“AÑO DEL BICENTENARIO, DE LA CONSOLIDACIÓN DE NUESTRA

INDEPENDENCIA, Y DE LA CONMEMORACIÓN DE LAS HEROICAS

BATALLAS DE JUNÍN Y AYACUCHO”

FACULTAD DE AGRONOMÍA

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGRONÓMICA

REPORTE DE PRÁCTICAS N° 6

TEMA:

CARACTERIZACIÓN DE AMINOÁCIDOS

ASIGNATURA:

BIOQUÍMICA

DOCENTE:

Dr. NICOLÁS HIPÓLITO LEÓN PUMA

INTEGRANTES:

MAMANI QUISPESIVANA, ANDERSON JOSE

TRELLES HUAMANI, GONZALO

CCAHU CCAHUA, JESUS MIGUEL

HUACHACA CCANCHILLO, ROY YIMMY

AREQUIPA –PERÚ
 2024-I

1. Introducción:

Los aminoácidos son compuestos orgánicos que desempeñan un papel crucial en la

biología, ya que son los bloques de construcción fundamentales de las proteínas, las
moléculas más diversas y funcionalmente versátiles en los organismos vivos. Cada
aminoácido se compone de un grupo amino (-NH2), un grupo carboxilo (-COOH), un
átomo de hidrógeno y una cadena lateral distintiva (R) que varía entre los diferentes
aminoácidos. Esta variación en la cadena lateral es la que confiere a cada aminoácido
sus propiedades químicas y físicas únicas.

Los aminoácidos se clasifican en varios tipos según sus propiedades y funciones.

Pueden ser esenciales, aquellos que el organismo no puede sintetizar y deben ser
obtenidos a través de la dieta, y no esenciales, que el organismo puede producir.
Además, se diferencian por sus características polares, no polares, ácidas y básicas, lo
que influye en su comportamiento en soluciones acuosas y en la formación de
estructuras proteicas.

La importancia de los aminoácidos va más allá de la formación de proteínas.

Participan en numerosas rutas metabólicas, actúan como precursores de
neurotransmisores y hormonas, y están involucrados en la regulación del equilibrio de
nitrógeno en el cuerpo. Comprender las características de los aminoácidos es esencial
para diversas disciplinas científicas, incluyendo la bioquímica, la biología molecular y
la medicina, ya que permite profundizar en los mecanismos de la vida a nivel
molecular y desarrollar aplicaciones biotecnológicas y terapéuticas innovadoras.

2. Objetivos:
- Comprender y aplicar diferentes métodos cualitativos para la detección de
aminoácidos.
- Adquirir habilidades prácticas en el uso de métodos cualitativos para la
detección de aminoácidos.
- Identificar la presencia de aminoácidos en diferentes muestras.

3. Materiales:
- Material de laboratorio: Tubos, rejillas, morteros, pipetas y papel filtro.

- Soluciones y Reactivos: Soluciones de aminoácidos 0,1 M (arginina,

glicina,triptófano, tirosina), ninhidrina (0,2% en acetona), ácido acético
glacial, ácido sulfúrico, solución de NaOH al 40%, ácido nítrico concentrado,
reactivo de Millon

- Muestras biológicas: Hojas de espinaca o acelga y huevo crudo

4. Metodología:
a. Antes de realizar los experimentos rompa el huevo y separe la clara de la
yema. En un recipiente bata la clara ayudándose de un tenedor o batidor de
mano. Prepare una solución de clara de huevo al 5%. Filtre con papel filtro.
b. Experimento 1: Prueba de ninhidrina
Coloque 1 ml de solución de prueba en un tubo de ensayo y agregue 5 gotas de
solución de ninhidrina y hierva durante 2 minutos. Un color violeta indica la
presencia de aminoácidos. Esta prueba se realiza con todos los α-aminoácidos
y proteínas. Muchas aminas primarias también pueden dar una prueba de
ninhidrina positiva.Nota: A veces, sólo la glicina da el complejo violeta y
otros aminoácidos como tirosina, triptófano, arginina, etc. dan el color
amarillo, lo que se debe a su menor solubilidad en agua, por lo que su solución
contiene una pequeña cantidad de NaOH, que es el responsable de este color
c. Experimento 2: Prueba de Hopkins -Cole
Agregue 1ml de ácido acético glacial a 1 ml de la solución de prueba y luego
vierta aproximadamente 1 ml de H2SO4 concentrado con cuidado por el
costado de un tubo de ensayo inclinado para formar dos capas. Se forma un
anillo violeta en la unión de dos líquidos, lo que indica la presencia de un
grupo indol.
d. Experimento 3: Prueba Xantoproteica
Tome 0,5 ml de solución de prueba en un tubo de ensayo y agregue la misma
cantidad de HNO3 concentrado. Al enfriarse se forma un color amarillo.
Ahora a esta solución agregue 1ml de solución de NaOH al 40% para hacerla
alcalina, un color naranja brillante confirma que el aminoácido contiene un
anillo aromático.
e. Experimento 4: Prueba de Millón
Coloque 1 ml de solución de prueba en un tubo y agregue 10 gotas de reactivo
de Millon, luego caliéntalo en un baño de agua hirviendo durante 10 minutos.
Dejar enfriar a temperatura ambiente. Agregue 10 gotas de solución de nitrato
de sodio. Un color rojo indica la presencia de tirosina.

5. Resultados:
a. Experimento 1: Prueba de ninhidrina

En la reacción con ninhidrina es usada para la determinación cuantitativa de

los aminoácidos y péptidos. Los aminoácidos reaccionan con la ninhidrina
para dar un característico color azul violáceo llamado azul de Ruheman con
una absorción máxima a 540 nm a excepción de la prolina e hidroxiprolina
que dan un color amarillo, con una absorción máxima a 440 nm. La ninhidrina
es reducida y el aminoácido es desaminado y descarboxilado.
Imágenes de la muestra las soluciones de Albúmina, Cistina, Metionina antes
de ser sometida al calor.
 Las diferentes soluciones sometidas a baño maría durante 2 minutos y vemos
una coloración violeta que indicaría la caracterización de los aminoácidos.

Observamos que la solución de ovoalbúmina se torna violeta por la presencia

de aminoácidos y proteínas. Con esta reacción podemos identificar grupos
aminos libres en posición alfa, mientras que en la albúmina y caseína no
presentan los aminoácidos libres.

b. Experimento 2: Prueba de Hopkins -Cole

La prueba de Hopkins -Cole es para identificar el triptófano y las proteínas
que lo contienen. La positividad se reconoce por la aparición de un anillo color
violeta rojizo (Vázquez-Jorge, 2014). En esta experiencia no se observó la
formación de un anillo violeta en la interfaz entre el ácido acético glacial y el
ácido sulfúrico concentrado, esto debido a que se usó otros reactivos.
 El resultado de la prueba de Hopkins -Cole es importante en el contexto del
análisis bioquímico, ya que la presencia de indol puede indicar la existencia de
ciertos compuestos orgánicos o metabolitos en la muestra en estudio.
Específicamente, en microbiología, la detección de indol puede utilizarse para
identificar ciertos tipos de bacterias que producen este compuesto como
producto metabólico.

c. Experimento 3: Prueba Xantoproteica

La prueba xantoproteica sirve para reconocer los aminoácidos que poseen el

grupo bencénico (tirosina, fenilalanina, triptófano). Las proteínas que tienen
en su composición estos aminoácidos también darán la reacción.

En la prueba realizada en el laboratorio se logro conseguir el color amarillo

característico de que dicho aminoácido contiene un anillo aromático

d. Experimento 4: Prueba de Millón

 Los compuestos que contienen el radical hidroxibenceno reaccionan con el
reactivo de Millón para formar complejos rojos.

El único aminoácido fenólico es la tirosina y sus derivados y sólo estos

aminoácidos dan una prueba positiva. al realizar el baño maria podemos
observar que la cistina (a) y la metionina (b) no dieron positivo al reactivo de
Millón, pero la albúmina (c) si; ya está cuenta con las tirosina y es así que
cambia a un color rojizo. dando nos positivo al reactivo de Millon.

c
ab b
ac
6. Conclusión:

- Comprender y aplicar diferentes métodos cualitativos para la detección de

aminoácidos permite a los investigadores seleccionar y utilizar la técnica más
adecuada para su estudio, optimizando la precisión y eficacia en la
identificación de aminoácidos presentes en diversas muestras.
- Adquirir habilidades prácticas en el uso de métodos cualitativos para la
detección de aminoácidos es esencial para asegurar que los análisis se realicen
correctamente y de manera reproducible.
- Identificar la presencia de aminoácidos en diferentes muestras es crucial para
diversas aplicaciones, desde la investigación nutricional hasta el diagnóstico
clínico.

7. Cuestionario:
1. ¿Por qué es importante realizar pruebas cualitativas de aminoácidos en el
contexto de la agronomía?

Es muy importante puesto que con algunas de las pruebas cualitativas de aminoácidos
es que se puede por ejemplo determinar la calidad de la materia orgánica de los
suelos, puesto que suelos ricos en aminoácidos son para un mejor desarrollo de la
planta, además estos aminoácidos también tienen que ser analizados esta vez en la
zona de la planta ya que es necesario que la planta tenga niveles normales de
aminoácidos en sus tejidos vegetales, esto determina la calidad del producto.

2. ¿Cómo se puede utilizar la prueba de ninhidrina para evaluar la calidad de

proteínas en alimentos?

La prueba de ninhidrina se utiliza para evaluar la calidad de las proteínas en alimentos

de la siguiente manera:
Extracción de proteínas: Se extraen las proteínas del alimento mediante un método
adecuado, como la molienda y extracción con solventes.
Reacción con ninhidrina: Se mezcla una muestra de las proteínas extraídas con una
solución de ninhidrina. La ninhidrina reacciona con los grupos amino de los
aminoácidos y péptidos presentes en las proteínas, formando un complejo de color
púrpura.
Valoración del color: La intensidad del color formado está relacionada con la
cantidad de aminoácidos y péptidos presentes, lo que indica la cantidad de proteínas
en la muestra.
Comparación con estándares: Se compara la intensidad del color con estándares de
concentración conocida de proteínas para estimar la cantidad de proteínas presentes
en la muestra.
Esta prueba proporciona una evaluación rápida de la cantidad de proteínas en un
alimento, lo que puede ser útil para determinar su calidad nutricional y su idoneidad
para el consumo humano o animal.

3. ¿Cómo podría influir la presencia de impurezas en las muestras de plantas en

los resultados de estas pruebas cualitativas?

La presencia de impurezas en las muestras de plantas puede afectar significativamente

los resultados de las pruebas cualitativas. Estas impurezas pueden provenir de diversas
fuentes, como la contaminación del medio ambiente, el manejo inadecuado de las
muestras, o la presencia de microorganismos no deseados como reacciones
secundarias, contaminación microbiana, ruido de datos, dilución de compuestos de
interés. Para minimizar estos problemas, es crucial implementar buenas prácticas de
laboratorio y técnicas de bioseguridad.
Bibliografía
Vázquez-Jorge, Y. G., Guerra-Molina, L., Quintana-Tamayo, J. F., Ramírez-Arzuaga,
J., Fernando-Ballestero, R., & Vázquez-Jorge, Y. (2014). Caracterización
físico-química y contenido de proteínas de extractos fluidos del ostión de
mangle (Crassostrea Rhizophorae). Revista Cubana de Química, 26(1), 66-74.