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    Secuenciacion Sanger

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    Angie Camila Medina Lopez
    La secuenciación de ADN determina el orden de los nucleótidos en un fragmento de ADN. El método de secuenciación de Sanger, desarrollado en 1975, se utilizó en el Proyecto Genoma Humano y permite secuenciar fragmentos de ADN de forma automatizada usando electroforesis capilar. Las aplicaciones incluyen el diagnóstico de enfermedades genéticas y la determinación del sexo fetal en fecundación in vitro.

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    Secuenciacion Sanger

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    La secuenciación de ADN determina el orden de los nucleótidos en un fragmento de ADN. El método de secuenciación de Sanger, desarrollado en 1975, se utilizó en el Proyecto Genoma Humano y permite secuenciar fragmentos de ADN de forma automatizada usando electroforesis capilar. Las aplicaciones incluyen el diagnóstico de enfermedades genéticas y la determinación del sexo fetal en fecundación in vitro.

    Título original

    Secuenciacion Sanger (1)

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    La secuenciación de ADN determina el orden de los nucleótidos en un fragmento de ADN. El método de secuenciación de Sanger, desarrollado en 1975, se utilizó en el Proyecto Genoma Humano y permite secuenciar fragmentos de ADN de forma automatizada usando electroforesis capilar. Las aplicaciones incluyen el diagnóstico de enfermedades genéticas y la determinación del sexo fetal en fecundación in vitro.

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    Secuenciacion Sanger

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    La secuenciación de ADN determina el orden de los nucleótidos en un fragmento de ADN. El método de secuenciación de Sanger, desarrollado en 1975, se utilizó en el Proyecto Genoma Humano y permite secuenciar fragmentos de ADN de forma automatizada usando electroforesis capilar. Las aplicaciones incluyen el diagnóstico de enfermedades genéticas y la determinación del sexo fetal en fecundación in vitro.

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    de 17

    SECUENCIA

    Grupo 4

    Electiva 1:

    Biotecnologia

    Ambiental SANGER

    Angie Camila Medina lopez


    fuac
    2022
    ¿Que es?

    Secuenciación
    ADN
    La secuenciación del ADN se define como

    un conjunto de técnicas bioquímicas cuya

    finalidad es la determinación de nucleótidos

    ADENINA -CITOCINA - GUANINA Y TIMINA en

    un oligonucleótidos de ADN. La secuencia

    de ADN constituye la información genética

    heredable de los seres vivos.


    PROYECTO GENOMA HUMANO
    En el proyecto Genoma Humano, que

    sirvió para el diagnóstico pre

    sintomático y prenatal de enfermedades

    genéticas y el desarrollo de la terapia

    génica para este proyecto tan

    ambicioso, se usó un método de

    secuenciación desarrollado por Frederic

    Sanger en 1975, más conocido como

    métodos de secuenciación de Sanger


    Metodo de secuenciacion de

    SANGER
    La secuenciación de Sanger arroja

    secuencias de alta calidad para

    segmentos relativamente largos de

    ADN. La técnica suele utilizarse

    para secuenciar fragmentos

    individuales de ADN como plácidos

    bacterianos o ADN copiados en la

    PCR. El método de secuenciación

    de Sanger, más utilizado hoy en

    día, emplea la electroforesis

    capilar, la cual permite su

    automatización.
    APLICACIONES
    Deteccion de polimorfismos de un solo nucleotido (SNP)
    Analisis de polimorfismos de cadena simple (SSCP)
    PROCEDIMIENTO
    Materiales

    Una enzima ADN polimerasa.


    Un cebador .
    Los cuatro nucleotidos del ADN (dATP,dTTP,dcTP,dGTP).
    Un molde de ADN que sera secuencial.
    Paso 1 Paso 2
    La muestra de ADN
    Se calienta la
    que se secuenciar
    mezcla para

    hace convienen un
    desnaturalizar el

    tubo con el
    molde de ADN

    (separar cadenas)

    cebador, el ADN

    y luego se enfría

    polimerasa y los

    para que el

    nucleótidos del

    cebador pueda

    ADN. unirse al molde de

    Paso 3
    La ADN polimerasa añadirá nucleótidos a

    la cadena hasta que aleatoriamente

    agregue un neocleotido didesoxi en

    lugar de uno normal. A partir de ese

    moment,o no es posible agregar más

    nucleótidos y la cadena termina con el

    nucleótidos didesoxi.
    Paso 4
    Este proceso se repite cierto

    número de ciclos cuando los ciclos

    terminan, está prácticamente

    garantizado que se han incorporado

    nucleótidos didexosi en cada una de

    las posiciones del ADN blanco en al

    menos una reacción.


    Los extremos de los fragmentos

    tendrán el pigmento que indica su

    único final.
    Paso 5
    Cuando la relación termina, los

    fragmentos se hacen pasar a

    través de un tubo largo y

    delgado que contiene una

    matriz de gel en un proceso

    llamado electroforesis capilar,

    en que los fragmentos cortos se

    mueven rápidamente a través

    de los poros del gel.


    Paso 6
    Cuando cada fragmento cruza la línea de meta al final del tubo, un láser lo

    ilumina y permite la detección del pigmento asociado.


    APLICACIONES
    Entre las aplicaciones de la secuenciación del ADN

    se encuentra el proyecto del genoma humano.


    El proyecto del genoma humano es un proyecto

    internacional cuyo objetivo es obtener una

    descripción completa del genoma humano a través

    de la secuenciación del ADN, el genoma que se

    investiga es el genoma nuclear.


    Esta información proporcionará el diagnóstico en

    individuos con riesgo de ser portadores del gen de

    alguna enfermedad.
    Se aplica también en el diagnóstico de enfermedades hereditarias o la

    determinación del sexo del feto previamente a su implantación en procesos

    de fecundación in vitro. En estado de 8 a 16 células se retiran 1 o dos células

    del embrión para poder amplificar un gen o varios genes específicos con el

    objetivo de estudiar el sexo.


    Bibliografia
    https://es.wikipedia.org/wiki/M%C3%A9todo_de_Sanger
    https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-

    expression-and-regulation/biotechnology/a/dna-sequencing
    https://genotipia.com/sanger/#:~:text=El%20m%C3%A9todo

    %20de%20Sanger%20se,cuatro%20dideoxinucle%C3%B3tido

    s%20(ddATP%2C%20ddGTP%2C
    https://www.thermofisher.com/co/en/home/life-

    science/sequencing/sanger-sequencing.html

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