13 Serologia e Inmunologia

SEROLOGIA E
INMUNOLOGIA

Lic. Yanira Cerón

INMUNOLOGIA

 La Inmunología es la rama de las ciencias biológicas
que se ocupa del estudio de las respuestas de defensa
a estímulos exógenos o endógenos y a sus
desviaciones patológicas.
 Inmunidad
 Conjunto de mecanismos de defensa frente a agentes
externos extraños. Se adquiere al nacer, va
madurando y consolidándose durante los primeros
años de vida.
Antígeno (Ag)

 Es una sustancia que cuando ingresa en el organismo
se reconoce como extraña, provocando una respuesta
inmune e induce la producción de anticuerpos.
 Son proteínas en su mayoría, polisacáridos, lípidos y
ácidos nucleicos.
 Un antígeno que estimula la formación de un

anticuerpo inmune se la llama: Inmunógeno.
Características de los
antígenos:

 Carácter de extraño
 Tamaño de las moléculas (mayor de 100.000 Dalton)
 Complejidad química y estructural ( 2 ó 3 aa dif.)
 Determinantes antigénicos (epitopes) Rx especi Ac
 Constitución genética del huésped (2 de la misma
sp responden dif a un mismo Ag)
 Dosificación, ruta (vía), tiempo de administración
del antígeno (cantidad de antígeno recibido)
Anticuerpos (Ac)

 Es un producto de la respuesta inmune que reacciona
con el antígeno correspondiente que dio lugar a su
formación.
 Son inmunoglobulinas (Ig) que se encuentran en la

fracción gammaglobulina de las proteínas plasmáticas.
 Existen 5 categorías de las inmunoglobulinas que son:
IgG, IgM, IgA, IgD, IgE.
 Son proteínas integradas por cadenas de aminoácidos

unidas por puentes peptídicos.
Características de reacción
antígeno y anticuerpo

 Especificidad
El Ag reacciona solamente con su Ac estimulado.
 Reaccionan las moléculas enteras no se produce

intercambios de partes o fracciones, ni se forma un
nuevo producto.
 La unión del Ag-Ac es firme, pero reversible bajo
condiciones apropiadas tanto uno como el otro se
pueden recuperar sin que aparentemente cambien.
Características de reacción
antígeno y anticuerpo

 No altera la estructura de las partes reaccionantes.
 El Ag y Ac se combinan en proporciones variables.
 El tiempo en que se produce la reacción es variable.
Serología

 Es un análisis de sangre para detectar la presencia
de Acs contra un microorganismo.
 Ciertos microorganismos estimulan al cuerpo para
producir Acs durante una infección activa.
 La detección de Acs se puede utilizar ya sea para

diagnosticar una infección previa o activa, o para
determinar si el individuo es inmune a una
reinfección por parte de un microorganismo.
Pruebas Serológicas
 Se utilizan para el diagnóstico de una gran variedad

de enfermedades infecciosas. La reacción Ag–Ac es
in vitro.
 Las pruebas serológicas que se realizan en el
laboratorio clínico son las siguientes:
 1. Aglutinación.
 2. Precipitación.
 3. Radioinmunoanálisis (RIA).
 4. ELISA (Análisis inmuno absorbente con enzimas
enlazadas).
 5. Inmunofluorescencia.
 6. Fijación del complemento.
 7. Pruebas de hemaglutinación.
Prueba de Aglutinación.

 Su principio se basa en la reacción Ag-Ac
 La aglutinación de los antígenos nativos insolubles o
de las partículas recubiertas por el antígeno puede
evaluarse a simple vista con o sin la ayuda del
microscopio.
 El Ag o el Ac se fija en una partícula de gran tamaño,
luego se forma un coagulo visible constituido por el
Ag, el Ac y otras partículas que se fijan.
Prueba de aglutinación

 Un antígeno particulado (ejemplo: bacterias,
eritrocitos), al ser puesto en contacto con su
anticuerpo específico en proporciones óptimas, se
une por medio de enlaces cruzados. Este complejo de
unión agruma, produciendo una reacción de
aglutinación.
Clasificación de las reacciones
de aglutinación

 Aglutinación directa → Un antígeno celular o de
partículas insolubles es aglutinado directamente por
el anticuerpo.
 Ejemplos: aglutinación de los eritrocitos del grupo A
por antisueros anti-A
 aglutinación de los eritrocitos RH positivos por el
 antisuero anti-D
 aglutinación del antígeno brucelar por anticuerpos
anti-Brucella
Clasificación de las reacciones
de aglutinación

 Aglutinación indirecta → aglutinación de las células
recubiertas de antígeno o a las partículas inertes que
son portadoras pasivas de antígenos solubles
 Ejemplos: La fijación del látex para VDRL en la sífilis

 Utilización de eritrocitos en la prueba de
hemaglutinación indirecta (HAI) en la búsqueda de
anticuerpos contra Tripanosoma cruzi
 Las pruebas cualitativas
de aglutinación
determinan la presencia o
ausencia de un
determinado Ac o Ag en
una muestra problema
 Se utiliza ampliamente en
medicina clínica.
 Ejemplo: Para
diagnosticar una faringitis
estreptocócica.

Prueba de Precipitación

Prueba de Precipitación

 Un antígeno soluble, al
ser puesto en contacto
con su anticuerpo
específico, forma
complejos inmunes que
al encontrarse en
proporciones óptimas
se insolubilizan dando
una reacción de
precipitación.
Prueba de Radioinmunoanálisis

 Consiste en cuantificar
antígenos que pueden
marcarse
radioactivamente y se
fundamenta en la
competencia por el
anticuerpo especifico,
entre una concentración
de material marcado
(conocido ) y una sin
marcar ( desconocido )
Prueba de Radioinmunoanálisis

 los complejos formados entre antígenos y
anticuerpos pueden entonces separarse y medirse la
cantidad de radioctividad .
 Se utilizan isotopos radioactivos Yodo (I=125 )
ELISA
(Análisis inmune absorbente con enzimas
enlazadas).

 Es una técnica
inmunoenzimatica que
permite la detección de
reacciones Ag–Ac
gracias a la reacción con
productos de color .
ELISA

 Es una técnica de inmunoensayo en la cual
un antígeno inmovilizado se detecta mediante
un anticuerpo enlazado a una enzima capaz de
generar un producto detectable, como cambio de
color o algún otro tipo
Los marcadores enzimáticos mas
utilizados son

 Peroxidasa de rábano picante (HRP)
 Fosfatasa alcalina
 Ureasa
 Galactosidasa beta
 Y otros
Inmunofluorescencia.

 Consiste en conjugar ciertos colorantes fluorescentes
con anticuerpos o antígenos y la unión de estas con
el colorante fluorescente origina un foco de
interacción entre el antígeno y el anticuerpo.
Los colorantes fluorescentes que se
utilizan son

 Fluoresceína ( Verde ) Mas Utilizado
 Ficocianina ( Rojo )
 Ficoeritrina (Naranja – Rojo )
 Rodamina ( Rojo )
 Rojo Texas ( Rojo )
Fijación del
complemento

 Reacción inmunológica en la que un Ag se combina
con un Ac y su complemento.
 Consiste en que el complemento es consumido
durante las reacciones Ag–Ac y se produce lisis
visible .
 El sistema del complemento esta constituido por 20
o mas proteínas plasmáticas que interactúan entre si
Fijación del
complemento

Pruebas de
hemaglutinación

 Aglutinación de los glóbulos rojos de la sangre bajo
los efectos de anticuerpos.
 Los eritrocitos comúnmente utilizados empleados
son de carnero y de humano .
Los resultados se valoran de la
siguiente forma

 1 . La aglutinación positiva esta indicada por un
recubrimiento rojo granular difuso en el fondo del
tubo.
 2. La ausencia de aglutinación (negativa )se define
por un botón rojo compacto en el fondo del tubo que
se desliza al inclinarlo.
 3. La aglutinación parcial da un aspecto intermedio
entre un recubrimiento difuso en el fondo del tubo y
un botón rojo y adquiere la forma de anillo con un
centro hueco.
Las enfermedades detectables
con la serología son las siguientes

 Sarampión  Brucelosis
 Rubéola  Amebiasis
 Carbunco  Infección micótica
 VIH,  VSR
 Hepatitis viral  Sífilis
 toxoplasmosis  y una variedad de
enfermedades más.
Técnicas serologicas

 Proteína C reactiva  Antiestreptolisina O
 Antígenos febriles  Toxoplasmosis
 RPR  HCG
 Mononucleosis  Factor reumatoideo
infecciosa  HB Ag
 VDRL
Proteína C reactiva

 Es una proteína de fase aguda, presente en el suero
de pacientes sanos la cual puede incrementarse
significativamente en la mayoría de procesos
infecciosos bacterianos y virales, tejido dañado,
inflamación y neoplasias malignas.
 Es producida por el hígado. El nivel de PCR se eleva

cuando hay inflamación en todo el cuerpo. Esta es
una de un grupo de proteínas llamadas
"reaccionantes de fase aguda" que aumentan en
respuesta a la inflamación.
Prueba rápida para reaginas
plasmáticas (RPR)

 Las "reaginas" presentes en el suero de individuos
infectados con Treponema pallidum, se detectan por
acción de las mismas con antígeno de cardiolipina,
lecitina y colesterol adsorbido sobre partículas de
carbón. La reacción produce una aglutinación visible
macroscópicamente, favorecida por las partículas de
carbón. Las reacciones inespecíficas se evitan con el
empleo de antígeno altamente purificado y el
agregado de cloruro de colina, por lo que no es
necesario inactivar la muestra.
RPR

 Técnica que se ocupa
un antígeno de
cardiolipina para
investigar reaginas de
la sífilis en suero sin
inactivar, plasma y
LCR.
Prueba del VDRL
(Venereal Disease Research Laboratory)

 En la prueba de VDRL, el suero del paciente es
inactivado a 56° C por 30 minutos, si se usa liquido
cefalorraquídeo (LCR) sólo se debe centrifugar
Luego la muestra se mezcla con un antígeno, que es
una solución buffer salina de cardiolipina y lecitina
adosadas a partículas de colesterol. Esta prueba se
puede realizar en lámina y ser observada al
microscopio como un precipitado de partículas finas
(floculación), o se puede realizar en un tubo de
ensayo y ser leída macroscópicamente
VDRL

 Técnica no treponémica
de aglutinación en
porta para la detección
cualitativa y
semicuantitativa de
reaginas plasmáticas en
suero humano y
ayudan a detectar el
agente causal de la
sífilis.
Factor reumatoideo

 El factor reumatoide es un anti-anticuerpo. Esto se puede
detectar en el laboratorio por su capacidad de atar y de
formar los grupos con las partículas del látex o los
glóbulos rojos que contienen la Inmunoglobulina humana
G (IgG).
 Si el factor reumatoide está presente en la sangre del

paciente asocia al IgG que recubre las partículas del látex
que causan los grupos. Esto se llama aglutinación. La
Aglutinación se considera una reacción positiva que
indique la presencia de factor reumatoide en un nivel
perceptible.
Antígenos febriles

 Técnica de aglutinación en porta y tubo para la
detección y semicuantificación de anticuerpos anti
salmonella, brucella y proteus en suero humano.
 Estas reacciones se basan en el hecho de que cuando

el organismo humano es invadido por agentes
infecciosos, responde produciendo anticuerpos
aglutinantes contra ellos los cuales se ponen de
manifiesto al entrar en contacto el anticuerpo con el
anticuerpo específico
Antiestreptolisina O

 Se produce por estreptococos B hemolíticos del
grupo A y la cuantificación de los anticuerpos y se
utiliza para el diagnóstico y tratamiento de
enfermedades de fiebres reumáticas,
glomerulonefritis aguda y otras infecciones
estreptocócicas.
GONADOTROPINA CORIÓNICA
HUMANA (HCG)

 Los niveles de hCG pueden medirse en la sangre o la
orina. Con mayor frecuencia, se hace como una
prueba de embarazo, destinada a indicar la presencia
o ausencia de un embrión implantado. También
pueden hacerse pruebas de hCG para el diagnóstico
o seguimiento de células germinales y tumores
trofoblásticos.
HCG

 La mayor parte de las pruebas emplean un
anticuerpo monoclonal (MAb) específico de la
subunidad β de la hCG (βhCG). Este procedimiento
se emplea para asegurar que las pruebas no dan
falsos positivos por confusión de la hCG con la LH y
la FSH. Estas dos últimas están siempre presentes en
diferentes niveles en el cuerpo, mientras que la
presencia de hCG casi siempre indica el embarazo.

GRACIAS POR SU
ATENCIÓN

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Lic. Yanira Cerón

 Un antígeno que estimula la formación de un

 Son inmunoglobulinas (Ig) que se encuentran en la

 Son proteínas integradas por cadenas de aminoácidos

 Reaccionan las moléculas enteras no se produce

 La detección de Acs se puede utilizar ya sea para

 Ejemplos: La fijación del látex para VDRL en la sífilis

 Es producida por el hígado. El nivel de PCR se eleva

 Si el factor reumatoide está presente en la sangre del

 Estas reacciones se basan en el hecho de que cuando

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