MORFOLOGIA

MICROSCOPICA
(TINCION )
 ¿QUE ES?
Por Por
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visualizació ción
de los una
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microorganis os teñido sm
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s representa
a las
Ciencias de
la Salud

PUEDE SER
ESTUDIADA DE
morfología ¿DONDE

microscopica
DOS FORMAS RADICA?
DISTINTAS

,
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COMO
DESARROLLA SE en procesos
separados microorgan N los contagiosos
is mos ?
 Tanto la naturaleza del sustrato ES EL HECHO DE LA CASI
como el pH influyen en gran IMPOSIBILIDAD DE SEPARAR
medida en la absorción de los COMPLETAMENTE EL COLORANTE

TINCIONES colorantes. Si estas estructuras

son inestables o insolubles,la
DE LOS COMPONENTES EN
DONDE EJERCIÓ SU ACCIÓN DE
TINCION QUIMICA resistencia de la solución del TINCIÓN AUN EMPLEANDO SUS
colorante disminuirá y la LÍQUIDOS SOLVENTES
intensidad de la tincion se
perderá.

La acción de los colorantes grasos

ES LA COLORACIÓN DE LAS
se puede explicar fácilmente en
GRASAS O LÍPIDOS, YA QUE ES
términos de propiedades de
UNA TNCIÓN POR ADSORCIÓN
solubilidad comunes. Estos
Teñir supone una reacción de colorantes no contenen grupos
intercambio de iones del colorante TINCION FÍSICA fuertemente polares y se espera
a lugares actvos de la superfcie o que se disuelvan en materiales no
interior de las estructuras de la polares ordinarios de los tipos de
lípidos y “solubles en lípidos”.
célula, esto permitrá contrastar
mucho más el microorganismo
con respecto al medio que le
rodea.
 VENTAJAS DE LAS
TECNICAS DE TINCION
1 OBSERVAR MÁS ADECUADAMENTE SU MORFOLOGÍA

2 PROPORCIONAR EL CONTRASTE PRECISO Y SUFICIENTE

EN CADA CASO

3 ESTABLECER UNA INFORMACIÓN COMPLEMENTARIA

SOBRE SUS ESTRUCTURAS INTERNAS Y/O EXTERNAS

4 CONOCER SUS CARACTERÍSTICAS TINTORIALES

 Tiempos de tinción Pureza del colorante

Realizar correctamente Concentración del

FACTORES QUE
el frotis colorante
AFECTAN LOS
RESULTADOS
DE LA TINCION
Cantidad de la muestra El pH del colorante

Conservación del
Técnica empleada
colorante
 REALIZACION DE TINCIONES

1 2 3
EXTENSION DE MUESTRAS
PREPARACION DE SECADO
P Solidos : una gota de agua o solución salina colocada
MUESTRAS previamente en el portaobjetos, extendiéndola con Se dejará secar el extendido a
a menudo se tenen que ayuda del asa temperatura ambiente, hasta
fjar y teñir para facilitar P Liquida : puede depositarse directamente con pipeta comprobar, por el cambio de
una microgota del medio líquido o introducir aspecto de la preparación, que
su observación cuidadosamente el asa de siembra ésta se ha secado

4
FIJACION
5
Calor: La fjación por calor preserva la morfología global pero
COLORACION
no las estructuras intracelulares.
Su elección está condicionada al tipo de tinción a realizar.
Química: La fjación química se utliza para proteger
Utlizando generalmente colorantes básicos en soluciones
subestructuras celulares fnas y la morfología de hidro-alcohólicas que teñirán componentes celulares ácidos
microorganismos más grandes, pero más delicados.
 6 7
DECOLORACION
Es frecuente, después de una coloración, someter
la muestra de tinción a la subsiguiente
LAVADO
consiste en colocar directamente el frots en posición 8
vertical sobre un chorro medio de agua de la llave
decoloración, esto con el fin de diferenciar si las
bacterias son o no capaces de perder el colorante
durante algunos segundos hasta que ya no se observe COLORACION DE CONTRASTE
el colorante en el chorro que cae al desagüe
bajo la acción de situaciones drásticas colorantes generalmente básicos
que teñirán al final aquellas
estructuras que han sido
decoloradas y, que por lo tanto, no
9 han podido ser teñidas con el
OBSERVACIÓN DEL MICROSCOPIO colorante inicial
Siempre se empezará por el objetvo de pocos aumentos para
comprobar que la muestra está adecuadamente distribuida y no
existen otros elementos, como por ejemplo cristales, restos de
colorantes sin cristalizar, partculas de polvo
 Tipos de tinciones
TINCIÓN SIMPLE

Consiste en la aplicación de un
solo colorante a la muestra, esta
TINCIONES DIFERENCIALES debe ser posterior a la fijación de TINCIÓN NEGATIVA
la misma, permitiendo la
visualización de la morfología
bacteriana. nos permite observar
Se necesitará fijación previa características estructurales de la
generalmente por calor, además bacteria además de su morfología,
se utilizarán dos colorantes, siendo se caracteriza por no necesitar
el último el colorante de contraste. fijación previa y nos permite
visualizar sobre un fondo oscuro la
forma de la bacteria además de
alguna otra característica
estructural
 TINCIÓN DE GRAM

Es el método más empleado en

bacteriología gracias al cual las
TINCIONES ESPECIALES bacterias se pueden clasificar en TINCIÓN DE ZIEHL-NEELSEN
2 grandes grupos (Gram +, Gram
-). Esto es debido a la distinta
requieren de colorantes composición de la pared de las
La tinción se basa en colocar
fluorescentes, como por ejemplo, células bacterianas.
carbol-fucsina y calentar la
la tinción de auramina-rodamina o
preparación ligeramente para
la tinción de naranja de acridina
solubilizar las ceras, lípidos y otros
que utilizan colorantes
ácidos grasos de la pared celular
fluorescentes de forma especial
para que permita el paso libre del
utilizándose generalmente para
colorante, el cual tiene una
visualizar productos patológicos
enorme afinidad por los ácidos
con escaso número de
micólicos presentes en la pared
microorganismos
 CONCLUSION

EL DIAGNÓSTICO OPORTUNO Y SUGERENTE

DE LOS AGENTES INFECCIOSOS, POR LO
QUE JUEGAN UN PAPEL IMPORTANTE EN LA
DECISIÓN DEL TRATAMIENTO INICIAL DE
LAS ENFERMEDADES INFECCIOSAS. SE DEBE
PRACTICAR LA TINCIÓN ADECUADA DE
ACUERDO CON EL AGENTE INFECCIOSO EN
EL CUÁL SE ESTÁ SOSPECHANDO Y EL TIPO
DE MUESTRA CLÍNICA.