TG Color

C GPO/PAP AA
Método enzimático para la determinación de triglicéridos
en suero o plasma

SIG­NI­FI­CA­CION CLI­NI­CA neizar y fechar.

Los triglicéridos son lípidos absorbidos en la dieta y también -  4 x 50 ml: reconstituir el contenido de un vial de Reactivo A
producidos en forma endógena a partir de los carbohidratos. con una porción de Reactivo B y luego transferir al frasco de
Su medición es importante en el diagnóstico y manejo de las Reactivo B enjuagando varias veces. Homogeneizar y fechar.
hiperlipidemias. Estas enfermedades pueden tener origen
genético o ser secundarias a otras tales como nefrosis, PRE­CAU­CIO­NES
dia­betes mellitus y disfunciones endócrinas. El aumento de Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
triglicéridos se ha identificado como un factor de riesgo en Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
enfermedades ateroscleróticas. de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
FUN­DA­MEN­TOS DEL ME­TO­DO acuerdo a la normativa local vigente.
El esquema de reacción es el siguiente:
lipoprotein lipasa ES­TA­BI­LI­DAD E INS­TRUC­CIO­NES DE
triglicéridos glicerol + ácidos grasos AL­MA­CE­NA­MIEN­TO
glicerol kinasa Re­ac­ti­vos Pro­vis­tos: son es­ta­bles en re­fri­ge­ra­dor (2-10oC)
glicerol + ATP glicerol-1-P + ADP has­ta la fe­cha de ven­ci­mien­to in­di­ca­da en la ca­ja. No man-
GPO tener a temperaturas elevadas durante lapsos pro­longados.
glicerol-1-fosfato + O2 H2O2 + dihidroxiacetonafosfato Reactivo de Trabajo: es estable 30 días en refrigerador
POD (2-10oC).
2 H2O2 + 4-AF + clorofenol quinonimina roja
IN­DI­CIOS DE INES­TA­BI­LI­DAD O DE­TE­RIO­RO DE LOS
RE­AC­TI­VOS PRO­VIS­TOS RE­AC­TI­VOS
A. Reactivo A: viales conteniendo lipoprotein lipasa, glicerol El Reactivo de Trabajo puede presentar una coloración
kinasa (GK), glicerol fosfato oxidasa (GPO), peroxidasa rosada que no afecta su funcionamiento.
(POD), adenosina trifosfato (ATP) y 4-aminofenazona (4-AF). Lecturas del Blanco superiores a 0,160 D.O. o lecturas del
B. Reactivo B: so­lu­ción de buf­fer Good con­te­nien­do clo- Standard anormalmente bajas, son indicios de deterioro del
rofenol, pH 7,5. Reactivo. En tal caso, desechar.
S. Standard: solución de glicerol 2,26 mmol/l (equivale a
2 g/l de trioleína). MUES­TRA
Con­centra­cio­nes fi­na­les Suero o plasma
Good........................................................ 50 mmol/l; pH 7,5 a)  Re­co­lec­ción: previo ayuno de 12 a 14 horas, obtener
clorofenol................................................................ 2 mmol/l suero o plasma. Separar de los glóbulos rojos dentro de las
lipoprotein lipasa................................................... ≥ 800 U/l 2 horas de extracción.
GK......................................................................... ≥ 500 U/l b) Adi­ti­vos: en caso de emplear plasma, se recomienda
GPO.................................................................... ≥ 1500 U/l el uso de Anticoagulante W o heparina para su obtención.
POD....................................................................... ≥ 900 U/l c)  Sus­tan­cias in­ter­fe­ren­tes co­no­ci­das: los sue­ros con
ATP......................................................................... 2 mmol/l he­mó­li­sis intensa o marcadamente ictéri­cos producen resul-
4-AF..................................................................... 0,4 mmol/l tados erróneos, por lo que no deben ser usados.
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
RE­AC­TI­VOS NO PRO­VIS­TOS drogas en el presente método.
Calibrador A plus de Wiener lab. cuando se emplea la d) Es­ta­bi­li­dad e ins­truc­cio­nes de al­ma­ce­na­mien­to: los
técnica automática. triglicéridos en suero son estables 3 días en refrigerador
(2-10oC). No congelar.
INS­TRUC­CIO­NES PA­RA SU USO
Standard: lis­to pa­ra usar. MA­TE­RIAL RE­QUE­RI­DO (no pro­vis­to)
Reactivo de Trabajo: - Es­pec­tro­fo­tó­me­tro o fotocolorímetro.
- 5/10 x 20 ml: agregar 20 ml de Reactivo B a un vial de - Mi­cro­pi­pe­tas y pi­pe­tas para me­dir los vo­lú­me­nes in­di­ca­dos.
Reactivo A. Mezclar hasta disolución completa. Homoge- - Tubos o cubetas espectrofotométricas.

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- Ba­ño de agua a 37oC. No obstante, se recomienda que cada laboratorio establezca
- Reloj o timer. sus propios intervalos o valores de referencia.

CONDICIONES DE REACCION LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

- Longitud de onda: 505 nm en espectrofotómetro o 490- Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
530 nm en fotocolorímetro con filtro verde. Los reductores disminuyen la respuesta de color, mientras
- Temperatura de reacción: 37oC que los oxidantes colorean el Reactivo aumentando los
- Tiempo de reacción: 5 minutos Blancos.
- Volumen de muestra: 10 ul Las contaminaciones con glicerol producen resultados
- Volumen de reactivo: 1 ml falsamente aumentados.
- Volumen final de reacción: 1,01 ml
PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente repli-
PROCEDIMIENTO cados de las mismas muestras en 10 días diferentes, se
Homogeneizar la muestra antes de usar, especialmente obtuvieron los siguientes datos:
frente a sueros lechosos. Nivel D.S. C.V.
En tres tubos o cubetas espectrofotométricas marcadas 1,14 g/l ± 0,021 g/l 1,82 %
B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido) colocar: 7,41 g/l ± 0,074 g/l 2,11 %
B S D
b)  Recuperación: agregando cantidades conocidas de
Muestra - - 10 ul trioleína a distintos sueros, se obtuvo una recuperación entre
99,2 y 100,7% para todo el rango de linealidad del método.
Standard - 10 ul -
c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 10 g/l de triglicé-
Reactivo de Trabajo 1 ml 1 ml 1 ml ridos. Para valores superiores, repetir la determinación con
muestra diluida 1:2 con solución fisiológica. Multiplicar el
Mez­clar, incubar 5 minutos a 37oC o 20 minutos a tempe-
resultado obtenido por la dilución efectuada.
ratura ambiente (18-25oC). Enfriar y leer en espectrofotó-
d) Límite de detección: depende del fotómetro empleado.
metro a 505 nm o en fotocolorímetro con filtro verde (490-
En espectrofotómetros, el cambio mínimo de concentración
530 nm) llevando el aparato a cero con agua destilada.
detectable en las condiciones de reacción descriptas, para
una variación de absorbancia de 0,001 D.O. será aproxima-
damente de 0,008 g/l.
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
El color de reacción final es estable 60 minutos, por lo que la
PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
absorbancia debe ser leída dentro de este lapso.
Para las instrucciones de programación debe consultarse
el Manual del Usuario del Analizador en uso.
CALCULO DE LOS RESULTADOS
Para la calibración debe emplearse Calibrador A plus de
Corregir las lecturas con el Blanco de reactivos y usar las
Wiener lab., de acuerdo a los requerimientos del analizador.
lecturas corregidas para los cálculos.
2 g/l PRESENTACION
TG g/l = D x factor factor = - 5 x 20 ml (Cód. 1780107).
S - 10 x 20 ml (Cód. 1780101).
- 4 x 50 ml (Cód. 1780105).
CONVERSION DE UNIDADES
Triglicéridos (g/l) = 0,01 x Triglicéridos (mg/dl) BIBLIOGRAFIA
Triglicéridos (mg/dl) x 0,0113 = Triglicéridos (mmol/l) - Fossati, P - Clin. Chem. 28/10:2077 (1982).
- McGowan, M.W.; et al - Clin. Chem. 29/3: 538 (1983).
METODO DE CONTROL DE CALIDAD - Tietz, N.W. - Fundamentals of Clin. Chem. - W.B., Saunders
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad Co. - Philadelphia, Pa. (1970), pág. 329.
(Stan-datrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas - Expert Panel of National Cholesterol Education Program
de triglicéridos, con cada determinación. - JAMA 285/19:2486 (2001).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
VALORES DE REFERENCIA AACC Press, 4th ed., 2001.
El panel de expertos del National Cholesterol Education Pro-
gram (NCEP) provee los siguientes valores de Triglicéridos:
Deseable: < 1,50 g/l
Moderadamente elevado a elevado: 1,50 - 1,99 g/l
Elevado: 2,00 - 4,99 g/l
Muy elevado: ≥ 5,00 g/l

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Símbolos
Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de reactivos para diagnóstico de Wiener lab.

C
Este producto cumple con los requerimientos
previstos por la Directiva Europea 98/79 CE de
productos sanitarios para el diagnóstico "in vitro"
M Elaborado por:

P Representante autorizado en la Comunidad

Europea Nocivo

V Uso diagnóstico "in vitro"

Corrosivo / Cáustico

X Contenido suficiente para <n> ensayos

Irritante

H Fecha de caducidad

i Consultar instrucciones de uso

l Límite de temperatura (conservar a)

 No congelar
Calibr. Calibrador

b Control

F Riesgo biológico

Volumen después de la reconstitución

b Control Positivo

Cont. Contenido c Control Negativo

g Número de lote h Número de catálogo

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944
2000 - Rosario - Argentina

Wiener lab.
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Cert. Nº: 2085/97 2000 Rosario - Argentina
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