Apuntes Microbiologia
Apuntes Microbiologia
Apuntes Microbiologia
Microbiología
4º semestre
Dra. Adriana Carolina Flores Gallegos
UNIDAD 1. Introducción a la microbiología.
Generación espontanea
1) Francesco Redi (1668): naturalista y filosofo italiano.
Llevo a cabo experimentos en donde se colocan trozos de carne en
frascos de vidrio, observo que cuando la carne se descomponía
aparecían moscas y creía que se generaba de manera espontánea. Por
eso realizo diferentes experimentos uno con los frascos herméticamente
cerrados y otro cerrados con una tela.
2) Jonh Needham (1745): biólogo inglés y sacerdote.
Utilizo medios de cultivos análogos donde lo que preparo fue a través de
carne que hervía generaban extractos de carne. En este extracto se
podrá desarrollar la vida microbiana. Pensaba que existía la generación
espontánea en los organismos.
3) Lázaro Spallanzani (1769): naturalista italiano y sacerdote católico.
Vuelve a plantear el experimento de John, pero en vez de ser extracto
de carne es extracto de semillas y los sellaba herméticamente desde
que estaban hirviendo.
Los que estaban sellados no generaban ningún microorganismo.
Creen que la generación espontánea si existe porque creen que el aire
tiene un componente vital.
4) Louis Pasteur (1864): científico francés.
Diseña un instrumento que demuestra que el aire acarrea gérmenes que
son vitales para la creación de microorganismos.
Con un matraz cuello de cisne, filtraba el aire con un algodón y una
jeringa.
Filtra polvo y gérmenes que quedan atrapados en el cuello del frasco.
El único que apoyaba la teoría de la generación espontánea era Jonh
Needham.
A. John Tyndall (1820-1893)
En 1877 confirma que el polvo acarrea gérmenes, y si están
ausentes, los cultivos permanecerán estériles aun al ser expuestos
al aire.
B. Ferdinand Cohn (1828-1898)
Demuestra la existencia de endosporas bacterianas resistentes al
calor.
1977:
Se descubren las
diferencias entre ARNr
SS de arqueas y
bacterias.
Metazoos
(animales):
Equinodermos,
peces, anfibios,
mamíferos, aves,
reptiles, arácnidos,
insectos, moluscos
y crustáceos
Procariotas Eucariotas
Hongos mucosos,
Mitocondria, bacterias Methanosarcina,
entamebas, animales,
verdes no del azufre, gran holófilos,
hongos, plantas,
positiva, proteobacteria, methanobacterium,
ciliados, flagelados,
cloroplasto, cianobacteria, methanococcus,
tricomonadas,
favobacterias, thermotoga, pyrodictium T. celer,
microsporidios y
aquifex y thermopretus
diplomónadas (Giardia)
thermodesulfobacterium.
El sistema de los tres dominios es una clasificación biológica propuesta por
Carl Woese y colaboradores en 1977, que clasifica el árbol de la vida en
tres grupos, en la categoría más alta: Bacteria (en sentido restringido,
excluyendo a las arqueas, a diferencia de la hasta en ese momento
concepción del grupo), archaea y eukarya.
o Imperio bacteria:
⬧ Reino Eubacteria: Bacterias verdaderas.
⬧ Reino Archeobacteria: Bacterias ancestrales, por lo general
extremófilas.
o Imperio eucaryota (tienen núcleo verdadero)
⬧ Reino Archezoa: Es como la transición entre procariota y
eucariota. Organismos primitivos eucariotas unicelulares, tales
como Giardia, que tienen ribosomas 70S y carecen de aparato de
Golgi, mitocondrias, cloroplastos y peroxisomas.
⬧ Reino Protozoa: Protozoarios complejos.
⬧ Reino Chromista: Organismos fotosintéticos que tienen sus
cloroplastos dentro del lumen del retículo endoplásmico rugoso y
no en la matriz citoplasmática.
⬧ Reino Fungí: Organismos eucariotas que se nutren por absorción
y a menudo son multinucleados. Los hongos superiores
pertenecen a este reino.
⬧ Reino Plantae: Plantas multicelulares con células eucariotas
poseedoras de pared celular y fotosíntesis.
⬧ Reino Animalia: Animales multicelulares con nutrición por
ingestión.
Reino y Dominio
Division
Clase
Orden
Familia
Género
Espe
cie
Clase: Se caracteriza por terminar con sufijos específicos.
Orden: De dominio a familia no se escribe en cursive
Familia: La primera letra siempre es en mayúsculas
Género: En cursiva o subrayado
Especie: En cursiva, la primera siempre es minúscula.
0.61𝜆
𝑟=
𝑁𝐴
Apertura Distancia de
Categoría Objetivos
numérica trabajo
4x 0.10 37.5
Objetivos 10x 0.25 7.613
acromáticos 40x 0.65 0.632
100x 1.25 0.198
o Apertura numérica: Es la mitad del ángulo del cono de luz. La
resolución es mejor si la distancia de trabajo es menor.
Solo el objetivo de 100x puede usar aceite de inmersión.
Factores que determinan la resolución
Objetivo
Propiedades De escaneo Seco débil Seco fuerte De inmersión
Amplificación 4x 10x 40-45x 90-100x
Apertura numérica 0.10 0.25 0.55-0.65 1.25-1.4
Longitud focal
40mm 16mm 4mm 1.8-2mm
aproximada
Distancia de
17-20mm 4-8mm 0.5-0.7mm 0.1mm
trabajo
Poder de
resolución
aproximado con 2.3 0.9 0.35 0.18
luz de 450nm
(azul)
Ventajas Desventajas
Fácil de usar
Fácil de alinear
El
microscopio
Polimetafosfat de contraste
de fases es
Azufre
o
util para
detectar:
Determinar la Celulas
forma eucariotas
Características en común:
o Tiene grupos cromóforos
o Pueden unirse con las células por enlaces iónicos, covalentes
o hidrofóbicos
o Tinción negativa (nigrosina, tinta china)
Tipos de colorantes ionizables:
o Básicos: catiónicos (+): azul de metileno, fucsina básica, cristal violeta,
safranina, verde malaquita.
o Ácidos (-): eosina, rosa de bengala, fucsina acida.
La tinción de Gram es un procedimiento propuesto por Christian Gram, nos
permite separar rápidamente a los microorganismos en dos grandes grupos:
Gram positivos y Gram negativos.
Gram positivos= Morados
Gram negativos= Rojos
-Inclusiones celulares
Son almacenes de algún tipo de nutriente que le servirá a la célula cuando
está en carencia de cierto nutriente. Alrededor del 70% del citoplasma es
agua y dentro de este están las inclusiones que es un granulo de algún
material orgánico o inorgánico.
o Inclusiones orgánicas
➢ Gránulos de glucógeno: de 20 a 100 nm en diámetro
➢ Gránulos PHB (poli-B-hidroxibutirato): 0.2 a 0.7 un en diámetro
➢ Gránulos cianoficina: polipéptidos formados por arginina y
aspártico. Estos almacenan nitrógeno
➢ Carboxisomas: 100n en diámetro. Ribulosa 1, 5 bifosfato
carboxilasa (fijación de CO2)
➢ Vacuolas de gas: Flotar
o Inclusiones inorgánicas
➢ Polifosfato o gránulos de volutina (gránulos metacromáticos)
➢ Gránulos de sulfuro
La matriz de células procariotas suele estar llena de ribosomas que también están
estrechamente relacionados con la membrana celular. Con microscopía electrónica de
ajo aumento los ribosomas parecen ser partículas pequeñas e insignificantes, pero de
hecho son objetos muy complejos compuestos tanto de proteínas como de ácido
ribonucleico (ARN). Son el sitio de síntesis de proteínas: los ribosomas basales sintetizan
proteínas destinadas a permanecer dentro de la célula mientras que los ribosomas de la
membrana plasmática producen proteínas para el transporte externo. Los ribosomas en
procariotas son más pequeños que en eucariotas. Se conocen comúnmente como
ribosomas 70S y tienen un tamaño de aproximadamente 14-15 nm x 20 nm tienen un
peso molecular de aproximadamente 27 millones y están formados por dos subunidades
llamadas 50S y 30S.
Quizás la diferencia más llamativa entre las células procariotas y eucariotas es la forma
en que se empaqueta su material genético. Las células eucariotas tienen dos o más
cromosomas contenidos en un orgánulo unido a la membrana llamado núcleo. Por el
contrario, los procariotas no tienen un núcleo delimitado por membranas. Los
cromosomas procarióticos, que casi siempre son cromosomas de ADN de cadena
simple, circular y doble, están ubicados en una región de forma irregular llamada
nucleoide.
Está formado por la unión de dos polímeros distintos: uno NAM (N-ácido
acetil murámico) y NAG (N-acetil glucosamina)
Las cadenas de la subunidad de peptidoglicano se forman por reticulación
entre los péptidos. A menudo, el grupo carboxilo de la dalanina terminal está
conectado directamente al grupo amina del ácido diaminopimélico, pero en
su lugar se puede utilizar un puente peptídico. La mayoría de las paredes
celulares gramnegativas carecen de este puente peptídico.
N-acido
Capas
acetiltalasoamin
homogene
uronico en vez
as gruesas
de NAM
L-aminoacido
en lugar de D- Heteropolisacaridos
aminoacidos
Pseudomureina
No están presentes en todos los microorganismos, pero los que si las tienen
son más resistentes en condiciones adversas.
Lo más importante que tiene la endospora es el material genético que tiene
encapsulado.
Se llama endospora por que se forma en la parte interna de la célula.
o Corteza: capa gruesa que puede ocupar hasta la mitad del volumen
de la espora y esta antes de la cubierta de la espora.
o Exosporium: parte más externa de la espora.
o Cubierta de la espora: Esta hecha con un tipo de peptidoglicano.
o Pared de la espora: parte as cercana al material genético, rodea al
núcleo de la espora que está compuesto por ribosomas y su nucleoide.
Polimero
No lo degradan 1-2%
sulfatado
D-galactosa, 3.6-
anhidro-L- Enfriado a 40-
Algas rojas
galactosa y acido 42ºC
D-glucoronico
Fundido a 80-
90ºC
Tipos de medios
Medios selectivos Medios diferenciales
Favorecen el crecimiento de mohos Distinguen entre grupos de
en particular bacterias
Sales biliares, fucsina básica y Identificación preliminar
cristal violeta: Gram +
Endo, EMB, McConkey: E. coli, Agar sangre
bacterias del agua
Selectivos especiales McConkey: fermentación de lactosa
(rosa)
Todas las bacterias necesitan captar elementos químicos, que según las
cantidades en que son requeridos se clasifican en:
o Macronutrientes: C, H, O, N, P, S, K, Mg, Ca, Fe
o Micronutrientes (trazas): Mn, Co, Cu, Zn, Mo, Ni, etc.
En la naturaleza, estos elementos se encuentran combinados, formando
parte de sustancias orgánicas o inorgánicas. Algunos serán incorporados
para construir macromoléculas y estructuras celulares; otros solo sirven
para la producción de energía; finalmente, otros pueden ejercer ambos
papeles.
1 ppm corresponde a 1 mg/L
o Universales (que son los requeridos en esta forma por todos los
procariotas): H2O, CO2, fosfatos y sales minerales.
o Particulares: Elementos que se pueden captar de diferentes maneras,
según: N y S.
o Especiales: los microorganismos pueden tener necesidades
especiales.
o Factores de crecimiento.
¿Qué es?
o Es el principal constituyente del protoplasto bacteriano
o Es el medio universal donde ocurren las reacciones biológicas
o Es un reactante en exceso (es decir, un producto resultante de
algunas reacciones bioquímicas)
¿Qué fuentes de agua hay?
o Endógena procedente de oxido-reducciones
o Exógena (la mayoría) procedente del medio, y que difunde a través de
las membranas.
Los elementos N y S son requeridos por todos los seres vivos, se encuentran
en la célula en estado reducido:
o El -NH2 forma parte de los aminoácidos y de las bases nitrogenadas.
o El radical -SH interviene en aminoácidos y coenzimas.
De donde agarran el N y S
o El N y S pueden ser captados de modos distintos, según capacidades
biosintéticas.
o En forma combinada inorgánica oxidada
⬧ NO3- (acción de nitratorreductasas asimilatorias) →NH3→N
orgánico
⬧ SO4 2- (se activa con ATP, y luego se reduce a SO3 2- y
finalmente hasta SH2→ entra a compuestos orgánicos
o En forma combinada reducida
⬧ N reducido inorgánico: NH4+
⬧ S reducido inorgánico: S2-, SH-
⬧ N reducido orgánico: aminoácidos, péptidos
⬧ S reducido orgánico: cisteína
La capacidad de nutrición nitrogenada a partir del N2 atmosférico solo ha
evolucionado en ciertos procariotas: diazotrofos o fijadores de nitrógeno.
N2 + 8H+ + 8e- + 18ATP → 2NH3 + H2 + 18(ADP+Pi)
Desventajas:
o Es muy tedioso, no es practico para un gran número de muestras.
o No es muy sensible, se necesitan al menos 106 bacterias/mL para
que sean observadas al microscopio.
o No distinguen células vivas de muertas.
Donde:
t= tiempo de aplicación del tratamiento letal
T= temperatura en ºC
z= aumento de temperatura requerido para reducir el periodo de
calentamiento en un 90%, es decir el valor Z
Al valor de la integral del calor recibido se le denomina Fs
𝐹𝑠 = 𝐷(𝑙𝑜𝑔𝑁0 − log 𝑁)
Unidad 8. Hongos
Las paredes fúngicas se parecen a las de las plantas, pero sólo desde el
punto de vista de su arquitectura y no desde la composición química.
Está compuesta por:
o Quitina: polímero n-acetil glucosamina
o Polipéptidos
o Polisacáridos complejos (mananos y glucanos)
Sus funciones son:
o Protección, rigidez
o Transporte
o Virulencia inmunogenicidad
o Tipo de hifa
o Tipo de espora sexual
Nota: la principal manera de clasificar a los hongos es de acuerdo al tipo de
espora sexual que producen.
o Reproducción
⬧ Sexual
➢ 2 hifas de individuos genéticamente diferentes se unen
➢ Esporas sexuales
⬧ Asexual
➢ Esporas asexuales en el esporangio
➢ Conidios en conidióforos
➢ Gemación (levaduras)
➢ Fragmentación
Ascomicetos
Division por
gemación
Ovales,
esfericas o Pueden
casi filamentar
cilindricas
Unidad 9. Protozoarios