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    Cartel Blots

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    Fernando Sanchez Fuerte
    Este documento describe tres técnicas de transferencia de proteínas y ácidos nucleicos conocidas como Western blot, Dot blot y Slot blot. Explica que estas técnicas permiten determinar la presencia y cantidad de antígenos y anticuerpos específicos mediante la inmovilización de proteínas o ácidos nucleicos en membranas seguida de detección. Describe los procedimientos del Western blot, Dot blot y Slot blot, así como técnicas relacionadas como el Southern blot y Northern blot.

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    Fernando Sanchez Fuerte
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    Este documento describe tres técnicas de transferencia de proteínas y ácidos nucleicos conocidas como Western blot, Dot blot y Slot blot. Explica que estas técnicas permiten determinar la presencia y cantidad de antígenos y anticuerpos específicos mediante la inmovilización de proteínas o ácidos nucleicos en membranas seguida de detección. Describe los procedimientos del Western blot, Dot blot y Slot blot, así como técnicas relacionadas como el Southern blot y Northern blot.

    Descripción original:

    Blots

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    Este documento describe tres técnicas de transferencia de proteínas y ácidos nucleicos conocidas como Western blot, Dot blot y Slot blot. Explica que estas técnicas permiten determinar la presencia y cantidad de antígenos y anticuerpos específicos mediante la inmovilización de proteínas o ácidos nucleicos en membranas seguida de detección. Describe los procedimientos del Western blot, Dot blot y Slot blot, así como técnicas relacionadas como el Southern blot y Northern blot.

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    Este documento describe tres técnicas de transferencia de proteínas y ácidos nucleicos conocidas como Western blot, Dot blot y Slot blot. Explica que estas técnicas permiten determinar la presencia y cantidad de antígenos y anticuerpos específicos mediante la inmovilización de proteínas o ácidos nucleicos en membranas seguida de detección. Describe los procedimientos del Western blot, Dot blot y Slot blot, así como técnicas relacionadas como el Southern blot y Northern blot.

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    de 1

    BLOTS

    Western Blot, Dot Blot y Slot Blot


    Alvarado Mendoza Areli Yoselin, Snchez Fuerte Fernando,
    Trejo Lpez Saul Enrique Universidad Nacional Autnoma de
    Mxico. Facultad de Estudios Superiores Cuautitln. Campo 1.
    Grupo: 2602. Equipo No. 5
    Se utiliza para determinar la presencia y cantidad de antgenos y
    de anticuerpos especficos.
    La transferencia de protenas o blotting supone la inmovilizacin
    de las protenas (o cidos nuclicos) sobre membranas
    sintticas, seguido de la deteccin empleando sistemas
    especialmente diseados para la tincin de blots.

    Dot blot Western blot


    Hay sin embargo otros El mtodo para protenas ms potente es el denominado
    mtodos de transferir Western blot en el que las protenas son separadas en
    o aplicar protenas primer lugar mediante electroforesis en geles de
    sobre una membrana. poliacrilamida en condiciones desnaturalizantes (SDS-
    El ms sencillo es PAGE) y posteriormente se transfieren a una membrana,
    aplicarlas mediante la aplicacin de un campo elctrico
    directamente en forma perpendicular al gel (electroblotting). Una vez completada
    de una pequea gota esta operacin la protenas de inters son reveladas por
    de una solucin el agregado de un anticuerpo especfico.
    concentrada sobre la Se puede hablar de tipos de western blot.
    membrana. Directo: En donde el anticuerpo primario marcado se une
    La absorcin de la gota provoca la adhesin de la protena a la al antgeno de la membrana y reacciona con el sustrato
    membrana, quedando en forma de una mancha o 'dot' (es el caso originando una seal detectable.
    del 'dot blot'). Existen dispositivos que facilitan la aplicacin de las Indirecto: El anticuerpo primario sin marcar reacciona con
    protenas directamente a la membrana, aplicando una succin el antgeno, luego, un anticuerpo secundario marcado se
    que facilita la penetracin de la solucin, y reciben los nombres une al primario y reacciona con el sustrato.
    de 'dot blot' o 'slot blot' en funcin de que la protena quede
    aplicada en forma de una gota circular o de una lnea Southern blot
    Su nombre se debe al bilogo ingls Edwin Southern. Es
    Northern blot un mtodo que permite detectar la presencia de una
    Similar al la tcnica de Southern, pero permite detectar RNA en secuencia de DNA en un mezcla compleja. Para ello se
    vez de DNA. emplea la tcnica de electroforesis en gel de agarosa con
    La tcnica consiste en extraer RNA de las clulas pertinentes y el fin de separar los fragmentos de DNA de acuerdo a
    su posterior separacin por tamao mediante electroforesis en sus longitud y despus transferirlo a una membrana en
    gel. Las muestras de RNA son separadas en geles de agarosa donde se efecta la hibridacin de la sonda.
    que contienen formaldehdo como agente desnaturalizante del
    RNA. Los geles pueden ser teidos con bromuro de etidio y
    visualizados bajo luz UV. Los geles de poliacrilamida con urea
    tambin pueden utilizarse, aunque esto suele limitarse a
    fragmentos de RNA o miRNA, ya que crean un tamao de poro
    ms estrecho en su matriz.

    Referencias.

    Rojas, D.(2013). Fundamentos de tcnicas blotting: Southern, Northern, Western. Universidad


    Autnoma de Sinaloa. recuperado de:
    https://es.slideshare.net/CarolinaHerrera151/fundamentos-de-tcnicas-blotting-southern-northern-wes
    tern
    Flores, D. et. al. (2013). Seminario: Fundamento y procedimiento de las pruebas de Western blot.
    Universidad Nacional Mayor de San Marcos. recuperado de:
    https://es.slideshare.net/tratamiento1/fundamento-y-procedimiento-de-las-pruebas-de-western-blot
    Caldern, R. (2007). Curso de Mtodos Fisicoqumicos en Biotecnologa. Universidad Nacional
    Autnoma de Mxico. recuperado de:
    http://www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/met/inmunoquimica.pdf
    Universidad Nacional de Quilmes. TP6 Western blot. recuperado de:

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