Herramientas Moleculares

Herramientas moleculares
Las herramientas moleculares nos ayudan a saber identifica el tipo de información

genética como los ADN Y ARN, además nos permiten entender las epidemiologias de
enfermedades y precisa el diagnostico por la especificidad y sensibilidad que estas se
reportan como combatir el virus SARS COV2 o diferente microorganismo infecciosos. La
necesidad de tener un diagnóstico rápido y directo ha llevado al desarrollo de numerosos
ensayos de Reacción en Cadena de la Polimerasa(PCR), cuya ventaja es la obtención de un
diagnóstico definitivo, sensible y específico, desde la fase aguda a la convaleciente de la
enfermedad e incluso antes de que los anticuerpos sean detectables por las pruebas
serológicas convencionales.
La secuenciación de ADN: es el proceso que determina la secuencia de

bases de los nucleótidos (As, Ts, Cs y Gs) de un fragmento de ADN.
 La secuenciación de ADN es el proceso de determinar la secuencia de nucleótidos

(As, Ts, Cs y Gs) de un fragmento de ADN.
Tenemos que los cuatro nucleótidos del ADN son el dATP, dGTP, dCTP, dTTP, en orden
tienen los siguientes nombres:
1. Desoxiadenosina trifosfato.
2. Trifosfato de desoxiguanosina.
3. Desoxicitidina trifosfato.
4. Timidina trifosfato.
Como ya se explicó antes son los cuatro nucleótidos del ADN, son partes fundamentales de
esta proteína porque permite la recolección de información, la generación de energía y realizar los
procesos de síntesis.
 En la secuenciación de Sanger, el ADN blanco es copiado muchas veces y se hacen

fragmentos de diferentes longitudes. Nucleótidos fluorescentes que actúan como
"terminadores de cadena" marcan los extremos de los fragmentos y permiten la
determinación de la secuencia.
 Las técnicas de secuenciación de nueva generación son estrategias nuevas a gran

escala que aumentan la velocidad y reducen el costo de la secuenciación del ADN.
Reacción en Cadena de la Polimerasa
PCR: Técnica de laboratorio utilizada para amplificar secuencias de ADN utilizando

secuencias cortas de ADN llamados cebadores para seleccionar la parte del genoma a
amplificar. La temperatura de la muestra se sube y se baja repetidamente para ayudar a
la enzima de replicación del ADN a duplicar la secuencia del ADN que está siendo copiada.
Con esta técnica se pueden producir un billón de copias de la secuencia en estudio en sólo
unas pocas horas.
 La PCR permite generan miles, millones de copias de ADN

 El efecto de temperatura en dicha técnica es la permite de obtención de copias de la
región blanco
 Se utilizan en muchos casos como la clonación de ADN, el diagnóstico médico y el
análisis forense de ADN
¿Cómo se realizan?
Dicha técnica es utilizada con
 Taq polimerasa
 Cebadores
 ADN molde y nucleótidos
Pasos
 Desnaturalización (96°): ADN
 Unión de cebadores (55-65° C): Los cebadores se incorporan a la cadena molde
 Elongación(72°C): luego de haber presentado los cebadores la Taq polimerasa se
incorporará lo que hará la elongación, es decir lo alargara y así forma muchas
copias de ADN
*Dicho ciclo se repite de 25 a 35 veces en un aproximado de 2 a 4 hora. Pero ¿Por qué o
como produce miles, millones de duplicas de ADN?, esto es debido que al produce nuevas
secuencias de ADN esta puede ser tomada como cadenas moldes lo que hará que se
replique la duplicación de ADN y esto será gracias a las múltiples moléculas de Taq
polimerasa y los cebadores que quedaron en este proceso
Uso de la electroforesis: se utiliza electroforesis en gel, para saber si funcionó o

si el plásmido contiene el gen correcto, luego de hacer la prueba PCR. Debido que la
molécula de ADN tiene la misma cantidad de car lo que las electroforesis en gel, separara
los fragmentos de ADN únicamente por su tamaño
Uso en casos clínicos

la PCR se utiliza para amplificar genes asociados con trastornos genéticos a partir del ADN
de los pacientes (o de ADN fetal, en el caso de pruebas prenatales). La PCR también puede
utilizarse para detectar el ADN de una bacteria o un virus en el cuerpo de un paciente: si el
patógeno está presente, es posible amplificar regiones de su ADN de una muestra de
sangre o tejido.

Herramientas Moleculares - Seminario 6

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Herramientas Moleculares - Seminario 6

Cargado por

Información del documento

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Herramientas Moleculares - Seminario 6

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Las herramientas moleculares nos ayudan a saber identifica el tipo de información

La secuenciación de ADN: es el proceso que determina la secuencia de

 La secuenciación de ADN es el proceso de determinar la secuencia de nucleótidos

 En la secuenciación de Sanger, el ADN blanco es copiado muchas veces y se hacen

 Las técnicas de secuenciación de nueva generación son estrategias nuevas a gran

PCR: Técnica de laboratorio utilizada para amplificar secuencias de ADN utilizando

 La PCR permite generan miles, millones de copias de ADN

Uso de la electroforesis: se utiliza electroforesis en gel, para saber si funcionó o

Uso en casos clínicos

También podría gustarte