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88 Semen Sexado

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SEMEN SEXADO, UNA HERRAMIENTA TECNOLGICA PARA EL TAMBO

Med. Vet. Lucas E. Cutaia1, Guillermo Veneranda2 y Gabriel Bo3. 2007. Producir XXI, Bs.As., 15(188):52-57. 1-Instituto de Reproduccin Animal Crdoba (IRAC), lcutaia@iracbogen. com.ar 2-Syntex SA, 3-Los Lazos SA. www.produccion-animal.com.ar

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USO DE SEMEN SEXADO EN LA PRODUCCIN DE LECHE El sexo de los terneros nacidos en programas de inseminacin artificial (IA) puede ser predeterminado separando los espermatozoide X de los Y con un citmetro de flujo/clasificador de clulas. Esta tcnica fue desarrollada para esperma in vivo por el Dr. Larry A Johnson y est basada en que el esperma X, que produce terneras, contiene 3,8 % ms ADN que el esperma Y, que produce terneros machos (Johnson, 1992). Los espermatozoides colectados son teidos con un colorante y expuestos a un rayo lser de onda corta, el esperma Xteido emite una fluorescencia ms brillante por su mayor contenido de ADN, esa diferencia en emisin de fluorescencia puede ser medida por un tubo fotomultiplicador, a medida que el flujo sale por la boquilla del clasificador este es vibrado a alta frecuencia produciendo la formacin de gotas, a pesar que no todas las gotas contienen esperma, aquellas que s contienen se les da una carga negativa o positiva de acuerdo a su contenido de ADN, no se aplica carga a las gotas que contienen ms de un esperma, esperma muerto o espermas que no se ha detectado precisamente su contenido de ADN permitiendo que stas clulas se eliminen como desecho (Johnson,1992). El proceso de seleccin diluye el esperma, por lo tanto necesitan ser concentrados nuevamente antes de empacarlos en pajuelas de 0.25 ml a la dosis de 1 a 6 x 106 espermatozoides. La dosis contenidas en pajuelas para inseminacin de espermatozoides sexados es de alrededor de 1/20 de la dosis normal con semen congelado. A pesar de esto es necesario usar 1/3 menos de esperma por inseminacin que la convencionalmente para lograr un producto de xito comercial (Seidel et al, 1997). El sexado de semen es una tecnologa desarrollada en la dcada de los 80, y no ha sido fcil implementarla en rodeos comerciales hasta comienzos de este siglo, a pesar de las inmensas ventajas que traera tanto para el sector lechero como para el ganado de cra. En el ganado bovino lechero, las vacas con mayor mrito gentico se podran destinar a la produccin de cras hembra y el resto de las hembras a generar cras macho usando una raza de carne (Taylor et al, 1988). Los productores de carne podrn inseminar sus mejores vacas para reposicin para que paran hembras, esto permitir mejorar mucho la facilidad de partos ya que en general una hembra pesa menos al nacimiento que un ternero macho. Desde el momento en que se seleccion esas madres para generar el reemplazo por su calidad gentica, las hijas seran naturalmente las madres perfectas de la siguiente generacin de reemplazos y del resto del rodeo se obtendran preferentemente cras macho para el mercado (Ereth et al, 2000). En los programas genticos aumentara la respuesta en la tasa de seleccin, pues los cabaeros produciran ms toros con un nmero reducido de vacas elite (Seidel et al, 1999). La introduccin del semen sexado a los diferentes esquemas productivos del grupo Los Lazos S.A. se produjo en el ao 2003 mediante la tcnica de inseminacin a celo detectado para la produccin de embriones. En este momento y para aumentar el crecimiento del rodeo Aberdeen Angus Puro de Pedigree se planteo la necesidad de aumentar los nacimientos de hembras. USO DE SEMEN SEXADO MEDIANTE LA TCNICA DE IATF (INSEMINACIN ARTIFICIAL A TIEMPO FIJO) EN VAQUILLONAS HOLANDO ARGENTINO En los esquemas de produccin de leche de Argentina, la tcnica de inseminacin Artificial ha sido ampliamente adoptada. Los servicios de vaquillonas tradicionalmente se realizan a celo detectado, utilizando algunos mtodos tradicionales para sincronizar celos. La incorporacin de la IATF tuvo por objeto independizarse parcialmente de dicha deteccin de celos y ahorrar una cantidad de horas hombre necesarias para realizar la inseminacin. Los protocolos de sincronizacin del crecimiento folicular y de la ovulacin que se utilizaron en Rodeos de cra, son utilizados con xito en vaquillonas de leche, siendo el siguiente esquema el ms comnmente adoptado por S.A La Sibila en sus rodeos de Vaquillonas Holando Argentino.

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(1) Colocacin del dispositivo que libera P4 (progesterona) y que es mantenidos en la vagina (DIB) por un perodo de 7 u 8 das. Se administra 2 mg de benzoato de estradiol (EB) por va intramuscular (im) junto con la insercin del dispositivo en lo que se denomina el Da 0 del tratamiento (2) En el Da 8, se extrae el implante se aplica Prostaglandinas PGF (Ciclase) por va intramuscular (Im) (3) Se administra 1 mg de benzoato de estradiol (EB,) por va intramuscular (im) (4) Se realiza IATF entre las 52 y 56 horas de la remocin del dispositivo. La funcin fundamental de la aplicacin de estrgenos en el inicio del tratamiento es provocar la atresia de los folculos existentes e impedir de esta manera la formacin de folculos persistentes que interfieren negativamente en la fertilidad. Como la atresia es seguida por el comienzo de una nueva onda folicular a los 4 das se asegura de esta manera la presencia de un folculo nuevo y un ovocito viable en el momento de retirar el dispositivo. Por ltimo, la segunda administracin de EB es fundamental para sincronizar la ovulacin y obtener buenos ndices de preez a la IATF. (5) Entre los 18 y 24 das post IATF se realiza un repaso a Celo Detectado (CD).

Con el antecedente de los resultados y para aumentar la cantidad de hembras de reposicin, se comenz a utilizar semen sexado prcticamente bajo el mismo esquema anteriormente utilizado con semen convencional. El primer trabajo tuvo por objeto comparar 2 horarios distintos de inseminacin y adems la comparacin de una pequea variacin en el protocolo originalmente aplicado con semen convencional. Dicho ensayo se realizo en Estancia El Embrujo, El Fortn, Provincia de Crdoba, Argentina durante el mes de Junio de 2005. Se utilizaron 150 vaquillonas Holando Argentino con Registro de cra de ACHA (Asociacin de Criadores Holando Argentino). La Condicin Corporal fue de 5 (Escala de 1 a 9). La totalidad de los animales fue dividida al azar en 3 grupos los que se sometieron un tratamiento aplicando un protocolo para sincronizar el crecimiento folicular y la ovulacin. Todas las vacas recibieron un dispositivo intravaginal CIDR-13 por 8 das junto con la aplicacin de 2 mg de benzoato de estradiol (EB) en el Da 0, Prostaglandinas (PGF) en el Da 8 (cuando se quitaron los CIDR-B) y 1 mg de EB en el Da 9. En 2 de los 3 grupos se aplico media dosis de PGF2 al inicio del protocolo con el objeto de eliminar cualquier vestigio de Cuerpo lteo que pudiera aumentar los niveles de P4, los que sumados a la liberada por el dispositivo intravaginal puedan alterar la sincrona del protocolo o la fertilidad del grupo de vaquillonas. QUEDARON AS CONFORMADOS LOS SIGUIENTES GRUPOS Grupo 1: (Grupo Control) n=50. Recibieron inseminacin con semen sexado (3 x 106 millones de espermatozoides por dosis) a las 52 horas de retirado el dispositivo intravaginal. Grupo 2: n=50 (Grupo Semen Sexado 52h). Recibieron inseminacin artificial con semen sexado (3 x 106 millones de espermatozoides por dosis) a las 52 horas de retirado el dispositivo intravaginal y adems recibieron media dosis de PGF2 el da 0 junto a la colocacin del dispositivo.
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Grupo 3: n=50 (Grupo Semen Sexado 60h) Recibieron inseminacin artificial con semen sexado (3 x 106 millones de espermatozoides por dosis) a las 60 horas de retirado el dispositivo intravaginal y adems recibieron media dosis de PGF2 el da 0 junto a la colocacin del dispositivo. A los 3 grupos se los someti a un repaso a celo detectado los das 18 a 23 post IATF tambin utilizando semen sexado (3 x 106 millones de espermatozoides por dosis). Trabajaron 2 inseminadores los que inseminaron una cantidad similar de animales. El modelo estadstico que se utiliz fue regresin logstica (Infostat) considerando como variable dependiente al diagnostico de preez y como factores regresoras aquellas que pudieran haber afectado los resultados como por ejemplo, inseminador, grupo de tratamiento, horario, y su interaccin. No hubo efecto del Grupo de Tratamiento (es decir media PGF o no, y del horario) P=0,53, tampoco hubo efecto del inseminador (P=0,19) ni interaccin entre estos (P=0,77). El porcentaje de preez total fue aceptable en su comparacin con el aplicado con semen convencional. Esto hizo que realizamos dos trabajos mas aplicando el mismo protocolo que utilizamos en semen convencional. El Cuadro N 2 muestra los resultados de prees en los diferentes grupos.

Los resultados de preez del repaso no fueron desagrupados, considerndose un solo valor. (Cuadro 3).

Debido a que los porcentajes de preez en la IATF con sexado tienen una tendencia a ser menores que usando dicho semen a celo detectado, es que decidimos aplicarlo solamente en el repaso (Cuadro N 4).

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El uso de semen sexado para incrementar el nmero de hembras de reemplazo es una tecnologa muy interesante para su aplicacin. Si bien los porcentajes de preez son ligeramente inferiores al uso de semen convencional, el avance de los estudios sobre la concentracin y el momento de inseminacin adecuados, reducirn dichas diferencias. ESTUDIO COMPARATIVO DE PREECES OBTENIDAS POR UNIDAD DE TIEMPO UTILIZANDO IA A CELO DETECTADO O IA A TIEMPO FIJO La tasa de preez del rodeo es el producto de la tasa de deteccin de celos por la tasa de concepcin. La tasa de deteccin de celos es la relacin entre los animales detectados en celo y el total de los que efectivamente estn ciclando y la tasa de concepcin es el porcentaje de preez obtenido sobre las que se sirvieron. Esto significa que la relacin es factorial y si tuviramos una eficiencia de deteccin de celos del 40% y de concepcin del 40%, el porcentaje de preez sera del 16% (740% x 40% = 16%). Cualquier disminucin en uno de ellos afecta drsticamente el porcentaje de preez. Como alternativa de manejo para evitar o disminuir la deteccin de celos y acortar el intervalo parto-parto se han desarrollado protocolos de Inseminacin artificial a Tiempo Fijo (IATF), utilizando diferentes frmacos, tales como, DIB (Dispositivo Intravaginal con Progesterona), Ciclase (Prostaglandina), Novormn (eCG) y Gonasyn (GnRH). Mediante el uso de la IATF se elimina la variable deteccin de celos por lo tanto la tasa de preez resulta igual a la tasa de concepcin. Durante el ltimo ao hemos realizado algunas experiencias con el objetivo de comparar la cantidad de preeces obtenidas por unidad de tiempo, utilizando un programa de inseminacin artificial convencional (a celo detectado; Protocolo A) y dos programas diferentes de inseminacin artificial a tiempo fijo (Protocolo B y C).

El Protocolo B consiste en una sesin de IATF y luego repaso a celo detectado por dos ciclos, el Protocolo C consiste en dos sesiones de Tiempo Fijo y un ciclo de repaso con inseminacin a celo detectado. En base a estos resultados se puede concluir que al implementacin de una sesin de IATF y dos de deteccin de celos resulta en 21 preeces mas en la misma unidad de tiempo que el Protocolo A (Deteccin de Celos), y por otro lado el la realizacin de dos IATF y un ciclo de repaso a celo detectado, resulta en 35 preeces mas en la misma unidad de tiempo. De esta forma se acorta significativamente el intervalo parto-parto.

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Al implementar este tipo de protocolos es factible reducir el tiempo (horas hombre) destinado a las tarea de deteccin de celos. Otra ventaja es que se acorta el intervalo-primer servicio, ya que las vacas entran al programa inmediatamente despus del periodo de espera voluntario. Indudablemente la incorporacin de este tipo de tecnologas en el rodeo, debe ser gradual y seguida de cerca por el veterinario, para de esta forma poder lograr los resultados esperados.

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