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MANUAL LAB Microbiologia Industrial PDF

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UVM México Escuela de Ciencias de la Salud

Vicerrectoría Ciencias de la Salud


______________________________

Dirección Nacional de Tecnologías


Educativas en Salud

Manual de prácticas
Institucionales de la Escuela
de Ciencias de la Salud
— 2018 —

Copyright © UVM México, 2015. Todos los Derechos Reservados. 1


UVM México Escuela de Ciencias de la Salud

Formato Institucional de Prácticas Explícitas de


Formación Clínica y Profesional

-----MICROBIOLOGÍA INDUSTRIAL-----

Copyright © UVM México, 2015. Todos los Derechos Reservados. 2


UVM México Escuela de Ciencias de la Salud

Presentación

Escuela de Ciencias de la Salud Lic. en QFBT

ASIGNATUR MICROBIOLOGÍA INDUSTRIAL


A:
CLAVE: 80L732 CRÉDITOS 8.75 HORAS TOTALES 7
TOTALES:

TIPO DE SEMESTRAL CICLO: TERCER HORAS CON 5


SEMESTRE DOCENTE
CICLO:

ÁREA CURRICULAR: Formación clínica y HORAS DE 3


PRÁCTICA
profesional

Observaciones: HORAS DE 2
APRENDIZAJE
INDEPENDIENTE

Aspectos Curriculares
OBJETIVO GENERAL DE LA ASIGNATURA:

Comprender y analizar las bases y los procesos de la microbiología industrial basado en el uso de
los microorganismos, el conocimiento básico y la aplicación biológica que corresponden a su
elección, mantenimiento, mejora, diseño y formulación de medios, cinética de crecimiento y
formación de productos.

CONTENIDOS

Práctica 1; Aislamiento y purificación de bacterias……………..…………........................................ 5


Práctica 2; Cuantificación de unidades formadoras de colonias…………........................................ 9
Práctica 3; Curva de crecimiento bacteriano.................................................................................. 13
Práctica 4; Antibiograma..................................................................................................................16
Práctica 5; Pruebas bioquímicas para gram positivos.....................................................................19
Práctica 6; Pruebas bioquímicas...........................………................................................................22
Práctica 7; Biotecnología del vino …………………...….................................................................. 29

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UVM México Escuela de Ciencias de la Salud

Práctica Número: 1 Duración (mins/horas): 3 sesiones de 3 h

Nombre de la Asignatura Microbiología Industrial

Unidad de Contenido Unidad 1. Genética microbiana

Nombre de la Práctica Aislamiento y purificación de bacterias


Competencia Que el alumno sea capaz de:
a) Aplicar algunas metodologías para esterilizar material y medios de cultivo
asociada a la b) Explicar el concepto de medio de cultivo en microbiología
práctica. c) Explicar el fundamento de diferentes medios de cultivo y condiciones de
incubación empleadas para el aislamiento de microorganismos
d) Obtener cultivos aislados

Materiales

De la Institución/Docente: Para el Alumno(s):

Material: Bitácora de trabajo


 20 cajas Petri
Equipo de seguridad (mascarilla, googles,
 10 tubos con tapa guantes, bata, pantalón y zapato cerrado)
 4 Asas
Investigación previa, cuestionario.
 4 Hisopos
 2 Mecheros
 4 Matraces Erñenmeyer de 250 ml
 Papel kraft
2
Equipo:
 Autoclave
 Incubadora
 Balanza granataria

Sustancias:
 Medio agar base sangre
 Medio agar Dextrosa y Papa
 Medio agar Infusión Cerebro-Corazón
 Medio agar McConkey
 Medio agar Nutritivo
 Medio agar Salmonella y Shigella
 Medio agar Caldo Nutritivo

Cantidad indicada en el membrete para la elaboración de 1 L de


medio

Actividades

Para el Docente/Facilitador: Para el Alumno(s):

BRIEFING INICIAL (20 MINUTOS) 1. Leer cuidadosamente el membrete del medio de


1. Presentación e ingreso al laboratorio cultivo deshidratado (caldo y agar)
2. Diagrama de bloques 2. Calcular la cantidad necesaria para preparar 800
3. Socialización del propósito de Aprendizaje ml de caldo del medio de cultivo deshidratado
3. Pesar la cantidad calculada del medio
y/o examen rápido deshidratado. Esta operación debe ser rápida
para evitar que la humedad del ambiente no
PREPARACIÓN INICIAL (15 MINUTOS) afecte el resto del contenido del frasco
1. El docente solicita a los auxiliares de 4. Disolver el medio en 100 ml de agua destilada
laboratorio con 1 semana de anticipación en un matraz de 500 ml, una vez disuelto aforar
sus materiales a 800 ml, hacerlo por duplicado.
5. Ajustar el pH entre 6.8 y 7.2

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UVM México Escuela de Ciencias de la Salud

2. El docente verifica que el alumno 6. Colocar 10 ml de caldo en tubos de 16x150 c/u


ingresó su solicitud de materiales con los 7. Calcular la cantidad necesaria para preparar 800
auxiliares de laboratorio con mínimo 24 h ml de caldo del medio de cultivo sólido
de anticipación deshidratado y seguir los pasos 3 y 4
3. El docente verifica que los auxiliares NOTA: Un medio de cultivo sólido (agar) se puede
de laboratorio entreguen el material a los preparar a partir del medio de cultivo liquido (caldo)
alumnos contra vale de solicitud y agregando a este la cantidad necesaria de agar – agar
credencial del responsable del equipo, (15 a 20 g agar / 1L medio) para el volumen de medio
posterior al briefing deseado
4. El docente verifica que el alumno
revise que cuenta con el 100% de los 8. No medir pH. No es recomendable para medios
materiales solicitados que contienen agar- agar
5. El docente verifica que el alumno 9. Tapar el matraz y calentar hasta disolución total,
para ello agitar rapidamente y evitar que el
tenga el área de trabajo limpia y despejada medio de cultivo hierva y se derrame
10. Distribuir el medio de cultivo: 7 ml en tubos de
EJECUCIÓN DE LA PRÁCTICA 16x150mm
1. Lleva los tiempos y ayuda a los 11. Tapar cada uno de los tubos con algodón,
alumnos a llevar la cronología. etiquetarlos y esterilizarlos en autoclave a 121ºC
2. Provee Feedback descriptivo durante y 15 lbs de presión durante 20 min
la práctica. 12. Acomodar los tubos de acuerdo a su estado
3. Resuelve dudas durante la ejecución. físico en tres latas o cestos metálicos (liquido –
4. Promueve el buen Comportamiento sólido) y cubrir con papel kraft o de estraza
13. Esterilizar este material en autoclave a
del equipo durante la ejecución de la temperatura de 121ºC 15 lbs de presión durante
práctica 20 min
5. Verifica la Entrega de material limpio 14. Antes de abrir la autoclave, asegurese de que
y completo. baje la temperatura y que la presión interior sea
6. Utiliza un Modelo de FACILITADOR igual a la del exterior
NO INSTRUCCIONAL. 15. El resto de medio sólido esteril vaciarlos en cajas
7. Llenado de bitácora electrónica: Petri
https://goo.gl/forms/Ep16K5pZtsuutiRE3
Siembra de Bacterias:
DEBRIEFING (10 MINUTOS) 1. Sembrar bacterias en diferentes sustratos
1. Recapitula con los alumnos los 2. Organizar el material de modo que cada equipo
hechos ocurridos. cuente con el siguiente material:
2. Promueve la reflexión, discusión y  3 cajas de Petri de cada medio preparado
resolución de dudas.  dos tubos de 16x150 con caldo nutritivo
3. Verifica si se cumplió el propósito de  2 tubos de de 16x150con agar sólido
inclinado
aprendizaje. Identificar las cajas de Petri y tubos de ensayo con
plumón indeleble con los siguientes datos:

Clave de la maetria y grupo:___________


Nombre del alumno:_________________
Muestra:__________________________
Fecha de siembra:__________________

Sellar las cajas con masking-tape e invertirlas (tapa abajo


– base arriba)
Colocar las cajas y los tubos en un recipiente
debidamente identificado e incubar 24 h a 37ºC en
condiciones aeróbicas

NOTA: Cuando el cultivo se encuentre en estado sólido


transferir dos asadas

* 1 Tubo de 16x150 con caldo nutritivo (2 asadas)


* 2 Tubos de 16x150 con agar sólido inclinado (uno con
estría recta y otro con estría ondulada)
* 2 Cajas Petri (una con estría simple y otra con
cuadrante radial)
*1 Caja Petri (técnica de extendido o siembra masiva con
hisopo)

Comparación de la diversidad de las colonias


desarrolladas en los diferentes medios de cultivo y

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UVM México Escuela de Ciencias de la Salud

condiciones de incubación.

En las placas procede a:

1. Comparar la abundancia, separación y


diversidad de las colonias desarrolladas en las
cajas sembradas por agotamiento
2. Seleccionar de cada medio de cultivo aquella
placa que presente mayor numero de colonias
diferentes y separadas
3. Registrar los resultados en Tabla 2
4. Seleccionar de cada placa dos colonias
seleccionadas
5. Registrar los resultados en la Tabla 2
6. Registra, en un cuadro, las características de
cada coloniales del desarrollo de las cepas en
los diferentes medios de cultivo

Tabla 2. Abundancia y diversidad (numero y tipo) de


colonias desarrolladas en placas sembradas por
diferentes técnicas de aislamiento.

Agotamiento
Medios de Numero Numero de
cultivo/técnica aproximado de colonias
de siembra colonias diferentes

 Limpieza de materiales y entrega

 Limpieza y orden del laboratorio

Aprendizaje Auto-dirigido (Independiente):

Antes de la práctica:
1. Lectura de práctica
2. Investigar y dar dos ejemplos de especies bacterianas que pueden ser identificadas y aisladas por:

 Medio agar base sangre


 Medio agar Dextrosa y Papa
 Medio agar Infusión Cerebro-Corazón
 Medio agar McConkey

Después de la práctica:
1. ¿Cuál es el punto crítico para preparar un medio de cultivo sólido?
2. ¿En qué medio de cultivo se presentó el mayor número y diversidad de colonias microbianas?¿A qué
lo atribuyes?
3. La metodología a seguir para el aislamiento de bacterias es efectiva?¿por qué?
4. ¿qué otras técnicas son empleadas para aislar bacterias?
5. ¿Qué criterios seguiste para seleccionar la colonia para realizar el aislamiento primario?
Método de Evaluación

De la Práctica Del Aprendizaje Independiente

Trabajo en el laboratorio (asistencia) 20% Investigación previa 10%


Reporte de práctica 30% (véase anexo 1) Examen práctico 40 %

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UVM México Escuela de Ciencias de la Salud

Referencias y Bibliografía recomendada

Madigan, M T., M. Martinko y J. Parker. 2003 . Brock Biología de los microorganismos. 10a
edición. Prentice Hall Iberia. España

Vullo, D., M. Waschman, L. Alche. 2000 Microbiología en práctica. Manual de laboratorio para la
enseñanza de microbiología básica y aplicada. 1a edición Atlante S.R.L. Argentina.

Elaboró Dra. Brenda Lorena Sánchez Contacto: Ext. 34624


Ortiz

Cargo/Grado Docente de Campus: Coyoacán


: asignatura/Químico
Farmacéutico Biólogo

Revisó Comité Nacional de Fecha: Enero 2017


(validó): Validación de Practicarios de
QFBT

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UVM México Escuela de Ciencias de la Salud

Práctica Número: 2 Duración (mins/horas): 3 sesiones de 3 h

Nombre de la Asignatura Microbiología Industrial

Unidad de Contenido Unidad 2. Los microorganismos en el ambiente.

Nombre de la Práctica Cuantificación de unidades formadoras de colonias.


Competencia Que el alumno sea capaz de:
a) Analizar y evaluar las UFC en cultivos bacterianos
asociada a la
práctica.
Materiales

De la Institución/Docente: Para el Alumno(s):

Material: Bitácora de trabajo


 Pipetas de 1 mL.
Equipo de seguridad (mascarilla, googles,
 Cajas Petri esteriles. guantes, bata, pantalón y zapato cerrado)
 Matraz Erlenmeyer de 250 mL.
Investigación previa, cuestionario.
 10 tubos de ensayo con tapon de rosca.

Equipo:
 Cuenta colonias.
 Estufa incubadora.
 Baño maría.

Sustancias:
 Alcohol etílico 70%.
 Hipoclorito de sodio 100 ml.
 Agar cuenta estándar 20 g.
 Caldo nutritivo 20 g.
 Agar EMB 20 g.
 Agar nutritivo 20 g.

Actividades

Para el Docente/Facilitador: Para el Alumno(s):

BRIEFING INICIAL (20 MINUTOS) 1. Presenta investigación previa al ingreso.


1. Presentación e ingreso al laboratorio 2. Realiza la evaluación previa a la práctica (quiz)
2. Diagrama de bloques 3. Prepara un matraz Erlenmeyer con 99 mL de agar
b) Socialización del propósito de nutritivo estéril, así como también 5 tubos de ensaye
con 9 mL de caldo nutritivo estéril y Agar nutritivo
Aprendizaje y/o examen rápido para 6 cajas Petri.
4. Desarrolla la práctica de acuerdo a los siguientes
PREPARACIÓN INICIAL (15 MINUTOS) pasos:
1. El docente solicita a los auxiliares de
laboratorio con 1 semana de anticipación Técnica de cuenta en placa:
sus materiales 1. Se dispondrá de un caldo previamente
2. El docente verifica que el alumno inoculado con E. colli.
2. Se preparará un matraz de caldo
ingresó su solicitud de materiales con los nutritivo con 99 mL, previamente
auxiliares de laboratorio con mínimo 24 h estériles, en este se inoculará 1 mL del
de anticipación caldo con E. colli.
3. El docente verifica que los auxiliares 3. Agitar el matraz y mantener a 37°C en
de laboratorio entreguen el material a los baño maría.
alumnos contra vale de solicitud y 4. De este matraz se inocularán los cinco
credencial del responsable del equipo, tubos como se indica en la tabla 1.
posterior al briefing 5. De las 3 diluciones finales, se sembrará
utilizando 1 mL de caldo ya inoculado,

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UVM México Escuela de Ciencias de la Salud

4. El docente verifica que el alumno por duplicado, de acuerdo al esquema


revise que cuenta con el 100% de los de la tabla 1.
materiales solicitados 6. Una vez inoculado, se incubaran por 48
5. El docente verifica que el alumno hrs en estufa incubadora a 37°C.
7. Una vez pasado este tiempo, se
tenga el área de trabajo limpia y despejada contaran las UFC (unidades formadoras
de colonias) con ayuda del contador de
EJECUCIÓN DE LA PRÁCTICA colonias de acuerdo como lo indica el
1. Lleva los tiempos y ayuda a los profesor.
alumnos a llevar la cronología. 8. El resultado de la cuenta de cada caja
2. Provee Feedback descriptivo durante se multiplicará por el factor de dilución
la práctica. que le corresponde, teniendo así el
3. Resuelve dudas durante la ejecución. número final de UFC/mL.
4. Promueve el buen Comportamiento
Método en cámara de Newbauer:
del equipo durante la ejecución de la 1. Tomar 1 mL del tubo inoculado con E.
práctica colli y colocar en la cámara de
5. Verifica la Entrega de material limpio Newbauer, colocando previamente el
y completo. cubre objetos y dejando caer una gota
6. Utiliza un Modelo de FACILITADOR del cultivo inoculado en uno de los
NO INSTRUCCIONAL. extremos y dejando que por capilaridad
7. Llenado de bitácora electrónica: se llene la cámara.
https://goo.gl/forms/Ep16K5pZtsuutiRE3 2. Con ayuda del microscopio y utilizando
el objetivo de 40 x contar las células
con ayuda de la cuadricula de acuerdo
DEBRIEFING (10 MINUTOS) a la imagen 2.
1. Recapitula con los alumnos los 3. Utilizando la fórmula 1, se determinara
hechos ocurridos. las UFC.
2. Promueve la reflexión, discusión y 4. En caso de ser una gran cantidad de
resolución de dudas. células a contar, se realizara una
3. Verifica si se cumplió el propósito de dilución 1:2 con solución salina,
utilizando para determinar el número
aprendizaje. final de UFC la fórmula 2.

 Limpieza de materiales y entrega

 Limpieza y orden del laboratorio

Aprendizaje Auto-dirigido (Independiente):

Antes de la práctica:
c) Qué son las UFC (unidades formadoras de colonias)?
d) Cuál es la cantidad de UFC que debe de contener el agua potable en México?
e) Qué organismo regula la cantidad de UFC que debe de contener el agua y algunos alimentos
y consumibles en México?
f) Anexa las hojas técnicas de todos los reactivos utilizados.
g) Quien invento la cámara de Newbauer?
h) Qué otros usos tiene esta cámara además de la cuantificación de UFC?
i) Anexa un diagrama de cómo está conformada la cámara de Newbauer.

Después de la práctica:
a) Anota tres puntos importantes para la correcta toma de muestras sanguíneas tomando en cuenta el
menor daño al paciente.
b) Realiza un diagrama de flujo de la práctica realizada.
Método de Evaluación

De la Práctica Del Aprendizaje Independiente

Copyright © UVM México, 2015. Todos los Derechos Reservados. 9


UVM México Escuela de Ciencias de la Salud

Trabajo en el laboratorio (asistencia) 20% Investigación previa 10%


Reporte de práctica 30% (véase anexo 1) Examen práctico 40 %

Tabla 1.

Tabla 2.

Formula 1.

Formula 2.

Referencias y Bibliografía Recomendada


http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/087ecolssa.html

Manual de practicas del laboratorio de microniologia general. Maria de loa Angeles Aquiahuatl. Ed. Casa abierta al
tiempo, Universidad Autonoma Metropolitana unidad iztapalapa.

Microbiologia general, Prescot, Ed. Panamericana.

Copyright © UVM México, 2015. Todos los Derechos Reservados. 10


UVM México Escuela de Ciencias de la Salud

Elaboró QFB Humberto Asael Contacto: betotrigueros@hotmail.com


Trigueros Guzmán

Cargo/Grado Docente de Campus: Zapopan


: asignatura/Químico
Farmacéutico Biólogo

Revisó Comité Nacional de Fecha: Enero 2017


(validó): Validación de Practicarios de
QFBT

Copyright © UVM México, 2015. Todos los Derechos Reservados. 11


UVM México Escuela de Ciencias de la Salud

Práctica Número: 3 Duración (mins/horas): 2 sesiones de 3 h

Nombre de la Asignatura Microbiología Industrial

Unidad de Contenido Unidad 2. Los microorganismos en el ambiente.

Nombre de la Práctica Curva de crecimiento bacteriano.


Competencia Que el alumno sea capaz de:
a) Determinar y analizar el crecimiento microbiano mediante la construcción de
asociada a la curvas de crecimiento
práctica.
Materiales

De la Institución/Docente: Para el Alumno(s):

Material: Bitácora de trabajo


 Matraz de erlen meyer de 250ml. Con 100ml. De medio
liquido Equipo de seguridad (mascarilla, googles,
 Matraz de erlen meyer de 125ml. De solución salina guantes, bata, pantalón y zapato cerrado)
isotomica estéril
 6 pipetas de 10ml. Estériles Investigación previa, cuestionario.
 16 pipetas de 1ml. Estériles
 1 potenciómetro
 1 mechero Fisher
 Espectrofotómetro
 Celdas
 Gradilla
 16 tubos con 9ml. De solución salina isotomica estéril
 Varilla doblada en “L”
 12 cajas de Petri con agar nutritivo

Equipo:
 Autoclave eléctrica.
 Incubadora rotatoria.

Sustancias:
 Agua destilada
 Alcohol etílico
 Agar nutritivo.
 Solución salina isotónica estéril

Actividades

Para el Docente/Facilitador: Para el Alumno(s):

BRIEFING INICIAL (20 MINUTOS) 1. Presenta investigación previa al ingreso.


1. Presentación e ingreso al laboratorio 2. Realiza la evaluación previa a la práctica (quiz)
2. Diagrama de bloques 3. Desarrolla la práctica de acuerdo a los siguientes
3. Socialización del propósito de Aprendizaje pasos:
a. Inocular en condiciones esteriles un matraz
y/o examen rápido
erlen mayer de 250 ml con 100 ml de medio
de complejo con 10 ml de un cultivo de
PREPARACIÓN INICIAL (15 MINUTOS) escherichia coli (proporcionado por el
1. El docente solicita a los auxiliares de
profesor).
laboratorio con 1 semana de anticipación
b. Homogenizar cuidadosamente agitando el
sus materiales
matraz e imediatamente tomar una prueba
2. El docente verifica que el alumno
de 5 ml con una pipeta esteril y vaciarla en
ingresó su solicitud de materiales con los
una celda del espectrofotometro. Esta
auxiliares de laboratorio con mínimo 24 h

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de anticipación muestra correspodera al tiempo cero (t-0).


3. El docente verifica que los auxiliares c. De la misma manera se tomaran muestras
de laboratorio entreguen el material a los alas 0.5, 1,2,3,4 hrs. Para el tiempo de 6
alumnos contra vale de solicitud y hrs de incubacion se tomaran muestras de
credencial del responsable del equipo, 6 ml.
posterior al briefing
4. El docente verifica que el alumno d. Colocar el cultivo en la incubadora con
revise que cuenta con el 100% de los agitacion ( 150 rpm ) a 35° C.
materiales solicitados e. Dterminar la turbidez de la muestra en un
5. El docente verifica que el alumno espectomero a 560 nm. Leer el valor de la
tenga el área de trabajo limpia y despejada densidad optica
f. En la muestra de 6 hrs ademas de evaluar
EJECUCIÓN DE LA PRÁCTICA la turbides, se devera poner 1ml de cultuvo
1. Lleva los tiempos y ayuda a los en un matraz erlenmeyer con 99ml de
alumnos a llevar la cronología. solucion salina isotonica (ssi) esteril . del
2. Provee Feedback descriptivo durante matraz con la muestra diluida, hacer una
la práctica. serie de diluciones en tubos con 9ml de ssi
3. Resuelve dudas durante la ejecución. esteril, hasta 10. Cuidando de homogenizar
4. Promueve el buen Comportamiento las muestras cada vez que se haga una
del equipo durante la ejecución de la nueva disolucion.
práctica g. Enseguida inocular .1ml de las ultimasa 3
5. Verifica la Entrega de material limpio disoluciones en dos cajas de petri con agar
y completo. nutritivo y distribuir la muestra con una
6. Utiliza un Modelo de FACILITADOR barilla de vidrio doblada en “L”.
NO INSTRUCCIONAL. h. Dejar que se absorba el liquido en las cajas
7. Llenado de bitácora electrónica: y posteriormente incubarlas en forma
https://goo.gl/forms/Ep16K5pZtsuutiRE3 invertida durante 24-48 hrs.

DEBRIEFING (10 MINUTOS) i. Cuantificar el numero de UFC/ml de


1. Recapitula con los alumnos los escherichia coli.
hechos ocurridos. j. Con los datos obtenidos llene la tabla 1.
2. Promueve la reflexión, discusión y k. Graficar el teimpo de incubacion contra la
resolución de dudas. concentracion.
3. Verifica si se cumplió el propósito de
 Limpieza de materiales y entrega
aprendizaje.
 Limpieza y orden del laboratorio

Aprendizaje Auto-dirigido (Independiente):

Antes de la práctica:
1. Cómo se define el crecimiento en microbiologia y cuales son los eventos a nivel celular que ocurren
en cada una de las etapas de crecimiento?
2. Qué condiciones ambientales y nutrimentales causaran una disminusion o eliminacion de la fase log
en la curva de crecimiento?
3. Anexa las hojas técnicas de todos los reactivos utilizados.
4. Lectura de práctica

Después de la práctica:
1. Realiza un diagrama de flujo del procedimiento detallado de la práctica.

Método de Evaluación

De la Práctica Del Aprendizaje Independiente

Trabajo en el laboratorio (asistencia) 20% Investigación previa 10%


Reporte de práctica 30% (véase anexo 1) Examen práctico 40 %

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Tabla 1.

Referencias y Bibliografía Recomendada


http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/087ecolssa.html

Manual de practicas del laboratorio de microniologia general. Maria de loa Angeles Aquiahuatl. Ed. Casa abierta al
tiempo, Universidad Autonoma Metropolitana unidad iztapalapa.

Microbiologia general, Prescot, Ed. Panamericana.

Elaboró QFB Humberto Asael Contacto: betotrigueros@hotmail.com


Trigueros Guzmán

Cargo/Grado Docente de Campus: Zapopan


: asignatura/Químico
Farmacéutico Biólogo

Revisó Comité Nacional de Fecha: Enero 2017


(validó): Validación de Practicarios de
QFBT

Copyright © UVM México, 2015. Todos los Derechos Reservados. 14


UVM México Escuela de Ciencias de la Salud

Práctica Número: 4 Duración (mins/horas): 2 sesión de 3 h

Nombre de la Asignatura Microbiologia 2

Unidad de Contenido Unidad 3; Contaminación microbiana: deteccion y control.

Nombre de la Práctica Antibiograma.


Competencia Que el alumno sea capaz de:
a) Determinar a sensibilidad o resistencia una bacteria a un grupo de antibióticos
asociada a la
práctica.
Materiales

De la Institución/Docente: Para el Alumno(s):

Material: Bitácora de trabajo


 Cajas Petri
 sensidiscos con antibiótico. Equipo de seguridad (mascarilla, googles,
 Isopos esteriles guantes, bata, pantalón y zapato cerrado)
 Abatelenguas
 Asa de nicromo Investigación previa
 Pinzas
 Mecheros

Equipo:
 Estufa de incubación eléctrica

Sustancias:
 Agar nutritivo
 Agar sangre
 Agar chocolate

Actividades

Para el Docente/Facilitador: Para el Alumno(s):

BRIEFING INICIAL (20 MINUTOS) 1. Presenta investigación previa al ingreso.


1. Presentación e ingreso al laboratorio 2. Realiza la evaluación previa a la práctica (quiz)
2. Diagrama de bloques 3. Desarrolla la práctica de acuerdo a los siguientes
3. Socialización del propósito de Aprendizaje pasos:
a. Se prepararan los medios de cultivo.
y/o examen rápido b. Una vez listos y estériles, se tomara una
muestra de exudado faríngeo, sembrando
PREPARACIÓN INICIAL (15 MINUTOS) la muestra en los agares.
1. El docente solicita a los auxiliares de c. Incubar a 37°C por 48 hrs.
laboratorio con 1 semana de anticipación d. Una vez pasado este tiempo, se revisaran
sus materiales las colonias y seleccionara la que se
2. El docente verifica que el alumno someterá a la prueba de antibiograma.
e. Se tomara esta colonia con asa de nicromo
ingresó su solicitud de materiales con los en la totalidad de la caja Petri, haciendo
auxiliares de laboratorio con mínimo 24 h una cuadricula y posteriormente sembrando
de anticipación de manera diagonal, asegurando asi que la
3. El docente verifica que los auxiliares caja este completamente y uniformemente
de laboratorio entreguen el material a los sembrada.
alumnos contra vale de solicitud y f. Con ayuda de una pinzas estériles, se
credencial del responsable del equipo, colocaran los multidiscos, uno por uno o si
posterior al briefing vienen en una roseta, se colocara la roseta
4. El docente verifica que el alumno completa de tal manera que ninguno toque
la caja Petri. En caso de ser individuales,
revise que cuenta con el 100% de los asegurarse de que entre cada uno de ellos
materiales solicitados exista un especia aproximado de 2 cm.
5. El docente verifica que el alumno g. Incubar por 37°C por 48 hrs.
tenga el área de trabajo limpia y despejada h. Observar y anotar los tres antibióticos que
causen mayor halo de no crecimiento.

Copyright © UVM México, 2015. Todos los Derechos Reservados. 15


UVM México Escuela de Ciencias de la Salud

EJECUCIÓN DE LA PRÁCTICA
1. Lleva los tiempos y ayuda a los  Limpieza de materiales y entrega
alumnos a llevar la cronología.
2. Provee Feedback descriptivo durante  Limpieza y orden del laboratorio
la práctica.
3. Resuelve dudas durante la ejecución.
4. Promueve el buen Comportamiento
del equipo durante la ejecución de la
práctica
5. Verifica la Entrega de material limpio
y completo.
6. Utiliza un Modelo de FACILITADOR
NO INSTRUCCIONAL.
7. Llenado de bitácora electrónica:
https://goo.gl/forms/Ep16K5pZtsuutiRE3

DEBRIEFING (10 MINUTOS)


1. Recapitula con los alumnos los
hechos ocurridos.
2. Promueve la reflexión, discusión y
resolución de dudas.
3. Verifica si se cumplió el propósito de
aprendizaje.
Aprendizaje Auto-dirigido (Independiente):

Antes de la práctica:
a) Que es un antibiograma?
b) Que utilidad tiene en la clínica los antibiogramas?
c) Que es un sensidisco?
d) Anexa las hojas técnicas de todos los reactivos utilizados.
e) Que medio es el idóneo para llevar a cabo esta técnica?
f) Lectura de práctica

Después de la práctica:
a) Elabora un diagrama de flujo del procedimiento realizado.
Método de Evaluación

De la Práctica Del Aprendizaje Independiente

Trabajo en el laboratorio (asistencia) 20% Investigación previa 10%


Reporte de práctica 30% (véase anexo 1) Examen práctico 40 %

Referencias y Bibliografía Recomendada


http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/087ecolssa.html

Manual de practicas del laboratorio de microniologia general. Maria de loa Angeles Aquiahuatl. Ed. Casa abierta al
tiempo, Universidad Autonoma Metropolitana unidad iztapalapa.

Microbiologia general, Prescot, Ed. Panamericana.

Elaboró QFB Humberto Asael Contacto: betotrigueros@hotmail.com


Trigueros Guzmán

Cargo/Grado Docente de asignatura Campus: Zapopan

Revisó Comité Nacional de Fecha: Enero 2017


(validó): Validación de Practicarios de
QFBT

Copyright © UVM México, 2015. Todos los Derechos Reservados. 16


UVM México Escuela de Ciencias de la Salud

Práctica Número: 5 Duración (mins/horas): 2 sesión de 3 h

Nombre de la Asignatura Microbiología Industrial.

Unidad de Contenido Unidad 3. Contaminación microbiana


Nombre de la Práctica Pruebas Bioquímicas para Gram positivos
Competencia Que el alumno sea capaz de:
a) Aplicar diferentes metodologías para determinar el género de diferentes
asociada a la microorganismos
práctica.
Materiales

De la Institución/Docente: Para el Alumno(s):

Material: Bitácora de trabajo


 Portaobjetos.
 Tubos de ensayo. Equipo de seguridad (mascarilla, googles,
 Jeringas esteriles. guantes, bata, pantalón y zapato cerrado)
 Agujas para vacutainer.
 Adaptador para vacutainer. Investigación previa
 Tubos para recolección de sangre con anticoagulante citrato
de sodio al 3.8%.

Equipo:
 Baño maría
 Centrifuga.

Sustancias:
 Alcohol 70%
 Peróxido de hidrogeno
 Caldo nutritivo.
 Agar nutritivo.
 Kit de tinción para gram.

Actividades

Para el Docente/Facilitador: Para el Alumno(s):

BRIEFING INICIAL (20 MINUTOS) 1. Presenta investigación previa al ingreso.


1. Presentación e ingreso al laboratorio 2. Realiza la evaluación previa a la práctica (quiz)
2. Diagrama de bloques 3. Desarrolla la práctica de acuerdo a los siguientes
3. Socialización del propósito de Aprendizaje pasos:
a. Prepara los medios requeridos.
y/o examen rápido b. Obtener 5 mL de plasma.
c. Sembrar las muestras proporcionadas por
PREPARACIÓN INICIAL (15 MINUTOS) el profesor e incubar por 48 hrs.
1. El docente solicita a los auxiliares de d. Una vez obtenido el crecimiento, se
laboratorio con 1 semana de anticipación seleccionara una colonia problema y se
sus materiales identificara que se trate de cocos gram + o
2. El docente verifica que el alumno gram -, por medio de tinción de gram.
e. Una vez confirmado lo anterior, se
ingresó su solicitud de materiales con los procederá a realizar las siguientes pruebas:
auxiliares de laboratorio con mínimo 24 h
de anticipación Prueba de catalasa:
3. El docente verifica que los auxiliares
de laboratorio entreguen el material a los 1. Se colocara en un portaobjetos y con ayuda
alumnos contra vale de solicitud y de un asa estéril, un poco de muestra de la
credencial del responsable del equipo, colonia problema.
posterior al briefing 2. A continuación se colocara una gota de
4. El docente verifica que el alumno peróxido de hidrogeno sobre la muestra.

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revise que cuenta con el 100% de los 3. Observar si se presenta burbujeo, esto
materiales solicitados indicara una prueba positiva.
5. El docente verifica que el alumno
tenga el área de trabajo limpia y despejada Prueba de coagulasa:

1. Se tomara 1 mL de plasma.
EJECUCIÓN DE LA PRÁCTICA 2. Con ayuda de un asa de nicromo se tomara
1. Lleva los tiempos y ayuda a los un poco de la colonia problema y se
alumnos a llevar la cronología. inoculara el plasma, agitando el asa dentro
2. Provee Feedback descriptivo durante del plasma.
la práctica. 3. Se tapara el tubo y se incubara a baño
3. Resuelve dudas durante la ejecución. maría por un lapso de 4 hrs.
4. Promueve el buen Comportamiento 4. Durante este tiempo se revisara cada 30
del equipo durante la ejecución de la min si es que el plasma presente algún
indicio de coagulación, es decir algún
práctica coagulo presente o hilos de fibrina
5. Verifica la Entrega de material limpio formándose en el plasma. En dado caso de
y completo. que se presente esto se tomara como
6. Utiliza un Modelo de FACILITADOR positiva.
NO INSTRUCCIONAL. 5. Una vez pasando este tiempo, si no se
7. Llenado de bitácora electrónica: presenta coagulación, será una prueba
https://goo.gl/forms/Ep16K5pZtsuutiRE3 negativa.

DEBRIEFING (10 MINUTOS)


 Limpieza de materiales y entrega
1. Recapitula con los alumnos los
hechos ocurridos.  Limpieza y orden del laboratorio
2. Promueve la reflexión, discusión y
resolución de dudas.
3. Verifica si se cumplió el propósito de
aprendizaje.
Aprendizaje Auto-dirigido (Independiente):

Antes de la práctica:
a) Que es la catalasa?
b) Que es la coagulasa?
c) Que nos indica que una bacteria de una prueba de catalasa positiva?
d) Que nos indica que una bacteria nos dé positiva a la prueba de coagulasa?
e) Anexa las hojas técnicas de las sustancias utilizadas.
f) Lectura de práctica

Después de la práctica:
a) Realiza un diagrama de flujo de la práctica realizada.
b) Anota 5 puntos importantes a considerar para obtener un resultado óptimo.
Método de Evaluación

De la Práctica Del Aprendizaje Independiente

Trabajo en el laboratorio (asistencia) 20% Investigación previa 10%


Reporte de práctica 30% (véase anexo 1) Examen práctico 40 %

Referencias y Bibliografía Recomendada


http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/087ecolssa.html

Manual de practicas del laboratorio de microniologia general. Maria de loa Angeles Aquiahuatl. Ed. Casa abierta al
tiempo, Universidad Autonoma Metropolitana unidad iztapalapa.

Microbiologia general, Prescot, Ed. Panamericana.

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Elaboró QFB Humberto Asael Contacto: betotrigueros@hotmail.com


Trigueros Guzmán

Cargo/Grado: Docente de asignatura Campus: Zapopan

Revisó Comité Nacional de Fecha: Enero 2017


(validó): Validación de Practicarios de
QFBT

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UVM México Escuela de Ciencias de la Salud

Práctica Número: 6 Duración (mins/horas): 2 sesiones de 3 h

Nombre de la Asignatura Microbiología Industrial.

Unidad de Contenido Unidad 4. Utilización de microorganismos en técnicas analíticas.


Nombre de la Práctica Pruebas Bioquímicas

Competencia Que el alumno sea capaz de:


asociada a la a) Describir las características morfológicas
práctica. macroscópicas y microscópicas de las bacterias.
b) Comprobar la pureza de los cultivos mediante
tinciones simples
c) Caracterizar mediante pruebas bioquímicas una
bacteria aislada y una bacteria de referencia
Materiales

De la Institución/Docente: Para el Alumno(s):

Material: Bitácora de trabajo

4 Mecheros Equipo de seguridad (mascarilla, googles,


guantes, bata, pantalón y zapato cerrado)
4 Asas
1 Gradillas Investigación previa
Portaobjetos
Cubreobjetos
1 Charola para tinción
1 Puente de vidrio para tinción
1 Piseta
30 Tubos con tapa
10 Cajas Petri
4 Matraces Erlenmeyer de 250 mL
Papel kraft

Equipo:

Microscopio
Balanza granataria
Autoclave
Incubadora

Sustancias:

Cristal Violeta
Safranina
Acetona
Etanol
Lugol
Medio Caldo Urea
Medio Caldo Rojo Fenol y Lactosa
Medio Agar Citrato de Simmons
Medio Agar Hierro de Kliger
Medio MIO
Medio MR-VP
Medio SIM
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UVM México Escuela de Ciencias de la Salud

Cantidad indicada en el membrete para la elaboración de


un litro de medio

Actividades

Para el Docente/Facilitador: Para el Alumno(s):

BRIEFING INICIAL (20 MINUTOS) Procedimiento:


4. Presentación e ingreso al laboratorio
5. Diagrama de bloques Lavar y desengrasar los portaobjetos y
6. Socialización del propósito de Aprendizaje cubreobjetos. Para ello emplear jabón líquido y
y/o examen rápido
agua; enjuagar varias veces con alcohol al
95%, ponerlos a secar y flamearlos 2 a 3
PREPARACIÓN INICIAL (15 MINUTOS)
veces.
1. El docente solicita a los auxiliares de
laboratorio con 1 semana de anticipación
sus materiales 1. Etiquetar un portaobjetos por uno de
2. El docente verifica que el alumno sus extremos con el nombre de la
ingresó su solicitud de materiales con los muestra a observar
auxiliares de laboratorio con mínimo 24 h 2. Preparar los frotes bacterianos a partir
de anticipación de cultivos liquidos o sólidos.
3. El docente verifica que los auxiliares 3. Fijar con calor (mechero).
de laboratorio entreguen el material a los 4. Agregar cristal violeta en cantidad
alumnos contra vale de solicitud y
suficiente para cubrir el frote (2 a 3
credencial del responsable del equipo,
posterior al briefing
gotas) y dejar actuar 1
4. El docente verifica que el alumno minuto.
revise que cuenta con el 100% de los 5. Lavar con el mínimo de agua para
materiales solicitados eliminar el exceso de colorante.
5. El docente verifica que el alumno 6. Agregar lugol en cantidad suficiente
tenga el área de trabajo limpia y despejada para cubrir el frote (2 a 3 gotas) y dejar
actuar 1 minuto.
EJECUCIÓN DE LA PRÁCTICA 7. Lavar con el mínimo de agua para
1. Lleva los tiempos y ayuda a los eliminar el exceso de mordente.
alumnos a llevar la cronología.
8. Decolorar con alcohol:acetona hasta
2. Provee Feedback descriptivo durante
la práctica. que el efluente salga incoloro
3. Resuelve dudas durante la ejecución. 9. Lavar con agua para eliminar el exceso
4. Promueve el buen Comportamiento de disolvente.
del equipo durante la ejecución de la 10. Agregar safranina en cantidad
práctica suficiente hasta cubrir el frotis (2 ó 3
5. Verifica la Entrega de material limpio gotas) y dejar actuar 1 minuto.
y completo. 11. Lavar con agua para eliminar el exceso
6. Utiliza un Modelo de FACILITADOR del colorante de contraste.
NO INSTRUCCIONAL. 12. Dejar secar la preparación a
7. Llenado de bitácora electrónica:
https://goo.gl/forms/Ep16K5pZtsuutiRE3
temperatura ambiente.
13. Observar al microscopio con los
DEBRIEFING (10 MINUTOS) objetivos de 10x, 40x y 100x.
1. Recapitula con los alumnos los 14. Esquematizar las observaciones
hechos ocurridos. realizadas con el objetivo de mayor
2. Promueve la reflexión, discusión y aumento y describir las
resolución de dudas. características de los microorganismos
3. Verifica si se cumplió el propósito de observados e indicar si son Gram
aprendizaje. positivos o Gram negativos (cuadro 3).

Cuadro 1. Características microscópicas de


bacterias, de acuerdo a la tinción de Gram

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Forma Agrupación Gram/Ácido


resistencia

Forma: bacilo, coco, cocobacilo, espirilo, otro;


2Agrupación: pares, cadena, racimo, ninguno,

otro; 3Gram:positivo, negativo, no determinado.

Fecha:___________________
Muestra:__________________
Tinción:___________________
Preparación:_______________
Aumento:__________________
Decripción:_________________

A partir de los cultivos puros de bacterias

1. Observar en le microscopio
estereoscópico las cajas petri donde
están las colonias purificadas
2. Realizar su descripción detallas de cada
colonias puras y registrar la información
en el Cuatro 4

Cuadro 2. Características coloniales y


microscópicas del desarrollo de bacterias
Características Características Resultados
de desarrollo
Forma
Color
Colonias Elevación
Textura
Aspecto

Siembra para caracterización fisiológica de


bacterias.

1. Marcar las cajas por la parte inferior


dividiéndolas en dos sectores.
2. Organizar los tubos de modo que cada
alumno cuente con una serie de tubos
con los medios de cultivo
necesarios.
3. Etiquetar las cajas y los tubos
4. Inocular los medios de cultivo en el
orden que se indica a continuación:

  Por estría recta los tubos que


contienen citrato de Simmons.
  Mediante estría recta uno de los

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sectores de cada una de las placas de


Petri.
  Mediante asada los tubos que
contienen caldo Rojo de fenol+manitol,
caldo urea, y los dos con RM/VP.
  Por estría recta y picadura el tubo
que contiene Agar Kliger.
  Por picadura los tubos que
contienen los medios, SIM y MIO,
  Incubar a 37°C y revisar a las 24
horas. Si hay desarrollo abundante
guardar los medios de cultivo en
refrigeración, y si el desarrollo es escaso
incubar 24 horas más

1. Caracterización fisiológica de bacterias


(lectura e interpretación de resultados.
o Hemólisis. En las placas de agar
sangre indique si la hemólisis fue parcial
(α) o total (β).
o Utilización de carbohidratos y
producción de ácido sulfhídrico. En
Agar Kliger.
o Pico y fondo alcalinos indican el
desarrollo de bacterias incapaces de
utilizar glucosa o la lactosa.
o Pico y fondo ácidos a las 18 a 24 h
(reacción inicial) indican la
fermentación de glucosa.
o Pico alcalino / fondo ácido a las 48 h
(reacción tardía). El pico retorna a pH
alcalino por la formación de
aminas alcalinas procedentes de la
descarboxilación oxidativa de proteínas
cerca de la superficie.
También indica fermentación de la
glucosa.
o Pico y fondos ácidos a la 48 h de
incubación indican fermentación de la
lactosa.
o Desarrollo de un precipitado negro.
Prueba positiva para la producción de
ácido sulfhídrico
o Utilización de citrato. En agar Citrato
de Simmons, la presencia de desarrollo
bacteriano y el vire del
indicador a un color azul intenso indica
una prueba positiva.
o Hidrólisis de la urea. En caldo urea,
el vire del indicador a rojo o rosa intenso

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indica una prueba positiva. o


Descarboxilación de aminoácidos. En el
tubo con el medio MIO el vire del
indicador a púrpura indica la
descarboxilación de la ornitina. En este
medio se puede observar además la
movilidad de las bacterias,
así como la producción de indol.
o Fermentación ácido mixta. En uno de
los tubos con caldo RM/VP incubados
durante 72 h; agregar 5
gotas del indicador rojo de metilo. La
aparición de un color rojo estable en la
superficie del cultivo indica una
producción de ácidos suficientes para
alcanzar un pH de 4.4 por lo que se
considera la prueba positiva.
o Producción de acetoína como
subproducto de una fermentación ácido
mixta. En el segundo tubo con caldo
RM/VP incubado durante 24 h añadir
0.6 mL de α-Naftol y0.2 mL de
hidróxido de potasio (40%). La
alteración en el orden de la adición delos
reactivos puede originar resultados
falsos. Agitar suavemente el tubo y dejar
reposar de 10 a 15 minutos. La aparición
de un color rojo indica una prueba
positiva.

o Prueba Movilidad: En los tubos con medio


de SIM y MIO observe el crecimiento a lo largo
de la picadura. La movilidad de los
microorganismos se manifiesta por su
migración desde la línea de siembra y su
difusión en el medio lo que produce turbidez.
Pueden mostrar estrías de crecimiento velloso
(+). Cuando el crecimiento bacteriano se
acentúa a lo largo de la línea de siembra y el
medio que lo rodea permanece claro la prueba
es negativa.
o Prueba del Indol. Agregar unas gotas de
Reactivo de Erlich o Kovac en la superficie de
los medios SIM y MIO. La aparición de un
anillo color rosa indica la formación de
compuestos indólicos.
o Prueba del ácido sulfhídrico. Observar la
presencia de un precipitado negro en los tubos
de los medios SIM y Kliger que indica la
formación del ácido sulfhídrico
o

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1. Registrar en el Cuadro 5 las


características metabólicas reportadas
para la bacteria.
2. Investigar las características metabólicas
de la cepa con la que trabajo, con base
en esta
información proceder a comparar lo
reportado en la bibliografía con los
resultados obtenidos.

Cuadro 3. Caracterización fisiológica de dos


bacterias en estudio.
Prueba Bioquímica Resultados
Morfología
Agrupación
Gram
Estructuras
especiales
Hemólisis
Utilización de
manitol
O/F Glucosa
Kliger: a)
Fermentación de
glucosa
b) Fermentación de
lactosa
c) Producción de
H2S
Citrato
Ureasa
Descarboxilación a)
Lisina
b) ornitina
c) arginina
RM
VP
SIM a) Producción
de H2S
b) Indol
c) Movilidad

 Limpieza de materiales y entrega

 Limpieza y orden del laboratorio

Aprendizaje Auto-dirigido (Independiente):

Antes de la práctica:
1) Lectura de práctica
Después de la práctica:
1. ¿Qué variables pudieron causar errores al momento de revelar las pruebas bioquímicas?
2. ¿Cuáles crees que sean las variables que tú puedas controlar? ¿Por qué́?
3. ¿Qué ventajas y desventajas encuentras al emplear tanto las pruebas bioquímicas tradicionales
como las galerías API para determinar la fisiología bacteriana?
Método de Evaluación

De la Práctica Del Aprendizaje Independiente

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UVM México Escuela de Ciencias de la Salud

Trabajo en el laboratorio (asistencia) 20% Investigación previa 10%


Reporte de práctica 30% (véase anexo 1) Examen práctico 40 %

Referencias y Bibliografía Recomendada


  Koneman, E. W., S. D. Allen, W. M. Jamda, P. C. Scneckenenherger y W. Winn.
1999. Diágnóstico Microbiológico Texto y Atlas color. 5a edición. Médica Panamericana,
S. A. Argentina
  Mac Faddin J. F. 2003. Pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias de
importancia clínica. 3a edición Médica Panamericana, S. A. De C. V. México
  Madigan, M. T., J. M. Martinko y J. Parker. 2003. Brock. Biología de los
microorganismos. 10a Ed. Prentice Hall Iberia. España.
  Prescott Lansing M., Harley Jonh P. y Klemm Donald A. 2005. Microbiology. 6a. ed.
McGraw Hill. 992 pp
  Balows, A. 2005. Manual of Clinical Microbiolgy. 5a edición. A. Society for
Microbiology, Washington, USA.
  Díaz, R., G. Gamazo e I. López Goñi.1995. Manual Práctico de Microbiología. 1a
edición. MASSON, S. A. España.

Elaboró Dra. Brenda Lorena Contacto: Ext. 34624


Sánchez Ortiz

Cargo/Grado: Docente de asignatura Campus: Coyoacán

Revisó (validó): Comité Nacional de Fecha: Enero 2017


Validación de Practicarios
de QFBT

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Práctica Número: 7 Duración (mins/horas): 3 sesiones de 3 horas

Nombre de la Asignatura Microbiología Industrial

Unidad de Contenido 5.Tecnología de las fermentaciones industriales

Nombre de la Práctica Biotecnología del vino

Competencia asociada a la El estudiante:


práctica. a) Utilizar su conocimiento para la elaboración de bebidas alcohólicas a partir de
frutas
b) Determinar las características fisicoquímicas de una buena fermentación
c) Determinar las características organolépticas de una buena fermentación

Materiales

De la Institución/Docente: Para el Alumno(s):

Material: Bitácora de trabajo

Recipiente limpio. Equipo de seguridad (mascarilla, googles,


Envase de vidrio guantes, bata, pantalón y zapato cerrado)
1 Matraz aforado 100 ml
2 Matraz aforado 250 ml Investigación previa
5 Pipeta de 1 ml 1 Kg de uvas moradas
5 Pipeta de 10 ml
25 ml Tubos de 20 ml

Equipo:
Balanza analítica
Espectrofotómetro

Sustancias:
100 g de Azúcar
1 g de Levadura
Ácido Dinitrosalícilico
Tartrato de sodio y potasio
Hidróxido de sodio
Glucosa

Actividades

Para el Docente/Facilitador: Para el Alumno(s):

BRIEFING INICIAL (20 MINUTOS) En el recipiente previamente lavado colocar el kg de uvas


1. Presentación e ingreso al laboratorio Moler con todo y semillas
2. Diagrama de bloques
3. Socialización del propósito de Aprendizaje y/o Posteriormente se agrega azúcar aproximadamente 100
examen rápido gramos

PREPARACIÓN INICIAL (15 MINUTOS) Finalmente se agrega la levadura 1 gramo, colocar en un


1. El docente solicita a los auxiliares de envase de vidrio y se deja fermentar 3 días
laboratorio con 1 semana de anticipación sus
materiales Durante la fermentación se toma muestra cada 8 horas
2. El docente verifica que el alumno ingresó su para monitorear la producción de alcohol por medio de la
solicitud de materiales con los auxiliares de densidad, y medir azucares reductores, las muestras se
laboratorio con mínimo 24 h de anticipación guardan en congelación para realizar las determinaciones
3. El docente verifica que los auxiliares de al final del proceso.
laboratorio entreguen el material a los alumnos Después de 3 días de dejarlo fermentar se realiza la
contra vale de solicitud y credencial del clarificación de nuestro vino.
responsable del equipo, posterior al briefing

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4. El docente verifica que el alumno revise que Calentar grenetina en agua para que esta se disuelva
cuenta con el 100% de los materiales solicitados
5. El docente verifica que el alumno tenga el área Posteriormente se le agrega a nuestro vino
de trabajo limpia y despejada
Se deja reposar hasta observar un sedimento. 2 días
EJECUCIÓN DE LA PRÁCTICA
1. Lleva los tiempos y ayuda a los alumnos a Y está listo para consumirse
llevar la cronología.
2. Provee Feedback descriptivo durante la Determinación de azucares reductores
práctica.
3. Resuelve dudas durante la ejecución. Preparación del reactivo DNS
4. Promueve el buen Comportamiento del equipo Se prepara según el método propuesto por Coughlan y
durante la ejecución de la práctica Moloney. Se añade 10 g de ácido dinitrosalicílico (DNS) y
5. Verifica la Entrega de material limpio y 300 g de tartrato de sodio y potasio a 800 ml de NaOH
completo. 0,5 N y se calienta suavemente para disolver los
6. Utiliza un Modelo de FACILITADOR NO reactivos. El volumen se completa hasta 1,0 L con agua
INSTRUCCIONAL. destilada.
7. Llenado de bitácora electrónica:
https://goo.gl/forms/Ep16K5pZtsuutiRE3
Preparación de la curva patrón
DEBRIEFING (5 MINUTOS) Se implementa el mismo método para realizar la curva
1. Recapitula con los alumnos los hechos patrón, como se describió en el método fenol-sulfúrico.
ocurridos. Empleando una solución patrón de glucosa con una
2. Promueve la reflexión, discusión y resolución concentración de 1.0 g/L, para la cual se disuelve 0.1
de dudas. gramos de glucosa en 90 ml de agua y se lleva a volumen
3. Verifica si se cumplió el propósito de a 100 ml. Esta solución patrón se prepara a diferentes
aprendizaje. concentraciones adicionando a cada tubo 1 ml del
reactivo de DNS con agitación constante. Posteriormente
se lleva a baño maría durante 15 minutos se deja enfriar y
se añade agua destilada hasta completar el volumen
respectivo. Se determina la absorbancia de cada tubo a
575 nm en el espectrofotómetro UV.

Preparación de la muestra

Se toma 1 ml de la solución acuosa de la muestra,


enseguida se adiciona 1 ml del reactivo de DNS y se
calienta por 15 min en baño maría. Se deja enfriar y se
diluye con 10 ml de agua destilada. Se procede a leer la
absorbancia junto con el blanco a la misma longitud de
onda que las muestras para la curva patrón.

Aprendizaje Auto-dirigido (Independiente):

Antes de la práctica:
a) Investigar Fermentación alcohólica
b) Investigar Métodos de fermentación con frutos
c) Investigar Que son los azucares reductores

Después de la práctica:
a) Explique si su rendimiento fue bueno o bajo, si fue bajo, mencione las posibles causas.
b) Indicar las características del producto obtenido.
c) Reportar el comportamiento de azucares
d) Reportar la producción de alcohol

Método de Evaluación

De la Práctica Del Aprendizaje Independiente

Investigación previa 10% Examen rápido sobre la investigación previa


Trabajo en el laboratorio 40%
Reporte de práctica 50% (véase anexo 1)

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Elaboró M. en C Alma Angélica Vuelvas Contacto: Ext. 11454


Solórzano

Cargo/Grado: Docente de asignatura Campus: Querétaro

Revisó Comité Nacional de Fecha: 30 de Septiembre 2016


(validó): Validación de Practicarios
de QFBT

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ANEXOS

ANEXO 1: RÚBRICA DE EVALUCIÓN

Parámetro Excelente Bueno Regular Deficiente


10 pts 8 pts 6 pts 0 pts
1.Formato tipo
artículo en Excelente Bueno Regular Deficiente
formato
electrónico -Cumple con el Hubo incumplimiento Hubo incumplimiento Hubo
5% formato que se en uno de los tres en dos de los tres incumplimiento en
anexa al final de requisitos: requisitos: los tres requisitos:
este manual -Cumple con el -Cumple con el -Cumple con el
-Se entregó en formato que se formato que se formato que se
tiempo anexa al final de anexa al final de anexa al final de
- Se entregó en este manual este manual este manual
formato electrónico -Se entregó en -Se entregó en -Se entregó en
tiempo tiempo tiempo
- Se entregó en - Se entregó en - Se entregó en
formato electrónico formato electrónico formato electrónico

2. Ortografía
5% Excelente Bueno Regular Deficiente
-No presenta errores Presenta entre 1 y 3 Presenta entre 3 y 6 El reporte incluye
de ortografía errores ortográficos errores ortográficos más de 6 errores
ortográficos
3. Resumen y
palabras clave Excelente Bueno Regular Deficiente
5% Hubo incumplimiento
-En el resumen en uno de los tres Hubo incumplimiento Hubo
describe con sus requisitos: en dos de los tres incumplimiento en
propias palabras en -En el resumen requisitos: los tres requisitos:
máximo 1 cuartilla describe con sus -En el resumen -En el resumen
los objetivos del propias palabras en describe con sus describe con sus
trabajo, la máximo 1 cuartilla propias palabras en propias palabras en
metodología general los objetivos del máximo 1 cuartilla máximo 1 cuartilla
con los resultados trabajo, la los objetivos del los objetivos del
más relevantes. metodología general trabajo, la trabajo, la
-Redacta los verbos con los resultados metodología general metodología general
en pasado más relevantes. con los resultados con los resultados
-Incluye las palabras -Redacta los verbos más relevantes. más relevantes.
claves relacionadas en pasado -Redacta los verbos -Redacta los verbos
a la práctica -Incluye las palabras en pasado en pasado
claves relacionadas -Incluye las palabras -Incluye las palabras
a la práctica claves relacionadas claves relacionadas
a la práctica a la práctica
4. Introducción
15% Excelente Bueno Regular Deficiente
-Realiza una revisión -Realiza una revisión -Realiza una revisión - La revisión
bibliográfica donde bibliográfica bibliográfica bibliográfica es
plantea completa donde incompleta incongruente al
ordenadamente el plantea - o no incluye las tema y no se
tema de desordenadamente referencia incluyen las
investigación, su el tema de bibliográficas o referencias
importancia e investigación (no se hemerográficas en el bibliográficas o
implicaciones cumple la regla de lo texto hemerográficas en el
partiendo de lo general a lo texto
general a lo particular),
particular. - o no incluye las
-Incluye las referencia
referencia bibliográficas o
bibliográficas o hemerográficas en el
hemerográficas en el texto
texto

Copyright © UVM México, 2015. Todos los Derechos Reservados. 30


UVM México Escuela de Ciencias de la Salud

5. Planteamiento del El planteamiento El planteamiento El planteamiento No responde a la


problema responde a la responde responde pregunta ¿qué voy a
pregunta ¿qué voy a parcialmente a la deficientemente a la investigar?
investigar? pregunta ¿qué voy a pregunta ¿qué voy a
investigar? investigar?
6. Justificación El planteamiento El planteamiento El planteamiento No responde a la
responde a la responde responde pregunta ¿por qué
pregunta ¿por qué parcialmente a la deficientemente a la voy a investigar?
voy a investigar? pregunta ¿por qué pregunta ¿por qué
voy a investigar? voy a investigar?
7. Objetivos El planteamiento El planteamiento El planteamiento No responde a la
5% responde a la responde responde pregunta ¿para qué
pregunta ¿para qué parcialmente a la deficientemente a la voy a investigar?
voy a investigar? pregunta ¿para qué pregunta ¿para qué
voy a investigar? voy a investigar?
8. Hipótesis La hipótesis La hipótesis La hipótesis La hipótesis no
constituye un juicio constituye un juicio constituye un juicio constituye un juicio
de posibilidad que de posibilidad que de posibilidad que de posibilidad que
expresa la relación expresa la relación expresa la relación exprese la relación
causa efecto (si vs causa efecto (si vs causa efecto (si vs causa efecto (si vs
entonces) que se entonces) que se entonces) que se entonces) que se
pretende verificar. pretende verificar pretende verificar de pretende verificar.
parcialmente manera deficiente.
correcto.
9. Método
5% Excelente Bueno Regular Deficiente
-Describe el -Describe el -No describe el
procedimiento -Describe el procedimiento procedimiento
experimental de procedimiento experimental de experimental
forma que responde experimental de forma que responde
a la pregunta ¿Cómo forma que responde de forma deficiente
lo voy a investigar? parcialmente a la pregunta ¿Cómo
correcto a la lo voy a investigar?
pregunta ¿Cómo lo
voy a investigar?

10.Resultados
15% Excelente Bueno Regular Deficiente
-Recopila y ordena -Recopila y ordena -Recopila y ordena -No presenta los
los datos obtenidos los datos obtenidos los datos obtenidos resultados obtenidos
presentándolos en presentándolos en presentándolos en
párrafos, cuadros o párrafos, cuadros o párrafos, cuadros o
gráficos claramente gráficos pero no los gráficos pero no los
identificados. identifica claramente identifica claramente
-Incluye las fórmulas -O no incluye las -No incluye las
y sustituciones fórmulas y fórmulas y
empleadas sustituciones sustituciones
empleadas empleadas
11. Análisis de
resultados Excelente Bueno Regular Deficiente
20%
-Interpreta y analiza -Interpreta y analiza - Interpreta y -No Interpreta y no
los resultados los resultados analiza los analiza los
obtenidos obtenidos pero no resultados obtenidos resultados obtenidos
comparativamente comparativamente pero no -Ni tampoco indica
con la bibliografía con la bibliografía comparativamente las aplicaciones
consultada -Indica consultada con la bibliografía teóricas
las aplicaciones -O no indica las consultada
teóricas aplicaciones teóricas -No indica las
aplicaciones teóricas
12.Conclusiones
20% Excelente Bueno Regular Deficiente
-Redacta con sus -Redacta con sus -No redacta con sus -No redacta las
propias palabras si propias palabras si propias palabras si conclusiones o las
se cumplen o no los se cumplen o no los se cumplen o no los copia de textos
objetivos en base al objetivos pero no objetivos
análisis de los considera -o No considera el
resultados completamente el análisis de los
análisis de los resultados

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resultados
13.Referencias
5% Excelente Bueno Regular Deficiente
-Presenta por lo -Presenta menos de -Presenta menos de -No presenta
menos 3 3 bibliografías 3 bibliografía bibliografía
bibliografías consultadas consultada, sin
consultadas, en - o no las presenta orden alfabético ,
orden alfabético , en orden alfabético - o no sigue el
siguiendo el formato - o no sigue el formato APA
APA formato APA

ANEXO 2: REPORTE DE PRÁCTICA

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ANEXO 3: SOLICTUD DE REACTIVOS Y MATERIALES

UNIVERSIDAD DEL VALLE DE MEXICO


Región Ciudad de México
Campus:
Hoja de solicitud de reactivos y materiales de laboratorio
Titulo de la práctica
Fecha de la práctica
Fecha de entrega de solicitud
Numero de equipos Materia
Semestre Carrera
Horario Laboratorio
Profesor
REACTIVOS
Cantidad
Descripción del Reactivo Observaciones
por grupo

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