INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGÍA

LABORATORIO DE BIOTECNOLOGÍA FARMACÉUTICA

Práctica 4. Búsqueda y aislamiento de estreptomicetos y comprobación de
la acción microbiana
Integrantes:
 Acosta Rodríguez María Fernanda
 Ayllón Ornelas Brenda Karen
 Fierro Leos Ariadna
 González Hernández Luisa Fernanda
 Mendoza Narez René

Profesoras:
 M. en C. Flor Selene Villalobos Escobedo
 Dra. Estela Flores Gómez

Fecha de entrega: 16/05/2022

Equipo 1 Grupo: 5FM2
 Práctica 4. Búsqueda y Aislamiento de estreptomicetos y comprobación de la acción
antimicrobiana
OBJETIVOS
Objetivo general

 Descubrir estreptomicetos o microorganismos productores de metabolitos de aplicación

farmacéutica en una muestra de suelo a partir de la plataforma de screening de Waskman.

Objetivos específicos

 Aislar estreptomicetos o microorganismos productores de metabolitos de aplicación

farmacéutica a partir de una muestra de suelo realizando diluciones seriadas y siembra en
medios de cultivo sólidos.
 Identificar posibles microrganismos productores de metabolitos de aplicación
farmacéutica mediante técnicas microbiológicas.
 Determinación de la capacidad de acción antimicrobiana de los microrganismos aislados e
identificados realizando una prueba de antagonismo.

METODOLOGÍA
Tabla de reactivos
 Reactivo Fundamento
Solución salina isotónica La solución salina se utiliza de manera
sistemática como diluyente para ajustar la
turbidez de las suspensiones de células
bacterianas y así mantener la integridad y
viabilidad de las células.
Mantiene también el balance osmótico.
(Laboratorio BD, 2007).
Agar nutritivo Medio de cultivo no selectivo, en el cual la
pluripeptona y el extracto de carne
constituyen la fuente de carbono, nitrógeno y
aportan nutrientes para el desarrollo
bacteriano, es utilizado para el aislamiento y
recuento de microorganismos con escasos
requerimientos nutricionales. (Britania, s.f)
Agar papa dextrosa Medio de cultivo que aporta los elementos
nutricionales necesarios para el desarrollo
de hongos filamentosos y levaduras.
También es utilizado para el recuento de
colonias fúngicas en muestras de
cosméticos, productos farmacéuticos y
algunos alimentos lácteos. (Lidefer, 2019).
Medios selectivos Los medios de cultivos selectivos son
aquellos agares y caldos que sirven para el
aislamiento de un grupo definido de
microorganismos, mientras inhiben el
desarrollo de otros. Son ideales para
sembrar muestras polimicrobianas,
permitiendo recuperar el patógeno
buscado entre el microbiota
acompañante. (Lidefer, 2019).

Cuestionario previo
1. ¿Qué significa el término “screening”?

El test de screening o tamizaje es una prueba que se utiliza para la determinación precoz de
enfermedades y que permite conocer la posible prevalencia de una enfermedad que afecta a una
población.

Según A. Morrison, el test de screening para el control de enfermedades es un examen que se

utiliza en personas asintomáticas, en orden a clasificarlas como susceptibles o no, de tener la
enfermedad que es objeto del screening. Los susceptibles de tener la enfermedad son investigadas
hasta su diagnóstico final y las que tiene la enfermedad son tratadas.
Las metas del screening se orientan principalmente a reducir la morbilidad y mortalidad por la
enfermedad en la población tamizada y a ofrecer tratamiento precoz a los casos descubiertos.
(Santiago, 2003).

2. Investiga cuál fue el procedimiento que utilizó Selman Waksman para descubrir la
estreptomicina.

La estreptomicina, un antibiótico que fue muy útil en el siglo pasado para tratar la tuberculosis,
fue descubierta un 19 de octubre de 1943 por el estudiante de postgrado Albert Schatz, cuando
cursaba su doctorado en la Universidad de Rutgers (EE.UU.)

El descubrimiento lo hizo Albert Schatz, en el sótano del Departamento de Microbiología de los

Suelos de la universidad, bajo la tutoría y jefatura de Selman Abraham Waksman. El estudiante
trabajaba con las actinobacterias o actinomicetas, bacterias que viven en los suelos en donde
juegan un papel muy importante en la descomposición de la materia orgánica. A este grupo
pertenecen los géneros Streptomyces  y  Micobacterium. (Mirador salud, 2012).

A causa de la guerra interrumpe su investigación y es enviado a un laboratorio de las Fuerzas

Armadas de un hospital en Miami donde contrae tuberculosis, a los 5 meses lo dan de baja y
regresa a la universidad donde fue enviado a trabajar al sótano, para evitar el contagio ya que
utilizaba en sus experimentos la cepa muy virulenta y contagiosa que causaba la tuberculosis
(Mycobacterium tuberculosis). Crecía las bacterias en cápsulas de petri y les agregaba las
sustancias bactericidas para ver si inhibían el crecimiento del M. tuberculosis. (Mirador salud,
2012).

Para agosto de 1943, trabajaba con dos cepas bacterianas de Streptomyces griseus, una
proveniente del suelo y otra de un pollo. El 19 de octubre de 1943, durante el desarrollo
del experimento 11, de allí el nombre del libro de Pringle, se dio cuenta de que tenía un nuevo
antibiótico derivado del Streptomyces griseus, al que llamó estreptomicina. (Mirador salud, 2012).

3. ¿Cuál es la diferencia entre un medio selectivo y un medio diferencial?

Medio selectivo: Tipo de medio con algunos elementos o nutrientes específicos. La función de este
tipo de medio es que crezcan solo un tipo determinado de microorganismos inhibiendo el
crecimiento de otros. (Microbiologia para humanos, 2019).

Medio diferencial: Son aquellos donde se permite identificar y/o diferenciar (como su nombre

indica) una especie de otra, ambas en el mismo medio. Puede ser debido a su metabolismo, su
crecimiento, etc… acostumbran a llevar un indicador que permite ver esta diferenciación.
(Microbiologia para humanos, 2019).

4. ¿Qué diferencia existe entre un antibiograma y una prueba de antagonismo?

Las pruebas de sensibilidad o antibiogramas determinan la susceptibilidad de un microorganismo

frente a los medicamentos antimicrobianos, a partir de la exposición de una concentración
estandarizada del germen a estos fármacos. Las pruebas de sensibilidad pueden hacerse para
bacterias, hongos o virus. Para algunos microorganismos, los resultados obtenidos con un fármaco
permiten predecir los resultados que se obtendrán con fármacos similares. Así, no todos los
medicamentos potencialmente útiles necesitan probarse. (Vázquez, 2020)

Figura 1 Antibiograma

Las pruebas de antagonismo permiten conocer e identificar que reacciones tienen estos hongos
patógenos entre sí y reconocer con pruebas y métodos más precisos su biología, además cuales
pueden llegar a ser utilizados como hongos antagonistas para desarrollar estrategias que permitan
controlar la enfermedad. (Cerda y otros, 2017)

Figura 2 Prueba de antagonismo

5. ¿Cuáles son los requisitos que debe de cubrir un microrganismo indicador para utilizarla
en una prueba de antagonismo?

Para seleccionar a los microorganismos antagonistas se deben considerar las siguientes

características generales:

 Capacidad para colonizar rápidamente la superficie de los frutos y de persistir en ellas de

manera efectiva.
 Mayor habilidad que el patógeno para adquirir los nutrientes.
 Capacidad de sobrevivencia bajo diferentes condiciones ambientales

(Wisniewski y Wilson, 1992).

Por otra parte, se deben considerar otras características específicas del microorganismo
antagonista, siendo las más importantes:

 Su estabilidad genética.
 Efectividad a bajas concentraciones.
 No exigente en requerimientos nutricionales.
 Capacidad de sobrevivir a las condiciones adversas del medio ambiente
 Efectividad para un amplio rango de microorganismos patógenos en una variedad de
frutos y hortalizas.
 Capacidad de reproducirse en medios de crecimiento económicos.
 Que se mantenga en una formulación durante un largo período de vida
 Que sea fácil de aplicar sin producción de metabolitos secundarios que causen daños a la
salud humana.
 Resistente a los fungicidas y compatible con los procedimientos comerciales y no
patogénico sobre el hospedero.

(Wilson y Wisniewski, 1989)

6. ¿Qué nuevas metodologías se realizan en la actualidad para el descubrimiento de nuevos

fármacos?

El diseño de fármacos asistido por computadora (DIFAC) cobra cada vez mayor importancia en la
investigación y desarrollo de medicamentos, el DIFAC forma parte de un esfuerzo
multidisciplinario y está conformado por una serie de disciplinas científicas que abarcan modelado
molecular, quimioinformática, química teórica y química computacional.

Diversas universidades y centros de investigación en el mundo cuentan con grupos especializados

en el desarrollo y/o aplicación de metodologías computacionales para la investigación de
fármacos. Algunas universidades ya incluyen en sus planes de estudio el tema de DIFAC. Por
ejemplo, se inició el grupo de Diseño de Fármacos Asistido por Computadora de la Facultad de
Química (DIFACQUIM) de la Universidad Nacional Autónoma de México. DIFACQUIM trabaja en un
ambientemultidisciplinario colaborando con grupos en México, Estados Unidos, varios países en
Europa y Asia.

La siguiente figura ilustra líneas de investigación que típicamente pueden seguirse en un grupo
académico enfocado en el DIFAC. (Medina, Fernández y Naveja, 2015).
Referencias

 Cerda E y otros. (2017). PRUEBAS DE ANTAGONISMO CON HONGOS ASOCIADOS AL

SÍNTOMA DE MARCHITEZ DE ÁRBOLES DE AGUACATE EN MICHOACÁN, MÉXICO. 09-05-22,
de Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo Sitio web:
http://www.avocadosource.com/Journals/Memorias_VCLA/2017/Memorias_VCLA_2017_
PG_173.pdf
 Laboratorios BD (2007). Legacy.bd.com. Recuperado el 16 de mayo de 2022, de
https://legacy.bd.com/europe/regulatory/Assets/IFU/US/8806181JAA(0707)_ES.pdf
 Medina J, Fernández E. y Naveja J. (2015) Avances en el diseño de fármacos asistido por
computadora. Educación Química, Vol 26. 180-186.
 Medios de Cultivo . (2019, 2 de octubre). Microbiología para
humanos. https://microbiologiaparahumanos.wordpress.com/medios-de-cultivo/
 Medios de cultivos selectivos: fundamento, solidos y liquidos . (2019, 20 de
abril). Lifeder. https://www.lifeder.com/medios-de-cultivos-selectivos/
 Mirador Salud. (2012). LA TRISTE HISTORIA DEL DESCUBRIMIENTO DE LA
ESTREPTOMICINA. 09-05-22, Sitio web: https://miradorsalud.com/la-triste-historia-del-
descubrimiento-de-la-estreptomicina/#:~:text=La%20estreptomicina%2C%20un%20antibi
%C3%B3tico%20que,UU.)
 Vázquez M. (2020). Pruebas de sensibilidad o antibiogramas. 09-05-22, de Manual MSD
Sitio web: https://www.msdmanuals.com/es-mx/professional/enfermedades-
infecciosas/diagn%C3%B3stico-de-laboratorio-de-las-enfermedades-infecciosas/pruebas-
de-sensibilidad-o-antibiogramas
 Wisniewski, M.E., and Wilson, C.L. 1992. Biological control of postharvest diseases of fruits
and vegetables: Recent advances. HortScience 27:94-98.