que les ayudan a madurar. Más profundamente, las
células epiteliales forman una densa malla, que el timocito cruza para finalmente llegar a la médula
en donde se encuentran corpúsculos de Hassall (los que recientemente han sido implicados en la
formación de la célula CD4CD25), macrófagos, escasas células mieloides secretoras de citocinas (IL:1,
3, 6, 7) y células dendríticas interdigitantes (ricas en MHC) con las que establece contacto.
Se produce así, la selección positiva, lo que significa

que después de haber sido sometidos a un escrutinio
por diferentes células, sólo sobreviven aquellos
timocitos que no son autorreactivos; se propicia el
desarrollo de los linfocitos capacitados para reaccionar
frente a moléculas extrañas y se induce la apoptosis
de los que muestran afinidad por molé- culas propias.
Finalmente, los linfocitos maduros con sus marcadores
CD4 (Th- linfocito cooperador) o CD8 (Tc- linfocito
citotóxico) salen del timo a través de las vénulas con
endotelio columnar
alto y entran al torrente sanguíneo en donde muchos de ellos se quedan (el 75% de los linfocitos
circulantes son T), el resto se dirige a los órganos linfoides secundarios para ejercer el
reconocimiento específico del antígeno correspondiente. El timo desarrolla su máxima actividad
durante los primeros años de vida, lo que se refleja en la producción de linfocitos que, en un
individuo de 35 años de edad, corresponde al 20% de la generada en el neonato. Conforme avanza la
77
EP Medicina humana
edad, disminuye el número de linfocitos T vírgenes, por lo que la respuesta inmune celular en etapas
avanzadas depende, principalmente, de los linfocitos T de memoria.
Ganglio linfático
El ganglio forma parte del sistema linfático que filtra por zonas los antígenos procedentes del líquido
intersticial y de la linfa. Los antígenos libres o las células portadoras de los antígenos pueden
penetrar al ganglio por los ductos denominados vasos linfáticos aferentes, para establecer contacto
con los linfocitos ubicados en él. Los linfocitos sanguíneos llegan al ganglio principalmente por vía
hematógena a través de vénulas.
El ganglio está rodeado por una cápsula de tejido conectivo y estructurado por tres regiones. En la
corteza predominan las células B y se localizan los agregados celulares denominados folículos
primarios. En la paracorteza abundan los linfocitos T y las células dendríticas interdigitantes que dan
soporte y poseen moléculas MHC II, por lo que actúan principalmente como presentadoras. En la
médula del ganglio hay macrófagos, linfocitos T, B y numerosas células plasmáticas. En el folículo
primario abundan las células B, hay algunos linfocitos T y células dendríticas foliculares de soporte,
cuyas prolongaciones circunscriben a los linfocitos. Si el antígeno penetra libremente puede ser
captado directamente por el linfocito B o por el macrófago; por otra parte, si el antígeno es
transportado por un fagocito, puede ser presentado al linfocito T o B.
En ambos casos existe la posibilidad inmediata de que el linfocito B o T se active, lo que conlleva a
un aumento en su tamaño (principalmente si se activa B y se transforma en célula plasmática) y a un
incremento en la actividad del retículo endoplásmico generador de proteínas (anticuerpos,
78
EP Medicina humana
citocinas). Como consecuencia, debido a los cambios que conlleva la activación de los linfocitos éste
se transforma en folículo secundario o centro germinativo de Flemming. Los centros germinales
corresponden a zonas con células en intensa proliferación, que originan células efectoras y de
memoria, localizándose en ellos linfocitos B, macrófagos, células dendríticas, plasmáticas y algunos
linfocitos T. El aumento de tamaño de los folículos inducirá a su vez el crecimiento del ganglio,
manifestación clínicamente detectable en individuos con procesos patológicos, principalmente de
tipo infeccioso. En la enfermedad de Bruton existe una alteración genética (en tirosincinasa) que
impide la formación del linfocito B, por lo tanto, no hay células plasmá- ticas, no se forman
inmunoglobulinas y se genera una inmunodeficiencia humoral (agammaglobulinemia). Estos
pacientes a pesar de tener infecciones de repetición, no muestran crecimiento ganglionar regional.
Bazo
Es un órgano situado en el hipocondrio izquierdo con un peso aproximado de 150 g. Tiene dos tipos
de tejidos, el que corresponde a la pulpa blanca está constituido por una arteriola central cubierta
con una vaina de tejido linfoide periarteriolar, los linfocitos T se encuentran alrededor del vaso
sanguíneo y las células B confluyen y forman folículos primarios. En el sitio de transición entre ambas
zonas hay un gran número de macrófagos que presentan antígenos a los linfocitos y fagocitan
células deterioradas, principalmente eritrocitos. La otra zona del bazo denominada pulpa roja está
integrada por sinusoides vasculares que finalmente conectan con la vena esplénica, lo que permite
la salida de la sangre que ingresa, constantemente, a través de la arteria. El bazo filtra sangre de
manera similar a como los ganglios filtran linfa, y este mecanismo es uno de los más efectivos para
depurar al organismo de gérmenes que de alguna manera llegan a la circulación. Cada día la mitad
del volumen sanguíneo corporal total pasa por este órgano y en él se lleva a cabo la fagocitosis, no
sólo de antígenos sino también de células senescentes o dañadas.
79
EP Medicina humana
Tejido linfoide asociado a mucosas (MALT)
Son agrupaciones linfoides no capsuladas situadas en áreas submucosas. Las células de cada sitio
tienen distintos fenotipos y características funcionales. La mayoría de los linfocitos intraepiteliales
son T con predominio del tipo CD8; en humanos aproximadamente el 10% corresponde a linfocitos
intraepiteliales T, caracterizados por su capacidad para responder directamente ante cualquier
antígeno. Al igual que en el resto de los órganos descritos, hay tejido linfoide organizado en
folículos primarios con abundantes linfocitos B y centros germinales o folículos secundarios. La
inmunidad generada en estos sitios se enriquece con la actividad desplegada por la gran cantidad
de anticuerpos (IgA), que se encuentran inmersos en las mucosas.
Entre los órganos linfoides secundarios, existen variaciones tanto en la estructura como en la forma
de llegada de un antígeno, así al ganglio llega principalmente por la linfa, en el bazo por la sangre y
en algunos tejidos asociados a mucosas a través de células. Sin embargo, el proceso desencadenado
por la interacción antígenos-células linfoides, en los folículos primarios, descrito en la sección
correspondiente al ganglio, se realiza de manera similar en los diferentes órganos secundarios. Los
linfocitos generados en la médula ósea y el timo recirculan por todo el organismo, a través de la
sangre y la linfa, para finalmente ingresar a los órganos linfáticos secundarios y establecer contacto
con el antígeno correspondiente. Muchos linfocitos ya activados o de memoria, salen de los órganos
linfoides y se ubican en el sitio de entrada del antígeno con el que interaccionaron o migran a sitios
de inflamación e infección. Otros, principalmente los de tipo T permanecen en la circulación,
adheridos a las paredes de los vasos sanguíneos o dispersos en los tejidos linfoides asociados a
mucosas, en compañía de los B, que se localizan principalmente en los órganos linfoides. Esta
distribución estratégica muestra la amplia cobertura del sistema linfoide, para establecer una
óptima vigilancia y protección específica a través de todo el organismo.
80
EP Medicina humana
III. CAPACIDADES
 Contrasta los órganos linfoides primarios y secundarios
 Describe la circulación del sistema linfático, identifica el conducto torácico, la
cisterna del quilo
 Identifica la posición de las cadenas linfáticas
 Describe las dimensiones y relaciones de las amígdalas palatinas, linguales,
faríngeas
 Describe las relaciones del timo
 Describe las relaciones del bazo

a. Ingrese al programa APR 3.0
81
PRÁCTICA N° 11
HISTOLOGÍA DE ORGANOS LINFOIDES
HISTOLOGÍA DEL SISTEMA LINFÁTICO
No sé Lo sé Lo sé en Soy capaz de
N ÍTEM
Nada Poco forma regular explicarlo
1 ¿Cómo se puede disponer el tejido linfoide?
2 ¿Qué diferencia hay entre nódulo linfático y

ganglio linfático?
3 ¿Cuál es la estructura de un ganglio linfático?
4 ¿Cuáles son las funciones del bazo?
5 ¿Qué es la linfa?
El tejido linfoide es un tejido conjuntivo especial, constituido por fibroblastos modificados

denominados células reticulares, fibras de colágeno de tipo III que se denominan fibras
reticulares y numerosos linfocitos y algunas células plasmáticas y macrófagos
El tejido linfático o linfoide se dispone de 3 maneras:
1. CORDONAL, constituido por estructuras longitudinales (en la médula de los ganglios

linfáticos o en pulpa blanca del bazo)
82
EP Medicina humana
2. FOLICULAR, constituido por estructuras esféricas u ovoides denominados nódulos o folículos

linfoides, que, a su vez pueden constituir acumulaciones linfáticas asociadas a mucosas como la
bucal, la faríngea (tonsilas o amígdalas), en la intestinal (placas de Peyer) o rodeados de una
cápsula conjuntiva para formar los órganos linfáticos como el bazo, ganglios linfáticos o
linfonodos y el timo.
3. DIFUSA, constituido por estructuras de distribución extensa, irregular, en las mucosas de

los sistemas respiratorio, digestivo, genital y urinario
Histológicamente la Médula Ósea se caracteriza por presentar dos compartimientos: uno vascular y
otro hemopoyético; el compartimiento vascular está compuesto principalmente por un sistema de
capilares sinusoides mientras que el compartimiento hemopoyético es predominantemente celular
ubicado en forma de cuñas irregulares; este compartimiento son células sanguíneas en proceso de
diferenciación que se encuentran incluidas en un estroma de tejido conectivo conformado por
células reticulares, macrófagos y adipocitos, fibras reticulares, proteoglucanos y glucoproteínas.
Histológicamente el Timo está constituido por un estroma que se compone de una fina cápsula de
tejido conectivo de la cual se extienden tabiques hacia el interior del parénquima y contienen vasos
83
EP Medicina humana
sanguíneos, vasos linfáticos eferentes y nervios, fibras colágenas y fibroblastos entre otros grupos
celulares. Por su parte, el parénquima puede dividirse a su vez en dos zonas: la zona más externa o
corteza (más basófila) que contiene gran cantidad de linfocitos T en desarrollo, células
epiteliorreticulares (tipo I, II y III) y macrófagos; y la zona más interna o médula (más eosinófila) que
contiene linfocitos T y células epiteliorreticulares (tipo IV, V y VI o corpúsculos de Hassal). Ahora
bien, los órganos linfáticos secundarios son donde tienen lugar las reacciones inmunes e incluyen
los ganglios linfáticos, el bazo y el tejido linfoide asociado a mucosas.
Histológicamente dentro de estos órganos el tejido linfático puede organizarse de dos formas: tejido
linfático difuso y tejido linfático nodular.
El tejido linfático nodular se presenta como acumulaciones celulares bien organizadas y está
conformado por una zona del manto o corona y un centro germinativo; mientras que el tejido
linfático difuso como su nombre lo indica es una organización más difusa del tejido linfático.
Histológicamente los ganglios linfáticos están constituidos por:

a. Estroma: los ganglios linfáticos presentan una cápsula de tejido conectivo denso que los rodea a
partir de la cual emergen trabéculas que dividen una porción del parénquima; además el estroma
tiene un tercer componente que es un tejido reticular compuesto por células y fibras reticulares que
sostienen los componentes de este órgano.
b. Parénquima: está dividido a su vez en dos zonas a saber; corteza y médula:

La corteza es la porción más externa del parénquima y contiene tejido linfático nodular (zona más
cercana a la cápsula) y tejido linfático difuso (zona más profunda de la corteza). Ya que ambas zonas
presentan una estructura histológica diferente son fácilmente visibles al microscopio óptico de luz
clara y reciben nombres distintos, es así como la zona más cercana a la cápsula se denomina corteza
superficial o corteza nodular mientras que la zona más profunda se denomina corteza profunda o
paracorteza.
La médula es la porción central o más profunda del órgano y está formado en líneas generales por
cordones y senos medulares.
84
EP Medicina humana
Es importante destacar que en los ganglios linfáticos ocurre un proceso importante en la detección
de antígenos, este proceso se denomina filtración de la linfa y se lleva a cabo mientras la linfa viaja a
través del ganglio atravesando una serie de espacios denominados senos; de acuerdo a su ubicación
los senos reciben diferentes nombres, y es así como se pueden observar senos subcapsulares, senos
trabeculares y senos medulares.
Es importante destacar que el ser humano está expuesto constantemente al ingreso de antígenos de
diversa naturaleza razón por la cual existen otros tejidos linfáticos que aseguran la protección del
ser vivo; un ejemplo de ello es el tejido linfático asociado con las mucosas (MALT).
III. CAPACIDADES
a. Identifica y describe en imágenes microscópicas las estructuras histológicas del tejido
linfoide, folículos linfoides, amígdalas, timo, ganglio linfático y bazo:
a. Amígdala:
i. Epitelio de la amígdala
ii. folículo linfoide
iii. Centro germinativo de un folículo linfoide
iv. Cripta de la amigadla
b. Placa de Peyer
i. Mucosa intestinal del íleon
ii. Nódulo linfático de la placa de Peyer
c. Ganglio linfático
i. Capsula del ganglio linfático
ii. Seno subcapsular del ganglio linfático
iii. Corteza del ganglio linfático
iv. Medula del ganglio linfático
v. Folículos primarios
vi. Folículos secundarios
vii. Centro germinativo de un folículo linfoide
viii. Zona del manto del folículo linfoide
ix. Cordón medular de un folículo linfoide
x. Seno medular
d. Timo
i. Corteza del timo
ii. Lóbulo del timo
iii. Lobulillo del timo
iv. Septum del timo
v. Medula del timo
vi. Corpúsculo de Hassall
e. Bazo
i. Capsula del bazo
ii. Pulpa roja
iii. Pulpa blanca
iv. Folículos linfoides
v. Trabécula
vi. Arteria central de la pulpa blanca
85
EP Medicina humana
a. Ingrese a APR 3.0

b. Ingrese al módulo de sistema linfático
c. Ingrese al área de histologí Y RECOINOZCA LAS ESTRUCTURAS
d. Ingrese a la página web de Histology Guidevirtual histology laboratory
e. Busque el capítulo de sistema linfático y reconozca las estructuras
VII. CAPACIDADES
b. Identifica y describe en imágenes microscópicas las estructuras histológicas del sistema
linfático:
a. Amígdala:
i. Epitelio de la amígdala
ii. folículo linfoide
iii. Centro germinativo de un folículo linfoide
iv. Cripta de la amigadla
b. Placa de Peyer
i. Mucosa intestinal del íleon
ii. Nódulo linfático de la placa de Peyer
c. Ganglio linfático
i. Capsula del ganglio linfático
ii. Seno subcapsular del ganglio linfático
iii. Corteza del ganglio linfático
iv. Medula del ganglio linfático
v. Folículos primarios
vi. Folículos secundarios
vii. Centro germinativo de un folículo linfoide
viii. Zona del manto del folículo linfoide
ix. Cordón medular de un folículo linfoide
x. Seno medular
d. Timo
i. Corteza del timo
ii. Lóbulo del timo
iii. Lobulillo del timo
iv. Septum del timo
v. Medula del timo
vi. Corpúsculo de Hassall
e. Bazo
i. Capsula del bazo
ii. Pulpa roja
iii. Pulpa blanca
109
EP Medicina humana
iv. Folículos linfoides

v. Trabécula
vi. Arteria central de la pulpa blanca
1. Describe las siguientes láminas:
Órgano: Amígadala palatina (críptas)
Descripción: Las amígdalas son un ejemplo de tejido linfoide asociado a la mucosa (MALT). Los
linfocitos se distribuyen como nódulos difusos no encapsulados en el tejido conectivo subyacente.
Órgano: Intestino delagado
Descripción: Este es un nódulo linfático que tiene función de defensa localizada en la mucosa o
submucosa del tracto digestivo.
Este es un GALT (Tejido linfoide asociado a intestino)
Órgano: ÍLEON (PLACA DE PEYER
submucosa del tracto digestivo.
Este es un GALT (Tejido linfoide asociado a intestino)

Órgano: ganglio linfático
Descripción: Los ganglios linfáticos son pequeños órganos interpuestos a lo largo de los vasos
linfáticos que monitorean inmunológicamente la linfa.
Órgano: bazo
Descripción: El bazo es un órgano encapsulado que filtra la sangre y controla inmunológicamente la

sangre.
Órgano: Bazo
Descripción: PALS (vaina linfática periarteriolar): masa cilíndrica de linfocitos T maduros que rodea
las arteriolas centrales.
Órgano: Bazo
Descripción: El bazo es el órgano linfoide secundario más grande del cuerpo. Contiene dos
compartimentos morfológica y funcionalmente distintos:
Pulpa roja : filtra la sangre de material extraño y glóbulos rojos viejos o dañados
Pulpa blanca : sitio de reacciones inmunes a los antígenos transmitidos por la sangre.
Órgano: Timo
Descripción: El timo es un órgano encapsulado donde las células T proliferan y maduran detrás de la
barrera hematoencefálica.
Órgano: Timo
Descripción: Corteza.- región interna más ligera de linfocitos más grandes.
Corpúsculo de Hassell: células reticulares epiteliales dispuestas concéntricamente compactadas.
Órgano: Timo
Descripción: Corpúsculo de Hassell: células reticulares epiteliales dispuestas concéntricamente

compactas.
Órgano: Ganglio linfático (corteza)
Descripción: Conformada por:
Corteza externa : región adyacente a la cápsula.
Nódulos primarios : acumulaciones esféricas de células B (sin un centro germinal).
Nódulos secundarios : acumulaciones esféricas de células B con un centro germinal donde las células
B se diferencian en células plasmáticas.
Corteza interna (paracorteza): región entre la corteza externa y la médula libre de nódulos.
Corteza dependiente del timo: esta región contiene la mayoría de las células T en un nodo.
Vénulas endoteliales altas: vénulas con células endoteliales inusualmente altas a través de las cuales
los linfocitos en la sangre ingresan al nodo.
Órgano: Íleon (placa de peyer)
submucosa del tracto digestivo. Este es un GALT (Tejido linfoide asociado a intestino)
VIII. INVESTIGACIÓN
a. Responda:
1. ¿Cuáles son las funciones del sistema linfático?

 Mantener el balance de los fluidos en tejidos.
 Defensa contra patógenos.
 Absorción de grasa del tracto digestivo.
 Eliminar células dañadas o muertas.
 Reconocer y eliminar a las células y sustancias consideradas extrañas o ajenas.
2. ¿Qué es el tejido linfoide?
Es la formación especial de organización del tejido conjuntico. Se dispone de tres

componentes:
 Linfocitos, células plasmáticas y macrófagos.

 Células reticulares (tipo de fribroblasto)
 Fibras reticulares (colágeno tipo III)
3. ¿Cómo se puede disponer el tejido linfoide?
CORDONAL.- constituido por estructuras longitudinales (en la médula de los ganglios

linfáticos o en pulpa blanca del bazo).
FOLICULAR.- constituido por estructuras esféricas u ovoides denominados nódulos o
folículos linfoides, que, a su vez pueden constituir acumulaciones linfáticas asociadas a
mucosas como la bucal, la faríngea (tonsilas o amígdalas), en la intestinal (placas de Peyer)
o rodeados de una cápsula conjuntiva para formar los órganos linfáticos como el bazo,
ganglios linfáticos o linfonodos y el timo.
DIFUSA.- constituido por estructuras de distribución extensa, irregular, en las mucosas
de los sistemas respiratorio, digestivo, genital y urinario.
4. ¿Qué diferencia hay entre nódulo linfático y ganglio linfático?
Según varias literaturas dice que es de la misma composición anatómica e histológica lo que
concluimos que son la misma cosa, pero hay algo muy curioso que solo se dice ganglio
linfático axial.
5. ¿Cuál es la estructura de un ganglio linfático?
 CORTEZA.- área rica de LB (con macrófagos) que este también está conformado por
folículos primarios que son ricos en LB maduros en reposo y por folículos
secundarios que se forma apartir de folículo primario tras la estimulación antigénica.
 PARACORTEZA.- área rica de LT (donde además se localizan células drendríticas
interdigitadas).
 MÉDULA.- Encontramos LT y LB, célas plasmáticas y abundante macrófagos.
6. ¿Cuáles son las funciones del bazo?
El bazo tiene función de filtrar sangre y atrapar antígenos de origen sanguínero; puede
reaccionar a infecciones sistémicas, que estos llegan por las arterias esplénicas, además
ayuda a controlar la cantidad de sangre del organismo y destruye las células envejecidas y
dañadas.
7. ¿Qué es la linfa?
La linfa es un líquido coagulable, casi incoloro y débilmente alcalino, que procede de la

sangre, circula por los vasos linfáticos y se vuelca en las venas, y cuya función es la de servir
de intermediario en los cambios nutritivos entre la sangre y los tejidos.
EP Medicina humana
PRÁCTICA 12
REACCIONES ANTIGENO - ANTICUERPO
Lo sé Lo sé en
No sé Soy capaz de
Poco forma
N ÍTEM Nada explicarlo
regular
(+ó-)
1 ¿Cuáles son las características bioquímicas de

un anticuerpo?
¿En qué se diferencian los antígenos de
2
los anticuerpos?
3 ¿Qué son determinantes antigénicos?
4 ¿Cómo se produce una aglutinación?
5 ¿Qué diferencia hay entre epítopo

y determinante antigénico?
INMUNOLOGÍA
La inmunología es una rama amplia de biología y de las ciencias biomédicas que se ocupa
del estudio del sistema inmunitario, entendiendo como tal al conjunto de órganos, tejidos
y células que, en los vertebrados, tienen como función reconocer elementos ajenos dando
una respuesta (respuesta inmunitaria).
95
EP Medicina humana
La ciencia trata, entre otras cosas, el funcionamiento fisiológico del sistema inmunitario
tanto en estados de salud como de enfermedad; las alteraciones en las funciones del
sistema inmunitario (enfermedades autoinmunitarias, hipersensibilidades,
inmunodeficiencias, rechazo a los trasplantes); las características físicas, químicas y
fisiológicas de los componentes del sistema inmunitario in vitro, in situ, e in vivo.
REACCIÓN ANTÍGENO – ANTICUERPO
Tanto la respuesta humoral como el celular suponen el reconocimiento de determinadas

estructuras químicas en la superficie de macromoléculas extrañas, los antígenos. Estas
estructuras químicas del antígeno se denominan determinantes antigénicos y la
especificidad de la respuesta inmunitaria va dirigida especialmente a ellos.
Cuando se ponen en contacto un antígeno con el anticuerpo específico, reaccionan

uniéndose mediante un enlace no covalente entre la zona específica de la
inmunoglobulina y los determinantes antigénicos de la molécula de antígeno. La
combinación del anticuerpo con el antígeno desencadena una serie de procesos capaces
de neutralizar y eliminar a una sustancia extraña.
Las reacciones más importantes entre antígeno y anticuerpo son las siguientes:
I. Precipitación. Se produce entre antígenos y anticuerpos solubles que al unirse

forman agregados insolubles de ambas moléculas que precipitan.
2. Aglutinación. En este caso, los anticuerpos se dirigen contra los antígenos que se
encuentran en la superficie de ciertas células como microorganismos o glóbulos rojos. El
anticuerpo se combina con los antígenos de superficie y forma aglomerados de células.
96
EP Medicina humana
La hemaglutinación se produce entre los anticuerpos del plasma sanguíneo y los antígenos
de los glóbulos rojos de la sangre de diferente grupo sanguíneo. Esta prueba es
fundamental en la determinación de los grupos sanguíneos ABO.
3. Neutralización. Las uniones de los receptores específicos del anticuerpo al antígeno

bloquean la acción de éstos contra las células de los tejidos invadidos.
4. Opsonización. La llevan a cabo anticuerpos que reciben el nombre de opsoninas. Las

opsoninas se unen a antígenos presentes en superficies celulares de bacterias y forman
un revestimiento que favorece la fagocitosis por los macrófagos. Estos anticuerpos hacen
posible la acción fagocitaria que sin ellos sería imposible.
Las opsoninas favorecen la fagocitosis de los microbios
PRACTICA 10 - A
PRUEBA DE DOBLE DIFUSIÓN (Reacción de Precipitación)
97
EP Medicina humana
La técnica de Ouchterlony también se conoce como técnica de doble difusión. En ella, el

antígeno y el anticuerpo difunden uno hacia el otro en un medio semisólido compuesto por
agar puro y clarificado. Cuando el antígeno y el anticuerpo están en proporciones óptimas se
produce el entrecruzamiento del antígeno y el anticuerpo, formando un precipitado insoluble
denominado línea de precipitación. Estas líneas se pueden utilizar para identificar visualmente
y buscar semejanzas entre los antígenos. Si no se dan las proporciones óptimas
–por ejemplo, si hay un exceso de antígeno o de anticuerpo– entonces no se formara el
precipitado visible. Esta técnica proporciona una evidencia fácilmente visible de la
unión entre antígeno y anticuerpo, y no es necesario un equipo sofisticado para
observar la reacción antígeno-anticuerpo.
La técnica de Ouchterlony está diseñada para determinar si los antígenos son idénticos, si
están relacionados o si no tienen relación. Si los antígenos son idénticos, se dice que tienen
identidad. Antígenos idénticos tienen todos sus determinantes antigénicos o epitopos
comunes. En este caso, las líneas de precipitación difunden una hacia la otra para unirse
completamente formando un arco. Los antígenos tienen identidad parcial si son similares o
están relacionados. Los antígenos relacionados tienen algunos determinantes antigénicos
comunes, pero no todos. En el caso de identidad parcial, además del arco, se forma un
saliente que apunta hacia el antígeno con mayor similitud. Los antígenos que no están
relacionados se dice que tienen no-identidad y no poseen ningún determinante antigénico
en común. En este caso, las líneas se cruzan para formar una figura que se parece a una X.
En la técnica de Ouchterlony se perforan agujeros en el agar para formar pocillos. Los

pocillos se cargan entonces con el antígeno o con el anticuerpo, y se les permite difundir
uno hacia el otro.
A menudo, el mismo antígeno se coloca en pocillos adyacentes para evaluar la pureza de la

preparación. En este caso debe observarse un arco liso, sin salientes, ya que los antígenos
98
EP Medicina humana
son idénticos. También se pueden colocar muchos anticuerpos en un pocillo central. Los
anticuerpos difundirán hacia fuera en todas direcciones y reaccionaran con los
antígenos que se han colocado en los pocillos circundantes.
III. CAPACIDADES
 Observa la reacción de precipitación entre el antígeno y el anticuerpo.
 Identificar un antígeno desconocido y observar los patrones producidos por
las diversas relaciones: identidad, identidad parcial y no identidad.
 Distingue entre epítopo y antígeno.
 Explica la especificidad de los anticuerpos por sus epitopos.
 Observa como proteínas relacionadas pueden compartir epitopos.
PROCEDIMIENTOS
Accede a la página de inicio del programa PhysioEx y selecciona el Ejercicio 12: Pruebas
serológicas (Serological Testing). Pulsa en la Actividad 2: Comparación de muestras con la
técnica de doble difusión de Ouchterlony (Comparing Samples with Ouchterlony Double
Diffusion) y luego accede a la pestaña previo (Pre-lab Quiz).
Después de responder en línea, pulsa en la pestaña Experimento (Experiment) para

comenzar. Aunque en la pantalla aparecen las instrucciones que debes seguir para
realizar el experimento, también puedes consultarlas en el texto que sigue. A
continuación, se muestra la pantalla de inicio del experimento.
1. Arrastra una placa de petri a la mesa de trabajo. La tapa de la placa se abrirá para
revelar una vista ampliada de su interior.
2. Arrastra el sacabocados hasta el centro de la vista ampliada de la placa y perfora un agujero

en el agar. A continuación, arrastra el sacabocados hasta la parte superior izquierda,
99
EP Medicina humana
superior derecha, inferior izquierda e inferior derecha de la placa para perforar otros
cuatro pocillos en el agar. Después de perforar los cinco pocillos, estos quedaran marcados
del 1 al 5.
3. Arrastra el tapón cuentagotas de la botella que contiene anticuerpos de cabra anti-

albumina humana (Goat A-H) y deposita una muestra en el pocillo 1.
4. Arrastra el tapón cuentagotas de la botella que contiene anticuerpos de cabra anti-

albumina bovina (Goat A-B) y deposita una muestra en el pocillo 1.
5. Arrastra el tapón cuentagotas de la botella que contiene seroalbumina bovina (BSA) y

llena el pocillo 2 con una muestra.
6. Arrastra el tapón cuentagotas de la botella que contiene seroalbumina bovina (BSA) y

deposita una muestra en el pocillo 3.
7. Arrastra el tapón cuentagotas de la botella que contiene seroalbumina humana (HSA) y

deposita una muestra en el pocillo 4.
8. Arrastra el tapón cuentagotas de la botella que contiene el antígeno desconocido

(Unknown) y deposita una muestra en el pocillo 5.
9. Fíjate en que el temporizador (Timer) marca 16 horas. Pulsa en Iniciar (Start) para ponerlo
en marcha. Los antígenos y anticuerpos difundirán unos hacia otros y formaran un
precipitado, la línea de precipitación. La simulación comprime el periodo de tiempo de 16
horas en solo 10 segundos de tiempo real.
10. Ahora examinaras las líneas de precipitación que se han formado e indicaras que
relación existe entre cada par de antígenos. Pulsa en la primera fila de la tabla que aparece
en pantalla (2 y 5) y luego en Identidad, Identidad parcial o no-identidad, encima de la
columna de identidad, para indicar si los antígenos presentan identidad, identidad parcial o
no-identidad. Repite este paso para los cuatro pares de antígenos. Anota tus resultados en
la Tabla 2.
TABLA 2 Resultados de la técnica de doble difusión de Ouchterlony
Pocillos Identidad
2y5
2y3
3y4
4y5
100
EP Medicina humana
PRÁCTICA 10 - B
DETERMINACIÓN DE LA PROTEÍNA C – REACTIVA (Reacción de AGLUTINACIÓN)
La Proteìna C Reactiva es una proteína de fase aguda originalmente descrita por Tillet y
Francis en 1930. Se incrementa en forma inespecífica en procesos inflamatorios agudos en
respuesta a estímulos como infección, traumatismos, ejercicio extenuante, quemaduras o
neoplasias. Es más fiable que la VSG y que el recuento de leucocitos.
Entre las proteínas de fase aguda que aumentan su concentración se encuentra la proteína
C reactiva, que actúa como una opsonina específica para aumentar la fagocitosis de
bacterias y también tiene propiedades inmunomodulantes. La proteína C reactiva aumenta
rápidamente al comienzo de la enfermedad, 12 a 24 horas luego de la inflamación o daño
tisular y desaparece en la etapa de recuperación, apareciendo sólo en la fase activa del
proceso inflamatorio. La proteína C reactiva se encuentra aumentada en: infecciones virales,
tuberculosis, fiebre reumática activa, artritis reumatoide activa, etc. La proteína C reactiva
se ha utilizado como marcador de inflamación en procesos inflamatorios sistémicos que
detectan niveles de > 10.0 mg/L. Actualmente, mediante un método ultrasensible, se
pueden detectar niveles de proteína C reactiva muy bajos con los cuales se puede predecir
riesgo cardiovascular. Empleando el método ultrasensible, la Asociación Americana de
Cardiología recomienda la siguiente interpretación: < 1.0 mg/L riesgo bajo, 1.1-3.0 mg/L
riesgo moderado, 3.1-10.0 mg/L riesgo alto.
DEFINICIÓN DE LA PRUEBA
La prueba rápida de PCR- Látex es una técnica de aglutinación en porta lámina para la
detección directa cualitativa y semicuantitativa de la Proteìna C Reactiva (PCR), una proteína
de fase aguda. Se basa en la reacción inmunológica de aglutinación de una suspensión de
partículas de látex poliestireno sensibilizadas con anticuerpos específicos anti PCR humana,
aglutina en presencia de PCR (antígeno del suero), una proteína de fase aguda. La
aglutinación es visible en una concentración de PCR en suero igual o superior a 6 mg/L (8,
0.8 mg/L, ver inserto), BioSystem, Spinreact.
101
EP Medicina humana
MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS
MATERIALES
-Látex PCR: Suspensión de partículas de látex en buffer salino – glicina, cubiertas con
antisuero mono específicos anti PCR- humana. La sensibilidad del reactivo ha sido ajustado
para detectar entre 6 y 250 md/L de PCR (BioSystem). Usa micro gotero calibrado de 20 ul.
-Control positivo: suero humano estabilizado, contiene PCR como antigeno.
-Control negativo: suero humano estabilizado o suero animal (BioSystem) contiene PCR
menor de 6 mg/dl.
-Buffer salino: solución salina fisiológica (NaCl 0. 9%).
Todos los reactivos se conservan en Azida sòdica al 0.1%.
- Placa con àreas reactivas.
- Varillas mezcladoras.
102
EP Medicina humana
- Microgotero calibrado (20 ul – BioSystem, 50 ul – Spinreact, ver inserto).
- Timer.
- Fuentes de luz.
- Tubos para diluciones (semicuantitativo).
- Pipeta automática.
PRECAUCIONES:
-Agitar bien antes de su uso.
-Sustancias Interferentes: fibrina, sueros turbios, lipèmicos bemolizados, presencia de

factores reumatoides. Las placas deben lavarse con detergente no iònico y abundante agua
destilada.
- Suero, son estables hasta las 48 horas entre 2º - 8ºC y hasta 3 meses congeladas (- 25 ºC).
PROCEDIMIENTO
A.- TEST CUALITATIVO (Screening).
- Dejar atemperar los reactivos y muestras al ambiente y homogenizar con suavidad antes
de su uso.
- Colocar una gota (50 ul) de suero muestra no diluìdo sobre la placa y una gota de cada
control en círculos separados de la tarjeta.
- Añadir al lado de la anterior una gota de PCR- làtex.
- Mezclar y extender la muestra con el palillo desechable. Emplear palillos distintos para
cada muestra.
- Agitar la tarjeta a 80 – 100 rpm durante 2 minutos.
Leer, interpretar y registrar los resultados:
Observar bajo luz artificial la presencia o no de aglutinación, dentro del minuto siguiente a
la parada del agitador. La presencia de aglutinación indica un contenido de Proteìna C
Reactiva igual o superior a 6 (0 ver inserto del Kit usado) mg/ dl.
Los sueros positivos deben titularse.
Presencia de aglutinación: nivel de PCR igual o superior a 6 mg/ L.
Ausencia de aglutinación: nivel de PCR inferior a 6 mg/ L en la muestra.
103
EP Medicina humana
Resultados de una prueba de aglutinación de látex

1. Suero no diluido de paciente
2. Suero control positivo
3. Suero control negativo
RESULTADOS
104
EP Medicina humana
PRÁCTICA 10 - C
ACTIVIDAD LÍTICA DEL COMPLEMENTO
FUNDAMENTO
El sistema del complemento es un grupo de proteínas plasmáticas y de la membrana, que por su

mecanismo de acción pertenece a los sistemas enzimáticos cuya activación se produce en forma
de cascada. Forma parte del sistema inmunitario innato y tiene como función: atraer a los
fagocitos al sitio de reacción, opsonizar microorganismos para facilitar la fagocitosis, lisar la
membrana celular de los microorganismos que indujeron su activación, solubilización y
eliminación de complejos inmunitarios y regulación de la producción de anticuerpos.
En la actualidad, se conoce que el sistema del complemento está compuesto por más de 30
proteínas, dentro de las cuales hay proteasas, inhibidores y receptores. La concentración de
las proteínas del complemento en el plasma es de más de 3 g/L y constituye
aproximadamente el 15% de la fracción de globulina.
El sistema del complemento puede ser activado por anticuerpos unidos a la superficie del
patógeno por la vía clásica, lo cual constituye un buen ejemplo de la estrecha relación entre
el sistema inmunitario adquirido (anticuerpos) y el sistema inmunitario innato
(complemento). Otras vías de activación del complemento son la vía de la lectina y la vía
alterna. La activación del complemento por la vía clásica requiere de la presencia de
complejos antígeno-anticuerpo. Los antígenos pueden ser solubles o particulados, pero los
anticuerpos tienen que ser de las clases IgM e IgG.
Cuando el sistema del complemento se activa se desarrollan tres etapas: formación de la C3

convertasa, formación de la C5 convertasa y formación del complejo de ataque a la
membrana.
105
EP Medicina humana
CAPACIDADES
 Demostrar la actividad lítica del complemento.
 Demostrar la actividad lítica del complemento empleando como modelo la

reacción entre un suero conteniendo anticuerpos contra eritrocitos, en presencia y
ausencia de complemento.
MATERIALES Y PROCEDIMIENTO
7. Propipetas
Materiales 8. Gradilla para tubos
1. Suero humano, grupo sanguíneo O 9. Baño maría a 56 ºC
2. Eritrocitos humanos, grupo sanguíneo A o B, al 2% 10. Baño maría a 37 ºC
3. Complemento 11. Centrífuga
4. Suero fisiológico 12. Bocal con lejía
5. Tubos de 13x100 mm en gradilla
6. Pipetas de 1 mL
Procedimiento
1. Inactivar el suero humano, incubándolo a 56 ºC en baño maría por 30 minutos.
2. Rotular 3 tubos y repartir los reactivos según se indica:
a. Suero humano, inactivado 0,25 mL

Eritrocitos 0,25 mL
Complemento 0,25 mL
b. Suero humano, no inactivado 0,25 mL

Eritrocitos 0,25 mL
Solución salina 0,25 mL
c. Suero humano, inactivado 0,25 mL
106
EP Medicina humana
Eritrocitos 0,25 mL
Solución salina 0,25 mL
3. Incubar los tubos a 37 ºC durante 30 minutos.

4. Centrifugar los tubos a 1 500 rpm durante 3 minutos.
RESULTADOS
La actividad lítica del complemento se evidencia por el enrojecimiento del medio (hemólisis)
en los tubos de ensayo que contienen complemento (tubos a y b). El tubo c no debe mostrar
hemólisis.
V. INVESTIGACIÓN
1. ¿Qué tipo de identidad has encontrado en las muestras de este experimento?

Descríbelo.
En este experimento nosotro pusimos en los puntos:
1. Ac. Anti albúmina bacuna y ac. Anti humana.
2. Suero (albúmina bobina)
3. Suero (albúmina bobina)
4. Suero (albúmina humana)
5. Ag desconocido.
Resultado del experimento:

2. ¿Por qué crees que es importante que el agar sea puro y clarificado? Describe
el papel que desempeña la albumina en la sangre.
Describe como fuiste capaz de determinar cuál era el antígeno desconocido.
¿Por qué se forma la línea de precipitación?
El agar es importante que esto ayuda al ac se pueda desplazar y este se una

con el ag formando un precipitado insoluble denomina linea de precipitación.
La albúmina humana desempeña la función como ag ya que en el medio
pusimos los ac de albúmina para que este forme la linea de precipitación. Ya
que este también formo una identidad parcial por que loss antígenos tienen
identidad parcial si son similares o están relacionados. Se forma la línea de
precipitación por que se juntaron los ac con los ag.
3. ¿Crees que la seroalbumina humana y la seroalbumina bovina tendrían

epitopos comunes?
La seroalbúmina bovina contienen algunos determinantes antigénicos

comunes al del seroalbúmina humana.
4. Explique cómo se forma la aglutinación. Explique en qué consiste la

aglutinación en látex .
La formación de aglutinación se forma por que anticuerpos se dirigen contra

los antígenos que se encuentran en la superficie de ciertas células como
microorganismos o glóbulos rojos. El anticuerpo se combina con los
antígenos de superficie y forma aglomerados de células.
La aglutinación en látex nos sirve para nosotros podamos identificar bien el

Ac o al Ag, si nosotros ponemos al látex el ac es por que nosotros queremos
identificar el ag y viceversa.
EP Medicina humana
PRÁCTICA N° 16
WESTERN BLOT
Lo sé Lo sé en
Soy capaz
No sé Poco forma
de
N ÍTEM Nada regular
explicarlo
(+ó-)
1 ¿Qué es Western blot?
2 ¿Qué significa Western Bolt Positvo?
3 ¿Que significa Wester Bolt Negativo?
4 ¿Es la prueba de Wester Blot

confirmatoria para HIV?
II. FUNDAMENTO
La técnica Southern blotting fue desarrollada por Ed Southern en 1975 para

identificar ADN. Una variación de esta técnica, desarrollada para identificar ARN, se
denominó Northern blotting continuando asi con el tema de los puntos cardinales.
Western blotting, otra variante que identifica proteínas, se llama asi por el mismo
motivo. Western blotting utiliza una corriente eléctrica para separar proteínas en
base a su tamaño y carga. Esta técnica utiliza electroforesis en gel para separar las
proteínas en una matriz de gel. Debido a que el gel es frágil y podría ser difícil de usar
en otras pruebas, las proteínas son luego transferidas a una membrana de
nitrocelulosa. La técnica original de Western blotting utilizaba papel secante
(difusión) para la transferencia de las proteínas, pero en la actualidad también se
utiliza la electricidad para transferir las proteínas a tiras de nitrocelulosa.
Estas tiras están disponibles en el mercado, eliminando la necesidad de usar

electroforesis y equipos de transferencia. En esta actividad iniciaras el procedimiento
117
EP Medicina humana
Después de que los antígenos del VIH (virus de inmunodeficiencia humana) hayan
sido transferidos al soporte de nitrocelulosa y presentados en tiras.
La técnica Western blotting también es conocida como inmunotransferencia, porque

las proteínas que se transfieren, o se borran, en la membrana luego se tratan con
anticuerpos –el mismo procedimiento utilizado en el ensayo indirecto de
inmunoabsorción ligada a enzimas (ELISA). El ELISA se considera ligado a enzima
porque una enzima se une químicamente a un anticuerpo en las dos versiones de la
prueba, la directa y la indirecta. Inmunoabsorcion se refiere al hecho de que los
antígenos o los anticuerpos son adsorbidos (pegados) a un plástico. Si la prueba esta
diseñada para detectar un antígeno o antígenos, es un ELISA directo, porque está
buscando directamente la sustancia extraña. Un ELISA indirecto se diseña para
detectar los anticuerpos que el paciente ha creado contra el antígeno.
De la misma manera que los anticuerpos secundarios utilizados en la técnica indirecta de

ELISA, en el Western blot, los anticuerpos secundarios también tienen una enzima unida
a ellos, lo que permite el uso de color para detectar una proteína en particular. El
anticuerpo secundario se une a la región constante del anticuerpo primario, si se
encuentra en la muestra del paciente. La principal diferencia entre estas técnicas es que
la técnica ELISA utiliza un pocillo que corresponde a una mezcla de antígenos y el
118
EP Medicina humana
Western blot usa una banda discreta de proteína que representa al antígeno
específico que reconoce el anticuerpo. Al igual que el VIH, la enfermedad de Lyme
también se puede detectar con la técnica de Western blot.
La prueba inicial para identificar el VIH es el ELISA, que es menos costosa y más fácil
de realizar que el Western blot. Esta última técnica se usa como una prueba de
confirmación después de un resultado ELISA positivo, debido a que el ELISA es
propenso a dar resultados falsos positivos. Las bandas de un Western blot positivo
son de anticuerpos que se unen a proteínas específicas y a glucoproteínas del virus
de la inmunodeficiencia humano. Un resultado positivo en el Western blot viene
determinado por la presencia de bandas de proteínas particulares (ver Tabla 12.1).
III. CAPACIDADES
1. Comparar la técnica Western Blotting con el ensayo ELISA.
2. Observar el uso de la técnica Western Blotting para detectar el VIH.
IV. PROCEDIMIENTOS
Accede a la página de inicio del programa PhysioEx y selecciona el Ejercicio 12:

Pruebas serológicas (Serological Testing). Pulsa en la Actividad 4: Técnica de
inmunotransferencia (Western Blotting) (Western Blotting Technique) y luego en la
pestaña V. INVESTIGACIÓN previo (Pre-lab Quiz). Después de responder al V.
INVESTIGACIÓN en línea, pulsa en la pestaña Experimento (Experiment) para
comenzar. Aunque en la pantalla aparecen las instrucciones que debes seguir para
realizar el experimento, también puedes consultarlas en el texto que sigue. A
continuación se muestra la pantalla de inicio del experimento.
Procedimiento
1. Arrastra un soporte hasta la bandeja situada en la mesa de trabajo. Otros cuatro

soportes se colocaran automáticamente en la bandeja.
2. Pulsa en el montón de tiras de nitrocelulosa (Nitrocellulose Strips) y

automáticamente se colocara una tira en cada soporte.
3. Arrastra el tapón cuentagotas de la botella que contiene la muestra del paciente A

hasta el primer soporte para depositar el antisuero de dicho paciente en la tira de
119
EP Medicina humana
nitrocelulosa. De forma automática, se depositara una gota de antisuero del resto de

muestras en el soporte correspondiente.
4. Arrastra la bandeja con los soportes y colócala en el agitador orbital.
5. Ajusta el temporizador (Timer) en 60 minutos pulsando el botón (1) situado junto

al indicador del temporizador. Pulsa en Iniciar (Start) y una suave oscilación
permitirá que los anticuerpos reaccionen con los antígenos fijados a la tira de
nitrocelulosa. Una vez transcurrido el tiempo fijado, la bandeja volverá
automáticamente a la mesa de trabajo y cada soporte se vaciara en el recipiente
para la recogida de residuos peligrosos (Biohazard). La simulación comprime el
periodo de tiempo de 60 segundos en 10 segundos de tiempo real.
6. Arrastra el frasco que contiene la solucion tampón de lavado (Washing Buffer)

hasta el primer soporte para añadir el tampón a cada uno de ellos. Cada soporte se
vaciara luego, de forma automática, en el recipiente para la recogida de residuos
peligrosos. El lavado elimina cualquier unión no específica a anticuerpos que pudiera
haberse formado.
7. Arrastra el tapón cuentagotas de la botella que contiene la solución tampón de

revelado (Developing Buffer) hasta el primer soporte para añadir tampón de
revelado a cada soporte.
8. Arrastra la bandeja con los cinco soportes hasta el agitador orbital.
9. Ajusta el temporizador en 60 minutos pulsando el botón (1) situado junto al indicador

del temporizador. Pulsa en Iniciar (Start) y una suave oscilación permitirá que los
anticuerpos secundarios reaccionen con los anticuerpos unidos a la nitrocelulosa. Una
vez transcurrido el tiempo fijado, la bandeja volverá automáticamente a la mesa de
trabajo y cada soporte se vaciara en el recipiente para la recogida de residuos
peligrosos. La simulación comprime el periodo de tiempo de
60 segundos en 10 segundos de tiempo real.
10. Arrastra el frasco que contiene la solución tampón de lavado hasta el primer
soporte. Se añadirá el tampón de lavado a cada soporte y luego, de forma
automática, se vaciara el contenido de los soportes en el recipiente para la recogida
de residuos peligrosos. El lavado elimina cualquier unión no específica de
anticuerpos secundarios conjugados.
120
EP Medicina humana
El exceso de anticuerpos secundarios conjugados podría reaccionar erróneamente

con el sustrato y dar resultados falso-positivos.
11. Arrastra el tapón cuentagotas de la botella que contiene los sustratos

(Substrates) hasta el primer soporte. Se añadirán los sustratos (tetrametilbencidina y
peróxido de hidrogeno) a cada soporte. Los sustratos contienen las sustancias
químicas sobre las que actuara la enzima unida al anticuerpo.
12. Arrastra la bandeja con los cinco soportes hasta el agitador orbital.
13. Ajusta el temporizador en 60 minutos pulsando el botón (1) situado junto al

indicador del temporizador. Pulsa en Iniciar (Start) y una suave oscilación permitirá
que la enzima reaccione con los sustratos. Una vez transcurrido el tiempo fijado, la
bandeja volvera automáticamente a la mesa de trabajo. La simulación comprime el
periodo de tiempo de 60 segundos en 10 segundos de tiempo real.
14. Para determinar los antígenos presentes en cada muestra procede como sigue:
• Pulsa en la tira de nitrocelulosa que se encuentra en el interior del soporte para

visualizar los resultados.
• Pulsa en Guardar datos (Record Data) para mostrar tus resultados en la pantalla.
Anótalos en la Tabla 4. Las bandas presentes en la tira de nitrocelulosa representan
los anticuerpos de la muestra que han reaccionado con los antígenos (bandas) de la
tira (ver Tabla 12.1).
Repite este paso para las cinco muestras.
Antígenos de VIH
Abreviaturas Descripción
gp160 Glucoproteína 160, un precursor de la cubierta
Viral
gp120 Glucoproteína 120, una proteína de la cubierta
viral que se une a CD4.
p55 Precursor de la proteína p24 del centro vírico.
gp41 Glucoproteína de la cubierta final.
p31 Transcriptasa inversa
p24 Proteína del centro vírico.
121
EP Medicina humana
15. Ahora indicaras si el resultado para cada muestra es negativo, indeterminado o

positivo para el VIH. Los criterios para presentar un resultado positivo varían
ligeramente de un organismo a otro. Los Centros para el Control y Prevención de
Enfermedades recomiendan los siguientes criterios:
• Si no aparecen bandas, el resultado es negativo.
• Si aparecen bandas, pero no coinciden con los criterios de un resultado positivo, el
resultado es indeterminado. Los pacientes que se consideran indeterminados

después de múltiples pruebas deben ser supervisados y analizados de nuevo en una
fecha posterior.
• Si aparecen p31 o p24 y también aparecen gp160 o gp120, el resultado es positivo.

Pulsa en la primera fila de la tabla que aparece en la pantalla (paciente A) y luego
pulsa el botón (2), IND o (1), que se encuentran encima de la columna de resultado
de la prueba VIH, para indicar si el resultado de la muestra es positivo,
indeterminado o negativo para el VIH.
Repite este paso para las cinco muestras. Anota tus resultados en la Tabla 4.
TABLA 4 Resultados de la técnica Western Blot

Muestra gp160 gp120 p55 p31 p24 Resultado del ensayo VIH
Paciente A
Paciente B
Paciente C
Control positivo
Control negativo
122
EP Medicina humana
V. PREGUNTAS PARA RESOLVER AL FINALIZAR LA PRÁCTICA
1. Describe como se utiliza la electroforesis en gel para separar proteínas.

La electroforesis en gel es una técnica utilizada para separar fragmentos de
ADN (u otras macromoléculas, como ARN y proteínas) en función del tamaño
y la carga. La electroforesis implica pasar una corriente a través de un gel que
contiene las moléculas de interés. Dependiendo de su tamaño y carga, las
moléculas se moverán a través del gel en diferentes direcciones o a diferentes
velocidades, lo que les permite separarse unas de otras.
2. En una muestra que da positivo para el VIH usando la técnica de Western

Blot, ¿que están presentes anticuerpos o antígenos? ¿Cómo lo sabes?
Antígenos, si aparecen las proteinas p31 o p24 y las glucoproteinas gp160 o
gp120 en el resultado, es positivo.
3. Describe porque es más especifica la técnica Western blot que el ELISA

indirecto para la detección del VIH.
La técnica de Western Blot es mas especifica, permite distinguir frente a
que antígenos se dirigen los anticuerpos detectados ( anticuerpos que se unen a
proteinas especificas y glucoproteinas del virus de la VIH).
4. Explica que procedimiento se debe seguir cuando un paciente ha dado un

resultado indeterminado en la prueba Western blot.
Si se há dado resultado indeterminado se recomienda repetir la prueba
después de tres y seis meses, dependiendo de los factores de riesgo
identificables en cada caso. Si después de seis meses persiste indeterminado,
muy rara vez se trataría de una genuina infección por VIH .
5. Describe brevemente como se prepararon las tiras de nitrocelulosa antes

de añadirles las muestras de pacientes.
Las tiras de blot contienen una banda de control inmunoglobulina G y una
banda anti-IgG. Las tiras individuales de nitrocelulosa se incuban com suero
diluido o muestra de plasma y controles. Los anticuerpos específicos del HCV,
si se encuentran en la muestra, adheriran a las proteinas del VCH de las tiras.
Las tiras se lavan para eliminar los materiales que no se uniron y despues se
incuban com anticuerpos humanos anti IgG purificados por afinidad,
conjugados com fosfatasa alcalina
6. Describe la importancia de las etapas de lavado en el procedimiento

seguido en esta prueba.
El lavado elimina cualquier unión no especifica a anticuerpos que
pudiera haberse formado.
BIBLIOGRAFIA
https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr-
electrophoresis/a/gel-electrophoresis
http://www.ecogen.com/upfiles/A56009.pdf
Artículo de revision Interpretation of rapid tests for diagnosing the infection

caused by the human immunodeficiency virus - Ricardo Iván Álvarez-Carrasco
https://www.empireo.es/pruebas-anticuerpos-utilidad-vih/
123
EP Medicina humana
PRÁCTICA N° 15
ELISA
Lo sé Lo sé en Soy capaz
No sé
Poco forma de
N ÍTEM Nada
regular explicarlo
(+ó-)
¿Es lo mismo estar infectado por el
1 VIH que tener SIDA?
2 ¿Cómo se transmite el VIH?
3 ¿Qué factores pueden influir para la

transmisión del VIH?
4 ¿Cómo NO se transmite el VIH?

¿Cómo se realiza el diagnóstico de la
5 infección por VIH?
II. FUNDAMENTO
El ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA, Enzyme-linked

immunosorbent assay) se utiliza para detectar la presencia de un antígeno o un
anticuerpo. El analisis se considera ligado a enzima porque una enzima se une
químicamente a un anticuerpo en las dos versiones de la prueba, la directa y la
indirecta. Inmunoabsorcion se refiere al hecho de que los antígenos o los
anticuerpos son absorbidos (pegados) a un plástico. Si la prueba esta diseñada para
detectar un antígeno o antígenos es un ELISA directo, porque está buscando
directamente la sustancia extrana. Un ELISA indirecto se diseña para detectar los
anticuerpos que el paciente ha creado contra el antígeno. Un resultado positivo de
ELISA indirecto requiere seroconversion. Se produce seroconversión cuando un
paciente pasa de dar negativo en una prueba para un anticuerpo especifico, a dar
positivo para el mismo anticuerpo.
124
EP Medicina humana
En el ELISA directo, una microplaca de 96 pocillos está recubierta con los anticuerpos
homologos fabricados contra el antígeno objeto de estudio. El elevado número de
pocillos permite ensayar fácilmente muchas muestras al mismo tiempo.
La muestra de suero del paciente se anade a la placa para examinar la presencia del
antígeno que se une al anticuerpo que recubre la placa. El ELISA tiene la ventaja de
que la proteína se adhiere bien al plástico. Luego se añade un anticuerpo secundario.
Si el antígeno está presente, se formará un “emparedado” formado por anticuerpo-
antígeno-anticuerpo secundario. El anticuerpo secundario está unido quimicamente
a una enzima. Cuando se añade el sustrato, la enzima convierte el sustrato (que era
un compuesto incoloro) en un compuesto coloreado. La cantidad de color producido
será proporcional a la cantidad de antígeno unido a los anticuerpos, y de este modo
se determina si el paciente es positivo para el antígeno. Si el antígeno no está
presente, el anticuerpo secundario (ligado a la enzima) se elimina con sucesivos
lavados, el sustrato no cambiará y permanecerá incoloro. Un uso común de la
prueba ELISA directa es la prueba de embarazo, que detecta gonadotropina
corionica humana (hCG), una hormona presente en la orina de mujeres
embarazadas.
125
EP Medicina humana
En el ELISA indirecto, una microplaca de 96 pocillos está recubierta con los

antígenos. La muestra de suero del paciente se añade para examinar la presencia de
anticuerpos que se unen a los antígenos de la placa. El anticuerpo secundario que se
añade tiene una enzima ligada a el que se une a la región constante del anticuerpo
primario, si está presente en la muestra del paciente. La región constante de un
anticuerpo tiene la misma secuencia de aminoácidos en los anticuerpos de una
misma clase (por ejemplo, todos los anticuerpos IgG tienen la misma region
constante). La región variable de un anticuerpo proporciona la diversidad de
anticuerpos y es el sitio donde se une el antígeno. La configuracion que se forma en
el ELISA indirecto es antígeno-anticuerpo primario-anticuerpo secundario. Al igual
que en el ELISA directo, la adición de sustrato se utiliza para determinar si la muestra
da un resultado Positivo ante la presencia del anticuerpo.
En esta actividad utilizaras el método ELISA indirecto para detectar la presencia de

anticuerpos creados contra el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH). Para
verificar los resultados emplearas controles positivos y negativos. Se puede obtener
un resultado indeterminado cuando no se ha producido suficiente color para
justificar un resultado positivo. Un resultado indeterminado podría deberse a
uniones no específicas, o a que el individuo haya sido infectado recientemente y
todavía no ha producido suficientes anticuerpos para dar un resultado positivo. En
cualquier caso, se deberá repetir el ensayo al individuo.
126
EP Medicina humana
III. CAPACIDADES A DESARROLLARSE DURANTE LA PRÁCTICA
1. Entender cómo se emplea el ensayo de inmuno absorcion ligada a

enzimas (ELISA) como prueba diagnóstica.
2. Distinguir entre el ELISA directo y el ELISA indirecto.
3. Describir la estructura básica de los anticuerpos.
4. Definir seroconversión.
5. Entender el empleo del método ELISA indirecto para detectar

anticuerpos anti-VIH.
ELISA (en placa). La prueba se realiza en placas de plástico (poliestireno) de 8 cm x 12

cm que contienen 96 pocillos, cada uno de aprox. 1 cm de profundidad y 0,7 cm de
diámetro.
ELISA INDIRECTO
Procedimiento e interpretación de resultados
Materiales necesarios:
- Placas de 96 pocillos o tiras de 8 pocillos, recubiertas con Ag.
- Suero control negativo (sin Acs específicos) y positivo (con Acs específicos)
- Diluyente para las muestras y controles
- Conjugado (Ac anti-Ig bovina marcado con peroxidasa)
- Solución de lavado
- Mezcla de sustrato-cromógeno
127
EP Medicina humana
- Servilletas de papel
- Micropipetas mono y multicanal
- Espectrofotómetro lector de
ELISA Procedimiento:
PROCEDIMIENTO FISIO EX
Accede a la página de inicio del programa PhysioEx y selecciona el Ejercicio 12:

Pruebas serológicas (Serological Testing). Pulsa en la Actividad 3: Ensayo indirecto de
inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) [Indirect Enzyme-Linked Immunosorbent
Assay (ELISA)] y luego en la pestaña V. INVESTIGACIÓN previo (Prelab Quiz).
Después de responder al V. INVESTIGACIÓN en línea, pulsa en la pestaña Experimento
(Experiment) para comenzar. Aunque en la pantalla aparecen las instrucciones que
debes seguir para realizar el experimento, también puedes consultarlas en el texto que
sigue. A continuación se muestra la pantalla de inicio del experimento.
1. Arrastra la microplaca de 96 pocillos hasta la mesa de trabajo.

2. Arrastra la pipeta multicanal hasta el suministrador de puntas de pipeta
desechables para insertar las puntas.
3. Arrastra la pipeta multicanal hasta el frasco que contiene antígenos de VIH (HIV
Antigens) para cargar las puntas con la solución de antígeno.
4. Arrastra la pipeta multicanal directamente sobre la microplaca para verter el
líquido en una fila de pocillos.
5. Arrastra la pipeta multicanal hasta el recipiente para la recogida de residuos
peligrosos (Biohazard) para eliminar las puntas.
6. Ajusta el temporizador (Timer) en 14 horas, pulsando el boton (1) situado junto al
indicador del temporizador.
Este tiempo de incubación permite que los antígenos se adhieran a los pocillos de
plástico de la microplaca. Pulsa en Iniciar (Start) para poner en marcha el
temporizador.
La simulación comprime el periodo de tiempo de 14 horas en solo 10 segundos de
tiempo real.
7. Arrastra el frasco que contiene la solución tampón de lavado (Washing Buffer)
hasta la microplaca para eliminar el exceso de antígenos que no han sido adsorbidos
(pegados) por la placa.
8. Arrastra la microplaca a la pila para volcar su contenido en el fregadero y desechar
asi el resto de tampón de lavado junto con el antígeno que no ha quedado pegado al
plástico de la placa.
9. Arrastra la microplaca hasta el papel secante. La placa se presionará sobre la
superficie del papel secante y se eliminara el líquido que queda en los pocillos. En un
128
EP Medicina humana
ensayo ELISA real, deberías lavar varias veces para disminuir cualquier union no
específica. Para simplificar, en esta simulacion se ha reducido el número de lavados.
10. Arrastra la pipeta automática de 100-ml hasta el suministrador de puntas de
pipeta desechables, para colocar una punta en la pipeta.
11. Arrastra la pipeta automática de 100-ml hasta el tubo de ensayo que contiene la
muestra de control positivo (1), para cargar la muestra en la pipeta.
12. Arrastra la pipeta automática de 100-ml hasta la microplaca para depositar la
muestra en los pocillos de la placa.
Automáticamente la punta será retirada y eliminada en el recipiente para la recogida
de residuos peligrosos. Cada una de las restantes muestras se depositará
automáticamente en los correspondientes pocillos de la placa.
13. Ajusta el temporizador en 1 hora, pulsando el botón (1) situado junto al
indicador del temporizador. Durante este tiempo de incubación, los antígenos
adheridos al plástico se unirán a los anticuerpos presentes en la muestra. Pulsa en
Iniciar (Start) para poner en marcha el temporizador.
La simulación comprime el periodo de tiempo de 1 hora en 10 segundos de tiempo
real.
14. Arrastra el frasco que contiene la solución tampón de lavado hasta la microplaca,
para eliminar el exceso de antígenos y evitar así la unión no especifica del antígeno y
el anticuerpo.
15. Arrastra la microplaca hasta la pila para tirar la solución tampón de lavado y los
anticuerpos que no se han unido.
superficie del papel secante para eliminar el líquido que queda en los pocillos.
17. Arrastra la pipeta multicanal hasta el suministrador de puntas de pipeta
desechables para insertar las puntas.
18. Arrastra la pipeta multicanal hasta el frasco que contiene solución tampón de
revelado (Developing Buffer) para cargar la solución en las puntas. La solución
tampón de revelado contiene el anticuerpo secundario conjugado.
19. Arrastra la pipeta multicanal a la microplaca para añadir la solución a los pocillos.
Las puntas de pipeta se retiraran automáticamente y serán eliminados en el
recipiente para la recogida de residuos peligrosos.
20. Ajusta el temporizador a 1 hora y luego pulsa en Iniciar (Start) para poner en
marcha el temporizador y permitir que el anticuerpo secundario conjugado se una al
anticuerpo primario, si está presente en la muestra.
21. Arrastra el frasco que contiene la solución tampón de lavado (Washing Buffer)
hasta la microplaca para eliminar cualquier unión no especifica que se haya podido
producir.
22. Arrastra la microplaca hasta la pila para vaciar su contenido en el fregadero.
superficie del papel secante para eliminar el líquido que quede en los pocillos.
129
EP Medicina humana
24. Arrastra la pipeta multicanal hasta la caja de puntas de pipeta desechables para
insertar las puntas.
25. Arrastra la pipeta multicanal hasta el frasco que contiene solución sustrato
(Substrate) para llenar las puntas.
26. Arrastra la pipeta multicanal sobre la microplaca para añadir la solución a los
pocillos. Las puntas de pipeta se retirarán automáticamente y seran eliminadas en el
recipiente para la recogida de residuos peligrosos.
27. Aparecerá una visión ampliada de los pocillos. El revelado progresara con el
tiempo. Para determinar la densidad óptica de cada muestra (las muestras se
encuentran en la primera columna de pocillos, de arriba a abajo de la microplaca):
• Pulsa en el pocillo y la densidad óptica aparecerá en la ventana del lector de placas
(Microtiter Plate Reader).
• Pulsa en Guardar datos (Record Data) para mostrar tus resultados en la pantalla.
Anotalos en la Tabla 3.
Resultados de ELISA indirecto
RESULTADO TEST VIH

MUESTRA DENSIDAD OPTICA
Paciente A
Paciente B
Paciente C
Control Positivo
Control Negativo
28. Ahora indicaras si el resultado de cada muestra es negativo, indeterminado o

positivo para el VIH.
• Un resultado < 0,300 se lee como negativo para VIH-1.
• Un resultado comprendido entre 0,300 y 0,499 se lee como indeterminado (hay
que repetir la prueba).
• Un resultado > 0,500 se lee como positivo para VIH-1.
Pulsa en la primera fila de la tabla que aparece en la pantalla y luego en el botón (2),
IND, o (1) situados en la parte superior de la columna de Resultado del test VIH (HIV
Test Result), para indicar si el resultado de la muestra es positivo, indeterminado o
negativo para el VIH. Repite este paso para las cinco muestras.
Anota tus resultados en la Tabla 3.
130
EP Medicina humana
VI. INVESTIGACIÓN
1. Indica a que se ha unido el anticuerpo secundario en esta actividad, y por qué.

El anticuerpo secundario que se añade tiene una enzima ligada a el que se
une a la región constante del anticuerpo primario. Al unirse dos o más anticuerpos
secundarios a cada primário há una amplificación de la señal.
2. Define seroconversión. ¿Cómo puedes saber si en una muestra se ha

detectado una seroconversión?
Seroconversion se produce cuando un paciente pasa de dar negativo en
una prueba para detectar anticuerpo especifico,a dar positivo para el mismo
anticuerpo. Para demostrarla es preciso analizar al menos dos sueros de la
misma persona separados por un intervalo de tiempo variable, por ejemplo 2
semanas.
3. Escribe las diferencias entre los ensayos ELISA directos e indirectos.
Si la prueba esta diseñada para detectar un antígeno o antígenos es un

ELISA directo, porque está buscando directamente la sustancia extraña.
Un ELISA indirecto se diseña para detectar los anticuerpos que el
paciente ha creado contra el antígeno. Un resultado positivo de ELISA
indirecto requiere seroconversión. Además, el ELISA directo es el anticuerpo
primario el que se marca con la enzima y en el ELISA indirecto se marca el
anticuerpo secundario.
4. Discute por que un paciente podría dar un resultado indeterminado.

Un resultado indeterminado podría deberse a uniones no específicas, o a que
el individuo haya sido infectado recientemente y todavía no ha producido
suficientes anticuerpos para dar un resultado positivo.
5. ¿Cómo afectaría a tus resultados si tu control negativo hubiera dado un

resultado indeterminado?
Si se da un resultado indeterminado se debe repetir el ensayo al individuo.
6. Describe brevemente la estructura básica de los anticuerpos.
Los anticuerpos son proteinas que tienen estructura globular. Están formadas
por dos tipos de cadenas proteicas (H y L). Hay dos cadenas idénticas largas o
pesadas (heavy, H) y dos cadenas idénticas cortas o ligeras (light, L), formando una
Y en las inmunoglobulinas más sencillas. Las cadenas H y L están unidas entre sí
por puentes disulfuro. Tanto las cadenas H como las L tienen una región variable
(extremo amino de las cadenas) que es la que se une con el antígeno. Esta región
presenta una secuencia de aminoácidos distinta en cada anticuerpo.
BIBLIOGRAFIA
http://www.higiene.edu.uy/parasito/trabajos/elisa.pdf
http://e-
ducativa.catedu.es/44700165/aula/archivos/repositorio//3250/3413/html/21_estructura_y_clases_de_a
nticuerpos.html
131
EP Medicina humana
NORMAS DE BIOSEGURIDAD DEL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Y

PARASITOLOGIA DE LA UPeU
La seguridad de los docentes y especialmente estudiantes que realizan sus prácticas

en este laboratorio se considera una prioridad, de acuerdo al enfoque de la
DIRECCION GENERAL DE SALUD DE LAS PERSONAS y la DIRECCION DE
CALIDAD EN SALUD, (INS). El objetivo es desarrollar un entorno seguro en los
servicios de salud mediante la reducción de riesgos y mejora de la seguridad del
estudiante y docente, por eso todo docente y estudiante debe cumplir las normas de
Bioseguridad para salvaguardar su integridad antes, durante y después de las
actividades de las prácticas realizadas en este laboratorio.
1. Los estudiantes deben llegar a la hora indicada a las practicas, e ingresar sin hacer desorden y
con las manos limpias. Así mismo está prohibido correr dentro del laboratorio.
2. Cada estudiante debe hacer uso de los casilleros para guardar las cosas que no utilizara en la
práctica y ser responsable de los mismos.
3. Mantener la puerta del laboratorio cerrada y no permitir el ingreso de personas ajenas a la
práctica.
4. Utilizar los EPPs (Mandil, mascarilla, protectores oculares, gorro quirúrgico y guantes)
necesarios antes de ingresar a cada práctica.
5. El calzado de los estudiantes debe ser cerrado, no se permitirá el ingreso con sandalias ni
pantalones cortos.
6. Mantener limpio el mandil, estudiante con mandil sucio no ingresara a prácticas.
7. Los estudiantes deben tener el cabello recogido dentro del gorro quirúrgico, las uñas limpias y
cortas.
8. Evitar desplazamientos innecesarios, movimientos bruscos. Hablar sólo lo indispensable.
9. Está prohibido el consumo de alimentos, bebidas y gomas de mascar dentro del laboratorio.
10. Esta prohíbo el uso de los celulares, maquillarse y remover sus lentes de contacto dentro del
laboratorio.
11. Antes y después de cada práctica limpiar y desinfectar con alcohol al 70% el área de trabajo.
12. Usar correctamente los reactivos, instrumentos y equipos del laboratorio; en caso de
desconocimiento del uso adecuado de los equipos, instrumentos y reactivos, deberán
preguntar al responsable del laboratorio.
13. Tener cuidado con el alcohol cuando manipule el mechero. Nunca debe dejar éste
desatendido, si ya no lo usa.
14. Abstenerse de tocar con las manos enguantadas alguna parte del cuerpo y de manipular
objetos diferentes a los requeridos en el procedimiento, especial cuando se está trabajando con
bacterias.
15. Emplear pipeteadores manuales o automático para adicionar las muestras y reactivos. Nunca
pipetear con la boca.
16. Evitar la contaminación de reactivos por uso de recipientes y pipetas inadecuadas.
17. Evitar usar reactivos que no esté debidamente identificado, verificar las etiquetas de los
mismos y estar seguro de cómo emplearlo.
18. Evitar devolver sustancias a sus envases originales. Retirar la cantidad necesaria a usar en el
ensayo.
19. Realizar solamente aquellas actividades indicadas por el profesor, no llevar a cabo
experimentos no autorizados.
20. Emplear técnicas asépticas para el manejo de cultivos de microorganismos.
21. Evitar llevar en el laboratorio accesorios que podrían ser fuente de contaminación (joyas,
relojes o pulseras, etc).
22. En caso de contaminación accidental con sangre u otro liquido biológico sobre una superficie:
Cubrir con papel, Luego agregar hipoclorito de sodio a 5.000 ppm, Dejar actuar por 30
minutos, Limpiar nuevamente con desinfectante a la misma concentración.
23. Si se rompe material de vidrio con sangre debe recogerse con recogedor, nunca con la mano.
132
EP Medicina humana
24. En caso de algún accidente no perder la calma y avisar inmediatamente al Jefe de laboratorio,
para tomar las medidas de seguridad necesaria y/o usar la ducha alemana.
25. Cuidar de no tachar, marcar o rallar las mesas de trabajo, las paredes y equipos del laboratorio.
26. Las agujas y todo elemento punzo cortante deben descartarse en los contenedores rígidos de
color rojo que se encuentran en cada mesa.
27. Desechar los residuos biológicos no punzo cortantes (guantes, gasas, algodón y cualquier otro
material que tuvo contacto con sangre o bacterias) en los tachos rojos de residuos biológicos y
los papeles, plásticos y cartones en el tacho negro de residuos generales.
28. Regresar los reactivos y equipos empleados (microscopio, baterías de coloración etc.), limpios
y de manera ordenada a su respectivo lugar una vez finalizada práctica. Reporte cualquier
daño de los mismos al docente.
29. Lavarse las manos al ingresar y salir del laboratorio.
30. El mandil es de uso exclusivo en el laboratorio, está prohibido caminar con el mismo por el
campus universitario.
31. Entregar una copia de su carnet de vacunación (tétano, influenza, tbc, hepatitis, etc) el primer
día de prácticas; caso contrario no se le permitirá el ingreso al resto de las practicas
programadas.
Blgo. BSc. Yareta Yareta José Luis
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UNIVERSIDAD PERUANA UNIÓN

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA DE MEDICINA HUMANA

MORFOFISIOLOGÍA DEL SISTEMA HEMATO INMUNOLÓGICO

Docente de Prácticas de Laboratorio

Las prácticas inducen al estudiante en el campo de la experimentación, mediante la

Con el objeto de obtener un mayor aprovechamiento, es necesario que el alumno antes de

a) Conocimientos teóricos y los III. CAPACIDADESs de cada trabajo práctico.

Todo lo anterior redundará en la obtención de mejores resultados, siendo de importancia la

OBJETIVOS DE LAS PRÁCTICAS DE MORFOFISIOLOGÍA HEMATO INMUNE

N Practica Capacidad Laboratorio

Eritrocitos a. identificación y reconocimiento de los elementos formes de la

a. Usa la técnica consensuada para la obtención del hematocrito

a. identifica los elementos formes de cada serie.

4 Médula ósea a. calcula la relación tejido hematopoyético/tejido adiposo

a. identifica los datos faltantes

d. Interpreta pruebas de laboratorio

8 I EXAMEN PRACTICO Microbiología

En el cadáver o en imágenes virtuales:

Anatomía de los Órganos a. identifica el conducto torácico, la cisterna del quilo

Histología de los órganos a. Identifica y describe en imágenes microscópicas las

17 EXAMEN ORAL Aula

REGLAS BÁSICAS DE HIGIENE Y SEGURIDAD EN EL LABORATORIO

2. Jamás tener prisa a la hora de realizar los experimentos de la práctica.

3. En las prácticas de laboratorio son indispensables: El máximo grado de observación de los

I. AUTOEVALUACIÓN DE CONOCIMIENTOS PREVIOS:

1 ¿Cuantos glóbulos rojos tenemos por milimetro cubico

2 ¿Cuánto mide el diámetro de un globulo rojo?

3 ¿Qué es un frotis sanguíneo?

5 ¿Qué son los reticulocitos?

II. FUNDAMENTO TEÓRICO

Las células se diferencian en función de características tales como el tamaño, la forma, la

diferenciación de los elementos formes como leucocitos es importante para establecer el

Por lo tanto, la evaluación microscópica y morfológica de extendidos de sangre constituye

Fig 1. Frotis sanguíneo.

Pautas para la observación microscópica de elementos formes - Frotis de sangre periférica

La observación microscópica de un extendido sanguíneo se realiza en primera instancia con

La hematopoyesis es el proceso a través del cual se producen los elementos formes de la

La eritropoyesis es el proceso de formación de nuevos glóbulos rojos (eritrocitos). La

Los reticulocitos presentan en

a. Identifica las células de la serie roja en una muestra de sangre periférica

IV. MATERIALES Y PROCEDIMIENTO

i. Se recomienda sangre total anticoagulada con EDTA, aunque se obtiene

Reticulocitos (%) = Nº de Reticulocitos x 100

Los reticulocitos se incrementan en sangre periferica en las anemias hemolíticas, en anemias

I. AUTOEVALUACIÓN DE CONOCIMIENTOS PREVIOS:

1 ¿Cuáles son las dimensiones normales de los

5 ¿Qué son los reticulocitos?

II. FUNDAMENTO TÉORICO

Las alteraciones de los eritrocitos, se

Microcitos: Hematíes que presentan un tamaño inferior al normal (menos de 6µm) y

Llamadas también poiquilocitosis. Entre éstos tenemos:

Eliptocito: Los hematíes son alargados (ovalocitos). Se encuentran en la enfermedad

Dacriocitos. Son hematíes en forma de lágrima. Se encuentran en la anemia

Hipocromía. Son hematíes con disminución del contenido de la hemoglobina y

Hipercromía. Son hematíes ávidos de hemoglobina. Pueden encontrarse en caso de

Punteado basófilo. Son gránulos basófilos presentes en el citoplasma de los hematíes.

Gránulos de Shuffner. Son gránulos que presentan algunos hematíes en caso de

III. MATERIALES Y PROCEDIMIENTO