Wilson Cardona G.

, y
Cromatogratia de capa fina Roberto
Amaris A
Sesión 6

CROMATOGRAFÍA DE CAPA FINA

Objetivos
Separar una mezcla de compuestos orgánicos en solución, mediante cromatografia en capa fina

2. Ensayar varias mezclas de solventes en diferentes proporciones y escoger cual de ellas efectúa
a la
mejor separación.
3. Identificar cada uno de los compuestos separados comparándolos con muestras patrones.
4. Calcular el valor del R para cada compuesto en la proporción de solvente escogida.

Aspectos teóricos
La cromatografía es un método físico de separación basado en la diferencia de distribucion de los componento
de una mezcla entre dos fases de soluto de la
inmiscibles, una móvil otra estacionaria. Las
y moléculas
SOn retenidas por la fase estacionaria y arrastradas por la fase móvil, de manera que Si los componentes del
mezca
mezcla presentan diferentes afinidades por alguna de las fases, sus velocidades medias de avance a lo larn
delistema serán diferentes. La afinidad viene determinada por fuerzas de tipo Vander Waals, puentes to
ndrogeno o transferencia de carga. Los componentes que sean fuertemente retenidos por la fase estacionaria
Se moverán más lentamente a lo largo de dicha fase que aquellos que se unen débilmente. Como consecuenca
de esta diferencia de movilidad los
componentes de la mezcla se separan en bandas discretas, que pueden
analizarse cualitativa o cuantitativamente mediante el uso de los detectores adecuados.

En la
cromatografía en capa fina (TLC) la
material de
fase estacionaria se deposita formando una
capa delgada sobre un
soporte, como placas de vidrio o aluminio. La fase móvil asciende a lo largo de la tase
por capilaridad, produciéndose la separación de los componentes de la muestra con base a Su estacionaria
distribución entre la fase móvil y la fase estacionaria. diferente

Algunos adsorbentes comúnmente utilizados como fases estacionarias son: silica

almidón. La sílica gel es la más utilizada gel, alumina, sacarosa y
para separar compuestos neutros o con pocos grupos
principalmente por la formación de puentes de hidrógeno, como se muestra la figura. polares,

-S-O SI 0-sl
Enlaces de hidrógeno

Silica gel

La alúmina se usa con más frecuencia para la

moléculas polares, tales separación de bases y la celulosa para la
como los aminoácidos, los carbohidratos
y otros
separación de
compuestos naturales hidrofílicos.
La fase móvil consiste en un disolvente o
mezcla de disolventes,
fin de optimizar la separación de los seleccionado (s) en base a su
componentes de la muestra en la polaridad con el
columna. De forma orientativa se
establecer el siguiente orden de polaridades puede
para los disolventes más utilizados:
Éter de petróleo (mezcla de
cloroformo < acetona <
hidrocarburos)<
acetato de etilo< etanol <
hexano < benceno < éter etílico tetracloruro de
metanol <
agua carbono <
Alaunas de las ventajas que presenta esta
se muestra técnica son su bajo costo,
de forma esquematica un
proceso rapidez y su sensibilidad. En la
su
disolvente en la placa recibe el
nombre de
cromatográfico
capa en
fina. La altura Figura
frente
de disolvente, máxima que alcanza ei
distancias relativas recorridas por los y
componentes de la mezcla en el
se utiliza como referencia
para calcular las
cromatograma.

n a ilustración de la sepaiacion por

crofiatogralia de capa tina consultar la
siguiente página:
http://www.qmc.ufsc.br/organica 40
Manual de Prácticas de
Fundamentos de Quimica Organea
 Hoberi Anrar1s A
rovnatogralia de cajpa tina wison ardons . y

eución
fenie de dasoBverte

a
A O

Se denomina factor de retardo (R)

a
disolvente en el mismo
la relación existente entre ia distancia recorrida por un
compuesto y a
recorrida por el tiempo:

de
distanciarecorrida porelcompuesto da Y Ryg
R
distancia recorrida por el disolvente
AA dp do

Este factor depende tanto de condiciones

las experimentales (temperatura, grado de saturacion de la camara de
desaollo. cantidad de muestra, etc.) como de la composición de la fase móvil y de la fase estacionaria

Materiales:

2 Placas cromatográficas Cámara de yodo

2 CamaraS 2 Capilares
Silica gel

Sustancias:

Mezcla de acido gálico, resorcinol y B-naftol Acetato de etilo

Muestras problema: solución de åcido gálico, Hexano
resorcinol y B-naftol

Sección experimental

Cromatografía de adsorción en capa fina

una mezcla
Tome dos placas cromatográficas y siembre en una placa utilizando un capilar (ver figura),
resorcinol y B-naftol. Siembre al lado de la anterior
que contenga los siguientes solutos: ácido gálico,
anteriores.
una nuestra desconocida que contenga uno de los compuestos

coOH
OR
OH

HO

OR

-naftol Resorcinol Acido gàlico

Sembrado de la muestra

41
Manual de Practicas de Fundamentos de Quimica Organics
 wilson Cardona G., Y
Hoberto
2 Amaris a
Cromatografia de capa fina de etilo
mezcla
hexano-acetato
n
en proporCión
en una cámara que contenga una
ntroduzca esta placa
solvente.
con el
solutos NO estén en contacto
O., procurando que los

Nota 1: la cámaras cromatográfica debe estar muy seca;

en casa
de contener numedad colóou.
olóquela en la
estufa
de una mezcla de hexano-acetato da

R e p i t a el paso 2 en una segunda placa y colóquela dentro etilo e

proporción 6:4
antes de la parte Superiorde c a d a i .
Después de que el eluente haya
ascendido hasta un poco
coloquelasS dentro
de una cámara
de
dela
subió el solvente y
placas, retirelas, marque
hasta donde
cada una de las placas. yodo
Observe las manchas que aparecen en

con los compuestos organicos desconocidos

. Compare las manchas de los compuestos patrones
cada uno de los compuestos sena.
6.
Escoja la placa donde se obtiene mejor separación e identifique
y determine su Rr.
Relacione la polaridad de los compuestos orgánicos separados con la de los solventes utilizados.

fase móvil

10. Haga una relación entre la polaridad de los compuestos y el H

NOta 2: Cubra con cinta transparente las cromatoplacas y no olvide colocarlas el intorme

Disposición de desechos:

Grupo 10 A-Sólidos: en este recipiente se depositan las placas de cromatografia dañadas

rupo 10 B-Guardián de seguridad: en este recipiente se depositan los capilares
Grupo 7A -0rgánicos peligrosos: residuos de hexano y acetato de etilo

Preguntas
1. Qué tipos de cromatografía se utilizan según la fase estacionaria?
2. Para qué se utiliza la cromatografia y en que se diferencia de la
3 En qué campos es más útil la cromatografía sobre electroforesis?
Mencione cinco solventes papel?
que se utilicen en TLC
5. Se podrá utilizar agua como solvente en TLC?
6. Si se tiene como eluente
hexano-éter
Explique.
1:1 y necesita aumentar la
componentes necesita aumentar? por qué? polaridad de éste, Cuál de los dos
7. A un eluente
benceno-cloroformo 1:1 se requiere disminuir la
aumentaría? por qué? polaridad, Cuál de los dos componenies
8. En qué se diferencian los términos adsorción y
absorción?

Manuai de
Prácticas de
Fundamentos
Gndamentos de
de Quimica Ovgan
Cui
 Carhena
ty iobei fo Aman A
witsen

Akohees y Fenoles
Prepiedades Qumwas de

Sesion 11
ALCOHOLES Y FENOLES
PROPIEDADES
QUIMICAS DE LOSs

tonoles,
en
presencia
de diferentes
Objetivos o n la
de los T0
alcoholes
alitáticos
cos con
c
de sodio metálico, la
reactividad de los la prueba
Comparar la utilizando

tercarios,

reactivos aios
secundario y
alcotholes primarios,
Diferenciar los
Jones.
la prueba de
prueba de Lucas y metanol en licores farmaceunca

de muestra
Deterinar la presencia acetaminotón
e n una
cualitativamente

4. eterminar tenoles en trutas

5 Determinar la presencia de en donde Rv A
fenoles
como Ar-OH los alcohole
R-OH y los Estructuralmente,
Aspectos teóricos como respectivamente. unidos al átomno do
en torma general aromático, de
radicales

se designan número
diconoles un anillo
y del
alquil o cicloalquil dependiendo
un grupo terciarios,
epresentan secundarios o
como primarios,
Se asiican
carbono que contiene
el grupo -OH, asi

Feno
Terciario
Secundarlo
Primano

de R y de Ar,
como también, del
estos compuestos dependen tanto sobre estas tiene el grudo
de
quimicas y tisicas el efecto que
Las propiedades
reacciones del grupo -OH y se observará
estudiarán las
grupo-OH. Se
Raf variar su estructura.
el agua, como muestran
Los fenoles son que los alcoholes y
ácidos más fuertes
Reacción ácido base: una de las razones es que
a
de acidez; etanol: 10, agua:
10'" y fenol: 10",
as siguientes constantes está estabilizado po
mås débil
tenóxido es una base el ión alcóxido e hidróxido ya que
que
el
ion
resonancia.

Na
NaOH

R ON + NaON
No reacciona

b Reacción con sodio metálico: al hacer reaccionar los

alcoholes y los tenoles con sodio metálico (una
base más fuerte que los
reacción implica el
hidróxidos), se podrá apreciar el carácter ácido de estos compuestos. ESta
rompimiento del enlace oxigeno-hidrógeno, 0-H, por la acción del metal. La reaccion
que ocurte es la siguiente:

2 R-OH 2 Na (s) 2 R-O Na Ha (o)

El
desprendimiento de hidrógeno es la evidencia de
de su
producción
da una idea de la
reactividad relativa, acidez, del
hidrógenos
la molécula, activos
y la velociuau
en
alcoholes con el sodio metálico. A continuación fenol los
se muestra el
orden
y diferentes tipos e
de reactividad decreciente

Manual de 58
Prácticas de Fundamentos de Quimica organ
 G.,y Roberto Amarís A.
opiedades Ouimicas de Alcoholes y Fenoles Wilson Cardona

OH R-C OH R1C-OH R OH

C. Prueba de Lucas: Los alcoholes tratados con el reactivo de Lucas difieren en la velocidad con a
reaccionan dependiendo de su estructura. Esto se aprovecha para diferenciar entrelas tres ases
en acido clorniarnco
alcoholes. El reactivo de Lucas solución que contiene cloruro de zinc
es una
concentrado. Esta prueba es aplicable a los alcoholes solubles en agua.

nucleofilica, la Cual
La reacción que presentan los alcoholes con el reactivo de Lucas es de sustitución
enlace carbono-cloro, C-U:
implica la ruptura del enlace carbono-oxigeno, C-OH, y la formación de un

ZnCl2
COH+HCI Calor
R C-CI H,0

La interpretación de la prueba se hace de la siguiente manera

Los alcoholes terciarios reaccionan instantáneamente formando el haluro de alquilo insoluble, que se
como una dispersión turbia (aspecto lechoso). Los alcoholes maas secundarios reacCionan
separa cloruro correspondiente. Los
lentamente, tardan aproximadamente entre 7 y 10 minutos para formar el
alcoholes primarios no reaccionan bajo estas condiciones.

d. Oxidación de alcoholes y fenoles (Prueba de Jones):

los alcoholes primarios y

Para alcoholes: Bajociertas condiciones de oxidación es posible distinguir
secundarios lo hacen con relativa facilidad, mientras
secundarios de terciarios, ya que los primarios y de oxigenos o
aumento del número
hacen. Una reacción de oxidación implica un
que los terciarios no lo R-C-OH. Uno de los
carbono del grupo funcional
disminución del número de hidrógenos entorno al crómico. Los alcoholes
es el reactivo del ácido
Oxidantes más utilizados para esta diferenciación los secundariossa
ácidos carboxilicos y
aldehídos y posteriormente a
primarios se oxidan inicialmente a verde. La reacción que ocurre
es la
un cambio en el reactivo de naranja a
cetonas, produciendo
siguiente:

R-cOH Cro HCrOs

verde
Naranja

denominados quinonas.
fenoles produce una clase de compuestos
Para fenoles: La oxidación de los aromaticas. Además, de los
ciclohexadienonas conjugadas no
Estos compuestos estructuralmente son (sal de
como dicromato o peryodato, el
nitrosodisulfonato potásico
agentes oxidantes usuales, tales
de quinonas:
fremy) se utiliza para la preparación

OH

NaCrO,50 NalO/H
-boquinoa
Catecol

PBenzoGuinona

(KSO3}NO
HOAcetona

59
Manual de Prácticas de Fundamentos de Quimica Orgánica
 Roberto Amaris A.
Cardona G.y
Wils on
Fenoles
con un doble enlace),
Propiedades Quimicas de Akcohees y
urn carbono
hidroxilo unido a coloración se debe a
fenoles y enoles (grupo cloruro férrico. La
fenoles: Los con el fenoles
e Prueba para
o verdosa
al r e a c c i o n a r
distinguir entre
una
coloración violeta
el hierro. Esta prueba permite
producen coordinación con

formación de un
complejo de
ta
y alcoholes

Materiales:
Baño maria
Tubos de ensayo Mortero
Pinza para tubo de ensayo

Sustancias:
Reactivo de CrO/H2SO4
Ciclohexanol
Solución de ácido salicilico
al 1%
8-naftol Solución de FeCl3 al 1%
Solución de hidróxido de sodio al 10%
Acido sulfúrico concentrado
n-butano 0.5%
Solución de ácido cromotrópico al
2-butanol
KMnOs al 2%
1-butano
Soiución concentrada de fenol en benceno Acido oxálico
Una tableta de acetaminofén
Sodio metálico
Un Banano
Reactivo de Lucas
Solucion de tenol en agua al 5% Aguardiente

Seccion experimental
1 Prueba de acidez e n medio básico: En dos tubos de ensayo coloque, respectivamente:

Tubo 1.5 gotas de ciclohexanol

Tubo 2. 0.1 g de B-naftol

Adicione a cada tubo 1 mL (20 gotas) de NaOH al 10%, agite y observe.

Prueba de acidez con sodio metalico: En cuatro tubos de ensayo pequeños, limnpios y SECos
coloque respectivamente, 10 gotas de:

Tubo 1: n butanoi
Tubo 2 2-butano
ubo 3: t-butaiof
Tubo 4. solución concentrada de fenol en benceno
Adicione à cada tutbo, lo más rápido posible, un pequeño
pedazo de sodio (del tamaño de una cabecita
de tostoro), en torma simultánea a los cuatro tubos. Observar el desprendimiento de gas y la rapidez de
a reacción en cada
caso. Anote los resultados y establezca un orden de reacción de mayor a menor.

60
Manual de Prácticas de
Fundamentos de Quimica Organ
Propiedades Quimicas de Alcoholesy Fenoles
G.,y Roberto Amaris A.
Wilson Cardona

3 Prueba de Lucas: En tres tubos de

ensayo pequeños del reacuvO de
(HC/ZnC2) y adicione respectivamente, 10 gotas de:
v secos. colocar 20 gotas Luc
Tubo 1: n-butanol
Tubo 2: 2-butanol
Tubo 3: tbutanol

Si no observa cambio en algun tubo colóquelo en un baño de agua caliente (60-70 °C) 5 minutos, anore
los resultados y establezca el orden de reactividad.

4. Prueba de Jones: En cuatro tubos de

ensayo coloque respectivamente, 4 gotas de
Tubo 1: n-butanol
Tubo 2:2-butanol
Tubo 3: t+butanol
Tubo 4: solución de fenol en agua al 5%.

Luego adiclone a cada tubo con agitación, 2 gotas del reactivo de anhídrido crómico (CrOs) en ácido
sulfúrico yi mL de agua. Observe y anote los cambios de coloración.

5. Prueba del cloruro férrico para fenoles: En tres tubos de ensayo coloque respectivamente, 5 gotas
de:

Tubo 1: fenol en agua al 5%

Tubo 2: solución de ácido salicílico
Tubo 3: n-butanol

Adicione 2 gotas de solución de cloruro férrico al 1%. Agite, observe y copie los resultados.

6. Determinación cualitativa de paracetamol ó acetaminofen: El paracetamol o acetaminofén es un

medicamento con propiedades analgésicas, sin propiedades antinflamatorias clinicamente
celulares responsables de la
significativas. Actua inhibiendo la síntesis de prostaglandinas, mediadores en forma de
Se presenta habitualmente
aparición del dolor. Además, tiene efectos antipiréticos. mas
capsulas, Comprimidos gotas
o de administración oral. En la actualidad es uno de los analgésicos
utilizados al ser bastante seguro y no interactuar con la gran mayoría de los medicamentos.

contra el
H3C ES un ingrediente frecuente de una serie de productos
resfriado común y la gripe. A dosis estándar es seguro, pero su bajo
resultado no pocos
precio y amplia disponibilidad han dado como
HO casos de sobredosificación. En las dosis indicadas el paracetamol no
afecta a la mucosa gástrica ni a la coagulación sanguínea o los
Acetaminofén riñones.

hasta obtener un polvo bien

a. Coloque en un mortero 1 tableta de acetaminofén y macere

homogéneo.
Tome un poco con la espátula y póngalo en tubo de ensayo.
b.

hasta que se disuelva la mayor parte del sólido.

C. Adicione 1 mL de agua y agite vigorosamente
de FeCla y observe la aparición de una coloración azul-violeta.
d. Añada 3 gotas de solución
7. Determinación cualitativa de fenoles en frutas: En las frutas y verduras aparecen unos pigmentos
al cortar y dejar expuesta la superficie al aire. Este
pardos cuando se dañan los tejidos vegetales
normalmente contenidas en el interior de las
pardeamiento aparece cuando sustancias politenólicas,
la acción del enzima fenolasa, presente en el
vacuolas de las células vegetales, son oxidadas por

61
Manual de Prácticas de Fundamentos de Quimica Orgánica
 G.,y Roberto Amaris A.
Wils on Cardona
Propiedades Oimicas de Aceholes y Fenoles
cataliza dos tipos de reacciones; la
fenotasa ó polifenot oxidasa,
CHoplasma de estas célutas La
a la oxidación de un monofenol a un ortodifenol:
resolasa, da lugar
P e r a de ellas, activided

0-quinonas son muy reactivae

as
oxida el o - d i l e n o l a
una
o quinona. Las
La s e g u n d a
actividad, catecolasa,
dando la coloración parda
rápidamente
y polimerizan Escaldando la
fenolasa.
verduras se intenta evitar la acción de la
procesado de frutas y cualquier lesión tisular (o
Durante el oomo es posible después de que
se produzca
trutas y verdutas tan pronto
con la finalidad de evitar el contacto con e
comun es la inmerSión en agua,
inoluso antes) Otra práctica

aire

Sin celentamiento:

6 gotas de FeCl3 y un pequeño trozo de banano

Adicione a un mortero

coloración
Macere durante 2 minutos y observe la aparición de alguna
Con calentamiento:

durante 5 minutos
Coloque un pequeño trozo de banano en agua caliente, entre 70-80 °C,

AdicIone a un mortero 6 gotas de FeCla y el trozo de banano previamente calentado

Macere durante 2 minutos y observe la aparición de alguna coloración

Compare le coloración obtenida con y sin calentamiento, a que se atribuye la diferencia de

coioración?

Determinación cualitativa de metanol en licores: Es un líquido ligero, incoloro, inflamable y tóxico

que se empiea como anticongelante, disolvente y combustible. Su fórmula química es CHOH. La
fermentacion de jugos azucarados implementada para la obtención de bebidas alcohólicas, además de
etanol, produce también cantidades variables de metanol y otros compuestos volátiles. El contenido de
metanol en vro tnto es de 43. 122 mg metanol/, en vino blanco 38.118 mg/ml, en brandy 1500 mg/l, en
wisky 1000 ng/i y en ron 800 mg/l.

La ntoxicacion por metanof

entonces frecuentemente por vía
ocurre
aicohoiicas adulteradas con alcohol digestiva en el caso de bebidas
desnaturalizado o por vía respiratoria, digestiva o a través de la piel
intacta en el caso de exposición en
ambientes laborales, desde donde se
graves y aun mortales. Elo pueden originar intoxicaciones
los individuos
rreversible pues la retina, es el sitio de pueden sobrevivir dejando como secuela la ceguera
manifestación de la toxicidad del metanol.
La mayor parte de los métodos usados en la determinación de metanol
tormaldehido y la posterior determinación de
se basan en su oxidacion d
éste último:

62
Manual de Prácticas de
Fundamentos de Quimica Organict
Prpetactes c u i a S de Akoholes y Fenotes
Wilson Cardona G.,y Roberto Amaris A.

Complejn enle peirpe

a. Coja dos tubos de ensayo y coloque, respectivamente, en cada uno de ellosS

Tubo 1: 1 mL de aguardiente
Tubo 2: 1 mL de aguardiente adulterado

Adicione a cada tubo 3 gotas de ácido sulfúrico concentrado y agite

c. Agrega a cada tub0 5 gotas de permanganato de potasio y agite durante 10 minutos (la solución queda
un poco café)
d. Adicione a cada tubo de 3 a 5 gotas de ácido oxálico y agite (se decolora la solución)
e. Agregue a cada tubo 1mL de la solución de ácido cromotrópico al 0.5% y agite
f. Adicione a cada tub0 20 gotas de ácido sulfúrico concentrado por las paredes del tubo, NO AGTE
Caliente los tubos en un baño maría a 70°C durante 10 minutos. Un anillo de separación pürpura indica
g
la presencia de metanol.

Interferencias: gliceraldehido, arabinosa, fructosa y sacarosa dan un color amarillo para la reaccion.
Concentraciones considerables de furtural dan lugar a la aparición de un color rojizo.

Disposición de desecthos:

adulterado
Grupo 7A- orgánicos peligrosos: Acidez en medio básico y la prueba del licor los residuos de sodio
sodio ó potasio: Colocar beaker etanol para recolectar
Grupo 98 reactivos un con
metales presentes en los
en las diferentes pruebas de acidez, con el fin de desactivar estos
generados
residuos, se veifica la ausencia de sodio metálico y se procede a depositar en el Grupo 7A- orgánicos

peligrosos muestras que

Grupo 4A-orgánicos con metales: Muestras que contengan el reactivo de Lucas,
contengan el FeCl3
el reactivo de Jones
Grupo 3A Prueba de Jones: los alcoholes ensayados
con

Preguntas
sodio metálico.
1. Escriba unaecuación para la reacción de ciclohexanol con
reactivo de Lucas?
2. Qué papel desempeña el ZnCl2 en el
Escriba el mecanismo de la prueba de Lucas.
el ácido crómico: isobutanol, 1-metiiciciopentanol, 2
4. Cuál de los siguientes alcoholes no es oxidado por
metilciclopentanol, explique
entre 4-clorofenol y 4-clorociclohexanol?
Experimentalmente iCómo podemos distinguir
el alcóxido y el hidróxido?
6. Por qué elión fenóxido es una base más débil que
en fotografía
7. Consulte la importancia del sistema quinona-hidroquinona
mas importantes contenidos en el banano, manzanas y patatas
8. Consulte cual ó cuales son los fenoles

63
Manual de Prácticas de Fundamentos de Quimica Orgánica