Microscopía Oil Red O-Solución de Tinción
Microscopía Oil Red O-Solución de Tinción
Microscopía Oil Red O-Solución de Tinción
0250 Técnica
Tinción en la cubeta de 60 ml de Hellendahl
Los portaobjetos han de ser inmersos y movidos en las soluciones, la simple
Microscopía introducción proporcionará resultados de tinción insuficientes.
Los portaobjetos deberían ser escurridos bien por goteo después de los diferentes
pasos de tinción, de esta manera se podrá evitar el innecesario arrastre de solu-
Oil red O-solución de tinción ciones.
Para conseguir un óptimo resultado de tinción, deberían respetarse los períodos
para la detección de lípidos neutrales en cortes indicados.
congelados Portaobjetos con corte congelado
para microscopía 2-Propanol al 60 % 20 segundos
Oil red O-solución de tinción 10 minutos
2-Propanol al 60 % 30 segundos
Producto sanitario para diagnóstico in vitro
Agua destilada 20 segundos
Solución de hematoxilina modificada según Gill II 5 minutos
La presente “Oil red O-solución de tinción - para la detección de lípidos neutrales Agua corriente del grifo 3 minutos
en cortes congelados - para microscopía” es utilizada para el diagnóstico celular
en la medicina humana, se emplea en el examen histológico de muestras de Montar los preparados humedecidos con p. ej. Aquatex® y cubreobjetos.
origen humano. Se trata de una solución de colorante lista para el uso que, junto
con otros materiales de diagnóstico in vitro pertenecientes a nuestra cartera, Para el almacenamiento de preparados durante varios meses se recomienda el
hace evaluables determinadas para el diagnóstico estructuras de destino montaje con un medio de montaje acuoso (p. ej. Aquatex®, gelatina glicerinada
(mediante inclusión congelado, tinción, contratinción, montaje) en material de según Kaiser) y un cubreobjetos.
examen histológico, como pueden ser cortes histológicos p. ej. del riñón, de un Para el análisis de preparados teñidos con un aumento microscópico >40x se
músculo, del corazón o del pulmón. recomienda el uso de aceite de inmersión.
Principio Resultado
La tinción de rojo aceite O (Oil Red O) se utiliza por ejemplo para la detección de Núcleos celulares azul
grasas neutras o gránulos de polietileno en tejidos histológicos, en la patología
articular así como en material de muestra citológico. La presente solución de rojo Lípidos rojo luminoso
aceite O está lista para ser usada y proporciona una intensa y luminosa colora-
ción en rojo de los lípidos, mientras que los núcleos celulares son contrateñidos Localización de errores
en azul por medio de una solución de hematoxilina según Gill II. Diferenciación insuficiente
La tinción de lípidos en tejidos histológicos con colorantes tipo Sudán es un proce- El paso crítico de la tinción es el paso de diferenciación con 2-propanol al 60 %
so físico. El rojo aceite O es un colorante lipófilo que, debido a su comportamiento según la tinción de rojo aceite O, el cual elimina del tejido los restos de colorante
de solución, difunde hacia los lípidos del tejido. que sobren.
Los tiempos indicados en la presente información deberían ser respetados con la
Material de las muestras máxima exactitud para evitar de esta manera una posible coloración inespecífica
de fondo.
Cortes congelados de tejido nativo (8 - 10 µm)
Coloración inespecífica del fondo coloración inespecífica del fondo
Reactivos Las trazas de grasa que pueda haber sobre o dentro del preparado, así como en
Art. 1.02419.0250 el portaobjetos, también serán ligadas y teñidas de forma específica por el rojo
Oil red O-solución de tinción 250 ml aceite O. Por consiguiente, se debería evitar todo ensuciamiento con grasa, ya que
para la detección de lípidos neutrales en cortes congelados estos restos podrán causar resultados erróneamente positivos.
para microscopía
Notas técnicas
Necesario además:
El microscopio usado debería corresponder a los requisitos de un laboratorio de
Art. 105175 Hematoxilina en solución modificada según Gill II 500 ml, 2,5 l
diagnóstico médico.
para microscopía
Si se utilizan criostatos o aparatos automáticos de tinción, deberán tenerse en
Art. 109634 2-Propanol para análisis EMSURE® 1 l, 2,5 l, 5 l cuenta las instrucciones de operación del fabricante, tanto del aparato como del
ACS,ISO,Reag. Ph Eur software.
Eliminar el aceite de inmersión en exceso antes de archivar.
Preparación de las muestras
La toma de muestra debe ser realizada por personal especializado. Diagnóstico
Todas las muestras deben tratarse de acuerdo con el estado de la tecnología. Los diagnósticos deberán ser establecidos solamente por personas autorizadas
Todas las muestras deben estar rotuladas inequívocamente. y cualificadas.
Deben usarse instrumentos adecuados para la toma de muestras y en la prepa- Deberán emplearse terminologías vigentes.
ración, y deben seguirse las instrucciones del fabricante para la aplicación / el Deberán elegirse y realizarse ensayos ulteriores según métodos reconocidos.
empleo. Cada aplicación debería implicar controles adecuados para descartar resultados
erróneos. El uso de un control negativo (p. ej. tejido renal exento de grasa) exclu-
Preparación del reactivo ye por ejemplo la posibilidad de tinciones no específicas.
Oil red O-solución de tinción
Almacenamiento
La Oil red O-solución de tinción - para la detección de lípidos neutrales en cortes
congelados - para microscopía utilizada para los procesos de tinción está lista Guardar la Oil red O-solución de tinción - para la detección de lípidos neutrales
para el uso, la dilución de la solución no es necesaria y empeora el resultado de en cortes congelados - para microscopía de +15 °C a +25 °C.
la tinción así como la estabilidad.
Estabilidad
Solución de 2-propanol al 60 %, acuosa La Oil red O-solución de tinción - para la detección de lípidos neutrales en
Para preparar aprox. 100 ml de solución se añaden juntos: cortes congelados - para microscopía puede usarse hasta la fecha de caducidad
indicada.
2-Propanol al 100 % 60 ml Después de abrir el frasco por primera vez, el contenido almacenado entre +15 °C
y +25 °C es utilizable hasta la fecha de caducidad indicada.
Agua destilada 40 ml
Los frascos siempre deberán estar bien cerradas, ya que la solución contiene
disolventes volátiles que podrían evaporarse.
Capacidad
al menos 200 tinciones / 250 ml
Reactivos auxiliares
Art. 104699 Aceite de inmersión frasco gotero de
para microscopía 100 ml, 100 ml,
500 ml
Art. 105175 Hematoxilina en solución modificada según 500 ml, 2,5 l
Gill II
para microscopía
Art. 105230 Rojo aceite O (C.I. 26125) 25 g
para microscopía Certistain®
Art. 108562 Aquatex® frasco gotero de
(medio de montaje acuoso) 50 ml
para microscopía
Art. 108635 Gelatina glicerinada según Kaiser, exento frasco gotero de
de fenol 100 ml
para microscopía
Art. 109242 Gelatina glicerinada según Kaiser 100 ml
para microscopía
Art. 109634 2-Propanol para análisis EMSURE® 1 l, 2,5 l, 5 l
ACS,ISO,Reag. Ph Eur
Literatura
1. Romeis - Mikroskopische Technik, Editors: Mulisch, Maria, Welsch, Ulrich,
2015, Springer-Verlag Berlin Heidelberg
2. Theory and Practice of Histological Techniques, John D Bancroft and Marilyn
Gamble, 6th Edition
3. Conn’s Biological Stains: A Handbook of Dyes, Stains and Fluorochromes for
Use in Biology and Medicine, 10th Edition, (ed. Horobin, R.W. and Kiernan,
J.A). Bios, 2002
Status: 2018-01-05