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    Anti Bio Grama

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    Este documento describe el proceso de lectura interpretada del antibiograma y la detección de ESBLs por método de disco difusión. Explica los requisitos necesarios como el conocimiento de mecanismos de resistencia y antibiotipos naturales. También cubre la detección de fenotipos habituales, raros e imposibles, y provee ejemplos de deducción de mecanismos de resistencia a partir de fenotipos observados. Finalmente, discute factores biológicos y técnicos que afectan la interpretación, así como métodos

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    Anti Bio Grama

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    Este documento describe el proceso de lectura interpretada del antibiograma y la detección de ESBLs por método de disco difusión. Explica los requisitos necesarios como el conocimiento de mecanismos de resistencia y antibiotipos naturales. También cubre la detección de fenotipos habituales, raros e imposibles, y provee ejemplos de deducción de mecanismos de resistencia a partir de fenotipos observados. Finalmente, discute factores biológicos y técnicos que afectan la interpretación, así como métodos

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    LECTURA INTERPRETADA DEL ANTIBIOGRAMA Y DETECCION DE ESBLs POR DISCO DIFUSION

    Mg. T.M. Robert Caballero Bardales Docente

    ESTE PROCESO CONSISTE EN EL RECONOCIMIENTO DE LOS FENOTIPOS DE RESISTENCIA Y PERMITE AL LABORATORIO


    Detectar mecanismos de Resistencia. Modificacin de la interpretacin. Reduccin de valores de susceptibilidad a

    antimicrobianos.

    REQUISITOS NECESARIOS PARA LA LECTURA INTERPRETADA DEL ANTIBIOGRAMA.


    Conocimiento previo de los mecanismos de

    resistencia y una valoracin adecuada de su expresin fenotpica. Conocimiento previo de las resistencias naturales de los microorgansmos evaluados ( antibiotipo ). Empleo adecuado de criterios de seleccin de antibiticos para sensibilidad ( NCCLS ).

    FENOTIPOS HABITUALES, RAROS E IMPOSIBLES


    El fenotipo de sensibilidad o de resistencia esta definido por el conjunto de datos obtenidos en el Antibiograma.

    Habituales: presencia epidemiologicamente normal. Raros: expresin de mecanismos de resistencia poco habituales. Imposibles: no responden a mecanismos de resistencia conocidos-falla tcnica o un error en la identificacin

    RESISTENCIAS NATURALES TPICAS DE PATGENOS COMUNES


    MICROORGANISMO Todas Enterobacteriacea Acinetobacter baumannii P aeruginosa Salmonella spp. Klebsiella spp. Citrobacter divresus Enterobacter spp. C. freundii Proteus vulgaris RESISTENCIA NATURAL Pen G, Gly, MLS Amp, Ax, C1G C2G, Ntr Amp, Ax, C1 Y 2G, Tr, Cam, Ctx, Ctr, Nal, Cxm, Amgl. Amp, Ax, Carb, Tic, C2G. Amp, Amx, Cam, C1G, Fox, C2G. Amp, AX, Cxm, Nt

    DETECCIN FENOTIPICA DE LOS MECANISMOS DE RESISTENCIA


    Propuesto por Patrice Courvalin en

    1992.

    Caracterizacin del fenotipo de Resistencia. Deduccin a partir del Fenotipo de Resistencia. Inferencias.

    EJEMPLOS DE ACTUACIN EN LA LECTURA INTERPRETADA


    Microorganismo Fenotipo observado sinergia Cam + C3G Sionergia Imp + EDTA Nalidixico R Oxacilina R Van R Tei S/ I Oxacilina R Mecasnismo Deducido ESBL Metalo - Betalactamasa mutaciones en GyrA +/- parC PBP2a vanB PBP modificadas Cambios Interpretativos R a todas las Cefal..... R a Carbapenemos Perdida de S a Quinolonas R a Betalactamicos Evitar uso de Glicopeptidos Posible R a Pen y c1g c2g

    Enterobacterias P. Aeruginosa H. Influenzae Staphylococcus Enterococcus S. Pneumoniae

    FACTORES BIOLGICOS
    QUE AFECTAN LA LECTURA INTERPRETADA

    PERSISTENTES
    Un pequeo numero de

    bacterias son capaces de sobrevivir el efecto letal del antibitico.

    EFECTO PARADJICO
    Proporcin de clulas sobrevivientes se

    incrementa significativamente con la concentracin del agente antimicrobiano que incrementa aun mas la CBM.

    TOLERANCIA
    Capaces de evadir la

    accin letal del agente antimicrobiano

    FENOTIPICA RESISTANCIA
    Los microorganismos pueden

    desarrollar resistencia durante la

    ejecucin de una prueba de


    susceptibilidad antimicrobiano

    FACTORES TCNICOS

    FASE de CRECIMIENTO
    Peligro mas comn

    encontrado: fijar la fase del cultivo.

    TAMAO del INOCULO


    Incremento del efecto de enzimas.
    Surgimiento de la TOLERANCIA:

    incremento del inoculo. Inculos bajos 104, las bacterias son eliminadas rpidamente.

    Interpretacin del Antiobiograma: Categorizacin Clnica de los Resultados del estudio de Susceptibilidad
    Microorganismo
    Identificacin + antibiograma

    Interpretacin de antibiograma

    Deduccin del fenotipo de resistencia Inferencia del fenotipo de resistencia con las trascendencia clnicas

    Deduccin de mecanismo de resistencia implicado

    Redefinicion de la interpretacin clnica de los resultados Deduccin de la sensibilidad a antimicrobianos no estudiados

    Informe de resultados

    Microorganismos pertenecientes a especies e igual genero con mecanismos que afectan la Lectura Interpretada del Antibiograma
    microorganismo Proteus mirabilis Porteus vulgaris Klebsiella pneumoniae Klebsiella oxytoca Enterobacter gergoviae Enterobacter cloacae Citrobacter freundii Citrobacter diversus Betalactamasa cromosomica CumA inducible SHV - 1 K1 Fenotipo salvaje salvaje Desreprimido salvaje Hiperproduccion salvaje Hiperproduccion AMP S R R R R R R S salvaje R Desreprimido R salvaje R Desreprimido R salvaje R Desreprimido R AMC S S S S r/R S R S R R R R S S TIC S R R R R R R S S R S R R R KZ S R R S R S R S R R R R R R CXM S R R S S S R S S/r R S/r R R R FOX CTX CAZ S S S S S S S R S S S S S S S/r S S S S S S/r S S S R S S R R R R S S R R R S S S S R S CEP S S S S S S S S S S S S S S IMP S S S S S S S S S S S S S S

    AmpC inducible AmpC inducible CdiA

    LECTURA INTERPRETADA EN BGN No Fermentadores

    LECTURA INTERPRETADA EN COCOS GRAM POSITIVOS

    SCNSM con fenotipo MLS inducible

    SARM con fenotipo MLS inducible

    OX

    inducible

    STAFILOCOCOCON FENOTIPO ( b2 ) DE MLSB INDUCIBLE.

    Fenotipos: A, B, C, D.

    No inducible

    STAFILOCOCO CON FENOTIPO MLSB INDUCIBLE ( GRUPO B1 )

    Anlisis del conjunto de los resultados de sensibilidad


    los resultados deben considerarse siempre

    en conjunto, analizando grupos de antibiticos pertenecientes a una familia Macrolidos - lincosamidas: estudiar por diferentes familias pero relacionados entre si por presentar Dianas de actuacin comunes.

    USO DE ANTIBITICOS MARCADORES O INDICADORES DE LA PRESENCIA DE LOS MECANISMOS DE RESISTENCIA


    Acido Nalidixico: resistencia a Quinolonas en

    enterobacteriaceae - por mutacin de DNA gyrasa. Kanamicina: resistente en Staphylococcus por APH(3) ANT(4). Eritromocina, Oleandomicina: induccin de la resistencia a lincosamidas, ketolidos y streptograminas por gener ERM.

    ESTUDIO DE COMBINACIONES ENTRE ANTIMICROBIANOS E INHIBIDORES DE MECANISMOS DE RESISTENCIA


    Acido Clavulnico asociado con C3G.

    Detectan ESBL en E. Coli y Klebsiella spp. EDTA asociado con Imp. Facilita el reconocimiento de Carbapenemasas. Sulbactam + C3G + C4G : detecta ESBLs en Enterobacter ( dism a 20mm ).

    Beneficio de la Lectura Interpretada


    Deteccin de nuevos Mecanismos.
    Anlisis de la Epidemiologa de la

    resistencia.
    Adecuacin de los tratamientos y

    control de polticas antimicrobianas.

    MEJORA DE LA CALIDAD

    La Lectura Interpretada del antibiograma

    puede servir como control de la validacin de los resultados


    Aumento de la informacin generada en el

    antibiograma.

    DETECCION DE ESBLs POR DISCO DIFUSION


    Permite la deteccion de ESBLs en diversos

    aislamientos microbianos ( enterobacterias: E.coli, K. pneumoniae ). No estandarizado para microorganismos de difcil desarrollo. Requiere un contnuo control de calidad. Muy til y de fcil implementacin en laboratorios bsicos de bacteriologa. Se pueden emplear dos metodologas : epsilomtricas y disco difusin de rutina.

    LIMITACIONES
    Hiperproduccin de B lactam. cromosmica

    ( k1 ) en P.vulgaris, K.oxytoca y la de SHV 1 en E.coli y K.pneumoniae producen falsa sinergia. Codificacin simultnea de BLEA y B lactam. Plasmdica ( TEM, SHV ) anula efecto sinrgico ( usar C4G ). Hiperproduccin constitutiva de AmpC en E.coli aumenta la MIC a Ceftazidima. Baja capacidad hidroltica de la BLEA a la C3G no revela sinergia ( usar C2G ).

    imp

    amc ak

    cip
    Ctx +clv

    nit

    E.Coli productora de ESBL

    E. Aglomerans productor de ESBL

    imp

    amc
    fox fox

    Amp+sulb

    Enterobacter sp. Prod. ampC Desreprimida total

    E.Coli con ESBL de tipo CEFAMICINASA

    . .

    AMC
    30mm

    AMC
    20mm

    INDUCCION DE BETALACTAMASA CROMOSOMICA POR IMIPENEM EN ENTEROBACTER CLOACAE

    Test screning ESBL Etest

    negativa

    Caz + Clavulanico

    Caz

    E Test. MBL

    EDTA + Imp

    Imp

    Cepa Serratia marcescens con una MIC

    de 16 mg/ml

    METALO TEST

    Nuestro mejor amigo: un libro. Nuestros mejores maestros: nuestros pacientes..

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