8 Cultivo de Embriones Bovinos
8 Cultivo de Embriones Bovinos
8 Cultivo de Embriones Bovinos
Tabla 1.
Desarrollo de embriones de dos células de ratón hasta el estadio de blastocisto después de ser expuestos a varios tipos de recipientes plásticos a temperatura
ambiente durante 1 hora (Boone y Shapiro 1990)
Tipo de recipiente plástico Nombre comercial Blastocistos n/n (%)
Placa multi pocillos Falcon 294/327 (89.9)a
Jeringas (embolo de goma) Becton Dickinson 3/88 (3.4)b
Jeringas (embolo plástico) Fortune 83/93 (89.3)a
Jeringas (embolo plástico) Monoject 52/56 (92.9)a
ab
Porcentajes con diferentes superíndices son diferentes (P< 0.05)
te incubado con émbolos de plástico, Grupo D; Semen En otro estudio, realizado con embriones de ratón
equino mas diluyente control incubado con émbolos de de dos células (Scott Fitzgerald et al., 1993; n=50) fue-
goma y Grupo E; Semen equino mas diluyente control ron cultivados en medio expuesto a émbolos de jeringa
incubado con émbolos de plástico. Cada grupo contenía negros de goma (Becton Dickinson); los embriones se
5 ml de diluyente y semen a una concentración de 1.0 x desarrollaron y realizaron 3-4 divisiones (69% embrio-
106 sperm./ml. En un segundo experimento, las incuba- nes de 8-células) pero todos los embriones termina-
ciones con semen fueron durante 45 minutos, y luego el ron haciéndose atrésicos (P<0.001 comparados con los
diluyente fue retirado y reemplazado por diluyente fresco. controles). Los efectos tóxicos de los émbolos de goma
Palasz A. T. y de La Fuente J.
Calor seco
Saturación de vapor
Tabla 2.
Porcentajes de crecimiento normal de los embriones expuestos al contacto con Pajuelas de plástico esterilizadas con oxido de etileno
Grupo Tiempo de aireación en Horas a
24 48 72 96 120 144
Tratados (%) 0 20 19 30 32 33
Control (%) 90 95 65 85 50 57
Filtración de membrana.
Tabla 3.
Desarrollo de embriones de ratón de 8 a 16 células hasta el estadio de blastocisto después de su exposición a varias pajuelas de plástico de 0.25 ml a 39ºC por
24 h y posteriormente cultivados en medio Ham´s F-10 durante 24 horas mas (4 replicas)
Tipo de pajuela N Embriones desarrollados a las 24 h (%) Blastocistos
(Grupo) a las 48h (%)
Control (en gotas) 38 37/38 (97.3) 37/38 (97.3)a
Amarilla (no estéril) 41 34/41 (82.8) 31/41 (75.6)b
Amarilla (IMV*) 34 12/34 (35.3) 11/34 (32.3)c
Transparente (IMV*) 35 14/35 (40.0) 6/29 (20.7)c
Transparente (no estéril) 34 29/34 (85.3) 20/34 (58.8)b
abc
Porcentajes con diferentes superíndices son significativamente diferentes
(P< 0.05).
Las pajuelas conteniendo los embriones fueron mante- etileno antes de su venta, aunque si que estarían del orden
nidas en un incubador a 39ºC durante 24 horas y posterior- de 40 días de aireación antes de ser distribuidas.
mente trasferidos de nuevo a medio fresco de Ham´s F-10
en gotas de cultivo durante otras adicionales 24 horas. Los
resultados sugieren que las pajuelas preparadas de forma co- Referencias
mercial contienen algunos factores que actúan reduciendo el
Pajuelas preparadas para desarrollo embrionario (Tabla 3). Por esto podría ser que las Boone WR, Shapiro SS. Quality control in IVF laboratory.
vitrificación. pajuelas comerciales fueran esterilizadas con gas de oxido de Theriogenology 33:23-50, 1990.
Broussard IR, Goodeaux SD, Goodeaux LL, Thibodeaux JK, Moreau JD,
Godke RA, Roussel JD. The effect of different types of syringes on
equine spermatozoa. Theriogenology 39:389-399, 1993.
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