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Iii - Morfología y Ultraestructura

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III.

MORFOLOGÍA Y ULTRAESTRUCTURA DE LAS


BACTERIAS.
MORFOLOGÍA DE LAS BACTERIAS.
La forma de las bacterias depende de la pared celular, que les proporciona
elasticidad y al mismo tiempo rigidez. Estos microorganismos se
presentan:habitualmente como elementos esféricos, conocidos como cocos,
alargados, denominados bacilos, e incurvados.
Esta forma puede variar debido a distintas circunstancias exógenas, como la
antigüedad del cultivo, factores nutricionales, tratamiento con antibióticos, etc.; por
otra parte, a las bacterias que tienen deficiencias en su pared o carecen de ella,
como los micoplasmas, los cambios ambientales les afectan con mayor intensidad,
por lo que no puede decirse que tengan un aspecto determinado. En un caso u
otro, a las bacterias que modifican de forma se les denominan pleomorfas y al
fenómeno, pleomorfismo. Además, debido al proceso de división celular, puede
que tras dividirse no permanezcan aisladas sino unidas entre sí formando
agrupaciones que, al ser en algunos casos muy típicas, contribuyen a su
identificación.
Cocos:
Forma común redondeada; a veces pueden ser ovoides, con un lado
aplanado (riñón) o un extremo afilado (lanceolados). Agrupados en 2 x2
(diplococos), de 4 x 4 (tétradas), en cadenas (estreptococos), en racimos
(estafilococos) o en forma de cubos (sarcinas).
Bacilos
Son alargados. Los cocobacilos son cortos. Terminación: en ángulo recto,
redondeadas, afiladas, engrosadas, en forma de maza, causado por la
propia forma de la bacteria o a la presencia de inclusiones o esporos.
Formas incurvadas
Son elementos generalmente aislados con una o varias curvaturas. Si
presentan una sola, pueden adoptar aspecto de coma (vibrios); a veces son
varias en un solo plano, rígidas, y se desplazan por flagelos (espirilos); en
ocasiones se sitúan en planos distintos, son flexibles y se mueven por
filamentos axiales (espiroquetas).

TAMAÑO
Para el tamaño de las bacterias se emplean una serie de divisiones del milímetro;
como micrómetro o micra (μm o μ); también puede utilizarse, para medir los
orgánulos, el nanómetro (nm) o el angstrom.
El tamaño varía entre bacterias, pero oscilan entre 0,5 y 1 μm de ancho y 1-10 μm
de largo.
MÉTODOS MICROSCÓPICOS DE OBSERVACIÓN DE LAS
BACTERIAS
Dado su pequeño tamaño, las bacterias tienen que observarse a través de
dispositivos de aumento como los microscopios ópticos compuestos. Empleando
metodos tintoriales que incrementan sus dimensiones. Ejemplo: sales de plata.

Examen en fresco
Permite visualizar las bacterias vivas e incluso observar sus movimientos. Si los
microorganismos provienen de un medio o producto patológico líquido, se utilizará
una gota del mismo, pero si proceden de un medio sólido se incorporarán a un
líquido isotónico que conserve la forma bacteriana.
Existen dos técnicas:
a) Tinción simple: en que la suspensión bacteriana se observa entre porta y
cubre.
b) Tinción compuesta: en donde se utilizan más de dos colorantes, resaltando
diferentes estructuras de la célula.

Exámenes tintoriales
Con el uso de los colorantes se pretende conseguir que los microorganismos
contrasten nítidamente con el medio que los rodea, destacar características
diferenciales de los mismos o incluso observar elementos estructurales.
Existen varios tipos de tinciones
simples, diferenciales o compuestas, específicas, de fluorescencia y otras.
 Tinción simple: en que la suspensión bacteriana se observa entre porta y
cubre.
 Tinción compuesta: en donde se utilizan más de dos colorantes,
resaltando diferentes estructuras de la célula.
o Tinción de Gram (): Permite distinguir, en función de las
características estructurales de su pared, entre los dos grandes
grupos de bacterias, grampositivas (violeta) y gramnegativas (rojo).
o Tinción de Ziehl-Neelsen o de ácidoalcohol resistencia: Con ella
se distinguen las bacterias ácido-alcohol resistentes (poseen lípidos
complejos en su pared que retienen la fucsina). Las bacterias ácido-
alcohol resistentes (rojas), las que no son ácido-alcohol resistentes
(azul).
 Tinciones específicas Revelan estructuras bacterianas: utilizada para
visualizar endosporos (flagelos y cápsulas) éstos se tiñen con verde
malaquita y se fuerza la tinción con calor rosa safranina.
 Tinciones fluorescentes: utilizada en diagnóstico indirecto para detectar
anticuerpos. También en diagnóstico directo. Ejemplo: auramina para
bacterias ácido-alcohol resistentes (mejor que Ziehl-Neelsen).
fisión binaria
serie de etapas:
 Se replica el ADN para crear una copia exacta de sí mismo.
 Cada juego de ADN se orienta hacia una región opuesta de la célula. Se
replican los organelos celulares también.
 Se activa la proteína FtsZ, que forma filamentos en torno al eje de división
de la célula. Dichos filamentos hacen crecer la membrana hacia el interior
del citoplasma, estrechando la célula.
 Se forma un septo (o cintura) que se estrecha de manera paulatina hasta
que separa del todo el citoplasma en dos, formando así dos individuos
idénticos (células hijas), pero de vida independiente.
Estructura
Las bacterias presentan una serie de estructuras de cubierta o envoltura situadas
superficialmente que, en las bacterias grampositivas y gramnegativas,
Estructuras frecuentes:
 De posterior a anterior; la membrana citoplasmática, la pared celular y la
capsula.
 En el interior celular: citoplasma, los ribosomas, el ADN cromosómico,
mesosomas.
Elementos facultativos:
 Capsula, plásmidos, Esporas, flagelos, fimbrias y pili.
Elementos frecuentes o fijos
Membrana citoplasmática
 Concepto: se le conoce como membrana plasmática. Se trata de una
estructura obligada.
 Situada: por debajo de la pared celular, delimitada hacia fuera por el
periplasma en las bacterias gramnegativas y por un espacio, casi
inexistente, en las grampositivas.
 Composición: una bicapa lipídica en un 40% del total y por proteínas en un
60%.
 Estructura: dependerá según el modelo de membrana.
o Lípidos: frecuentemente fosfolípidos. En menor medida glucolípidos
grampositivas.
o Proteínas. Estructuralmente se distinguen dos tipos:
 a) integrales o intrínsecas: la bicapa (confieren estabilidad al
conjunto) y permeasas (para el transporte de sustancias)
 b) periféricas, superficiales o extrínsecas; funciones
metabólicas.
 Propiedades: La membrana mantiene constante el medio interno. El
transporte de sustancias a su través de el de manera selectiva.
 Funciones:
 Participa en procesos vitales para las bacterias. Entre ellos destacan los
siguientes:
o Bioenergéticos; transporte de electrones y fenómenos de
fosforilización oxidativa. Produciendo la génesis de adenosina
trifosfato (ATP) a partir de adenosina difosfato (ADP).
o Biosintéticos; síntesis de diversas estructuras (pared celular y
glicocáliz).
o Biodegradativos, radica enzimas (exoenzimas)
 Sobre esta se anclan las fimbrias, los pili y los flagelos.

Pared celular
 Concepto: se considera un elemento obligado de la estructura de las
bacterias, aunque no existe en los micoplasmas.
 Situación: en la envoltura – en la membrana plasmática, y representa entre
el 10 y el 50% del peso celular seco.
 Estructura y composicion:
o Pared celular de las bacterias grampositivas.
 Peptidoglucano o mureína: En estas bacterias constituye
una estructura gruesa.
 Otros constituyentes: ácidos teicoicos (polímeros de glicerol
fosfato y de ribitol fosfato adicionalmente tienen aminoácidos y
azúcares).
o Pared celular de las bacterias gramnegativas: doble membrana y
el periplasma (entre las dos membranas).
 Peptidoglucano o mureína: el número de fibras y de capas
es menor, teniendo un espesor.
 Periplasma o espacio periplásmico: Alberga peptidoglucano
y es isotónico con el citoplasma.
 Membrana externa: Es la parte más superficial de la pared
celular. Constituida por lipopolisacáridos, fosfolípidos y
proteínas. Formada: por dos capas u hojas (externa e interna)
con proteínas asociadas.
 Capa externa: compuesta de lipopolisacárido (LPS). El
LPS tiene un peso molecular elevado y una estructura
compleja en la que se distinguen tres motivos
estructurales diferentes.
 Capa interna: Se trata, básicamente, de una
monocapa fosfolipídica en contacto con el periplasma.
 Proteínas asociadas; proteínas de la membrana
externa se suelen nombrar con las siglas Omp (por
outer membrane protein, o proteína de membrana
externa).

 Propiedades y funciones:
 Peptidoglucano: confiere rigidez y elasticidad dando forma, supone
protección frente a la elevada presión osmótica interior. Compuesto de
lisozima, enlaces glucosídicos ß(1-4).
 La mureína no es del todo permeable. Solo puede repeler ciertas
sustancias.
 Se anclan moléculas que son puntos de anclaje para flagelos.
 La pared actúa como soporte de la capsula, y de los flagelos.
 Su antigenicidad: gracias a proteínas, ácidos teicoicos y lipoteicoicos, LPS
(antígeno O) y polisacáridos.
 Interviene en los fenómenos de adhesión, agregación y coagregación
mediante los compuestos citados en el apartado anterior.
 La mureína no es permeable. Pero la membrana externa es una barrera de
permeabilidad a diferentes sustancias.
 Se anclan moléculas que son puntos de anclaje para flagelos.
 La pared actúa como soporte de la capsula, y de los flagelos.
 La toxicidad de las bacterias gramnegativas se relaciona, en gran medida,
con la presencia del lípido A.
 Las protuberancias de la membrana externa a modo de vesículas
superficiales sirven:
o a) para aumentar la superficie de contacto de las bacterias y, por
ende, su capacidad para captar nutrientes.
o b) como vectores de actividades proteolíticas, tóxicas y antigénicas.
o c) para establecer uniones con otras bacterias y la adhesión tisular.

 Protoplastos, esferoplastos y formas L


 Junto con bacterias que de forma intrínseca nunca tuvieron pared
(micoplasmas), existen otras que, teniéndola habitualmente, pueden
perderla en un momento dado. Los protoplastos y los esferoplastos son
formas esféricas incapaces de dividirse que surgen artificialmente al tratar
las bacterias con compuestos que desorganicen la mureína.

Glicocáliz
Con este nombre se suele denominar a todo polímero extracelular situado
inmediatamente por fuera de la pared celular. Comprende dos estructuras
facultativas de las bacterias:
 La cápsula
 La capa mucosa (capa mucilaginosa, limo o slime).
La cápsula y la capa mucosa son hidrófilas, poseen agua hasta un 90%, tienen
una consistencia viscosa o gelatinosa y rodean una o varias células, incluso
dispuestas en distinto plano.

Citoplasma
Constituye el medio interno celular, contiene a los orgánulos y contribuir al
movimiento de los mismos.
Características: es un hidrogel formado 85% de agua, macromoléculas y
estructuras que, en el caso de las bacterias patógenas para el hombre, las más
importantes son las siguientes:
 Inclusiones de reserva: son almacenamiento de nutrientes; existen dos tipos:
o Orgánicas: glucógeno y almidón (reservas de hidratos de carbono) y
las de ácido poli-β-hidroxibutírico (reservas de lípidos).
o Inorgánicas: polifosfatos, polímeros lineales de ortofosfatos,
(reserva de fósforo). Conocidas como granulaciones
metacromáticas, se tiñen de rojo o azules.
 Compuestos solubles: Es el caso de enzimas, aminoácidos, azúcares, sales
minerales, vitaminas, coenzimas, etc.
 Ribosomas. Hay hasta 15.000 por célula, y son responsables de la basofilia
citoplasmática. Están formados por: proteínas (30-40%) y ácido ribonucleico
ribosómico (ARNr) (60-70%). Esto constituye un 80% del total de ARN
bacteriano. Este ARNr es de tres tipos: 5S, 16S y 23S (S es la unidad de
sedimentación o Svedberg). Los ribosomas bacterianos, que aparecen como
partículas de 70S, constan de una subunidad mayor de 50S y otra menor de
30S (la célula eucariota posee ribosomas de 80S con subunidades de 40 y
60S).

Material genético DNA


 Concepto: cromosoma circular con DNA de doble cadena. Con 5,000,000 de
pares de bases (bp) o 5,000 pares de kilobases (kb).
 Composición: dos cadenas complementarias entre sí
 Estructura: de tipo tridimensional de doble hélice, estableciéndose enlaces por
puentes de hidrógeno entre las bases nitrogenadas; (A) con (T) y (C) con (G).
 Replicación: Conduce a la formación de dos moléculas hijas. Tiene un carácter
semiconservativo, de tal forma que cada cadena actúa como molde para la
síntesis de la complementaria.
 Propiedades y funciones
o Mantiene y transmite la información genética contenida en los genes
Interviene en la síntesis proteica y en su regulación.
o El ADN cromosómico es, en buena medida, la base de estudios de
biología molecular, participa en diversos fenómenos genéticos y
sobre él actúan algunos antibióticos por diversos mecanismos.

Mesosomas:
 Invaginaciones hacia el interior (citoplasma), dos tipos:
o a) centrales o septales: implicadas en la replicación del ADN y en la
formación del tabique que origina dos células en la división celular.
o b) laterales: pueden incrementar la superficie de contacto de la
membrana en procesos de exportación de proteínas (exterior y
superficie celular).

Elementos facultativos
CÁPSULA
 Composición: cubierta bien definida, firmemente adherida a la pared celular.
o Estructura: es polisacarídica.
o Observación: por medio de cultivo o de las muestras clínicas, puede
realizarse un simple examen en fresco (se observá un halo
refringente) o por tinciones negativas (china o nigrosina), con debido
a la impermeabilidad y la electronegatividad de la cápsula.
o Detección: características originan colonias con aspecto mucoso en
medios sólidos, denominadas M. Tienden adherirse a determinados
nutrientes (suero o sacarosa). Se desarrollan en ambientes de
presión y temperatura.
o Propiedades y funciones
 Protección al microorganismo de la desecación y de la
fagocitosis.
 Adherencia a superficies.
 Impedir la fijación de bacteriófagos a las estructuras.
 A) Su gran contenido de agua que evitaría la
desecación de la célula bacteriana
 B) Dificultar la difusión de sustancias hidrófobas y
electronegativas.
 C) Impedir la fijación de bacteriófagos a estructuras
más internas y, por tanto, su acción lítica.
 Virulencia; más virulentas que las no capsuladas. Porque
esta bloquearía la fagocitosis y la acción del complemento, al
evitar la opsonización bacteriana.
 Antigenicidad; La cápsula constituye el denominado antígeno
K y en el caso de algunas bacterias.
 Capa mucilaginosa, mucosa, limo o slime
o Composición: Es permeable a la tinta china y su composición es
fundamentalmente polisacárida y de forma habitual
homopolisacárida. Difícil distinguir si es capsula o es capa
mucilaginosa.
o Estructura: cubierta flexible, mal definida, de márgenes difusos, no
uniforme en densidad y grosor, débilmente unida a la membrana
externa o a la mureína, por lo que se elimina fácilmente.
o Observación: las muestras patológicas o de cultivos especialmente
enriquecidos, en los medios de cultivo sólidos.
o Detección: Debido a que está débilmente unida al resto de
estructuras bacterianas se pierde con facilidad in vitro. Por lo que se
utiliza el microscopio electrónico o de fluorescencia.
o Propiedades o funciones:
 Protección: para las bacterias, virulencia y antigenicidad. Lo
expuesto para la cápsula.
 Adhesión: agregación y coagregación. Por medio de la capa
mucosa. Tenida adherencia a superficies no descamativas, a
bacterias similares o diferentes.
 Reserva nutricional: originan elementos glucídicos fácilmente
asimilables, en ausencia de aporte exterior de azúcares.
 Interferencia en la antibioticoterapia; Al ser responsable de
que las bacterias se agreguen y coagreguen, se constituye
una especie de «magma» polisacárido (biopelícula) que
dificulta el acceso de los fármacos.
 No usadas para preparar vacunas, defecto inmunógeno.

Plásmidos
 Origen:
 Constituidos: ADN bicatenario, superenrollado, circular sin extremos libres, de
tamaño menor que el cromosoma (5 a 100 genes).
 Ubicación: dispersos en el citoplasma.
 Propiedades:
o Codifican a los pili, un elemento facultativo.
o Dotados de propiedades biológicas.
o Si un plásmido carece de función o ésta se desconoce, se denomina
críptico.
 Características:
o Replicándose independientemente del ADN cromosómico.
o Se hereda de forma estable, pero no es necesaria para el
crecimiento ni la reproducción de la célula que la hospeda.
o Curación: Es la pérdida de un plásmido, con lo que la bacteria
pierde también las propiedades o funciones que le confería.
o Transmisión: del tipo vertical (de célula madre a célula hija) o
transmisión horizontal (mecanismos de transferencia genética).
o Inmunidad: impide la expresión de otro idéntico o muy emparentado.
 Tipos: Existen una multitud, los más importantes son los siguientes:
 Conjugativos; activan el proceso de su propia transferencia por
conjugación.
 Plásmidos R: Codifican factores que inducen la resistencia a antibióticos.
 Plásmidos de virulencia: originan la síntesis de toxinas, antígenos
superficiales, los que codifican factores de capacidad invasora, etc.
 Otros plásmidos: codifican bacteriocinas, microcinas y antibióticos, los que
inducen la fijación radicular del nitrógeno o compuestos capaces de
degradar derivados del petróleo, etc.
 Plasmidotipia:
o Es un método que permite identificar los plásmidos comparándolos con
otros y conocer, en su caso, la evolución de plásmidos R en
determinadas comunidades con fines epidemiológicos. Se basa en los
estudios de compatibilidad.

Esporas
Tiene forma esférica u ovalado por el que un número pequeño de bacterias,
habitualmente grampositivas y rara vez gramnegativas, adquieren resistencia al
ambiente para poder sobrevivir incluso durante años, hasta que se den las
condiciones adecuadas para su desarrollo.
 Relación con la célula productora: ubicados en el interior de la bacteria
(endosporos) o libres (exosporos). No crean modificaciones al contorno
bacteriano o provocando una alteración en su morfología habitual.
 Esporogénesis: por medio de los genes de la esporulación. Se replica el ADN
cromosómico y se invagina la membrana citoplasmática sin que vaya seguida
de la pared celular (a). Se forman dos células (b) dentro de la misma pared,
una denominada madre (M) y otra esporal (E).
 Cambios fisicoquímicos: es la deshidratación y la disminución de las funciones
vitales, aunque éstas no desaparecen en términos absolutos
o Protección al ADN cromosómico: gracias a que se sintetiza una pared
esporal y diversas proteínas.
o Aporte nutricional: son proteínas usadas en futuras germinaciones,
formando envolturas proporcionándoles una consistencia queratiniforme.
o Estabilidad: por la síntesis de dipicolinato cálcico (ácido dipicolínico en
forma de sal cálcica) que se localiza a nivel de la corteza.
 Germinación: Es el paso de la forma esporulada a la forma vegetativa. Se
incrementa la actividad metabólica, se adquiere agua, desaparecen la corteza,
la intina, la exina y, en su caso, el exosporium. El ADN, que estaba situado
polarmente, se hace central y en definitiva queda una célula con una sola
pared esporal (pared celular) y la membrana esporal (membrana
citoplasmática).
 Propiedades y funciones:
o Resistencia ambiental: a altas temperaturas (no todos), la falta de
nutrientes, y de humedad, las altas presiones osmóticas, etc.
o Impermeabilidad: las cubiertas, determina que los esporos definiendo
el tipo de tinción.
o Resistencia a compuestos y procedimientos: factores que intentan
eliminar las bacterias. Ejemplo: radiaciones, ciertos desinfectantes,
antisépticos y antibióticos.

Flagelos
 Concepto; elementos facultativos responsables de la movilidad bacteriana. Son
estructuras finas, largas, onduladas o sinuosas, no ramificadas y muy frágiles.
 Situación; si carecen de flagelos son átricas, cuando sí los poseen:
o Atrica: no presenta flagelos.
o Monótricos (un flagelo polar).
o Lofótricos (un penacho en un extremo).
o Anfítricos (uno o varios flagelos en ambos polos).
o Perítricos (cuando rodean la bacteria).
 Observación: Puede recurrirse a su visualización directa - tinciones específicas
y microscopia óptica de fondo claro o microscopios como el electrónico. De
manera indirecta.
 Detección: el tipo de movilidad (si las bacterias no se mueven, el crecimiento
en la zona de la picadura, si por el contrario se extenderá por todo el medio).
Para ello se aplica un examen en fresco o a la inoculación en un agar
semisólido
 Estructura: filamento (compuesto de proteína flagelina), codo: zona más
gruesa, es como una articulación o bisagra, permite la orientación del
filamento. El codo se une al cuerpo basal anclándose la superficie celular.
 Síntesis: por medio de los genes que expresan diversas proteínas, esto a su
vez condiciona las dos fases I y II (dos tipos de proteínas).
 Propiedades y funciones:
o Movilidad: son órganos de locomoción por los que una bacteria se
desplaza de un lugar a otro.
o Factor de patogenicidad: Permite penetrar en los tejidos y, en
determinados casos, vencer fuerzas contracorriente.
o Antigenicidad: Constituyen los llamados antígenos H que, al igual que
los antígenos O y K, más aún en este caso al tratarse de proteínas, son
inmunógenos, lo que permite determinar la respuesta inmunitaria en el
hospedador.
o Quimiotaxis: cuando están dotadas de «órganos sensoriales» que
regulan la dirección del motor flagelar en el sentido de alejarse o
aproximarse a determinados compuestos.

Fimbrias
Se ubican centenares sobre la superficie de la bacteria. Participan en fenómenos
de adhesión, agregación, coagregación y en la formación de velos en los cultivos.
Estos se adhieren a las superficies, unas a otras o a las células animales.
Características: más delgado, corto que un flagelo. Formados por pilina.En el
extremo de las fimbrias se encuentran unas moléculas denominadas adhesinas
que interactúan con un receptor proteico o polisacárido, situado en otra bacteria o
en una superficie tisular del hospedador; de esta manera determinan,
respectivamente, uniones proteína-proteína o lectina-carbohidrato.

Pili
Más largos y anchos que los anteriores, son huecos y terminan en una especie de
botón. Se encuentran en menor cantidad. Están relacionados con el paso de
material genético a su través (conjugación). Se sintetizan por plásmidos F,
constituidos por proteína - pilina.
Filamentos axiales
No son apéndices, pero sí órganos de movilidad que emplean las espiroquetas
para desplazarse. Están constituidos por un penacho de fibrillas o endoflagelos
rodeados de una cubierta proteica. Discurren entre la mureína y la membrana
externa enrollándose sobre el soma de la célula.

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