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    Informe #07

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    CESAR DANIEL VELÁSQUEZ SANDOVAL
    Este documento presenta los métodos de diagnóstico para infecciones del tracto gastrointestinal, incluyendo protozoarios intestinales como Giardia lamblia, Entamoeba histolytica, Blastocystis hominis e Isospora belli. Describe el método directo utilizando muestras de heces y soluciones salina y de Lugol bajo el microscopio para identificar quistes y trofozoítos. El resumen provee detalles sobre cada protozoario y los resultados observados para cada muestra a través del método directo microscópico

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    Informe #07

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    CESAR DANIEL VELÁSQUEZ SANDOVAL
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    Este documento presenta los métodos de diagnóstico para infecciones del tracto gastrointestinal, incluyendo protozoarios intestinales como Giardia lamblia, Entamoeba histolytica, Blastocystis hominis e Isospora belli. Describe el método directo utilizando muestras de heces y soluciones salina y de Lugol bajo el microscopio para identificar quistes y trofozoítos. El resumen provee detalles sobre cada protozoario y los resultados observados para cada muestra a través del método directo microscópico

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    INFORME N° 07

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    Este documento presenta los métodos de diagnóstico para infecciones del tracto gastrointestinal, incluyendo protozoarios intestinales como Giardia lamblia, Entamoeba histolytica, Blastocystis hominis e Isospora belli. Describe el método directo utilizando muestras de heces y soluciones salina y de Lugol bajo el microscopio para identificar quistes y trofozoítos. El resumen provee detalles sobre cada protozoario y los resultados observados para cada muestra a través del método directo microscópico

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    Informe #07

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    Este documento presenta los métodos de diagnóstico para infecciones del tracto gastrointestinal, incluyendo protozoarios intestinales como Giardia lamblia, Entamoeba histolytica, Blastocystis hominis e Isospora belli. Describe el método directo utilizando muestras de heces y soluciones salina y de Lugol bajo el microscopio para identificar quistes y trofozoítos. El resumen provee detalles sobre cada protozoario y los resultados observados para cada muestra a través del método directo microscópico

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    “AÑO DE LA UNIDAD, LA PAZ Y EL DESARROLLO”

    FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

    ASIGNATURA:

    MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

    INFORME N° 07:

    MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO DE INFECCIONES DEL TRACTO


    GASTROINTESTINAL: PROTOZOARIOS INTESTINALES

    DOCENTE:
    DR. JUAN ABELINO BARON FIGUEROA

    AULA:
    A8P3

    AUTOR:
    Velasquez Sandoval, Cesar Daniel

    TRUJILLO – PERÚ
    2023
    PRÁCTICA N° 07

    MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO DE INFECCIONES DEL TRACTO


    GASTROINTESTINAL

    I. INTRODUCCIÓN
    En el tracto gastrointestinal se encuentra producida por Giardia intestinalis (G.
    duodenalis o C. lamblia) es predominante en nirios, y presenta en la actualidad una
    prevalencia creciente tanto en países tropicales como no tropicales.

    El parásito es un protozoo flagelado y en los últimos años se han descrito varios


    genotipos, con capacidad patógena diferente tanto en el humano como en los
    animales. Los trofozoítos se localizan en el intestino delgado, fijados a la mucosa,
    principalmente e n el duodeno. Allí se multiplican por división binaria y los que caen
    a la luz intestinal dan origen a quistes. Estos últimos son eliminados con las
    materias fecales y pueden permanecer viables en el suelo húmedo o en el agua
    por varios meses. Infectan por vía oral y después de ingeridos resisten la acción
    del jugo gástrico y se rompen en el intestino delgado para dar origen a cuatro
    trofozoítos por cada quiste.

    De igual manera el Blastocystis hominis se transmite por contaminación fecal, es


    una de las parasitosis intestinales más frecuentes en zonas tropicales. En general
    se considera no patógeno pues no invade el tejido intestinal. Algunos estudios
    afirman su patogenicidad, al causar diarrea y otros síntomas digestivos. En estos
    casos el tratamiento más utilizado son los 5-nitroimidazoles.
    La infección humana se adquiere por contaminación fecal a partir de otras
    personas o reservorios.

    Este parásito se localiza en el colon donde se han descrito cuatro formas de


    reproducción asexual: división binaria; plasmotomía que consiste en la formación
    de varios núcleos, que dan origen a varios organismos; endodiogenia en la que
    una célula madre da origen a dos hijas, antes de que se divida el parásito; y se
    forma la esquizogonia, que es la formación de gran cantidad de células hijas que
    forman un esquizonte.
    II. OBJETIVOS

    1. Fundamentar e interpretar los métodos de diagnóstico para


    enteroparásitos: método directo.
    2. Identificar los protozoarios intestinales: Giardia lamblia, Entamoeba
    histolytica, Blastocystis Hominis y Isospora Belli.

    III. MATERIALES
    ● Muestras de heces (Entamoeba histolytica, Blastocystis hominis, Giardia
    Lamblia y Isospora Belli)
    ● Guantes
    ● Recipientes estériles descartables (material externo)
    ● 6 palitos de madera
    ● Solución salina y Lugol
    ● Láminas portaobjeto y Laminillas cubreobjeto
    ● microscopios
    ● copas fondo cónico
    ● 6 tubos de fondo cónico
    IV. DESARROLLO
    RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA DE HECES
    a. La muestra de heces debe recogerse libre de orina, en caso de
    estreñimiento usar laxantesalino. Si las muestras no se recogen y manipulan
    adecuadamente antes de examinarlas,su valor para un diagnóstico exacto
    será escaso o nulo, sobre todo en el caso de los protozoos. Los trofozoítos
    comienzan a degenerar al cabo de 1-2 horas de la defecación no pudiendo
    diferenciarlos.
    b. Recolectar la muestra antes del uso de antiparasitarios, o hasta 5 días
    después.
    c. Colóquese la muestra en un frasco de vidrio o de plástico de boca ancha.
    d. Transportar al laboratorio y proceder a su examen de inmediato. Si las
    muestras no pueden examinarse en cuanto llegan, colóquese en el
    refrigerador (4-5°C) o en la zona más fresca y sombreada del laboratorio.
    e. De no ser posible su observación preservarla en líquidos conservadores o
    en refrigeración de 4 a 5°C.

    EXAMEN MICROSCÓPICO
    MÉTODO DIRECTO: Utiliza solución salina fisiológica y Lugol.
    Preparación de la muestra: En una lámina portaobjeto, se coloca una gota de
    solución salina fisiológica y con un mondadientes o una baqueta fina, se pone una
    pequeña cantidad de materia fecal a examinar, luego observación microscópica a
    menor y mayor aumento.

    FUNDAMENTO:
    1) Solución salina fisiológica:
    Reconocer trofozoítos de protozoos y otros estadios de diagnóstico de protozoos y
    helmintos (larvas, huevos) y elementos que aparecen en situaciones anormales,
    tales como leucocitos, eritrocitos, cristales de Charcot-Leyden.
    2) Solución de Lugol: Colorear en forma temporal trofozoítos y quistes de
    protozoos. Inmovilizar y colorear estructuras internas de larvas e identificar por
    morfología específica.
    PROCEDIMIENTO:
    Muestra: Giardia Lamblia
    El principal mecanismo de acción patógena, en
    giardiasis, se debe a la acción de los parásitos
    sobre la mucosa del intestino delgado,
    principalmente del duodeno y yeyuno.
    Solución: Salina fisiológica y lugol
    1) Identificar el portaobjetos con la muestra a examinar.
    2) Colocamos 1 gota de solución salina en un extremo del portaobjetos y 1
    gota de Lugol en el otro extremo.

    3) Con un aplicador tomar una muestra de heces y hacer una emulsión


    uniforme, primero en la gota de solución salina, y luego en la solución de
    Lugol.

    4) Con el palillo de madera procedemos a mezclar ambos extremos.


    5) Cubrimos cada preparación con un cubreobjetos.

    6) Observamos en el microscopio con el objetivo de 40x.


    QUISTES TROFOZOITO

    RESULTADOS:
    Como resultado del procedimiento directo se puede identificar quistes con la
    solución de lugol y un trofozoito móvil con la solución salina fisiológica en el
    microscopio a un objetivo de 40x.
    La patología principal se encuentra en infecciones masivas, en cuyo caso la
    barrera mecánica creada por los parásitos y la inflamación intestinal, pueden llegar
    a producir un síndrome de malabsorción.
    PROCEDIMIENTO:
    Muestra: Blastocystis hominis
    La infección humana se adquiere por contaminación fecal a partir de otras
    personas o reservorios constituida por quistes de pared dura, este parásito se
    localiza en el colon donde se han descrito cuatro formas de reproducción asexual:
    división binaria; plasmotomía que consiste en la formación de varios núcleos.
    Solución: Salina fisiológica y lugol
    1) Identificar el portaobjetos con la muestra a examinar.
    2) Colocamos 1 gota de solución salina en un extremo del portaobjetos y 1
    gota de Lugol en el otro extremo.

    3) Con un aplicador tomar una muestra de heces y hacer una emulsión


    uniforme, primero en la gota de solución salina, y luego en la solución de
    Lugol.

    4) Con el palillo de madera procedemos a mezclar ambos extremos.


    5) Cubrimos cada preparación con un cubreobjetos.

    6) Observamos en el microscopio con el objetivo de 40x.


    QUISTES

    RESULTADOS:
    Como resultado del procedimiento directo se puede identificar quistes con la
    solución de lugol y solución salina fisiológica en el microscopio a un objetivo de
    40x; el parásito tiene dos tipos de quistes que salen en la materia fecal, uno con
    cubierta fibrilar externa y el otro sin ella, la primera se forma a medida que el quiste
    madura.
    PROCEDIMIENTO:
    Muestra: Entamoeba histolytica
    La Entamoeba histolytica patógena existe en dos formas: trofozoito de 20 a 40 µm
    de diámetro y quiste de 10 a 20 µm de diámetro, ocasiona una infección parasitaria
    denominada amebas puede ser agrupada como: asintomática, sintomática sin
    evidencia de invasión tisular y sintomática con evidencia de invasión tisular.

    Solución: Salina fisiológica y lugol


    7) Identificar el portaobjetos con la muestra a examinar.
    8) Colocamos 1 gota de solución salina en un extremo del portaobjetos y 1
    gota de Lugol en el otro extremo.

    9) Con un aplicador tomar una muestra de heces y hacer una emulsión


    uniforme, primero en la gota de solución salina, y luego en la solución de
    Lugol.

    10)Con el palillo de madera procedemos a mezclar ambos extremos.


    11) Cubrimos cada preparación con un cubreobjetos.

    12)Observamos en el microscopio con el objetivo de 40x.


    QUISTES

    RESULTADOS:
    Como resultado del procedimiento directo se puede identificar quistes con la
    solución de lugol el quiste mide de l0um a 18um, es redondeado y posee una
    cubierta gruesa, en su interior se pueden observar de uno a cuatro núcleos
    también los cuerpos cromatoidales de forma cilíndrica con extremos redondeado
    en el microscopio a un objetivo de 40x.
    PROCEDIMIENTO:
    Muestra: Isospora Belli
    Isospora belli es un protozoo de la subclase Coccidia para el cual el hombre es el
    único huésped definitivo, habita en el intestino delgado, donde tiene reproducción
    sexual y asexual. Se elimina con las materias fecales en forma de ooquiste, de
    color blanco trasparente, con membrana de lgada y de forma oval.
    Solución: Salina fisiológica y lugol
    13)Identificar el portaobjetos con la muestra a examinar.
    14)Colocamos 1 gota de solución salina en un extremo del portaobjetos y 1
    gota de Lugol en el otro extremo.

    15)Con un aplicador tomar una muestra de heces y hacer una emulsión


    uniforme, primero en la gota de solución salina, y luego en la solución de
    Lugol.

    16)Con el palillo de madera procedemos a mezclar ambos extremos.


    17)Cubrimos cada preparación con un cubreobjetos.

    18)Observamos en el microscopio con el objetivo de 40x.


    QUISTES

    RESULTADOS:
    Como resultado del procedimiento directo se puede identificar ooquiste con la
    solución de lugol el quiste mide de 23 um por 13um, con membrana delgada y de
    forma oval en el microscopio a un objetivo de 40x.
    CONCLUSIONES

    - Se ha identificado en la muestra de Giardia lamblia quistes lugol y


    trofozoitos en solución salina es el hallazgo más frecuente en heces
    pastosas o duras, en casos con diarrea, el examen coprológico en solución
    salina permite observar los trofozoítos móviles la patología principal se
    encuentra en infecciones masivas, en cuyo caso la barrera mecánica creada
    por los parásitos y la inflamación intestinal, pueden llegar a producir un
    síndrome de malabsorción.
    - Se identificó en la muestra de Blastocystis hominis quistes con la solución
    de lugol y solución salina fisiológica en el microscopio a un objetivo de 40x;
    el parásito tiene dos tipos de quistes que salen en la materia fecal, uno con
    cubierta fibrilar externa y el otro sin ella, la primera se forma a medida que el
    quiste madura.
    - Se identificó en la muestra de Entamoeba Histolytica quistes con la solución
    de lugol el quiste mide de l0um a 18um, es redondeado y posee una
    cubierta gruesa, en su interior se pueden observar de uno a cuatro núcleos
    también los cuerpos cromatoidales de forma cilíndrica con extremos
    redondeado en el microscopio a un objetivo de 40x.
    - Como resultado del procedimiento directo se puede identificar ooquiste con
    la solución de lugol el quiste mide de 23 um por 13um, con membrana
    delgada y de forma oval en el microscopio a un objetivo de 40x, se localizan
    dentro de las células epiteliales del intestino delgado, las cuales destruyen,
    con producción de reacción inflamatoria y abundantes eosinófilos. La
    mucosa intestinal puede aplanarse y sufrir algún grado de necrosis.
    V. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

    1. Bruzual E, Brito A, Cryptosporidium spp. y Criptosporidiosis. Revista


    de la Sociedad Venezolana de Microbiología [Internet]. 2022 [cited
    2022 Oct 11];25(1):06-14. Disponible en:
    http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-25562005
    000100003
    2. Restor P. Coloraciones Ziehl-Neelsen y Safranina modificadas para el
    Diagnóstico de Cyclospora cayetanensis 488 Modified Ziehl-Neelsen
    and modified Safranin staining for diagnosing Cyclospora
    cayetanensis. 2008;10(3):488. Disponible en:
    http://www.scielo.org.co/pdf/rsap/v10n3/v10n3a14.pdf
    3. Aecid P. PROCESAMIENTO DE MUESTRAS PARA DIAGNÓSTICO
    DE PARÁSITOS INTESTINALES [Internet]. Ehas.org. [citado el 14 de
    octubre de 2022]. Disponible en:
    http://www.telemicroscopia.ehas.org/assets/diagnostico-parasitos-intes
    tinales.pdf
    4. Pérez M, Bruzual E, Brito A, Hurtado M. Cryptosporidium spp. y
    Criptosporidiosis. Rev. Soc. Ven. Microbiol. [Internet]. 2005 Ene
    [citado 2022 Oct 15] ; 25( 1 ): 06-14. Disponible en:
    http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-25562005
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    5. Chester H, Romero O, Tay G. Cryptosporidium [Internet]. Udlap.mx.
    1993 [citado el 15 de octubre de 2022]. Disponible en:
    http://catarina.udlap.mx/u_dl_a/tales/documentos/lqf/hinojosa_s_le/cap
    itulo6.pdf

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