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Rev Esp Cardiol. 2013;66(8):657–661

Puesta al dı́a: Innovación en cardiologı́a (VII)

La proteómica y la metabolómica: los mecanismos de la enfermedad

cardiovascular y el descubrimiento de biomarcadores
Javier Barallobre-Barreiroa, Yuen-Li Chungb y Manuel Mayra,*
a
King’s British Heart Foundation Centre, King’s College of London, Londres, Reino Unido
b
Cancer Research UK and EPSRC Cancer Imaging Centre, The Institute of Cancer Research and The Royal Marsden NHS Foundation Trust, Sutton, Surrey, Reino Unido

Historia del artı´culo: RESUMEN

On-line el 2 de julio de 2013
En la última década, la proteómica y la metabolómica han realizado aportaciones sustanciales al
Palabras clave: conocimiento de las enfermedades cardiovasculares. La evaluación no sesgada de los procesos
Proteómica fisiopatológicos sin partir de presunciones establecidas a priori complementa otras técnicas de biologı́a
Metabolómica molecular que se emplean en la actualidad con un enfoque reduccionista. En la presente revisión, se
Espectrometrı́a de masas
resaltan algunos de los métodos de las ciencias «ómicas» que se emplean para evaluar los cambios de las
Espectroscopia por resonancia magnética
proteı́nas y los metabolitos en la enfermedad cardiovascular. Es muy infrecuente que una función
biológica especı́fica discreta se atribuya a una sola molécula; es más habitual que se lleve a cabo con la
aportación combinada de muchas proteı́nas. A diferencia del enfoque reduccionista, en el que se estudia
individualmente las moléculas, las plataformas «ómicas» permiten el estudio de interacciones más
complejas en sistemas biológicos. La combinación de la proteómica y la metabolómica para cuantificar
los cambios de los metabolitos y sus correspondientes enzimas hará avanzar nuestro conocimiento de
los mecanismos fisiopatológicos y facilitará la identificación de nuevos biomarcadores de enfermedad
cardiovascular.
ß 2013 Sociedad Española de Cardiologı́a. Publicado por Elsevier España, S.L. Todos los derechos reservados.

Proteomics and Metabolomics for Mechanistic Insights and Biomarker Discovery

in Cardiovascular Disease

ABSTRACT

Keywords: In the last decade, proteomics and metabolomics have contributed substantially to our understanding of
Proteomics cardiovascular diseases. The unbiased assessment of pathophysiological processes without a priori
Metabolomics assumptions complements other molecular biology techniques that are currently used in a reductionist
Mass spectrometry
approach. In this review, we highlight some of the «omics» methods used to assess protein and metabolite
Magnetic resonance spectroscopy
changes in cardiovascular disease. A discrete biological function is very rarely attributed to a single
molecule; more often it is the combined input of many proteins. In contrast to the reductionist approach, in
which molecules are studied individually, «omics» platforms allow the study of more complex interactions
in biological systems. Combining proteomics and metabolomics to quantify changes in metabolites and
their corresponding enzymes will advance our understanding of pathophysiological mechanisms and aid
the identification of novel biomarkers for cardiovascular disease.

Full English text available from: www.revespcardiol.org/en

ß 2013 Sociedad Española de Cardiologı́a. Published by Elsevier España, S.L. All rights reserved.

ANTECEDENTES pueden constituir un espectro heterogéneo de etiologı́as, estadios

patológicos y bases genéticas. Hay una urgente necesidad de
La enfermedad cardiovascular (ECV) es la primera causa de identificar nuevos biomarcadores para estratificar a los pacientes y
mortalidad y morbilidad en los paı́ses industrializados. La personalizar los tratamientos. Actualmente, la evaluación de
predicción de los eventos cardiovasculares se basa en el biomarcadores se basa en la cuantificación de unas pocas proteı́nas
seguimiento de los factores de riesgo convencionales, como edad, o metabolitos3. Las plataformas de alto rendimiento como la
sexo, hábito tabáquico, diabetes mellitus e hipertensión1. Muchos proteómica y la metabolómica pueden ofrecer lecturas simultá-
de estos factores de riesgo tienen una prevalencia elevada en la neas de centenares de proteı́nas y metabolitos. En esta revisión, se
población, e incluso los mejores algoritmos para los eventos resumen las plataformas de proteómica y metabolómica que hoy
coronarios agudos han fallado en la predicción de la mayorı́a de se aplican a la investigación cardiovascular y pueden conducir a la
los casos de ECV en un periodo de 10 años2. Además de las identificación de nuevos biomarcadores de utilidad clı́nica.
dificultades de predicción, las ECV, como la insuficiencia cardiaca,
PROTEÓMICA
* Autor para correspondencia: Cardiovascular Division, King’s British Heart
Foundation Centre, King’s College London, 125 Coldharbour Lane, Londres SE5 9NU,
Reino Unido. La primera secuencia completa del genoma humano se publicó
Correo electrónico: manuel.mayr@kcl.ac.uk (M. Mayr). en 2001. En contra de lo esperado, esta secuencia incluı́a tan solo

0300-8932/$ – see front matter ß 2013 Sociedad Española de Cardiologı́a. Publicado por Elsevier España, S.L. Todos los derechos reservados.
http://dx.doi.org/10.1016/j.recesp.2013.04.010
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este método continúa estando limitado a una sola proteı́na en

Abreviaturas soluciones.

CL: cromatografı́a lı́quida

Espectrometrı́a de masas en tándem
ECV: enfermedad cardiovascular
EM: espectrometrı́a de masas
Las técnicas de abajo arriba hoy son las utilizadas para la mayor
ERM: espectroscopia por resonancia magnética
parte de la labor de análisis de muestras biológicas: en la
«proteómica de perdigonada» se analizan las proteı́nas de mezclas
unos 20.000 a 25.000 marcos de lectura abiertos que codificaban complejas utilizando una combinación de CL de alto rendimiento y
proteı́nas4. Sin embargo, los productos génicos están sujetos a EM/EM. Una posible advertencia respecto a esta técnica es que el
procesos de corte y empalme y edición de ARN alternativos que dan espectrómetro de masas selecciona el ion precursor más abun-
lugar a una amplia variedad de isoformas diferentes de las dante para la fragmentación. Por consiguiente, la detección de las
proteı́nas5. El objetivo de la proteómica es interrogar al proteoma6. proteı́nas abundantes es más probable que la de las escasas. El
El proteoma engloba todo el conjunto de proteı́nas expresadas por muestreo insuficiente es especialmente problemático en el caso de
una célula, un tejido o un organismo, incluidas sus modificaciones muestras como las de plasma o suero, que corresponden al
postraduccionales. La proteómica es el análisis integral de la proteoma más complejo del cuerpo humano, con proteı́nas que son
expresión génica con el empleo de diversas técnicas para de entre 10 y 12 órdenes de magnitud en el rango dinámico
identificar y caracterizar las proteı́nas. El término proteómica fue lineal13. Los espectrómetros de masas actuales solamente resuel-
acuñado por Marc Wilkins en 1994 por analogı́a con el de la ven de 4 a 5 órdenes de magnitud. Aunque un solo péptido puede
genómica, que es el análisis de los genes. ser suficiente para identificar sin ambigüedad una proteı́na, son
Las primeras técnicas de proteómica se desarrollaron en la necesarios múltiples péptidos de la misma proteı́na para una
década de los setenta7 y su uso ha evolucionado continuamente cuantificación fiable en la proteómica de perdigonada. Hasta la
desde entonces. No fue hasta mediados de la década de los noventa fecha, la mayorı́a de los estudios de proteómica que han analizado
cuando se aplicó la proteómica al estudio de las ECV, con los muestras de plasma han fracasado en el intento de identificar
trabajos pioneros de Knecht et al8 y Jungblut et al9. En esa época, nuevos biomarcadores debido a que las proteı́nas poco abundantes
una de las dificultades principales era la identificación de las son difı́ciles de detectar en presencia de componentes muy
proteı́nas. Inicialmente, se utilizó la secuenciación de Edman, pero abundantes como la albúmina. El problema del muestreo
esta técnica ha sido sustituida tras su introducción por la insuficiente del proteoma plasmático se podrı́a superar en parte
espectrometrı́a de masas (EM) biológica. El primer Premio Nobel con técnicas que utilizan una depleción de las proteı́nas
motivado por la EM fue el concedido a F.W. Aston en 1920. Su plasmáticas abundantes. Una estrategia alternativa es el empleo
espectrómetro de masas permitı́a la separación de diferentes de tejido enfermo, en el que hay un enriquecimiento de
isótopos. Más recientemente, dos nuevos inventos han hecho biomarcadores. Puede usarse una estrategia más especı́fica en el
posible analizar biomoléculas (ADN, péptidos, proteı́nas) mediante plasma/suero una vez identificado el biomarcador candidato.
EM: en 1987, M. Karas y F. Hillenkamp inventaron la MALDI
(desorción/ionización con láser asistida por matriz). En la MALDI- Monitorización por reacción múltiple
EM, se mezcla una matriz (p. ej., ácido a-ciano-4-hidroxicinná-
mico) con el producto a analizar (p. ej., péptidos). Dicho producto La monitorización por reacción múltiple en un espectrómetro
es desorbido de la matriz con la aplicación de un láser y es de masas de triple-cuadrupolo (QqQ-EM) se aplica a péptidos o
ionizado10. En 1989, J.B. Fenn inventó la ionización por electro- metabolitos identificados en los experimentos de descubri-
spray11, lo que le valió el Premio Nobel de Quı́mica en 2002. En la miento14,15. Una QqQ-EM proporciona una forma efectiva y exacta
ionización por electrospray, el producto analizado se ioniza de una de cuantificar unas pocas moléculas diana seleccionadas, incluso
fase lı́quida a otra gaseosa. Ası́ se puede establecer una interfase en mezclas complejas como el plasma o el suero15. Si se puede
directa de los sistemas de cromatografı́a lı́quida (CL) con los ionizar la molécula de interés mediante ionización por electrospray,
espectrómetros de masas. La CL-EM en tándem (CL-EM/EM) es el la QqQ-EM tendrá una interfase con un sistema de CL para la
patrón de referencia actual de la proteómica. La CL separa primero separación del producto analizado, tal como se ha mencionado
los péptidos, lo cual es esencial pues la mayor parte de las mezclas antes. La molécula precursora se selecciona entonces en el primer
son demasiado complejas para analizarlas mediante EM sin cuadrupolo. El segundo cuadrupolo se emplea como cámara de
prefracionamiento. A continuación, el espectrómetro de masas colisión para la fragmentación. Los iones producidos son detec-
en tándem registra las masas de los péptidos inalterados (EM tados en el tercer cuadrupolo, y su intensidad es un indicador de la
plena) antes de seleccionar un ion precursor y fragmentarlo. abundancia de la molécula de origen16. Dada su alta especificidad,
Habitualmente la fragmentación se induce mediante colisión con la monitorización por reacción múltiple se emplea para la
argón o nitrógeno. Los métodos más recientes emplean también validación de biomarcadores candidatos identificados en los
electrones, un método de fragmentación más suave que preserva experimentos de descubrimiento17, pero se ha empleado también
las modificaciones postraduccionales12. Los fragmentos se regis- con éxito para confirmar lugares especı́ficos de fragmentación de
tran en un espectro de EM/EM y el patrón de fragmentación revela las proteı́nas18. Además, la QqQ-EM es el método de elección para
un D masa especı́fico para cada aminoácido presente en el péptido. los estudios de metabolómica dirigida empleando metabolitos
En los estudios iniciales de proteómica, el proceso de trabajo se estándares como calibradores19.
basaba en un paso inicial de separación proteica que utilizaba
técnicas como la electroforesis en gel. A medida que se fueron
desarrollando espectrómetros de masas más rápidos y más METABOLÓMICA
sensibles, se efectuaban la digestión y el análisis directo de
mezclas de proteı́nas cada vez más complejas, sin un fracciona- Los metabolitos son los productos finales de todos los procesos
miento previo de proteı́nas. Se denomina a este método que se producen en las células, y las cantidades de metabolitos en
proteómica de abajo arriba. En cambio, la proteómica de arriba la enfermedad reflejan la adaptación de los sistemas biológicos
abajo analiza proteı́nas inalteradas mediante EM. Sin embargo, a los estados patológicos. Hoy se estima que hay más de
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2.000 metabolitos diferentes que pueden ser sintetizados de forma las tecnologı́as de EM han transformado nuestra capacidad de
endógena20. Además, la dieta incorpora metabolitos exógenos, establecer un perfil de metabolitos no solo en solución, sino también
como por ejemplo las vitaminas. Otro factor contribuyente directamente a partir de cortes de tejido. Por ejemplo, Manicke
importante para el conjunto de metabolitos del organismo es la et al33 aplicaron una EM con ionización por electrospray de desorción
flora intestinal. Al igual que en el caso de la proteómica, el objetivo para visualizar e identificar especies moleculares de lı́pidos en placas
de la metabolómica es caracterizar el complemento de moléculas de origen humano. En otro estudio se mostró el uso de técnicas de
pequeñas de una muestra determinada e interrogar a las redes imagen de moléculas pequeñas mediante EM en tejido cardiaco
metabólicas en condiciones normales y patológicas, de manera de ratón34. Nosotros utilizamos los avances más recientes de la EM
cualitativa y cuantitativa. Las tecnologı́as de metabolómica se han en lipidómica de perdigonada para comparar el contenido lipı́dico de
aplicado a diferentes áreas de investigación clı́nica, entre ellas el lesiones de aterosclerosis humanas bien definidas. Comparando las
descubrimiento de biomarcadores y fármacos21,22, la toxicologı́a23 muestras de endarterectomı́a de pacientes sintomáticos y asinto-
y la nutrición24. Los primeros estudios de metabolómica se máticos y áreas estables e inestables de la misma lesión sintomática,
publicaron a comienzos de la primera década de este siglo y delimitamos las firmas de lı́pidos caracterı́sticas para determinar la
se aplicaron rápidamente a la investigación cardiovascular. Al igual vulnerabilidad de la placa18.
que en la proteómica, la EM es el método de elección para los
análisis de metabolitos, pero también se emplea ampliamente la
espectroscopia por resonancia magnética (ERM)25. APLICACIONES A LA ENFERMEDAD CARDIOVASCULAR

Conocimiento del mecanismo de la enfermedad

Metabolómica basada en espectroscopia por resonancia
magnética
A diferencia del genoma, el proteoma y el metaboloma son
dinámicos y están mucho más próximos al fenotipo de la
La ERM es menos sensible que la EM, pero es notablemente
enfermedad (Fig.). Ası́ pues, podrı́an conducir a un mejor
cuantitativa y aporta ventajas en la cuantificación de los
conocimiento de los procesos que causan que la ECV se manifieste
metabolitos en tejidos intactos y en extractos de tejidos26. Esta
y progrese. Actualmente, las técnicas de proteómica pueden
técnica se basa en que ciertos núcleos con un número de nucleones
identificar hasta 5.000 proteı́nas en una muestra biológica/clı́nica
(protones o neutrones) impar poseen una propiedad denominada
compleja, pero las plataformas de proteómica están en continua
espı́n nuclear. Las resonancias de los núcleos excitados mediante
evolución y amplı́an las fronteras de la instrumentación analı́-
radiofrecuencias especı́ficas pueden medirse para producir una
tica35. En la investigación cardiovascular, el rango dinámico de la
señal bien definida. Los protones (1H) son con frecuencia los
expresión proteica a que dan lugar las proteı́nas de miofilamentos
núcleos de elección para el parámetro de espı́n, ya que son
abundantes (p. ej., tropomiosinas, miosinas, titina) dificulta la
abundantes. Empleando ácido perclórico, se puede extraer los
detección de las proteı́nas poco abundantes en los miocardiocitos.
metabolitos hidrosolubles directamente de corazones sometidos a
En consecuencia, los investigadores han desarrollado métodos
congelación brusca. La 1H-ERM proporciona una forma cuantita-
analı́ticos dirigidos a subproteomas especı́ficos, como los de los
tiva de medir los metabolitos hidrosolubles presentes en estos
miofilamentos cardiacos36, las mitocondrias cardiacas37, las
extractos de metabolitos27. Se utiliza un patrón de referencia
membranas celulares38 o el núcleo celular39. Nosotros hemos
interno para calibrar las desviaciones quı́micas en los espectros
caracterizado recientemente el remodelado de la matriz extrace-
para las identificaciones de los metabolitos. Es importante señalar
lular vascular en aneurismas de aorta abdominal humanos, ası́
que el área del pico que corresponde a la señal de cada metabolito
como la fibrosis inicial y tardı́a, en un modelo porcino de isquemia/
puede calcularse mediante la comparación con el patrón de
lesión de reperfusión40,41. Con la determinación de los niveles de
referencia interno para obtener valores cuantitativos. Pueden
expresión de proteı́nas sin partir de supuestos establecidos a priori,
examinarse al mismo tiempo muchas clases de moléculas en las
las tecnologı́as avanzadas pueden generar nuevas hipótesis y
muestras extraı́das, sin partir de supuestos previos respecto a los
desplazar el centro de interés actual de la determinación
tipos de moléculas. Esto hace que la 1H-ERM sea un método
cuantitativa a las diferencias cualitativas en la fibrosis cardiaca
excelente para abordar los análisis no dirigidos. La 1H-ERM
que pueden modificar la progresión de la enfermedad. Las técnicas
muestra su potencia a la sensibilidad requerida principalmente
«ómicas» abordan las interacciones complejas que se dan dentro de
en extractos ácidos. La sensibilidad y la resolución se reducen en
los sistemas biológicos desde un punto de vista holı́stico, en
los tejidos sólidos. Se puede analizar los tejidos sólidos empleando
particular las interacciones que afectan a la fisiopatologı́a de la
una técnica denominada 1H-ERM con spinning de ángulo mágico de
enfermedad. Anteriormente, los enfoques reduccionistas conven-
alta resolución. El estado energético de una célula o un tejido
cionales trataban las cascadas de señalización intracelulares como
determinados se puede evaluar con ERM de fósforo (31P-ERM). Esta
modelos lineales, considerando las moléculas involucradas confi-
permite la detección de metabolitos energéticos cardiacos de vida
nadas a una única vı́a de señal. Sin embargo, las diferentes vı́as
corta como fosfocreatina y adenosintrifosfato, ası́ como fosfato
interactúan entre sı́ y están organizadas en forma de redes que
inorgánico y el pH intracelular. La 31P-ERM también es adecuada
incluyen tanto proteı́nas como moléculas pequeñas42. La bioin-
para determinaciones in vivo e in vitro28,29.
formática ha pasado a ser un instrumento esencial para analizar y
visualizar de manera completa estas interacciones, y bases de
Metabolómica basada en espectrometrı́a de masas datos como la KEGG (Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes) o
Reactome establecen mapas de enzimas/metabolitos regulados
La metabolómica basada en EM proporciona un método muy dentro de diferentes redes metabólicas43. Ası́ pues, la combinación
sensible de recopilar la información de un perfil metabólico, de proteómica y metabolómica proporciona una lectura comple-
especialmente en los lı́quidos corporales30. Se han realizado análisis mentaria que mejora la fiabilidad de la interpretación de los
metabolómicos basados en el plasma después de una isquemia datos44 y ofrece un conjunto de instrumentos no sesgados para
miocárdica31, pruebas de esfuerzo y pacientes prediabéticos32. Los interrogar al metabolismo cardiovascular45,46.
metabolitos se separan antes de la identificación mediante La fibrilación auricular (FA) conduce a varias formas diferentes
espectrofotometrı́a de masas, utilizando para ello cromatografı́a de remodelado auricular, denominadas eléctrico, contráctil y
de gases o CL. Al igual que en la proteómica, los avances recientes en estructural. Empleando técnicas de proteómica y metabolómica
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Cinética enzimática
Degradación
Interconversión
Transporte
Secreción
n Acumulación
c ió
la Entrada de a
g u Modificaciones exógenos o m
re ol
de
postraduccionales
ab
Conformación et
os Degradación M
n ism Secreción
e ca Activación
M

Complejidad
a
Corte y empalme
eom
alternativo ot
Micro-ARN Pr
Edición del ARN
Estabilidad del ARN
Estructura del ARN

a
om
Epigenética
ri pt
Inserciones-deleciones c
Variantes alélicas a ns
Seudogenes Tr

a
m
e no
G Biología de sistemas

Figura. Biologı́a de sistemas. Los procesos reguladores en el ADN afectan a la expresión de moléculas de procesos posteriores, como los ARN, las proteı́nas y los
metabolitos. Los efectos de los diferentes elementos reguladores son aditivos. La biologı́a de sistemas intenta analizar las interacciones entre las diferentes
entidades moleculares para ofrecer una visión holı́stica de los procesos biológicos y las alteraciones patológicas que se producen en la enfermedad.

para analizar la muestra de orejuela auricular derecha de pacientes beta y tratamientos antiagregantes plaquetarios y anticoagulantes,
en ritmo sinusal y FA permanente, observamos una posible nueva que han llevado a una enorme mejora en los resultados clı́nicos y el
forma de remodelado auricular-remodelado metabólico47. Varias pronóstico de los pacientes con ECV. Al mismo tiempo, la
enzimas involucradas en el metabolismo de la glucosa, los lı́pidos y generalización de las pruebas estándares no invasivas y rápidas
la energı́a fueron alterados durante la FA. Los resultados para detección precoz o valoración de los factores de riesgo ha
proteómicos se sustanciaron mediante análisis metabolómico, y mejorado ciertamente el diagnóstico y los tratamientos preventi-
revelaron un aumento de los metabolitos lipı́dicos y los cuerpos vos. Sin embargo, las ECV rara vez se atribuyen a un único factor. En
cetónicos (acetato, betahidroxibutirato). No se conoce la contri- los últimos años, se ha puesto de manifiesto la necesidad de nuevos
bución del remodelado metabólico a la FA que se hace persistente. biomarcadores para las ECV, con objeto de estratificar mejor a los
Sin embargo, las alteraciones metabólicas parecen preceder a la pacientes y determinar su respuesta al tratamiento. Hoy se
aparición de la FA, lo cual sugiere que no son únicamente una considera a los biomarcadores entidades únicas. En una época
consecuencia de esta. En orejuelas auriculares humanas proce- de tecnologı́as de alto rendimiento, han aparecido nuevos enfoques
dentes de pacientes con o sin FA postoperatoria, se observó que para abordar múltiples biomarcadores en el diagnóstico clı́nico y el
habı́a desregulación de metabolitos cardiacos y alteración de las pronóstico. Por ejemplo, los espectrómetros de masas están ya en
concentraciones de enzimas relacionadas con el metabolismo de la el uso clı́nico para el diagnóstico perinatal y toxicologı́a. Mientras
energı́a antes del inicio de las arritmias postoperatorias47. De que los inmunoanálisis y los métodos bioquı́micos han dominado
manera análoga, las alteraciones proteómicas y metabolómicas el campo de los análisis clı́nicos, las técnicas de alto rendimiento
observadas en un modelo animal de un sustrato de FA en evolución podrı́an pasar a utilizarse más ampliamente para los biomarca-
(marcapasos taquicárdico ventricular en el perro) señalan la dores de la ECV en los próximos años.
importancia clave de los cambios metabólicos, el estrés oxidativo y
la lesión estructural asociada a la insuficiencia cardiaca congestiva
y las alteraciones profibrilatorias en la aurı́cula izquierda48. CONCLUSIONES

El uso combinado de proteómica y metabolómica, junto con los

Identificación de biomarcadores candidatos nuevos métodos para el análisis de datos, permite obtener una
imagen más holı́stica de los sistemas biológicos y sus alteraciones
En la segunda mitad del siglo XX hemos asistido a la en la enfermedad. En los sistemas biológicos, las moléculas (ARN,
generalización de las intervenciones quirúrgicas mı́nimamente proteı́nas o metabolitos) interaccionan para llevar a cabo los
invasivas para las ECV, ası́ como a una aplicación más amplia de procesos moleculares. No se debe abordar estas complejas
diversas moléculas farmacológicas, como estatinas, bloqueadores interacciones exclusivamente con un enfoque reduccionista. La
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J. Barallobre-Barreiro et al / Rev Esp Cardiol. 2013;66(8):657–661 661

ventaja de las técnicas «ómicas» es que se puede usarlas para of an automated high performance liquid chromatography-mass spectrometry
method for their quantitation. J Chromatogr A. 2011;1218:7316–24.
comparaciones de muestras clı́nicas no sujetas a ninguna hipótesis. 19. Stegemann C, Drozdov I, Shalhoub J, Humphries J, Ladroue C, Didangelos A, et al.
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20. Wishart DS, Tzur D, Knox C, Eisner R, Guo AC, Young N, et al. HMDB: the Human
espectrómetros de masas; b) el desarrollo de mejores técnicas de Metabolome Database. Nucleic Acids Res. 2007;35(Database issue):D521–6.
separación, junto con nuevos métodos de marcado, y c) la 21. Shah SH, Kraus WE, Newgard CB. Metabolomic profiling for the identification of
disponibilidad de bases de datos para analizar series de datos de novel biomarkers and mechanisms related to common cardiovascular diseases:
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complejidad creciente. Los espectrómetros de masas serán la 22. Wang-Sattler R, Yu Z, Herder C, Messias AC, Floegel A, He Y, et al. Novel biomarkers
tecnologı́a clave en la proteómica y la metabolómica para hacer for pre-diabetes identified by metabolomics. Mol Syst Biol. 2012;8:615.
avanzar nuestro conocimiento de las ECV y aportar nuevos 23. Shintu L, Baudoin R, Navratil V, Prot JM, Pontoizeau C, Defernez M, et al.
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